Translate this page to:
French
In JoVE (1)
Other Publications (4)
Automatic Translation
This translation into French was automatically generated.
English Version | Other Languages
Articles by Angela Pollard in JoVE
JoVE Immunology and Infection
Toxoplasma gondii Formation paroi du kyste dans la moelle osseuse Activé macrophages dérivés et Conditions Bradyzoite
Department of Medical Microbiology and Immunology, University of Wisconsin
Toxoplasma gondii se convertit en une forme un kyste, en réponse aux stress environnementaux, ce qui peut être imité dans les modèles de culture de tissus. Cette vidéo montre des techniques pour examiner la formation des parois du kyste en activant la moelle osseuse dérivées des macrophages ou des changements de pH moyen de croissance des cellules de fibroblastes.
Other articles by Angela Pollard on PubMed
Famille Très Polymorphe Des Antigènes De Surface Glycosylphosphatidylinositol Ancrées Avec La Preuve Du Règlement De Développement Dans Le Toxoplasma Gondii
Le cycle de vie du parasite Toxoplasma gondii apicomplexe exige que un kyste infectieux se développer et être maintenue pendant toute la durée de vie de l'hôte. Les molécules affichées sur la surface du parasite sont importantes dans le contrôle de la réponse immunitaire contre le parasite. T. gondii a une superfamille de glycosylphosphatidylinositol (GPI) ancrés antigènes de surface, appelée antigène de surface (SAG) et des antigènes de surface SAG-connexes, qui sont régulée par le développement lors de l'infection. En utilisant un algorithme de clustering, nous avons identifié une nouvelle famille de 31 protéines de surface qui sont prévus pour être ancré GPI, mais ne sont pas liés à des protéines du SAG, et donc nous avons appelé ces protéines antigènes de surface SAG-indépendants (Suse). Analyse de la densité de polymorphisme de nucléotide unique ont montré que les membres de cette famille sont les gènes les plus polymorphes dans le génome de T. gondii. Par immunofluorescence de SUSA1 et SUSA2, deux membres de la famille, a révélé qu'ils se trouvent sur la surface du parasite. Nous avons confirmé que SUSA1 et SUSA2 sont ancré GPI par clivage phospholipase. L'analyse des marqueurs de séquence exprimée (EST) a révélé que SUSA1 eu 22 sur 23 TER de l'infection chronique. L'analyse des ARNm et la protéine a confirmé que SUSA1 est fortement exprimé dans la forme chronique du parasite. Les sérums de souris atteintes de maladies chroniques T. gondii a réagi à SUSA1, indiquant que SUSA1 interagit avec le système immunitaire de l'hôte durant l'infection. Ce groupe de protéines représente probablement une nouvelle famille de polymorphes antigènes de surface GPI qui sont reconnus par le système immunitaire de l'hôte et dont l'expression est régulée lors de l'infection.
Caractérisation Structurale De Haemophilus Parainfluenzae Lipooligosaccharide Et L'élucidation De Son Rôle Dans L'adhérence En Utilisant Un Mutant Du Noyau Externe
L'agent pathogène opportuniste Haemophilus parainfluenzae est une bactérie Gram-négative trouvée dans l'oropharynx de l'homme. Haemophilus parainfluenzae est membre de la famille des Pasteurellaceae dans lequel il est plus étroitement lié à Haemophilus sengis et Actinobacillus. Caractérisation de surface lipooligosaccharide affichée a identifié les composants qui sont cruciaux dans l'adhérence. Nous avons examiné la structure d'oligosaccharides de lipooligosaccharide de 2 isolats cliniques de H. parainfluenzae. Oligosaccharide de noyau a été isolé par les méthodes usuelles de lipooligosaccharide purifié. Informations structurelles a été créées par une combinaison d'analyses de méthylation et monosaccharide, spectroscopie de résonance magnétique nucléaire et spectrométrie de masse révélant les structures suivantes : R-(1-6)-beta-Glc-(1-4)-D,D-alpha-Hep-(1-6)-beta-Glc-(1-4)-, son remplacement par un noyau de L,D-alpha-Hep-(1-2)-L,D-alpha-Hep-(1-3)-L,D-alpha-Hep-(1-5)-alpha-Kdo à la position 4 l proximale, résidus de D-alpha-Hep de Kdo et avec un résidu de PEtn en position 6 de la centrale L tri-heptose-KdoRésidu D-alpha-Hep. Dans la souche 4282, substituant R est bêta-galactose et chez la souche 4201 il n'y a aucun substituant au glucose distal. Ces analyses ont révélé que plusieurs aspects structurels de H. parainfluenzae lipooligosaccharide sont comparables avec nontypeable Haemophilus influenzae lipooligosaccharides. Cette étude a également identifié un galactane chez la souche 4201 et un glucane dans la souche 4282. Haemophilus parainfluenzae a été montré à respecter une ligne de cellules épithéliales bronchiques dans la même mesure que nontypeable H. influenzae. Cependant, un mutant de parainfluenzae H. manque le noyau externe de la lipooligosaccharide montre réduit l'adhérence aux cellules épithéliales, suggérant que H. parainfluenzae lipooligosaccharide joue un rôle dans la colonisation des tissus.
Un Domaine Transmembranaire Contenant Protéine De Surface Du Augments Gondii Réplication Dans Les Cellules Immunitaires Activées Et établissement D'une Infection Chronique Toxoplasma
Toxoplasma gondii mutants identifiés comme défectueux dans la mise en place d'une infection chronique ont été examinés afin d'isoler ceux qui sont spécifiquement affectés dans leur capacité à se répliquer dans les macrophages activés. L'un des mutants identifiés contient une insertion dans le gène TGME49_111670 hypothétique. La complémentation génétique restaure la capacité du mutant à se répliquer dans les cellules immunitaires et produire des kystes dans le cerveau des souris. Tandis que le mutant est plus sensible à l'oxyde nitrique est de sa souche parentale, il n'est pas défectueux dans sa capacité à supprimer l'oxyde nitrique. La protéine perturbé ne présente aucune homologie significative avec des protéines ayant des fonctions connues, mais on s'attend à avoir un domaine transmembranaire. Immunofluorescence montre la protéine sur la surface du parasite, même dans des macrophages activés, colocalisent avec un antigène de surface de tachyzoïtes, SAG1, et orienté avec son extrémité C-terminale extérieure. L'analyse de l'Ouest révèle que la protéine est diminuée dans les bradyzoïtes. Malgré la spécificité tachyzoïte de cette protéine, les souris infectées avec le mutant succombent à l'infection aiguë similaire à ceux qui sont infectés avec la souche parentale. Des échantillons de sérum provenant de souris atteintes de maladies chroniques T. gondii réagir à un polypeptide à partir de TGME49_11670, indiquant que la protéine est vu par le système immunitaire lors de l'infection. Cette étude est la première à caractériser une protéine de surface T. gondii qui contient un domaine transmembranaire et montrent que la protéine contribue à parasiter la réplication dans les cellules immunitaires activées et l'établissement d'une infection chronique.
Le Rôle De Certaines Molécules De Toxoplasma Gondii Dans La Manipulation De L'immunité Innée
L'infection par le parasite Toxoplasma gondii stimule une réponse immunitaire innée de l'hôte. T. gondii induit aussi des modifications dans les monocytes et les cellules dendritiques infectées que, probablement, contribuer à sa capacité à diffuser et, finalement, d'établir une infection persistante. Des progrès récents ont lié molécules du parasite spécifiques à une stimulation immunitaire ou de la capacité du parasite à la subversion voies de signalisation intracellulaires dans les cellules infectées d'échapper à l'immunité.
