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Articles by Austin L. Brown in JoVE
JoVE General
Rendendo Patch-pipette e Elettrodi Sharp con un estrattore programmabile
1Department of Molecular and Cellular Physiology, Stanford University, 2Department of Molecular and Cellular Physiology, Stanford University School of Medicine
Questo video mostra come utilizzare un estrattore programmabile per rendere pipette cerotto e gli elettrodi taglienti per elettrofisiologia. La stessa procedura può essere usato per fare una varietà di strumenti in vetro, tra cui aghi da iniezione.
Other articles by Austin L. Brown on PubMed
Portatile Unità Di Posizionamento Globale Per Integrare Attività Fisica Basata Su Accelerometry Monitor
Questo studio esamina l'utilità di integrare la misurazione di attività fisica basata su accelerometry con dati spaziali da portatile unità globale di posizionamento (GPS) sistema per determinare dove si verifica l'attività fisica.
Guadagno Di Funzione Mutazioni Nel Canale Sensoriale Mechanotransduction MEC-4 DEG/ENaC Alterano Blocco Gating E Droga
MEC-4 e MEC-10 sono le subunità che formano dei pori del mechanotransduction sensoriali complesse che media sensazione tattile in Caenorhabditis elegans (o ' Hagan, R., M. Chalfie e M.B. Goodman. 2005. NAT. Neurosci. 08.43-50). Sono membri di una grande famiglia di proteine di canale ionico, collettivamente chiamati DEG/ENaCs, che sono espressi nelle cellule epiteliali e i neuroni. In ovociti di Xenopus, MEC-4 può assemblare in canali homomeric e coassemble con MEC-10 in canali eteromerico (Goodman, M.B., G.G. Ernstrom, D.S. Chelur, R. O'Hagan, C.A. Yao e M. Chalfie. 2002. La natura. 415:1039-1042). Per guadagnare la comprensione dei principi di struttura-funzione che governano gating e blocco di droga, abbiamo analizzato l'effetto di mutazioni di guadagno di funzione utilizzando una combinazione di morsetto di tensione di due elettrodi, registrazione monocanale e fuori-fuori macropatches. Abbiamo trovato che mutazione di A713, la d o la degenerazione di posizione, ai residui più grandi di cisteina aumentato macroscopico probabilità corrente, aperto e aperti volte nei canali homomeric, suggerendo che ingombranti residui in questa posizione stabilizzano gli stati aperti. Wild-type MEC-10 parzialmente soppresso l'effetto di tali mutazioni su corrente macroscopica, suggerendo che le interazioni subunità-subunità regolano probabilità aperta. Supporto aggiuntivo per questa idea è derivato da un'analisi delle correnti macroscopiche trasportato dai canali eteromerico mutante di singolo e doppio-mutante. Abbiamo anche esaminato il blocco dall'amiloride diuretico e due relativi composti. Abbiamo trovato che mutazione di A713 treonina, glicina o aspartato diminuito l'affinità dei canali homomeric amiloride. Al contrario l'aumento di probabilità aperta, questo effetto non era correlato alla dimensione della catena laterale dell'amminoacido, che indica che la mutazione in questo sito altera antagonista vincolante da un meccanismo indipendente. Infine, vi presentiamo prova che quel blocco di amiloride è diffusione limitata nei canali DEG/ENaC, suggerendo che variazioni di affinità amiloride derivano da variazioni di energia di legame in contrasto con l'accessibilità. Possiamo concludere che la posizione d fa parte di una regione chiave nel canale funzionalmente e strutturalmente, che forse rappresenta l'inizio di un dominio che formano dei pori.
MEC-2 E MEC-6 Nel Caenorhabditis Elegans Sensoriale Mechanotransduction Complesso: Subunità Ausiliaria Che Consentono Attività Del Canale
Il canale ionico formato dalle proteine omologhe 4 MEC MEC-10 forma il nucleo di un canale sensoriale mechanotransduction in Caenorhabditis elegans. Anche se i prodotti di altri geni mec sono giocatori chiave in biofisica di trasduzione, è sconosciuto il meccanismo con cui essi contribuiscono alle proprietà del canale. Qui, si indaga il ruolo delle due subunità del canale ausiliario, MEC-2 (stomatina-like) e MEC-6-(paraoxonase-like), da li coexpressing con costitutivamente attiva eteromerico MEC-4/MEC-10 canali in ovociti di Xenopus. Questo lavoro si estende previo lavoro dimostrando che MEC-2 e MEC-6 sinergicamente aumentare corrente macroscopica. Usiamo monocanale registrazioni e biochimica di mostrare che queste subunità ausiliaria alterare funzione aumentando il numero di canali in uno stato attivo, piuttosto che drammaticamente interessando Proprietà monocanale o espressione superficiale. Usiamo anche due elettrodi tensione pinza e macropatch fuori-uscita di registrazione per esaminare gli effetti di cationi bivalenti e proteasi, noto regolatori dei membri della famiglia canale. Infine, si esamina il ruolo dell'associazione colesterolo nel meccanismo d'azione MEC-2 misurando le correnti di cellule intere e single-channel MEC-2 mutanti carenti in associazione di colesterolo. Suggeriamo che MEC-2 e MEC-6 svolgono un ruolo fondamentale nel modulare sia l'ambiente locale della membrana di MEC-4/MEC-10 canali e la disponibilità di tali canali per essere gestita dalla forza in vivo.
Viaggio Scuola Degli Stati Uniti, 2009 Una Valutazione Delle Tendenze
La casa bianca Task Force sull'obesità infantile ha fissato un obiettivo di crescente a piedi e in bicicletta a scuola da 50% entro 5 anni. Incontro l'obiettivo richiede una comprensione dettagliata dei modelli attuali di school travel.
