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Articles by Andrea L. Ambrosio in JoVE
JoVE General
생체내 및 아답터 - clathrin 상호 작용의 체외 연구에서
Department of Biochemistry and Molecular Biology, Colorado State University
Clathrin - 중재 endocytosis는 화물선 선택과 clathrin 코트 어셈블리를 조정 어댑터 단백질에 따라 달라집니다. 우리가 모델로 효모 endocytic 어댑터 단백질 Sla1p를 사용하여 어댑터 clathrin 물리적 상호 작용과 라이브 셀 이미징 방법을 연구하는 절차를 설명합니다.
Other articles by Andrea L. Ambrosio on PubMed
두 소설 Mannan-및 L-fucose 바인딩 Lectins 녹색 조류 Enteromorpha Prolifera에서의 격리: EPL 2의 생 화 학적 특성
EPL 1과 EPL 2 lectins를 녹색 조류 Enteromorpha prolifera에서 격리를 나타냅니다. 두 lectins는 20-22 kDa 단일 체인 nonglycosylated 단백질. 그들의 기본 구조의 70% 이상 대표 하는 펩 티 드의 N 단자 시퀀스 분석 EPL 1과 EPL 2 대표 소설 단백질 보여줍니다. 침전 확산 평형 실험 보여주었다는 EPL-1과 EPL 2 6000 다 (EPL-1) + 60000 59500 + 3000 다 (EPL-2)의 평균 명백한 분자 질량 나타내는 EPL 1과 EPL 2 높은 주문 집계, 아마도 homodimers 및 homotetramers 평형에서으로 self-associate 하는 경향이 있다. EPL 2 탄수화물 바인딩 특이성 효소 연결 된 lectin 분석 결과 본질적인 형광 측정 하 여 연구 했다. 결과 표시 EPL 2의 결합 사이트는 모두 D-스와 L fucose 위치 2 (축)에 수 산 기 그룹의 형태를 공유 하는 수 및 4 (적도) 분기 스 잔류물 및 o 1에서 치환에 대 한 하위 사이트를 포함 하 고.
배아 지 복 신호: Tolloid Proteinases의 저 해제로 서 Frizzled 관련 단백질을 분 비 합니다
여기 우리는 Xenopus gastrulation 중 비 Frizzled 관련 단백질 (sFRP) Sizzled/Ogon BMP 신호를 제어 하는 세포 외 단백질 반응의 억제제로에 대 한 예상치 못한 역할을 보고 합니다. Microinjection 실험 Sizzled Frizzled 도메인 Xolloid 관련 (Xlr)의 활동을 규제 하는 것이 좋습니다 다음 분자 경로 통해 Chordin, 저하 됩니다 metalloproteinase: Szl-| Xlr-| Chd-| BMP Szl--> P-Smad1-->입니다. 생 화 확 적인 분석 실험, Xlr 가수분해는 비슷한 선호도 생 기판에 대 한 Chordin의 경쟁적 억제제 Sizzled는 효소 소화에 저항 하 고 있습니다. Gastrula 배아와 효소 반응 상수에서 Sizzled 및 Chordin의 세포 외 수준의 모두 10(-8) M 범위, 지 복 패턴화 규정에 생리 적 역할에 일치 했다. Sizzled 또한 BMP1, Tolloid metalloproteinase 의료 관심의 자연 억제제가 이다. 또한, 마우스 sFRP2 저해 Xlr,이 분자 메커니즘에 대 한 광범위 한 역할을 제안 합니다.
Crossveinless-2는 Chordin/BMP Xenopus 배아 패턴화를 규제 하는 BMP 피드백 억제 물
척추 Crossveinless-2 (CV2) 약효 또는 BMP 신호 반대 수 있는 비 단백질 이다. Embryological 및 생화학 실험을 통해 우리가 찾을: (1) CV2 Xenopus 배아;의 복 부 지역에 BMP4 피드백 억제 물으로 작동 (2) CV2 단지 뒤틀 리고 gastrulation 및 BMP4; (3) Cv2은 tolloid proteinases;에 대 한 기판 (4) CV2 바인딩합니다 순화 Chordin 단백질 높은 선호도 (1 nM 범위에서 K(D)); (5) CV2 Tolloid 소화에서 발생 하는 Chordin 단백질 조각 또는 단지; Chordin/BMP 전체 길이 더욱 강력 하 게 결속 (6) CV2 고갈 될 Chordin overexpression 또는 tolloid 저해의 안티 BMP 효과에 지나치게 Xenopus 배아를 발생 합니다. 우리 BMPs tolloid 베이스 원인 피크 신호 레벨에 의해 저해 Chordin에서 해방 되도록 CV2/Chordin 상호 작용, 태아의 복 부 쪽으로 BMP 확산을 조정할 도움이 될 수 있습니다 제안 합니다.
