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Articles by Christopher T. Schmitz in JoVE
JoVE General
ハイスループットその場でハイブリダイゼーション法
ここで、我々は、効率的な高スループットを記述
Other articles by Christopher T. Schmitz on PubMed
開発雄マウス下部尿生殖路におけるWntとR-spondin遺伝子発現のアトラス
前立腺の開発はβ-カテニンシグナル伝達に影響を受けますが、それはそれらが合成されている場所、関与しているβ-カテニンの活性化、およびそれらのmRNAの存在量がアンドロゲンに影響されるかどうかは不明です。我々はトランスジェニックレポーターマウスの下部尿生殖路（LUT）におけるWnt /β-カテニン応答β-ガラクトシダーゼ活性を同定したが、β-ガラクトシダーゼ活性は、我々が調べた4マウス系統間で異なっていた。我々は、Wntは、R-spondins（Rspos、β-カテニンシグナル伝達のコアクチベーター）、β-カテニン応答のmRNAと、野生型胎児の男性、胎児の女性におけるアンドロゲン受容体応答mRNAのパターンを比較するためにin situハイブリダイゼーションに使用される、と新生児の男性のLUT。ほとんどのWntとRSPOのmRNAは前立腺の開発中にLUTに存在していた。性的二形の発現パターンは、Wnt /β-カテニン応答性遺伝子、およびWnt2b、Wnt4、Wnt7a、Wnt9b、Wnt10b、Wnt11、Wnt16、およびRspo3のmRNAが観察された。これらの結果は、この経路は前立腺管の開発中にアンドロゲンに直接または間接的に反応するかもしれないという考えを支持する、胎児のLUTにおけるWnt /β-カテニンシグナル伝達の性差を明らかにした。
胎児マウス下部尿生殖路の高分解能分子アトラス
下部尿生殖路（LUT）で、上皮 - 間質相互作用は、男女ともに男性では前立腺と精嚢の開発、女性の膣と子宮開発、尿道開発に不可欠である。孤立したLUT間質および上皮の遺伝子発現プロファイリングは、LUT開発のメカニズムを解明しましたが、このような研究は、それぞれの組織コンパートメント内に含まれる異種と病気に定義された細胞亜集団によって混同されています。我々は、17日後の性交、胎児マウスのLUTの高分解能分子アトラスを合成するin situハイブリダイゼーションに使用されます。我々は、16間質および上皮8つのサブコンパートメントにこれらの組織を細分化、精嚢、射精管、前立腺、尿道、膣の選択的細胞集団をマークしたmRNAを同定した。これらの結果は、LUTの遺伝子発現パターンをマッピングするための強力なツールを提供し、また我々が以前に気づいていなかったそのうちのLUT開発のメカニズムの役割を果たしている可能性が以前に未知のサブコンパートメントを明らかにした。
