Translate this page to:
Spanish
In JoVE (1)
Other Publications (3)
Automatic Translation
This translation into Spanish was automatically generated.
English Version | Other Languages
Articles by Celia Keim in JoVE
JoVE Immunology and Infection
Recombinante de producción retrovirales y la infección de células B
1Department of Microbiology and Immunology, Columbia University College of Physicians and Surgeons, 2Herbert Irving Comprehensive Cancer Center, Columbia University
Un sistema eficiente de la estructura y análisis de la función de un gen en un
Other articles by Celia Keim on PubMed
Inhibición De La Expresión De Interleucina-6 Por La Proteína V Del Virus De La Parainfluenza 5
La proteína de V del virus de la parainfluenza 5 (PIV5) desempeña un papel importante en la evasión de la respuesta inmune de anfitrión. La proteína V bloquea el interferón (IFN) señalización en células humanas causando la degradación de la proteína de STAT1, un componente clave de señalización IFN y la producción de bloques IFN-beta evitando translocación nuclear de IRF3, un factor de transcripción clave para activar el promotor de IFN-beta. Interleucina-6 (IL-6), junto con el factor de necrosis tumoral (TNF)-alfa e IL-1beta, es una citocina proinflamatoria principales que juega un papel importante en la erradicación de la infección por el virus a través de las respuestas inflamatorias. Muchos virus han desarrollado estrategias para bloquear la expresión de IL-6. Infección de PIV5 salvaje-tipo induce poca, o ninguna, expresión de citocinas como TNF-alfa, IL-6 mientras que la infección por un dominio de la rica de la cisteína mutante PIV5 falta el c-terminal conservado (rPIV5VDeltaC) inducida por altos niveles de expresión de IL-6. Examen de los niveles de mRNA de IL-6 indica que la activación de la transcripción de IL-6 desempeñó un papel importante en la mayor expresión de IL-6. Coinfección con el salvaje-tipo PIV5 prevenir la activación de la transcripción de la IL-6 por rPIV5VDeltaC y un plásmido de codificación de la proteína integral de PIV5 V evitó que la activación de la expresión del gen de IL-6 reportero promotor-conducido por rPIV5VDeltaC, que indica que la proteína V desempeñó un papel en la inhibición de la transcripción de la IL-6. La activación de IL-6 fue independiente de IFN-beta, a pesar de que las células infectadas rPIV5VDeltaC producen IFN-beta. Mediante ensayos de gen reportero e inmunoprecipitación de cromatina (ChIP), se encontró que el NF-kappaB desempeñó un papel importante en la activación de la expresión de IL-6. Hemos propuesto un modelo de activación e inhibiendo la transcripción de la IL-6 por PIV5.
Un Cambio De Residuo Solo Aminoácido En La Proteína P Del Virus De La Parainfluenza 5 Eleva La Expresión Génica Viral
Virus de la parainfluenza 5 (PIV5) es un paramixovirus prototípico. El gen V/P de PIV5 codifica dos especies del mRNA a través de un proceso de inserción de la pseudotemplated de residuos de dos G en un sitio específico durante la transcripción, dando por resultado dos proteínas virales, V y P, cuyos términos N de 164 residuos de aminoácidos son idénticos. Previamente se informó que mutando seis residuos del aminoácido dentro de esta región idéntico resultados en un PIV5 recombinante (rPIV5 - CPI-) que exhibe la expresión de la proteína viral elevada e induce la producción de citoquinas, tales como interferón beta y la interleucina 6. Debido a las seis mutaciones corresponden a la región compartida de la proteína de la V y la proteína P, no está claro si los fenotipos asociados con rPIV5-CPI-son debido a las mutaciones en la proteína P o mutaciones en la proteína V. Para abordar esta cuestión, utilizamos un sistema de minigenome y virus recombinantes para estudiar los efectos de las mutaciones en las funciones de las proteínas P y V. Se encontró que la proteína P con seis cambios de residuo de aminoácido (Pcpi-) fue más eficiente que el salvaje-tipo P en facilitar la replicación del ARN viral, mientras que la proteína V con seis cambios de residuo de aminoácido (Vcpi-) todavía inhibe la replicación de minigenome igual que la proteína de V de tipo salvaje. Estos resultados indican que la expresión génica viral elevada en las células rPIV5-CPI-infectado puede atribuirse a una proteína de P con una mayor capacidad para facilitar la síntesis de ARN viral. Además, se encontró que un cambio de residuo solo aminoácido en la posición 157 de la proteína P de Ser (residuo en la proteína de tipo P) a Phe (residuo en Pcpi-) es suficiente para expresión génica viral elevada. Usando espectrometría de masas y etiquetado de P (33), encontramos residuo que es fosforilado S157 de la proteína P. Basado en estos resultados, proponemos que la fosforilación de la P proteína en el residuo 157 desempeña un papel importante en la regulación de la replicación del RNA viral.
El ARN Exosoma Objetivos De La Citidina Deaminasa AID Para Ambas Cadenas De ADN De Doble Hélice Transcritas Sustratos
La activación inducida por la citidina deaminasa (AID) inicia inmunoglobulina (Ig) de recombinación de la cadena pesada (IgH) cambio de clase (CSR) y la región variable de Ig hipermutación somática (SHM) en los linfocitos B por desaminar cytidines en la plantilla y las hebras nontemplate de sustratos de ADN transcrito. Sin embargo, el mecanismo de acceso AID a la cadena de ADN plantilla, particularmente cuando se hibridan a una transcripción de ARN naciente, ha sido un enigma. Ahora implican el exosoma ARN, un complejo RNA-processing/degradation celular, en la orientación de la ayuda de dos hebras de ADN. En las células de linaje B activadas para la RSE, el ARN asocia exosoma con la AID, se acumula en las regiones del interruptor CIB en una forma dependiente de la ayuda, y es necesario para una óptima RSE. Además, tanto el complejo ARN celular exosoma y un complejo ARN recombinante núcleo exosoma impartir robusto AID y la transcripción dependiente de la desaminación de ADN de ambas hebras de transcrito sustratos SHM in vitro. Nuestros resultados revelan un papel para la maquinaria de vigilancia no codificante del ARN en la generación de diversidad de anticuerpos.
