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Articles by C. Ron Yu in JoVE

 JoVE Neuroscience

Imaging neuronalen Antworten in Scheiben Zubereitungen von Vomeronasalorgan Ausdruck eines genetisch kodierte Kalzium-Sensor


JoVE 3404 12/06/2011

1Stowers Institute for Medical Research, 2Department of Anatomy and Cell Biology, The University of Kansas School of Medicine

Die Vomeronasalorgan (VNO) erkennt Intraspezies chemischen Signalen, die sozialen und reproduktiven Informationen zu vermitteln. Wir haben Ca2 +-Imaging durchgeführt Experimente mit transgenen Mäusen, die G-camp2 in VNO Gewebe. Dieser Ansatz erlaubt es uns, die komplizierten Reaktionsmuster des vomeronasalen Neuronen eine große Anzahl von Pheromon-Stimuli zu analysieren.

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Veränderte Sexuelle Und Soziale Verhaltensweisen in TRP2 Mutierten Mäusen

Spontane Neuronale Aktivität Ist Für Die Einrichtung Und Wartung Des Geruchssinns Karte Erforderlich

Codierung, Geschlecht Und Individuellen Informationen Im Maus Vomeronasal Organ

Das Säugetier-Vomeronasal Organ erkennt komplexe chemische Signale, die Informationen über Geschlecht, Stamm und den sozialen und reproduktiven Status eines Individuums zu vermitteln. Oft nicht ganz ist verstanden, wie diese Signale codiert werden. Wir entwickelten transgene Mäusen zum Ausdruck bringen des Kalzium-Kennzeichen G-CaMP2 und analysiert Bevölkerung Antworten der Vomeronasal Neuronen zu Urin aus einzelnen Tieren. Ein erheblicher Anteil der Zellen durch entweder männlichen oder weiblichen Urin aktiviert wurde, aber nur eine kleine Population von Zellen reagiert ausschließlich auf Gender-spezifische Hinweise für Belastungen und Einzelpersonen freigegeben. Weibliche Signale aktiviert mehr Zellen und komplexere hormonelle Vorschriften als männlichen Signale unterstanden. Im Gegensatz zu Geschlecht Stamm und individuelle Informationen war codiert durch die kombinatorische Aktivierung von Neuronen, dass Urin aus verschiedenen Individuen charakteristischen Zelle Bevölkerungen aktiviert.

Eine Familie Von GFP-ähnliche Proteine Mit Unterschiedlichen Spektralen Eigenschaften in Lanzettfischchen Branchiostoma Floridae

Grün fluoreszierendes Protein (GFP) Familienmitglieder Teilen Sequenz Ähnlichkeit und die 11-angeschwemmte Beta-Fass-Klappe. Fluoreszenz oder helle Färbung, beobachtet in viele Mitglieder dieser Familie, ist von der inhärenten Eigenschaften der Polypeptid-Kette selbst, ohne dass Kofaktoren aktiviert. Aminosäuresequenz fluoreszierende Proteine kann durch Gentechnik Varianten mit unterschiedlichen spektralen Eigenschaften, geeignet für direkte Visualisierung der molekularen und zellulären Prozesse produzieren geändert werden. Natürlich auch vorkommende GFP-ähnliche Proteine fluoreszierende Proteine aus Nesseltieren der Hydrozoen und Anthozoa Klassen und Copepoden aus der Familie der Pontellidae, als auch nicht-fluoreszierende Proteine von Anthozoa. Eine mRNA Kodierung ein fluoreszierendes Protein GFP-wie AmphiGFP, mit Bezug zu GFP aus Pontellidae, seit kurzem von der Lanzettfischchen Branchiostoma Floridae, ein Cephalochordate (Deheyn Et Al., Biol Bull, 2007 213:95) isoliert.

Eindeutige Signale Vermittelt Durch Pheromon Konzentrationen Der Maus Vomeronasal Organ

Bei Säugetierarten kann Erkennung der Pheromon-Cues durch das Vomeronasal Organ (VNO) in verschiedenen Konzentrationen unterschiedliche Verhaltens Antworten und endokrine Veränderungen hervorrufen. Es ist nicht gut verstanden wie Konzentration-abhängige Aktivierung der VNO angeborene Verhaltensweisen auswirkt. In dieser Studie finden wir, dass, wenn Mäuse urogenitaler Bereich ein konspezifisch Tier untersucht, die Harnwege Pheromone VNO in einer Konzentration von etwa 1 % des im Urin erreichen können. Auf dieser Ebene Harn Pheromone entlocken Antworten aus einer Teilmenge von Zellen, die mit Geschlecht-spezifischen Hinweisreizen optimiert werden und bieten eindeutige Identifizierung des Geschlechts und die Belastung der Tiere. Im Gegensatz dazu aktiviere niedrige Konzentration des Urins nicht diese Zellen. Auffällig ist, finden wir eine Bevölkerung von Neuronen, die nur von niedrigen Konzentrationen von Urin aktiviert ist. Die Eigenschaften dieser Neuronen sind in Neuronen reagieren auf vermeintliche Einzel-Mischung Pheromone nicht gefunden. Zusätzliche Analysen zeigen, dass diese Neuronen durch hoch-Konzentration-Pheromone maskiert werden. Daher führt eine antagonistische Aktivität in natürlichen Pheromone die Aktivierung der unterschiedlichen Populationen von Zellen in verschiedenen Konzentrationen. Die differentielle Aktivierung wahrscheinlich andere nachgeschaltete Schaltung auslösen und zugrunde liegt die Konzentration abhängige Pheromon-Wahrnehmung.

Anforderungen an Kalzium Aktivierte Chlorid-Kanäle in Der Aktivierung Der Maus Vomeronasal Neuronen

In Landwirbeltiere das Vomeronasal Organ (VNO) erkennt und transduces Pheromon-Signale. VNO-Aktivierung wird gedacht, durch den Transienten Rezeptor vermittelt potenziellen C2 (TRPC2)-Kanal. Die aberrante Verhaltensstörungen Phänotypen beobachtet in TRPC2-/-Mäuse sind allgemein die verlorenen VNO Funktion zugeschrieben. Vor kurzem wurden aktiviert, Kalzium Chlorid-Kanäle gezeigt, zu VNO Aktivierung beitragen. Hier zeigen wir, dass CACCs in VNO Segment Vorbereitungen der TRPC2-/-Mäuse aktiviert werden können und diese Aktivierung pharmakologische Agenten, die intrazelluläre Ca(2+) Freisetzung hemmen geblockt wird. Urin hervorgerufen Cl(-) Strom reicht um Blindkontrollen Änderungen in VNO Neuronen von beiden Wildtyp (WT) zu fahren und TRPC2-/-Mäuse. Darüber hinaus schafft die Blockierung Cl(-) Leitwert im wesentlichen VNO Aktivierung in WT-Neuronen. Diese Ergebnisse legen nahe, eine TRPC2-unabhängig-Signalweg in der VNO und das Erfordernis der aktivierten Kalzium-Chlorid-Kanäle Strömungen Pheromon-Aktivierung zu vermitteln. Unsere Daten weiter empfehlen TRPC2-/-Mäuse VNO Teilfunktion behalten.

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