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Articles by Arun Seth in JoVE

 JoVE Clinical and Translational Medicine

定量的リアルタイムPCR(定量PCR)による前立腺腫瘍におけるマイクロRNAの検出


JoVE 3874 5/16/2012

1Department of Laboratory Medicine & Pathobiology, University of Toronto, 2Division of Urology, Sunnybrook Health Sciences Centre, Toronto, Canada, 3Department of Anatomic Pathology, Sunnybrook Health Sciences Centre, Toronto, Canada, 4Biological Sciences, Sunnybrook Research Institute

定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応(定量PCR)は、腫瘍サンプル中の様々なマイクロRNA(miRNA)分子の発現レベルを調査するために迅速かつ高感度な方法です。異なるmiRNA分子の何百ものこのメソッド式を使用して、増幅定量化し、同じcDNAをテンプレートから分析することができます。

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Srcは、ヒト乳癌におけるエストロゲン依存性エストロゲン受容体アルファタンパク質分解を促進する

エストロゲンは、エストロゲン受容体α(; ESR1でエンコードされたERα)の転写活性化とタンパク質分解の両方を駆動します。ここでは、ERアルファ陰性、50 ERα陽性原発乳癌が重要な転写後のERαの安定化を示唆している、調べた200で、変数と重複ESR1 mRNAレベルを観察した。我々の結果は、SrcがERアルファタンパク質分解を有効にするにはエストロゲンと協力していることを示します。 Srcのリガンド活性化ERαの転写活性を刺激し、ERαT(1/2​​)低下し誘導。 srcおよびERαのレベルは反比例原発乳癌に相関していた。 ERα-陰性原発乳癌および細胞株は、ERα陽性癌と細胞と比較して増加したSrcのレベルおよび/または活性を示した。 ERαT(1/2​​)はERα-陰性細胞株に減少した。両方のERα陽性と陰性の細胞株では、プロテアソームとSrc阻害剤の両方は、ERアルファレベルを増加させた。 Srcの阻害は、リガンド活性化ERアルファユビキチン化障害とERアルファレベルを増加させた。 BT-20細胞におけるSrcのsiRNAの障害リガンド活性化ERαの損失。 srcで前処理は、in vitroでのERαのユビキチン化と分解を増加させた。これらの知見は、我々はSrcの活性化とERアルファタンパク質分解の間に新たなリンクであるとリガンドERαおよびSrcドライブERαの転写活性との間のクロストークは、ユビキチン依存性タンパク質分解のためにERαをターゲットとすることによりモデルをサポートするために信じるもの提供しています。発癌性のSrcの活性化だけでなく、増殖だけでなく、ERα-陰性乳癌のサブセットでエストロゲン活性化ERαの損失、変更予後と治療への反応を促進する可能性がある。

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