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Articles by Angela L. Elwell in JoVE

 JoVE General

单次读取和配对的最终从10微克总RNA的mRNA - Seq的Illumina的图书馆


JoVE 3340 10/27/2011

1Regenerative Biology, Morgridge Institute for Research, 2Department of Cell & Regenerative Biology, University of Wisconsin, 3Department of Molecular, Cellular, & Regenerative Biology, University of California

在这里,我们描述了读取和配对的单端Illumina公司的mRNA - Seq的测序基础上的T7线性RNA扩增的基因表达分析库的制备方法。该协议只需要10微克启动总RNA,并产生了高度一致库代表整个笔录。

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分离父母从对下一代增长和发展的拟南芥种子大小影响环境。

实验室实验通常试图控制的环境条件受到深刻影响植物的生长和发展。然而,生长条件不统一之间或甚至在实验室和这些差异影响植物的生长和发展是未知的程度内。野生型拟南芥的实验被为了量化对增长和发展的下一代的父母环境和种子大小影响。单批种子种植在六个环境室,趋成熟。生产的种子是机械筛分成小型和大型的大小类然后在共同的环境中长大,受到一套跨越生命周期检定。方差分析表明种子大小影响早在发展,影响着主根生长和向重力性,但还开花时间尤其重要。育儿环境影响后代发芽时间、 开花和后代产生的种子的重量。在某些情况下,父母的环境影响的严重程度 (交互) 观察到的种子大小影响。这些数据表明,父母一代的生活史情况可以影响增长和整个生命周期的程度,在执行遗传研究时应考虑的下一代的发展。

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