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Articles by Andrea Liedmann in JoVE
JoVE Bioengineering
3 차원 자기 조립 펩티드 히드로겔에서 인간 신경 전구 세포의 배양
Albrecht-Kossel-Institute for Neuroregeneration, University of Rostock
여기서 우리는 자기 조립 3 차원 비계 문화에 인간 신경 전구 세포의 사용을 설명합니다. 우리는 유동세포계측법에 의해 연속적 예 분석하는 공사장 공중 발판에서 세포를 릴리스하는 프로토콜을 제시한다. 이 프로토콜은 상세한 mechanistically 연구를 수행하는 다른 세포 유형에 맞게 수 있습니다.
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인간의 신경 조상 세포 Wnt 3a에 의해 규제의 차별화
Wnt ligands 신호 통로 세포 성장 및 분화는 Wnt 통해 중앙 신경 시스템 개발 과정의 제어에 중추적인 역할을 재생 합니다. 이 연구에서 우리 ReNcell VM 인간의 신경 조상 세포의 분화에 Wnt 3a 및 β-catenin의 효과 조사 했다. Overexpression Wnt 3a 또는 돌연변이 안정 β-catenin ReNcell VM 셀, TCF 중재 전사에 대 한 그들의 효과에 한 후 Wnt 대상 유전자 발현 및 신경 교 세포로 분화 조사 했다. 우리의 결과 신호 증가 TCF 중재 전사 및 Axin2, LEF1 및 ReNcell VM 셀에 CyclinD1 Wnt 대상 유전자의 표정을 Wnt/β-catenin의 그 활성화를 보여 줍니다. 돌연변이 안정 β-catenin, 달리 Wnt 3a ReNcell VM 세포 분화 중 성체를 증가합니다. 따라서, 우리의 데이터는 신생 Wnt 3a에 의해 유도 된 ReNcell VM 셀에서 Wnt/β-catenin 통로의 transcriptional 활동의 독립적입니다 것이 좋습니다.
차별화 및 인간의 신경 조상 세포의 생존에 3D 비 계 형성의 효과
개요: 배경: 3 차원-건설 기계 임대 세포 성장과 분화 형성 및 포함 된 셀의 운명을 결정 하는 데 중요 한 3D microenviroment의 functionalisation와 많은 다른 세포 유형으로 직접 표시 되었습니다. 여기는 장비의 형성에 laminin와 매트릭스 농도 functionalisation의 영향을 조사 하기 위해 hydrogel 기반 비 계 사용 하 고 그 안에 인간의 신경 조상 세포에 이러한 장비의 영향 교양. 방법: 본이 연구에서는 우리 hydrogel 기반 매트릭스 Puramatrix의 다른 농도 사용. 일부 functionalised laminin와 매트릭스 실험 우리 나. 집중력과 치료는 비 계 형성에 laminin의 영향 원자 힘 현미경으로 조사 되었다. 인간의 태아 신경 조상 세포 선에서 셀 2D 문화 시스템에서 뿐만 아니라 다른 행렬에서 경작 되었고 이후 신경 표식에 대 한 항 체 stainings로 분석 했다. 동시에 세포의 생존 율 라이브/죽은 분석 결과 의해 결정 했다. 결과: 원자 힘 현미경 측정 시연 매트릭스 네트워크 격리 된 PuraMatrix 섬유 및 섬유의 집계에 의해 형성 된다. Hydrogel 농도의 증가 더욱 고립 된 섬유의 밀도 감소 시키는 섬유 (번들 형성)의 승진 laminin 집계로 건설 기계 임대 및 functionalisation의 메쉬 크기 감소를 이끌어 냈다. 살펴본 laminin functionalisation 인간의 신경 조상 셀 3D 성장 패턴을 구축을 위해 필수적 이며 셀의 그 확산 매트릭스의 농도 의해 영향을 받습니다. 또한 우리는 3D 문화 신경 분화와 2D 문화에 비해 세포의 생존 율을 향상 발견. 결론: 함께 찍은 우리 생존에 3D 비 계 형성의 직접적인 영향 및 인간의 신경 조상 세포의 신경 분화를 증명 하고있다. 이 발견 이전에 재생 의학의 맥락에서 줄기와 조상 세포의 in vivo engraftment 3D-건설 기계 임대 프로토콜 최적화의 중요성을 강조.
인간의 신경 조상 세포 Hippocampal 슬라이스 문화에 Engraftment 후 기능적 신경 분화 및 지역 기본 설정을 보여 줍니다
줄기 세포의 이식 제한 현재 많은 신경 퇴행 성 질환 또는 아무 치료 옵션에 대 한 잠재적인 치료를 제공 합니다. 그러나, 상대적으로 작은 호스트 환경 개발 및 이러한 셀의 통합에 미치는 영향에 대 한 알려져 있다. 이 연구에서 불멸 하 게 인간의 midbrain 신경 조상 세포 (NPCs) 쥐 hippocampal 뇌 조각 문화 차별화에 신경 환경 영향 조사에 engrafted 있다 우리. 패치 클램프 녹음 이식된 조상 세포가 신경 형 전압 개폐 전류를 나타내고 빠르게 hippocampal 뇌 조각에서 시 냅 스 입력을 받을 수 공개 합니다. Hippocampal 분할 영역에 걸쳐 조상 세포의 분포는 신경 건축 fissural 지역 및 보내는 프로세스 동안 반면 층 류 구조를 병렬, 조직적인된 패턴을 보여주었다가 뇌에 있는 세포에 있는 대부분의 셀과 함께 강력 하 게 영향을. 거의 셀 지층 radiatum 또는 피라미드 세포 층에서 발견 됐다. 함께, 이러한 결과 이식된 세포의 통합 규제 호스트 환경의 아키텍처에 대 한 가능성을 입증 하 고 coculture 시스템 마이그레이션, 통합 및 구조화 된 신경 환경에서 인간의 Npcs의 차별화를 기본 메커니즘을 공부 하 고 유틸리티를 강조.
