JoVE General
Ann-Marie Lawrence, Hüseyin Besir
Protein Expression and Purification Core Facility, EMBL Heidelberg
Un protocole court pour la coloration des protéines de Coomassie Brilliant Blue (CBB) G-250 dans des gels de polyacrylamide est décrite sans utiliser de solvants organiques ou d'acide acétique comme dans les procédures de coloration classique avec CBB.
Microbial Cell Factories. 2005 | Pubmed ID: 16351710
La solubilité des protéines recombinantes exprimé chez les bactéries est souvent décevant faible. Plusieurs stratégies ont été développées pour améliorer le rendement et une des stratégies plus courantes est la fusion de la protéine cible avec un partenaire approprié. Malgré plusieurs rapports sur l'utilisation efficace de chacune de ces compagnies pour augmenter la solubilité de quelques protéines recombinantes, aucun d'entre eux n'a toujours réussi et une approche combinatoire semble plus efficace pour identifier la combinaison optimale pour une protéine spécifique. Par conséquent, l'efficacité d'un système d'expression dépend la vitesse dans l'identification de la combinaison optimale pour le candidat de fusion approprié dans un processus de présélection. Cet article décrit un ensemble de vecteurs d'expression (pETM) conçu pour subcloning rapide, expression et purification ultérieure à l'aide de la chromatographie d'affinité métallique immobilisée (IMAC).