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Articles by A. Joffre Mercier in JoVE

 JoVE Neuroscience

Grabación de las respuestas de comportamiento a la reflexión en el cangrejo de río


JoVE 1956 5/14/2010

Department of Biological Sciences, Brock University

Hemos desarrollado dos métodos para estudiar los efectos de los estímulos visuales en el comportamiento en ausencia de señales táctiles y químicas. Un método implica grabar en vídeo las respuestas de los cangrejos a las paredes reflectantes en un acuario, y el otro examina los efectos de los insumos visual proporcionada por un cangrejo de río vive detrás de una mampara transparente.

 JoVE Neuroscience

La experimentación fisiológica con el intestino grueso cangrejo de río: Un ejercicio de laboratorio los estudiantes


JoVE 2324 1/18/2011

1Department of Biology, University of Kentucky, 2Department of Biological Sciences, Brock University

En este informe se muestran las técnicas que se pueden utilizar para investigar la biología del cangrejo de río del intestino grueso. Se muestra cómo la disección de un cangrejo de río abdomen y el estudio de la anatomía asociada, la fisiología y la modulación de la actividad. La actividad peristáltica y la fuerza de las contracciones se miden con un transductor de fuerza.

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Funciones Fisiológicas De FMRFamide-como Péptidos (Flp) En Crustáceos

Neuropéptidos juegan un papel importante en la señalización de productos químicos en los sistemas nerviosos centrales y periféricos. Una de las más grandes familias de neuropéptidos es la de los péptidos FMRFamide-como (Flp). Este artículo revisa lo que se conoce acerca de las funciones fisiológicas de FLP en crustáceos, centrándose en los sistemas cardiovasculares, digestivo y neuromusculares.

Modulación Sináptica Por Un Neuropéptido Depende De La Temperatura Y Calcio Extracelular

El neuropéptido cangrejos DRNFLRFamide aumenta la liberación de transmisor de terminales sinápticos en las células musculares. Como la temperatura disminuye de 20 a 8 grados C, disminuye el tamaño de los potenciales junctional excitatorios (EJPs), y el péptido se convierte más eficaz para aumentar la amplitud EJP. El objetivo del presente estudio fue determinar si la eficacia mejorada del péptido es estrictamente un efecto relacionado con la temperatura, o si se relaciona con el hecho de que los EJPs son menores a baja temperatura, lo que permite una mayor gama de amplitud EJP aumentar. Disminuyendo la temperatura redujo el número de quanta de transmisor liberado por el impulso nervioso (evaluado mediante el registro de las corrientes sinápticas) y aumenta la resistencia de entrada en las fibras musculares. Como en un trabajo anterior, mejoró la capacidad del péptido para aumentar la amplitud EJP disminuyendo la temperatura. Sin embargo, el péptido también fue más eficaz para aumentar la amplitud EJP al salida del transmisor se redujo mediante la reducción de la proporción de calcio a los iones de magnesio en el baño. Así la efectividad del péptido puede relacionar el nivel de salida de los terminales sinápticos.

Modulación Sináptica Por Un Neuropéptido Drosophila Es Específico De La Neurona Motora Y Requiere CaMKII Actividad

El péptido relacionado con el FMRFamide de Drosophila, DPKQDFMRFamide modula la transmisión sináptica en la Unión neuromuscular larvaria. MN6/7-Ib aumentos posteriores a la aplicación de 1 microM DPKQDFMRFamide, la amplitud de potenciales junctional excitatorios (EJPs) producidos por la estimulación selectiva de motoneurona. EJPs sacados por neurona motor estimulante MNSNb/d-es, sin embargo, no exhiben ningún aumento significativo con la misma concentración de neuropéptido. Se examinaron los mecanismos subyacentes a los efectos moduladores de DPKQDFMRFamide utilizando una combinación de métodos farmacológicos y genéticos. Tres líneas independientes de pruebas implican CaMKII como una proteína esencial efectoras o parte de la vía de transducción de señal. El efecto del neuropéptido se suprime por 1 microM KN-93 (inhibidor de la CaMKII) y por la expresión de un inhibidor de la CaMKII inducida por choque térmico. Un mutante de quinasa CaM heterozigótico responde mal al péptido.

Un Papel Para La Unión De Nucleótido Cíclico En Modulación Sináptica Por Un Neuropéptido De Cigalas

DF2 (DRNFLRFamide), un péptido similar a FMRFamide, se ha demostrado para aumentar la cantidad de transmisor liberado en las ensambladuras neuromuscular de cigalas. Aquí examinamos un posible papel de la Unión de nucleótido cíclico, AMPc y GMPC, en efectos de DF2 en la transmisión sináptica. Los efectos de DF2 en transmisión sináptica fueron supervisados por registrar potenciales postsinápticos excitatorios (EPSPs) en la musculatura profunda abdominal del extensor del cangrejo, Procambarus clarkii. Una serie de activadores e inhibidores fueron utilizada para determinar si o no campo, cGMP, proteína quinasa A (PKA) y la proteína quinasa G (PKG) median el efecto de este neuropéptido. Inhibidores de la fosfodiesterasa, sabidos que inhiben la descomposición de campo (IBMX) o cGMP (mdBAMQ), potencian el efecto de DF2 en la transmisión sináptica. Activadores de PKA (Sp-campos) y unidades (8-pCPT-cGMP) aumentan la amplitud EPSP, imitando los efectos de DF2. Inhibidores de PKA (Rp-campos) y PKG (Rp-8-pCPT-cGMP) cada bloque una parte de la respuesta para el péptido y cuando se aplica a estos dos inhibidores completamente bloquean la respuesta. Tomados en conjunto, estos resultados indican que los nucleótidos cíclicos y cíclico de nucleótido dependiente de proteínas quinasas son componentes necesarios del camino subyacentes de modulación mediante este neuropéptido.

Duración De La Socialización Influye En Las Respuestas a Un Espejo: Respuestas Del Cangrejo De Río Dominantes Y Subordinados Divergen Con Tiempo De Vinculación

Las superficies reflectantes se ha demostrado previamente para modificar el comportamiento de los cangrejos socializada. La socialización de cangrejos de río por el emparejamiento de ellos durante dos semanas estableció una jerarquía con un cangrejo de río subordinada dominante y uno por cada par. Cangrejos de río dominantes presentaron comportamientos específicos, tales como curvas, giros y cruce, con más frecuencia en un ambiente de reflexión que en un entorno no-reflexiva. Después de 2 semanas de la vinculación, cangrejos de río subordinada no respondió de esta manera, pero, en cambio, realizaron a pie más atrás en un ambiente de reflexión. El presente estudio investigó cómo la duración de la vinculación social afecta la respuesta a los espejos. Cangrejo de un tanque comunal se emparejaron durante 30 minutos o durante 3 días, y su actividad fue grabada durante 20 minutos en un ensayo en el acuario revestida con espejos en un medio y un revestimiento mate no reflectante en la otra mitad. Cangrejo de río ubicado en el tanque comunitario se utilizaron como grupo de comparación. Después de 30 min de apareamiento, cangrejos de río dominante y subordinado respondieron de manera similar a la reflexión, mostrando esencialmente el mismo patrón para siete de los nueve comportamientos examinados. Después de 3 días de apareamiento, los cangrejos dominante siguió respondiendo a la reflexión esencialmente de la misma manera, pero los cangrejos subordinados se comportaron de manera diferente, mostrando las diferencias en siete de los nueve comportamientos. De este modo, el patrón de respuestas de cangrejos dominante y subordinado a la reflexión se separaron con el tiempo de apareamiento.

Evidencia De Modulación Postsináptica De La Contracción Muscular Por Un Neuropéptido De Drosophila

DPKQDFMRFamide, el péptido FMRFamide-como más abundante en Drosophila melanogaster, se ha demostrado previamente para aumentar las contracciones de los músculos de la pared del cuerpo larval provocadas por estimulación nerviosa e incrementar los potenciales excitatorios cruce (EJPs). El presente trabajo han investigado la posibilidad de que este péptido también puede estimular la contracción del músculo por una acción directa sobre las fibras musculares. DPKQDFMRFamide induce contracciones lentas y aumento de tono en los músculos de la pared del cuerpo de larvas de Drosophila que había sido quitado el sistema nervioso central. El umbral para este efecto era aproximadamente 10(-8) M. El aumento de tono persistió en presencia de 7 x 10(-3) M glutamato, que desensibilizar los receptores postsinápticos glutamato. Así, el efecto sobre el tono no se podía explicar por la mayor liberación de glutamato de terminales sinápticos y, así, puede representar un efecto postsináptico. El efecto sobre el tono fue suprimido en solución salina sin calcio y por el tratamiento con antagonistas del calcio tipo L, nifedipino y nicardipina, pero no por la flunarizina, amilorida y bloqueadores de tipo T. Estos resultados proporcionan evidencia que este péptido de Drosophila puede actuar postsynaptically además de sus efectos presinápticos aparentes, y que el efecto postsináptico requiere de afluencia a través de los canales de calcio tipo L.

Ciclo De Distribución De Dopamina Y Octopamina En El Sistema Nervioso Central Y El Ovario Durante La Maduración De Los Ovarios De La Gamba Gigante De Agua Dulce, Macrobrachium Rosenbergii

Dopamina (DA), Octopamina (OA) y serotonina (5-HT) son los principales neurotransmisores que controlan el desarrollo gonadal en crustáceos decápodos. Estimula la 5-HT, mientras DA y OA retrasan el desarrollo gonadal en Macrobrachium rosenbergii. En el presente estudio, hemos investigado más los patrones de distribución de DA y OA en sistema nervioso central (CNS) y ciclo de ovario en distintas etapas de la maduración de los ovarios de este gigante langostino de agua dulce. Fibras y neuronas DA - y OA-immunoreactive fueron distribuidas extensamente en varias regiones del cerebro, ganglio subesophageal (SEG), los ganglios torácicos y ganglios abdominales. En el cerebro, los dos neurotransmisores estuvieron presentes en las neuronas de racimos, 6, 7, 11, 17 y neuropil regiones próximas. De la SEG, ganglios torácicos y ganglios abdominales, fibras y neuronas inmunorreactivas encontradas a lo largo de la línea media y en varios grupos neuronales alrededor de cada región de neuropil. Coloración para el DA y OA fue más intensa en los ganglios torácicos que en otras partes del SNC. En el ovario, DA - y OA-immunoreactivities estaban presentes a alta intensidad en ovocitos tempranos. La presencia de DA - y OA-immunoreactivities en ganglios neuronales como ovario sugiere que DA y OA también podrían estar implicados en el proceso reproductivo, particularmente ovárico desarrollo y diferenciación de los ovocitos en esta especie.

Péptido-inducida De Modulación De La Respuesta Sináptica De Transmisión Y Escape En Drosophila Requiere Dos Receptores G-proteína-juntados

Neuropéptidos se encuentran en los mamíferos e invertebrados y pueden modular la función neuronal a través de la activación de receptores g-proteína-juntados (GPCRS). Los mecanismos precisos por que muchos de estos GPCRs modulan cascadas de señales específicas para regular la función neural no están bien definidos. Utilizamos Drosophila melanogaster como un modelo para examinar los efectos celulares y comportamiento de la DPKQDFMRFamide, el péptido más abundante, codificado por el gen dFMRF. Mostramos que DPKQDFMRFamide aumentar la transmisión sináptica a través de la activación de dos receptores g-proteína-juntados, Fmrf Receptor (FR) y del Dromyosupressin Receptor-2 (DmsR-2). El péptido aumentó tanto la respuesta de CA presináptica y el contenido cuántico de transmisor liberado. Modulación de péptido-inducida de la función sináptica podría derogarse por agotamiento tiendas de CA intracelulares o interfiriendo con la liberación de CA desde el retículo endoplasmático desbaratando el receptor de rianodina o el receptor de inositol 1,4,5-trifosfato. El péptido también altera el comportamiento. DPKQDFMRFamide exógeno mejorado fictive locomoción; Esto requirió el FR y el DmsR-2. Asimismo, los receptores eran necesarios para una respuesta de escape a la exposición a la luz intensa. Así, detección coincidente de un péptido por dos GPCRs modula la función sináptica a través de efectos de liberación inducida por Ca(2+) CA, y presumimos que estos mecanismos están implicados en las respuestas del comportamiento a la tensión ambiental.

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