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Articles by Alexander Welle in JoVE
JoVE General
Perfused 마이크로 bioreactors의 칩 기반의 입체 세포 배양
Institute for Biological Interfaces, Forschungszentrum Karlsruhe
우리는 마이크로 bioreactors에서 세포의 3 차원 배양을위한 칩 기반의 플랫폼을 설명합니다. 하나의 칩 10 미오 최대 집 수 있습니다. 멸균, 폐쇄 순환 루프에서 유체 흐름, 산소 장력 등에 관한 정확하게 정의된 조건 하에서 재배 세포 수 있습니다.
JoVE General
입체 세포 배양을위한 칩 크기의 공사장 공중 발판의 Microfabrication
1Institute for Biological Interfaces, Karlsruhe Research Centre, 2Institute for BioMedical Technology, University of Twente, 3Department of Materials Research, Institute for Heavy Ion Research, 4Institute of Microstructure Technology, Karlsruhe Research Centre, 5Institute for Micro Process Engineering, Karlsruhe Research Centre
우리는 세 차원 세포 배양을위한 다공성 고분자 칩의 microfabrication 두 가지 프로세스를 제시한다. 첫 번째는 용매 증기 용접 공정과 결합 핫 엠보싱입니다. 두 번째는 생산의 중요한 단순화하기 위해 선도적인 이온 트랙 기술과 함께 최근에 개발된 microthermoforming 프로세스를 사용합니다.
Other articles by Alexander Welle on PubMed
경쟁력 있는 플라즈마 크리스털 중량 기술에 의해 모니터링 수정된 폴리머 표면에 단백질 흡착
이 종이 혈 청 단백질 및 세포 접착 (은 셀 라인 HepG2, L929 게재 등)의 경쟁 흡착에 폴리머 표면 광화학 수정 작업의 효과를 설명합니다. 폴리스 티 렌, poly(methylmethacrylate), 폴 리 카보 네이트의 UV 수정 마이크로 미터의 대형 구성과 단백질 adsorbate의 속성을 제어 하 여 체 외 세포 패턴을 축소 수 있는 방식으로 이러한 고분자의 physico-화학 속성을 변경 합니다. 폴리머 코팅된 센서의 대량 로드 외에 점 탄성 데이터를 추출할 수 있는 석 영 중량 기술을 사용 하 여 우리 생체 외에서 관찰 된 세포 접착을 위해 알 부 민 adsorbate의 점도 및 두께의 중요성을 증명 하고있다. 수량 및 되 고 기본 상태로 셀 구 충 제 자료 폴리스 티 렌에 표면 바운드 민의 점도 인하 표면 람다의 자외선에 노출 되 면 = 185 nm 알 부 민 솔루션 또는 셀 문화 미디어와 접촉 전에 공기. 이 세포 접착 단백질의 증 착을 촉진 하 고 관찰 된 세포 패턴에 설명 합니다. 이 특별 한 응용 프로그램을 제외 하 고 분산 모니터링 설명된 석 영 중량 생체 재료의 표면 현상에 기반한 일반 생체 적합성 연구에 대 한 유용한 도구를 제공 합니다.
사진에 화학적으로 제어 PC 12 접착 및 Neurite 지침에 대 한 폴리머 표면 무늬
꽃무늬 문화 기판에 의해 셀 위치 및 연결 제어를 제공 하는 셀룰러 네트워크의 체 외 조립 신경 과학 연구 및 세포 생물학에서 다른 응용 프로그램을 위한 유용한 도구입니다. 우리는 다른 셀 라인의 패턴화 Pheochromocytoma 셀 (PC-12)는 그 중 에서도 조직 공학 고급 수 있는 폴리머 표면 개 질에 따라 다양 한 기법을 개발. 표면 패턴화에 적용 되는 다른 기술을, 달리 패턴화 깊은 자외선 조사에 의해 제시 사진 폴리스 티는 널리 사용 되는 세포 문화 기판 소재 렌 (PS)에 적용 되며 대부분의 실험실에서 쉽게 수행 합니다. 자외선 람다의 폴리스 티 렌의 방사선 = 185 nm 수익률 포함 하는 혈 청에서 자발적인 경쟁 단백질 흡착을 제어 하는 고분자 표면에 주로 carboxyl 그룹 문화 미디어 [Welle A, Gottwald E. UV 기반 셀 문화 응용을 위한 고분자 기판의 패턴화 합니다. Biomed. Microdev입니다. 2002. 4시 33분-41] 이나 커플링 사이트 제어 단백질/펩타이드 immobilization에 대 한 정의 제공 합니다. 우리 여기 셀 구 충 제 알 부 민 도메인과 Pheochromocytoma 셀의 패터 닝에 대 한 매력적인 laminin 영역 셀의 패턴을 생산 하는 고급 응용 프로그램을 설명 패턴화은 셀과 공간적으로 정의 된 플라스마 단백질 흡착을 통해 게재에 대 한 우리의 이전 연구를 확장 합니다.
마이크로에 경쟁력 있는 단백질 흡착 꽃무늬 고분자 생체 재료 및 세포 외 매트릭스 맞춤옷의 점 탄성 속성
Biomaterial 표면에 세포 접착 및 앵커리지 의도적으로 또는 자발적으로 형성 되는 adsorbate 계층의 여러 매개 변수의 영향을 받는 셀의 생명력. Pre-treatments 및 여러 가지 컨디셔닝 단계 이전 표면 및 영향 동안 셀/biomaterial 접촉을 조성, 방향, 수량 및 셀과 biomaterial 사이의 인터페이스 계층의 viscoelasticity. 단백질 또는 탄수화물 adsorbates을 기반으로 두 개의 수정된 biomaterial 표면에 세포의 반응 하이 작업 수행: 마스크 UV irradiations (a) 열 화학적으로 패턴화 된 기판 제어 혈 청 단백질 흡착과 세포 접착 력을 얻기 위해 간단한 경로. Subcellular 크기의 구조를 달성 하 고 움직이지 그라디언트를 생산 가능 하다. 이러한 기판에 단백질 매트릭스를 검토 하기 위해 우리는 석 영 중량 기술 (QCM D) 플라스마 단백질 증 착 하는 동안 대량 통풍 관 외에 점 탄성 데이터를 추출 하는 능력이 적용. 수량 및 표면 바운드 알 부 민 점도 표면 (꽃무늬) 자외선 노출에 의해 수정 될 때 저하 되는 것이 밝혀졌다. 따라서, UV 수정 미디어에서 또는 세포에서 분 비 되 면 세포 접착 단백질의 경쟁 흡착을 촉진 하 고 관찰 된 세포 패턴을 생성 합니다. (b) 또 다른 조직 기술 엔지니어링, QCM 디도 검사는 움직이지, 수정 또는 교차 하는 연결 된 히 알루 론 산 (HA), vivo에서 중요 한 여분의 세포 매트릭스 구성 요소를 사용 하 여 우리의 데이터 설명 하 뒤에 알파, 오메가-bisamino polyethyleneglycol 응용 프로그램 carbodiimide 활성화 하 여 수정할 수 있습니다. 수 화 물의 출시와 함께 결합 하 여 하 층의 스티프닝으로 QCM 차원 데이터를 해석할 수 있습니다. 또한, 수 분 상태와 표면 바운드 ultrathin HA hydrogels 지니는 행동 조사 되었다. 정량화 QCM 차원으로 ECM의 박막의 점 탄성 매개 변수 durotaxis, 기계 기판 매개 변수의 효과 설명 하는 접착 력과 세포의 운동 성 해석에 대 한 유용 합니다.
Electrospun 지방 Polycarbonates로 조직 비 계 재료에 맞는
두 가지 지방 족 polycarbonates CO(2) 및 해당 epoxides synthesised 했다. Poly(propyl carbonate) (PPC) 아연 glutarate와 다른 유형의 촉매에 의해 준비 되었다. Poly(cyclohexyl carbonate) (PCHC) 생활 copolymerisation homogeneously 3-아미노-2-cyanoimidoacrylate 아연 아세테이트 복잡 하 여 catalysed 고 electrospinning 들어서는 통해 준비를 했다. 획득된 nanofibres 그들의 표면에 잘 정의 된 형태학 및 약간 다공성 구조 섬유를 따라 구슬의 자유를 했다. 그 후, 절전 깊은 UV irradiations biostable 고분자에서 2 차원 및 3 차원 장비의 광화학 표면 수정에 대 한 적용 이전에 수행 했다. 여기, PPC nanofibres의 표면 및 대량 속성에 영향을 관찰 했다. 두 고분자의 표면 수정 플라스마 단백질 흡착을 영향을 받습니다. Vivo에서 호스트/임 플 란 트의 상호 작용의 진행의 제어를 위한 허용 따라서, 광화학 대량 수정 PPC nanofibres에 처음으로 관찰 biodegradation 속도의 공간적 제어 가능성을 나타내는 있습니다. 특히 PPC L929 게재 및 기본 쥐 hepatocytes의 세포 배양을 위해 사용 되었다. 심지어 섬세 한 1 차 셀 건설 기계 임대 및 높은 생존 능력에 좋은 접착 력을 보였다.
유명한 대 불편-또는 새벽와 3D 문화 시스템의 상승
체 외 세포 생물학에 가장 큰 영향 중 하나는 3 차원 (3D) 문화 시스템 도입 전 6 년간 이상 하 고이 시대 3 차원 조직 배양의 새벽을 호출할 수 있습니다. 장점은 분명 있었지만,이 분야 연구의 이상적인 종양 모델로 다세포 spheroids 발견 때 1970 년대까지 "잠자는 아름다움" 이었다. 이 중생과 organotypical 문화 시스템 귀중 한 도구 되었고이 추세는 계속 증가 합니다. 시작, 간단한 접근 집계 문화 기술 등의 선호 때문에 그들의 단순 하 고 편리 했다, 지금은 더 복잡된 한 시스템 사용 하 고 아직도 개발 되 고 있다. 새로운 문화 기술의 개발 향상 중 하나는 정교한 제조 및 표면 개 질 기술, 특히 마이크로 및 나노 시스템 기술 중 하나를 극적으로 개선 하거나 아주 최근에 진화 하는 발생 합니다. 이러한 도구의 도움으로 더욱 정교 하 고 더 organotypic 같은 문화 시스템 생성 됩니다 곧. 3D perfused 또는 superfused 시스템 설정 및 유지 관리를 훨씬 더 복잡 한 접시와 문화 플라스 크의 사용에 비해 이후 3D 접근의 부가 가치는 아직도 입증 될 필요가 있다.
Benzylguanine Thiol 조립된 Monolayers Microcontact 인쇄 표면 구조에 스냅 태그 단백질 동원 정지에 대 한
표면에 단백질의 사이트 선택, 방향, 공유 immobilization microarrays, biosensors, biocatalysts, 및 세포 분석 실험의 설립에 중요 한 문제 이다. 여기 우리가 조립된 monolayers benzylguanine thiols (BGT) 스냅인 태그는 융합 단백질 수 炭 연결로 구성 된 준비 설명. 스냅-태그 수정된 O (6)-alkylguanine-DNA alkyltransferase (AGT) BGT의 headgroup와 반응 및 炭 guanine의 출시에 따라 구속 된다. Bacterially 생산된 재조합 그의-태그-스냅-태그-GFP microcontact (microCP)을 인쇄 하 여 만든 BGT 표면 패턴에 사이트별 immobilization 보여 주기 위해 사용 되었습니다. 이 다양 한 방법으로 모든 스냅인 태그 단백질 표면에 결합 될 수 있습니다.
공간적 3-차원 기판에 세포 접착 제어
생체 조건 셀의 microenvironment의 화학 및 생물 리 단서 spatiotemporal 패턴에 의해 정의 됩니다. 따라서, 조직 공학의 한 가지 중요 한 목표는 세포 접착 및 차별화와 같은 프로세스를 제어 하기 위해 정의 된 biofunctionalization와 장비의 세대. Integrin ligands는 세포 외 기질을 제시한 같은 extrinsic 요소를 흉내 낸 생체 건설 기계 임대에 세포 접착 연구에 중요 한 요소 중 하나입니다. 고정 된 biomolecules와 특별 한 thermoformable 폴리머 필름을 사용 하 여 마이크로 구조 건설 기계 임대, 예를 들어 곡선 및 기판 마이크로 꽃무늬 날조 될 수 있다. 여기, 우리가 "기판 수정 및 복제에 의해 Thermoforming" (스마트) 기술을 기반으로 마이크로 꽃무늬 장비의 제조에 대 한 새로운 전략 제시: 60 ° C의 낮은 형성 온도 하는 데 매우 처음 되 고 폴 리 젖 산 막의 표면 매력적인 셀, poly(L-lysine) (PLL) 및 히 알루 론 산 (VAHyal)을 세포 접착을 공간 제어할 photopatterned 레이어와 코팅 했다. 그 후, 이와 같이 수정 된 폴리머 막 thermoformed 3D 세포 배양을 위한 300 microm 직경의 구형 microcavities 어레이 생성 하는. 인간의 세포 (HepG2) 및 마우스 게재 (L929) 가이드 세포 접착을 보여 주기 위해 사용 했다. HepG2 세포 준수와 구멍 사이 세 표면에를 연결 하지 않고도 이러한 충 치 내에서 독점적으로 집계. 또한 깨끗 한 기판 고분자에 매우 강력 하 게 준수 L929 세포 히 알루 론 산 기반 hydrogel의 셀 혐오 감을 속성에 의해 효과적으로 꽃무늬 했다. 이것은 처음으로 세포 접착 thermoformed 3D 마이크로 구조에 UV 경화 PLL Vahyal와 고분자 기판의 패턴된 기능화에 의해 통제 되었다.
Proangiogenic 성장 요인의 배달에 대 한 Plga:poloxamer의 혼합에 따라 나노 입자
새로운 혈액 혈관 형성은 많은 혈관 치료를 위한 중요 한 요구 사항 및 허 혈 관련 질환 뿐만 아니라 많은 조직 엔지니어링 응용 프로그램에 관해서는. 신생 및 vasculogenesis, 사실, 조직 공학 전략을 통해 복잡 한 조직 기능 재생을 위해 중요 한 프로세스를 나타냅니다. 여러 가지 성장 인자 (GFs) 및 신호 분자 혈관 형성에 관여을 확인 하지만 임상 설정의 응용 프로그램은 여전히 강력 하 게 본문에 그들의 매우 짧은 반감기에 의해 제한 됩니다. 이러한 한계를 극복 하기 위해 우리는 두 개의 자연 proangiogenic Gfs의 배달에 대 한 고분자 나노 입자를 기반으로 새로운 주사 제어 릴리스 장치 개발: 혈소판 성장 인자 (PDGF BB)과 섬유 아 세포 성장 인자 (FGF-2) 파생. 나노 입자 시스템은 존재와 두 안정화 에이전트 부재 GF를 캡슐화 하는 수정된 된 용 매 확산 기술에 의해 준비 되었다: 소 혈 청 알 부 민 (BSA) 및 헤 파 린 나트륨 소금 (Hp). 개발된 nanocarriers 형태, 크기, 캡슐화 효율성, 체 외 방출 속도 론 및 세포 배양에서 GF 활동 특징 했다. 결과 지적 에이전트 안정화의 coencapsulation 수 GF 활성 구조를 유지, 또한, 나노 입자에 캡슐화 효율의 증가 했다. 이 최적화 과정을 통해 우리는 63%, FGF-2 캡슐화 효율성과 PDGF-BB 87%의 인상 수 있었다. 이러한 PLGA:poloxamer 블렌드 나노 로드 Gfs와 한 달 이상에 대 한 지속적인 패션 PDGF BB와 FGF 2 출시 수 있었다. 이 작품은 또한 PLGA:poloxamer 나노 입자의 다른 긍정적인 기능을 확인 한다. 즉, 시뮬레이션 된 생물 학적 매체에 그들의 안정성을 유지할 수 있습니다 그리고 그들은 또한 nontoxic 셀 문화 모델. FGF-2 또는 PDGF BB와 내 피 세포 문화 모델을 로드 하는 나노 입자의 인큐베이션 GFs 생리 활성 형태로 출시 됩니다 확인 했습니다. 모두 이러한 결과 밑줄 PLGA:poloxamer 나노 입자 Gfs의 제어 된 배달에 대 한 관심 및 허 혈 성 질환의 치료 및 조직 공학 응용 프로그램에 대 한 그들의 잠재력을 입증.
Biosensors 세포 배양 매체 Hepatocyte 성장 인자/분산형 요소의 검출을 위한 Sulfated 다 당 류로 입힌 다
셀 문화 bioreactors의 프로세스 제어 방법 단백질 농도의 온라인 모니터링 포함 됩니다. 생물 샘플은 일반적으로 다른 단백질의 높은 금액을 포함. 이 복잡 한 매체에 있는 단일 단백질의 직접 검출 레이블 없는 탐지와 biosensors의 개발에서 도전적인 작업입니다. 우리는 hepatocyte 성장 인자/분산형 인자 (HGF/SF) hepatocytes 경작을 위한 소형된 생물 반응 기의 매체를 포함 하는 혈 청에서 검출을 위한 표면 어쿠스틱 웨이브 (보고)에 따라 질량에 민감한 바이오 센서의 개발을 소개 합니다. 바이오 센서의 특이성은 다음 두 가지 방법 취득 했다. 첫 번째 접근 방법에서 HGF (안티-HGF)에 대 한 항 체 바이오 센서 표면에 dicarboxy 폴 리 에틸렌 글리콜의 중간 계층을 통해 炭 움직일 했다. 두 번째 방법에서 dextran 황산와 후코이단 센서 코팅 HGF 명확 하 게 그 sulfated 다 당 류는 사실 악용으로 사용 되었다. HGF 분석 실험을 수행, 비슷한 결과 dextran 황산으로 코팅 된 biosensors 및 biosensors 안티 HGF로 코팅을 사용 하 여 얻은 했다. 더 높은 센서 신호 biosensors 37 ° C에서 특히 후코이단으로 코팅을 사용 하 여 가져온 따라서, 바이오 센서 코팅 항 체와 함께 자주 사용 되는 코팅에 비해 간단 하 고 비용 절감 대안 biospecific sulfated 다 당 류 제공에 기반 합니다.
튼튼하게 통합된 모든 폴리머 칩에 형광 여기
통합된 광학 구성품 및 미세 채널 모든 폴리머 칩은 생물 학적 샘플의 형광 여기에 대 한 플랫폼으로 건설 되었다. 네 가지 경우에 대 한 표시 되었습니다 그들의 기능: (i) 내부 미세 채널, 미세 채널 내부의 스테인드 셀의 형광 (ii), (iii) 레이블이 있는 인지질 고분자도 파 관 위에 형광 및 (iv) 형광의 레이블이 지정 된 인지질 형광 폴리머도 파 관 위에 셀 스테인드.
PLGA:poloxamer 마이크로 및 나노 입자 합성 Proangiogenic 요소에 대 한 제어 방출 시스템으로 혼합
조직 공학 bioregenerative 의학에서 가장 유망한 연구 분야 중 하나입니다. 그러나, bioartificially 설계 조직 이식에 의해 생물 학적 기능 회복은 혈관 네트워크의 그들의 부족으로 인해 매우 제한 된 여전히. Proangiogenic 분자 전달 제어 릴리스 장치에서의 사용은 조직 vascularization 유도 유망 전략 이다. 실제로, 제어 방출 시스템 반복된 행정에 대 한 필요성을 우회 하는 동안 많은 짧은 약물의 치료 효과 생체 조건 향상 시킬 수 있습니다. 이 작품 PLGA:poloxamer 블렌드 기반 마이크로 및 나노 입자 최근에 개발 된 합성 proangiogenic 화합물의 지속적인된 납품을 위해 개발 된: s h A-2-22. 마약 로드 PLGA:poloxamer 조화 미는 유 중 석유 용 매 추출/증발 기술에 의해 준비 되었다. 마약 로드 PLGA:poloxamer 나노 입자는 수정된 용 매 확산 기술에 의해 준비 되었다. 이러한 약물 수송 했다 그들의 물리 화학적 속성, 형태학, 속도 약 캡슐화 효율과 릴리스 론 체 외에 관해서는 특징입니다. 결과 배합 조건을 조정 하 여 PLGA:poloxamer 마이크로-및 나노 입자 매우 높은 마약 부하량 및 제어 방식에서 최대 한 달 동안 활성 화합물을 출시 하는 용량을 얻을 수 있다. 내 피 세포 모델에서 수행 되는 체 외 세포 분석 실험 s h A-22-2 PLGA:poloxamer 뒤에 bioactivity를 확인 했다.
VEGF와 PDGF BB 배달 차량으로 히 알루 론 산/키토 산 나노 입자
크기는 임 플 란 트의 확산 길이 의해 주어진 특정 한도 초과 하는 경우에 특히 조직 설계 구조에 혈관 네트워크 개발 bioregenerative 의학의 근본적인 병목은 호스트 조직을 보여줍니다 매우 활성 물질 대사 및. 허 혈 성 사이트에서 proangiogenic 요인의 지속적인된 출시 생성 하는 조직 구조 vascularization 달성 하기 방법 중 하나. 이 작품 설명 형성과 두 프로 angiogenic 성장 요인의 배달에 대 한 히 알루 론 산-(HA/CS) 키토 산 나노 입자의 특성 분석: 혈관 내 피 성장 인자 (VEGF)와 혈소판 성장 인자 (PDGF BB)을 파생. 이러한 나노 입자는 이온 gelification 기술에 의해 준비 및 다른 제형 두 안정 시키는 대리인 협회에 성장 요소를 캡슐화 하 여 개발 되었다: 소 혈 청 알 부 민 또는 헤 파 린 나트륨 소금. 이러한 사업자 했다 그들의 물리 화학적 특성, 생물 학적 미디어에서 그들의 안정성 및 c3a은 셀 라인에 그들의 세포 독성에 관한 특징입니다. 결과 나노 입자 약 200 nm이이 방법으로 준비 될 수 있다. 하/CS 나노 입자 incubated EMEM 세포 배양 매체 또는 24 h. 테스트 확인 하/CS 나노 입자 cytotoxic 증가율 배달에 사용 되는 농도 범위는 세포 배양에 대 한 37 ° C에서 물 때 안정 했다. 또한, HA/CS 나노 입자 모 함 효율적으로 모두 성장 요인, VEGF와 PDGF, 각각 94%, 54%의 협회 값에 도달 수 있었다. 체 외 방출 연구는 PDGF BB 릴리스입니다 HA/CS 나노 입자에서 지속적인 방식으로 약 1 주일 동안 확인 합니다. 다른 한편으로, VEGF 첫 24 시간 내 완전히 해제 됩니다.
마이크로 구조 직접 UV 리소 그래피에 의해 Polydimethylsiloxane (PDMS)에서 신속한 프로토 타입
Microstructuring polydimethylsiloxane (PDMS)의 많은 연구소에-칩 (LOC) 응용 프로그램에 대 한 주요 단계입니다. 일반적으로, 구조 마스터에 대 한 액체 prepolymer를 캐스팅 하 여 생성 됩니다. 마스터의 생산에 특별 한 장비에 대 한 호출 하 고 알고 얼마나. 또한, 주어진된 마스터 정의 구조 복제를 허용합니다. 우리는 생산에 직접 UV 리소 뒤에 화학 개발 하 여 이미 경화 PDMS 마이크로 구조 간단, 저렴 하 고 실용적인 방법에 보고 합니다. 다중 노출 같은 리소 프로세스 동안 사용할 수 있는 옵션으로 인해 메서드가 복잡 하 고 단계별 구조에 쉽게 액세스 권한을 부여 하는 높은 설계 유연성을 제공 합니다. 또한, 마스터 필요 하 고 pre-cured PDMS 사용 하 여 주변 (조명) 조건에서 처리 수 있습니다. 기능 약 5 µ m 및 10 µ m의 깊이 깨 달 았 수 있습니다. 원리의 증거로 우리 구조 다양 한 설립된 소프트 리소 그래피 기술을 적용 하 여 프로세스의 타당성을 보여줍니다.
Benzylguanine에서 소닉 고슴도치의 선택적 Immobilization 꽃무늬 테크놀로지 Monolayers 종료
골드 패턴된 2-구성 요소, 테크놀로지 monolayers UV 리소 그래피에 의해 생산 되었다. Oligo(ethylene glycol)는 이황화 불특정 단백질 흡착과 세포 접착 력 감소 불활성 매트릭스로 종료. 조립된 단층 (SAM)의 두 번째 구성 요소는 돌연변이 O (6)-alkylguanine-DNA alkyltransferase (스냅 태그 ™)를 융합 소닉 더 헤지호그 (Shh)의 동원 정지에 대 한 benzylguanine moiety 제시. 스냅-태그의 효소 활동 연결된 시간 쉬.의 비행 2 차 이온 질량 분석의 선택적이 고 공유 immobilization 패턴화 샘 benzylguanine 머리 그룹의 올바른 측면 분포 확인 수 있습니다. 난다 고 특정 단백질 바인딩 혼합 sam의 부 량 benzylguanine /(ethylene glycol) 비율 증가와 알 부 민 증가 흡착을 보여주었다. 그러나, 스냅인 태그 쉬 immobilization는 pre-adsorbed 알 부 민에 의해 차단 되지 않습니다. 또한, 획득된 마이크로 꽃무늬 기판 transfected HEK293 세포의 바른된 미디어에서 스냅인 태그 많은 경쟁 단백질의 존재도 쉬이 잇의 직접 immobilization 허용. 따라서 제시 시스템은 복잡 한 혼합물을 피하는 정화 단계에서 융합 단백질의 제어 immobilization 적합 다.
Microstructuring 초음파 엠보싱으로 3 차원 셀 문화 애플리케이션용 Multiwell 격판덮개의
이후 더 나은 셀 모양 및 microenvironment 기존의 단층 문화에 비해 생체 조직을 반영 하는 3 차원 (3D) 셀 문화 모델 3 차원 조직 배양 기판 다양 한 의약품의 발견, 독성에 관한 연구, 암 및 줄기 세포 연구와 같은 생물 학적 응용에 대 한 더 많은 중요성을 얻을. 이 연구에서 우리는 microstructuring 96 잘 세포 배양 배지 초음파 엠보싱 프로세스를 사용 하 여 아래쪽으로 multiwell 격판덮개 형태로 3 차원 셀 문화 기판의 제조 방법 개발. 큐빅 microcavities 부착 한 다세포 집계 수 형성 결과 microstructured 영역에 의하여 이루어져 있다. 우리 간 파생 된 인간의 세포 라인 HepG2 시스템과의 생물 학적 평가 수행 하 고 구성 된 다공성 alginate 스폰지 상용 3D 문화 시스템 소설 기판에 비해. 신진 대사 활동 (alamarBlue ® 감소) 유도 4 biotransformation 효소 (EROD, ECOD, UGT, SULT)의 fluorimetry 또는 HPLC에 의해 결정 했다. 우리의 결과 공개 microstructured 접시에 HepG2 세포 ECOD UGT의 효소 활동으로 높은 미토 콘 드리 아 활동 alginate 스폰지 그렇지 않으면 유사한 조건에서 배양 세포에 비해 유도 치료 후 보였다. 표준 셀 배양 배지를 수정한 이후 획득된 시스템 자동된 심사에 적응할 수는 고 문화 성인, 3D 문화 구성을 복원 하거나 차별화 된 상태를 유지 하는 줄기 세포, 시 조 등의 모든 종류에 대 한 유용할 수 있습니다.
동적 정렬 프로세스 생활, 부착 한 세포의 세포 외 매트릭스의 생체 외에서 관찰
살아있는 세포와 인공 기판 사이의 인터페이스에서 정보를 수집 하는 것은 상당히 어렵다입니다. 기질 (ECM) 모든 휴대폰 기판 상호 작용을 중재 하 고 정렬, fibrillar 성분 나노미터 정밀도로 구성 됩니다. 이 인터페이스에 절차는 매우 역동적이 고 섬세 한. 생체 적합성 또는 그것의 대응 antifouling 통치 요인 이해, 그것은 레이블이나 고정을 방해 하지 않고 하 고 충분 한 시간적 해상도이 인터페이스를 조사 하는 데 필요한. 여기 저자 살아있는 세포의 ECM에서 분자 주문 프로세스를 명료 하 게 하는 전략에 소모 모니터링 비선형 광학 분광학 (합 주파수 생성) 및 현미경 검사 법 (제 2 고조파 세대), 형광 현미경 검사 법 및 석 영 크리스탈 microgravimetry를 결합. 인위적으로 (fibronectin과 콜라겐 나)와 자연스럽 게 정렬 된 ECM 소 (zebrafish, Danio rerio) 비선형 광학 분석 테스트를 하 고 ECM에 퍼지는 단백질의 배경 신호 로부터 명확 하 게 구별할 수 발견 했다. Fibril 증 착 및 주문 초기 단계 체 외 1 시간 일찍 셀 시드 후 관찰 했다. 이 인터페이스에 있는 소재의 낮은 금액에도 불구 하 고 휴대폰 기판 상호 작용의 첫 번째 단계를 수행 하는 기능 생물 의학 및 환경 인터페이스의 평가 대 한 유용한 증명할 예정 이다.
공간 컨트롤 클릭 화학에 추가: 주위 온도에서 Phototriggered (바이오) Diels 오리 나무 표면 기능화
O quinodimethanes의 Diels-알 더 추가 라이트 트리거를 기반으로 하는 photoconjugation 전략 biomolecules 호환 이며 촉매 필요 없이 주위 온도에서 급속 하 게 진행 됩니다. 공간 제어 작은 분자 ATRP 초기자, 폴리머, 그리고 비행 시간 2 차 이온 질량 분석 조사에서 펩 티 드의 photopatterning에 의해 확인 되었다.
