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Articles by Andreas Rettich in JoVE
JoVE Clinical and Translational Medicine
Implantación de transmisores de radiotelemetría Ceder los datos en el ECG, frecuencia cardiaca, la temperatura corporal y la actividad en ratones de laboratorio de movimiento libre
1Division of Surgical Research, University Hospital Zurich, 2Institute of Laboratory Animal Science, University of Zurich
Una técnica quirúrgica para la implantación de los transmisores de telemetría disponible comercialmente utilizados para la medición continua de biopotencial (un ECG), frecuencia cardiaca, temperatura corporal y la actividad locomotora en ratones libres de movimiento se muestra. Recomendaciones y protocolos para la atención post-operatoria y el alivio del dolor, mejorar la recuperación, el bienestar y la tasa de supervivencia se presentan también.
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El Impacto Fisiológico Y De Comportamiento De Contacto Sensorial Entre Los Ratones Adultos No Familiares En El Laboratorio
Los ratones de la vivienda en el laboratorio en grupos permite la interacción social y es la forma en que un laboratorio debe albergar a los ratones. Sin embargo, los machos adultos muestran la agresión recíproca y por lo tanto, con frecuencia alojados individualmente. Por otra parte, un divisor de rejilla, que permite el contacto sensorial con la vista y el olfato, pero impide que los combates y las lesiones, se puede separar los ratones dentro de una jaula. Este estudio examinó la influencia de este método de la vivienda en varios parámetros fisiológicos y de comportamiento. Ratones machos adultos alojados durante 10 días con el contacto sensorial con un hombre desconocido se muestra un aumento significativo en la frecuencia cardíaca (FC), temperatura corporal (TC), y la actividad motora (ACT). Por otra parte, los ratones sufrieron deterioro el comportamiento de la construcción del nido y el peso reducido significativamente cuerpo. Por el contrario, los machos alojados en una manera similar con una compañera sólo mostró una elevación transitoria de la ACT, BT, y de recursos humanos. Aunque no hay un efecto beneficioso claro de los hombres de cubierta con el contacto sensorial de las mujeres era evidente, este estudio no pudo excluir. Por otro lado, la vivienda de los machos adultos de esta manera conduce a alteraciones sufridas en detrimento de la fisiología y el comportamiento, lo que implica alteración grave de bienestar animal.
En Caso De Ratones De Laboratorio Ser Anestesiado Para Biopsia De Cola?
Biopsias de la cola se toman automáticamente a los ratones modificados genéticamente genotipo. Sin embargo, el efecto de este procedimiento en el bienestar de los animales rara vez se ha investigado. Por lo tanto, todavía no se ha demostrado claramente en qué medida los ratones sufren de cola biopsia (TB) y durante cuánto tiempo. El objetivo de nuestro estudio fue evaluar el impacto de una sola TB en los parámetros fisiológicos y de comportamiento de ratones adultos y para investigar si la anestesia puede ser beneficioso. Peso vivo (PV) las curvas, el consumo diario de alimento / agua y mediciones de telemetría de la frecuencia cardiaca, temperatura corporal y la actividad locomotora se registraron durante tres días siguientes a la tuberculosis, con y sin anestesia con metoxiflurano (MOF) o éter dietílico (éter). Además, el impacto de la anestesia solo se caracterizó. TB sin anestesia inducida por un aumento en la frecuencia cardíaca y la actividad locomotora durante 1 h. La temperatura corporal central se elevó durante 2 h. En contraste, el ritmo cardíaco se incrementó hasta 4 h después de la anestesia. La temperatura corporal central se mantuvo alterada durante un máximo de 20 horas después de la exposición al éter y por 44 horas después de la exposición al Ministerio de Hacienda. BW se redujo ligeramente después de MOF. Los casos de muerte se produjo exclusivamente en virtud de éter a una tasa del 7%. Nuestros resultados indican un efecto de corta duración de la tuberculosis, mientras que la anestesia, ya sea con MOF o éter indujo alteraciones notables en los parámetros analizados. En conclusión, este tipo de anestesia no mejorar el bienestar de la cola del ratón después de la biopsia.
Análisis Comparativo Y El Impacto Fisiológico De Los Diferentes Tejidos Metodologías Biopsia Utilizada Para El Genotipado De Ratones De Laboratorio
El genotipado de los ratones modificados genéticamente y el control de la autenticidad de los antecedentes genéticos de cepas congénicos coisogenic o mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es un procedimiento rutinario que se puede realizar con biopsias de tejidos diferentes que provocan distintos grados de trauma. En este estudio, algunos de los métodos de toma de muestras invasivas y no invasivas, se compararon, con el foco principal en el impacto sobre la fisiología de los animales. Se comparó la oreja ponche, biopsia de la cola, el pelo taponamiento, la boca y el recto hisopos y el sistema de seguridad simple de los animales, puntuable para el impacto en la frecuencia cardíaca (FC), la temperatura corporal central (BT) y la actividad motora por telemetría, durante la biopsia y para los siguientes 6 horas. Por otra parte, con el fin de correlacionar el impacto fisiológico con la viabilidad y fiabilidad de los resultados de genotipado, se realizó un análisis de PCR de las muestras de biopsia obtenidas mediante el uso de las mismas modalidades de recaudación analizados por telemetría. Todos los métodos de muestreo y retención inducida aumento significativo de recursos humanos y BT y un ligero aumento en la actividad motora durante 1 h, independiente de la invasividad del método utilizado. El genotipado de todas las biopsias permitió la identificación adecuada de los animales transgénicos, biopsias de la cola, los sacadores de los oídos y los folículos pilosos que dan señales claras, el último método es rápido, pero también son susceptibles a la contaminación cruzada durante el muestreo por un gran número de animales. Contención y todos los métodos de biopsia provocó cambios fisiológicos similares, lo que indica que el manejo de los animales es de gran importancia y que el procedimiento de muestreo no influyen fuertemente en los parámetros fisiológicos.
Evaluación Del Dolor Después De La Laparotomía En Ratones De Laboratorio Mediante El Registro Telemétrico De La Frecuencia Cardiaca Y La Variabilidad Del Ritmo Cardíaco
Dolor de leve a moderada de grado es difícil de detectar en los ratones de laboratorio porque los ratones son animales de presa que tratan de eludir a los depredadores o el hombre al ocultar signos de debilidad, lesión o dolor. En este estudio, se investigó el uso de la telemetría para identificar los indicadores de leve a moderado después de la laparotomía dolor.
Optimizado Técnicas Quirúrgicas Y Cuidado Postoperatorio Mejorar Las Tasas De Supervivencia Y Permitir La Grabación Exacta De Telemetría En Ratones Que Se Ejercitaban
El ratón de laboratorio se usa comúnmente como un sofisticado modelo en la investigación biomédica. Sin embargo, los experimentos que requieren cirugía mayor frecuencia conducen a complicaciones postoperatorias graves y la muerte, sobre todo si los ratones modificados genéticamente con alteraciones anatómicas y fisiológicas someterse a intervenciones amplias, tales como la implantación del transmisor. Transmisores de telemetría se utilizan para estudiar la fisiología cardiovascular y las enfermedades. La telemetría se obtiene una medición fiable y precisa de la presión arterial en el ratón que vagan libremente, sin anestesia y sin tensión, pero el registro de datos se ve obstaculizado considerablemente si las mediciones se hacen en el ejercicio de un ratón. Así, el objetivo de optimizar la implantación del transmisor para mejorar la grabación de la señal telemétrica en el ejercicio de los ratones, así como para establecer un régimen de cuidado postoperatorio que promueve la convalecencia y la supervivencia de los ratones después de una cirugía mayor en general.
El Hematocrito óptimo Para El Rendimiento Máximo Del Ejercicio En Agudas Y Crónicas Tratados Con Eritropoyetina-ratones
La eritropoyetina (EPO) tratamiento aumenta el hematocrito (HTC) y, en consecuencia, arterial de O (2) contenido. Esto a su vez mejora el rendimiento del ejercicio. Sin embargo, debido a la viscosidad sanguínea elevada asociada con el aumento de los niveles de HTC puede limitar el rendimiento cardíaco, se sugirió que la más alta posible Htc no necesariamente puede estar asociada con la mayor capacidad de ejercicio posible. Para probar la hipótesis propuesta de que un HTC óptima en agudas y crónicas, los ratones tratados con EPO existe - es decir, el HTC, que facilita el más grande de O (2) el flujo durante el ejercicio máximo - los niveles de HTC de ratones de tipo salvaje eran muy elevadas mediante la administración de la novela de proteínas estimulantes de la eritropoyesis (NESP; wtNESP). Por otra parte, en la línea de ratones transgénicos TG6 que alcanza niveles HTC de hasta 0,9, debido a la sobreexpresión constitutiva de la EPO humana, el HTC se redujo gradualmente mediante la aplicación de la fenilhidrazina compuesto que induce la hemólisis (FHZ; tg6PHZ). El rendimiento cardiovascular máxima se midió mediante el uso de la telemetría en todos los ratones que se ejercitaban. La más alta máximo de O (2) la captación (VO (2 máx)) y el tiempo máximo hasta el agotamiento a intensidades de ejercicio submáximo, se llegó a valores de HTC de 0,58 y 0,57 para wtNESP, y 0,68 y 0,66 para tg6PHZ, respectivamente. Producto de la tasa de presión, y por tanto también la capacidad máxima de trabajo del corazón, el aumento de los valores elevados de Htc. La viscosidad sanguínea relacionada con el VO (2 máx). Aparte de la confirmación de la hipótesis de HTC, llegamos a la conclusión de que tg6PHZ adaptado mejor a diferentes valores Htc wtNESP que debido a la mayor Htc óptimo de tg6PHZ en comparación con wtNESP. De la nota, viscosidad de la sangre juega un papel fundamental en la limitación de la capacidad de ejercicio.
El Isoflurano Y Sevoflurano Proporcionar Igualmente Eficaz Anestesia En Ratones De Laboratorio
El isoflurano es actualmente el anestésico volátil más común usado en ratones de laboratorio, mientras que en la medicina humana del sevoflurano más moderno a menudo se utiliza para la anestesia por inhalación. Este estudio tuvo como objetivo caracterizar y comparar las características clínicas de ambos anestésicos por inhalación de anestesia en los ratones. En un enfoque reflejo de las condiciones de laboratorio de rutina (la respiración espontánea, el suministro de gas a través de la máscara de la nariz, la prevención de la hipotermia por una alfombra de calentamiento) a 50 minutos de anestesia se llevó a cabo. Anestésicos se administraron en oxígeno como gas portador en dosis estandarizadas de 1,5 concentraciones mínimas alveolares, que era 2,8% para el isoflurano y 4,9% para el sevoflurano. Tanto la inducción y la recuperación de la anestesia procedió rápidamente, en 1-2 minutos. Durante la anestesia, todas las pruebas de reflejos fue negativa y sin deterioro grave de las funciones vitales se encuentran, todos los animales sobrevivieron. El más prominente de efectos secundarios durante la anestesia fue la depresión respiratoria con hipercapnia, acidosis y una marcada disminución en la tasa de respiración. Bajo anestesia, la frecuencia cardíaca y temperatura corporal se mantuvo dentro del rango normal, pero se incrementaron significativamente durante 12 horas después de la anestesia. La actividad locomotora, el consumo diario de alimentos y el agua y la progresión del peso corporal no mostró alteraciones después de la anestesia. No se encontraron diferencias significativas entre los dos anestésicos. En conclusión, el isoflurano y el sevoflurano proporcionan una anestesia ofrezca las mismas garantías en ratones de laboratorio.
Madriguera Del Comportamiento Como Un Indicador De Dolor Después De La Laparotomía En Ratones
La detección de dolor persistente de grado leve a moderado en ratones de laboratorio es difícil porque los ratones no muestran síntomas inequívocos de dolor o sufrimiento con los métodos estándar de monitoreo a corto plazo de observación o clínica. Este estudio investigó el uso potencial de rendimiento de madriguera - un comportamiento espontáneo y altamente motivado - como una medida de dolor post-operatorio en ratones de laboratorio. La influencia de la cirugía menor en madriguera se investigó en adultos ratones C57BL/6J de ambos sexos en un ensayo modificado roedor de madriguera (desplazamiento de pellets de alimentos a partir de un tubo lleno de sedimento) dentro de la jaula hogar del animal. Casi todos los ratones (98%) sanos enterrada (media latencia 1,3 h, SEM 0,5 h). Después de la cirugía sin necesidad de tratamiento del dolor, la latencia de la madriguera fue significativamente más prolongada (media Δ latencia 10 h). El tratamiento analgésico con el fármaco anti-inflamatorio carprofeno (5 mg / kg de peso corporal) redujo la latencia de la madriguera después de la cirugía (media Δ latencia 5,5 h) a la observada en los ratones que habían sido anestesiados (media Δ latencia 5.4 h) o ha recibido la anestesia y la analgesia (media Δ latencia 4,6 h). La analgesia durante la cirugía se asoció con un inicio mucho antes de cavar en comparación con la cirugía sin tratamiento para el dolor. Una gradación en su rendimiento de madriguera se encontró que van desde la tranquila antes de la operación de estado para el nivel intermedio después de la anestesia / analgesia y la cirugía con analgesia, a la prolongación de la latencia pronunciada a la madriguera después de la cirugía, sin el alivio del dolor. En conclusión, post-quirúrgica deterioro del estado general, probablemente atribuible principalmente al dolor, puede ser convenientemente evaluado en ratones de laboratorio sobre la base de la prueba de madriguera.
Multiparámetro De Telemetría Como Método De Cribado Sensible Para Detectar Reactogenicidad De La Vacuna En Ratones
Vacunas y adyuvantes refinados se necesitan con urgencia para avanzar en la inmunización contra los problemas mundiales infecciosas como el VIH, la hepatitis C, la tuberculosis y la malaria. Los grandes esfuerzos de detección están llevando a cabo para identificar adyuvantes con los perfiles de eficacia mejorada. Reactogenicidad a menudo representa un obstáculo importante para el uso clínico de nuevas sustancias. Sin embargo, independientemente de su importancia, este parámetro se ha mantenido difícil de detectar, debido a la falta de modelos animales sensibles a pequeños con una capacidad para realizar pruebas de alto rendimiento. Aquí mostramos que las mediciones continuas de telemetría de la frecuencia cardíaca, variabilidad del ritmo cardíaco, la temperatura corporal y la actividad locomotora en ratones de laboratorio fácilmente desenmascarado efectos secundarios sistémicos de la vacunación, que no fue detectado por la evaluación convencional de observación y de puntuación clínica. Incluso las aberraciones de menor importancia en la homeostasis se detecta fácilmente, que van desde la activación simpática sobre los efectos transitorios pirogénicas de reducción de la actividad física y la apatía. Resultados en tiempo real combinadas con el potencial de escalabilidad y automatización parcial en el contexto industrial sugieren telemetría multiparamétrico en ratones de laboratorio como una pantalla de primera línea para la reactogenicidad de la vacuna. Esto puede acelerar el descubrimiento de la vacuna, en general, y puede favorecer el éxito de las vacunas en la lucha contra las enfermedades infecciosas y el cáncer.
