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Articles by Christopher Pohlmeyer in JoVE
JoVE Bioengineering
Spatio-temporelle de manipulation de l'activité GTPase Petit au niveau subcellulaire et sur des échelles de secondes dans les cellules vivantes
1Department of Cell Biology, Center for Cell Dynamics, Johns Hopkins University, 2Graduate School of Pharmaceutical Sciences, University of Tokyo, 3Biomedical Engineering, Johns Hopkins University
Procédé pour spatio-temporel de commande de l'activité GTPase de petite par la lumière est décrite. Cette méthode est basée sur la rapamycine-FKBP-FRB induite par hétérodimérisation et photo-cages systèmes. Optimisation de la lumière-l'irradiation permet l'activation spatio-temporellement contrôlée de petites GTPases au niveau subcellulaire.
Other articles by Christopher Pohlmeyer on PubMed
Un Conjugué Rapamycine Photoclivable Pour Le Contrôle Spatio-temporel De L'activité GTPase Petit
Nous avons développé une nouvelle méthode pour contrôler l'activité spatio-temporelle de molécules de signalisation. Dérivé de rapamycine nouvellement synthétisé photocaged induite dimérisation rapide de FKBP (FK-506 protéine de liaison) et FRB (FKBP-Rapamycine protéine de liaison) lors d'une irradiation UV. Avec ce système, et l'irradiation UV dans l'espace confiné, nous avons atteint subcellularly activation localisée de Rac, un membre de petites GTPases. Notre technique offre une approche puissante pour des études de dynamiques des événements de signalisation intracellulaires.
Les Comètes D'actine Déclenchement Versus Membrane Ruffles: Des Effets Particuliers De Phosphoinositides Sur Réorganisation De L'actine
Un ensemble limité de lipides membranaires phosphoinositide réguler diverses fonctions cellulaires comme la prolifération, la différenciation et la migration. Nous avons développé deux techniques basées sur la dimérisation de protéines induite par la rapamycine de changer rapidement la concentration de la membrane plasmique de phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate [PI (4,5) P (2)]. Tout d'abord, en utilisant une forme de membrane-recrutables de la PI (4) P 5-kinase, nous avons augmenté PI (4,5) P (2) synthèse à partir de phosphatidylinositol 4-phosphate [PI (4) P] et a constaté que COS-7, HeLa, et embryonnaires humaines de rein 293 cellules formé des faisceaux de filaments d'actine mobiles connus sous le nom des comètes d'actine. En revanche, une deuxième technique que l'augmentation de la concentration de PI (4,5) P (2) sans consommer PI membrane (4) P induite volants. Ces phénotypes distincts ont été médiatisée par le trafic vésiculaire dynamine-médiation et de la diaphonie mutuellement inhibitrices entre la guanosine triphosphatases petite Rac et RhoA. Nos résultats indiquent que l'effet de la PI (4,5) P (2) sur la réorganisation actine dépend de l'abondance des phosphoinositides autres, tels que PI (4) P. Ainsi, la régulation des concentrations de combinatoire phosphoinositide peut contribuer à la diversité des fonctions phosphoinositides.
