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Articles by Brad Cavinder in JoVE
JoVE General
Sviluppo sessuale e scarico in ascospore Fusarium graminearum
1Genetics Program, Michigan State University, 2Department of Plant Biology, Michigan State University, 3Human Biology Program, Michigan State University, 4Department of Plant Pathology, Michigan State University
Croci sessuali e isolamento della progenie ricombinante sono strumenti di ricerca importanti per il fungo filamentoso,
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Mid1, Un Canale Ionico Del Calcio Mechanosensitive, Influisce Sulla Crescita, Sviluppo E Discarico Ascospore Del Fungo Filamentoso Gibberella Zeae
Il ruolo di Mid1, un canale attivato dal tratto ionico capace di essere permeata dal calcio, nello sviluppo di ascospore e scarico forzato dall'asci è stato esaminato nel fungo patogeno Gibberella zeae (anamorph Fusarium graminearum). I mutanti Δmid1 esposto un > conduttori riduzione ascospore scarico attività e prevalentemente prodotto anormale due-celled ascospore con subaortico ristretto e fragile. Il tasso di crescita vegetativa dei mutanti era ∼50% del tasso di wild-type, e produzione di macroconidia > 10 volte inferiore rispetto a wild type. Per comprendere meglio il ruolo del flusso di calcio, Δmid1 Δcch1 doppia mutanti sono stati esaminati anche, come Cch1, un canale ionico del calcio tipo L, è associato con Mid1 in Saccharomyces cerevisiae. Il fenotipo dei mutanti doppia Δmid1 Δcch1 era simile ma più grave rispetto al fenotipo dei mutanti Δmid1 per tutte le categorie. Sono state prese le misure di potenziale e corrente-tensione nelle ife vegetative del Δmid1 e Δcch1 mutanti e wild type, e le misure per tutti e tre i ceppi erano notevolmente simili, indicando che né proteine contribuiscono significativamente alle proprietà generale elettrica della membrana del plasma. Patogenicità dei mutanti Δmid1 e Δmid1Δcch1 sull'host (frumento) non è stata influenzata da mutazioni. Supplementazione di calcio esogeno parzialmente restaurate le ascospore scarico e difetti di crescita vegetativa per tutti i mutanti, ma ancora sono state prodotte le ascospore anormale. Questi risultati si estendono i ruoli conosciuti di Mid1 sviluppo ascospore e scarico forzato. Tuttavia, Neurospora crassa Δmid1 mutanti sono state inoltre esaminate e non hanno esibito i difetti nello sviluppo di ascospore o in scarico ascospore. Rispetto ai canali ionici in altri ascomiceti, Mid1 dimostra notevole adattabilità dei ruoli, soprattutto per quanto riguarda l'adattamento specifici di nicchia.
Fusarium Graminearum Dall'analisi Dell'espressione Di Analisi Funzionale
Fusarium graminearum, agente causale della testa ruggine del grano, è stato il terzo fungo filamentoso per avere una sequenza completa del genoma. Dal rilascio della sequenza del genoma in 2003, F. graminearum è diventato un modello per gli studi di genomica e trascrittomica, micotossine, genetica delle popolazioni fungine, funzione genica e lo sviluppo sessuale. Qui vi presentiamo le tecniche che abbiamo usato nel nostro laboratorio per eseguire analisi di espressione sulle fasi del ciclo di vita di F. graminearum e tecniche per caratterizzare funzionalmente quei geni identificati come potenzialmente interessanti.
