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Articles by Andrea Liedmann in JoVE
JoVE Bioengineering
La culture de cellules progénitrices neurales humaines dans un hydrogel en 3 dimensions Peptide auto-assemblage
Albrecht-Kossel-Institute for Neuroregeneration, University of Rostock
Nous décrivons ici l'utilisation d'un auto-assemblage en 3 dimensions d'échafaudage à la culture humaine cellules progénitrices neurales. Nous présentons un protocole visant à libérer les cellules de la échafaudages pour être analysés ultérieurement, par exemple par cytométrie en flux. Ce protocole pourrait être adapté à d'autres types cellulaires pour effectuer des études détaillées de façon mécaniste.
Other articles by Andrea Liedmann on PubMed
La Différenciation Des Cellules Progénitrices Neurales Réglementé Par Wnt-3a
Ligands Wnt jouent un rôle essentiel dans le contrôle de la croissance et la différenciation cellulaire au cours du développement du système nerveux central par la voie de signalisation Wnt. Dans cette étude, nous avons étudié les effets de Wnt-3a et β-caténine sur la différenciation des ReNcell VM humains cellules progénitrices neurales. Après la surexpression de Wnt-3a ou mutant stabilisé β-caténine dans les cellules VM ReNcell, leurs effets sur la TCF-médiée par la transcription, la signalisation Wnt expression du gène cible et de la différenciation dans les cellules neuronales et gliales ont été étudiés. Nos résultats montrent que l'activation de la voie de signalisation Wnt / β-caténine augmente TCF-médiée par la transcription et l'expression des gènes cibles de Wnt, les Axin2 LEF1 et CyclinD1 dans les cellules VM ReNcell. À la différence de mutante-stabilisé β-caténine, Wnt 3a-neurogenèse augmente au cours de la différenciation des cellules VM ReNcell. Ainsi, nos données suggèrent que la neurogenèse induite par Wnt-3a est indépendante de l'activité transcriptionnelle de la signalisation Wnt / β-caténine dans les cellules VM ReNcell.
Effet De La 3D-échafaudage Formation Sur La Différenciation Et La Survie De L'homme Dans Les Cellules Progénitrices Neurales
RÉSUMÉ: CONTEXTE: 3D-échafaudages ont été montré à la croissance cellulaire et la différenciation directe dans de nombreux types cellulaires différents, avec la formation et la fonctionnalisation de la 3D-microenviroment être important dans la détermination du sort des cellules embarquées. Ici nous avons utilisé un échafaudage hydrogel à base d'enquêter sur les influences de la concentration de matrice et la fonctionnalisation de laminine sur la formation des échafaudages, et l'effet de ces échafaudages sur les cellules progénitrices neurales cultivées en leur sein. Méthodes: Dans cette étude nous avons utilisé différentes concentrations de la matrice d'hydrogel PuraMatrix basé. Dans des expériences on fonctionnalisé la matrice de laminine I. Le impact de la concentration et le traitement avec la laminine sur la formation de l'échafaudage a été examiné avec la microscopie à force atomique. Des cellules provenant de fœtus un être humain en ligne de cellules progénitrices neurales ont été cultivées dans les différentes matrices, ainsi que dans un système de culture 2D, et ont ensuite été analysés avec des colorations d'anticorps contre les marqueurs neuronaux. En parallèle, le taux de survie des cellules a été déterminée par un test vivants / morts. Résultats atomique mesures de microscopie à force montré que les matrices sont formées par des réseaux de fibres PuraMatrix isolés et des agrégats de fibres. Une augmentation de la concentration d'hydrogel a conduit à une diminution de la taille des mailles des échafaudages et de fonctionnalisation avec l'agrégation laminine promu des fibres (formation faisceau), ce qui réduit encore la densité des fibres isolées. Nous avons montré que la laminine-fonctionnalisation est essentiel pour l'homme cellules progénitrices neurales pour construire 3D-schémas de croissance, et que la prolifération des cellules est également affectée par la concentration de la matrice. En outre, nous avons trouvé que la 3D-cultures améliorées différenciation neuronale et le taux de survie des cellules par rapport à la 2D-cultures. CONCLUSIONS: Dans l'ensemble, nous avons démontré une influence directe de la formation 3D-échafaudage sur la survie et la différenciation neuronale des cellules progénitrices neurales. Ces résultats soulignent l'importance d'optimiser 3D échafaudages protocoles avant dans la prise de greffe in vivo des cellules souches et progénitrices dans le contexte de la médecine régénérative.
L'homme Cellules Progénitrices Neurales Afficher Fonctionnelle De La Différenciation Neuronale Et La Préférence Régionale Après Prise De Greffe Sur Les Cultures Slice Hippocampe
La transplantation de cellules souches offre des thérapies potentielles pour de nombreuses maladies neurodégénératives qui ont actuellement des options de traitement limitées ou pas. Cependant, on sait relativement peu sur la façon dont l'environnement hôte affecte le développement et l'intégration de ces cellules. Dans cette étude, nous avons greffé des cellules humaines immortalisées mésencéphale progénitrices neurales (PNJ) sur les cultures d'hippocampe de rat de tranches de cerveau pour étudier l'influence d'un environnement de neurones sur la différenciation. Enregistrements de patch-clamp a révélé que les cellules progénitrices transplantés pourrait exprimer neuronale de type voltage-dépendants des courants et de recevoir rapidement l'entrée synaptique de la tranche de cerveau hippocampique. La distribution des cellules progénitrices dans les coupes d'hippocampe a été fortement influencée par l'architecture neuronale, avec la plupart des cellules situées dans les régions et les processus d'envoi fissurales parallèles à la structure laminaire, alors qu'à l'inverse, les cellules situées dans le gyrus denté a montré aucune tendance organisée. Presque aucun des cellules ont été trouvés dans le stratum radiatum ou des couches de cellules pyramidales. Ensemble, ces résultats démontrent le potentiel de l'architecture de l'environnement hôte à réglementer l'intégration des cellules transplantées, et mettre en évidence l'utilité des systèmes de coculture pour étudier les mécanismes qui sous-tendent la migration, l'intégration et la différenciation des PNJ de l'homme dans des environnements structurés neuronaux.
