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Articles by Christopher Thornton in JoVE
JoVE Immunology and Infection
ラテラルフロー技術を用いた血液学的悪性腫瘍患者における侵襲性肺アスペルギルス症の検出
1Biosciences, University of Exeter, 2BICMS, Queen Mary University of London, 3St. Bartholomew's Hospital and The London NHS Trust
侵襲性肺アスペルギルス症に対する迅速かつ正確なポイント·オブ·ケアテストが提示されます。それはに結合する特異的なモノクローナル抗体を使用して、横フロー技術を利用しています
Other articles by Christopher Thornton on PubMed
トリコデルマ属と密接に関連する菌類と自然発病の堆肥でトリコデルマ属菌を検出するために使用する特定のモノクローナル抗体の生産。
Hyperparasitic 菌類とそのホスト間の相互作用の研究は、深刻な菌類、土壌や堆肥などの混合集団を含む複雑な環境における個々 の属の明白な識別をできるメソッドの不在によって妨げられています。本研究の詳細、検出できますモノクローナル抗体 （MF2） の開発と自然発病堆肥のトリコデルマの回復とそのホストと拮抗相互作用中の hyperparasitic 菌トリコデルマの可視。モノクローナル抗体 MF2, 免疫グロブリン M (igm 抗体) クラスのトリコデルマ属の種のために特定の糖蛋白抗原の蛋白質のエピトープに対して提起され、近縁菌に Gliocladium 本 chrysospermus ヒポミケス属、Sphaerostilbella 属、琉球産ボタンタケ属 MF2 Clonostachys 属ネクトリア属数種について ochroleuca ・ Gliocladium ロセウム Gliocladium catenulatum からの抗原も土壌-堆肥伝染の無関係な菌類の範囲に反応しなかった。MF2 抗原の細胞外生産構成だった。西部にしみが付く分析 MF2 範囲で明白な分子固まりが付いている蛋白質の梯子に 35 200 kDa バインドことを示した。イムノゴールド電子顕微鏡 MF2 細胞壁と菌糸の隔壁および phialoconidia の細胞壁の強い結合を明らかにしたに対し螢 MF2 強く菌糸および phialides の細胞壁やトリコデルマ、介在とターミナルの地表にバインドされたことを示した。トリコデルマおよび Rhizoctonia solani のデュアル文化の螢、周りのホストは、コイル状の hyperparasite の細胞壁のみ MF2 によって染色された.MF2 の特異性自然発病堆肥のトリコデルマ検出用複合苦しませる ELISA 手法の開発を有効にします。このテクニックの特異性は、ITS1 の系列に基づく系統解析によって確認された-5.8 s-ITS2 rRNA を符号化領域分離されました。
変更モデル神経性食欲不振症患者の日病院治療のステージの設立。
神経性食欲不振症患者のための病院プログラムは後半の多くの関心を受けている日の開発。ただし、そここの無秩序のユニークな性質に支払わ少し注意はでした。このために我々 のデザインを設定日病院の治療プログラムを反映し変更のような患者の過半数の実証に向かってアンビバレンスの理解を組み込みます。我々 は、被災者の観点からは、拒食症機能と自我という同調的病気であることを認識します。それはいくつかのレベルで患者を放棄したくない「適応」の利点がある病気です。患者は、彼らの行動の側面を変更するには準備のさまざまなレベルでです。したがって日病院の治療のプログラムを目指して療法の患者を変更するための準備に配信の型と一致する必要があります。抵抗は変化の段階と治療の目標の間に '不一致' がある場合に発生します。変容のトランスセオレティカル ・ モデルとしてのパラダイムを使用して、一連の変更のさまざまな段階で患者のニーズを満たすことを目指し日間のプログラムを設計しています。
グリオキシル酸サイクルは病原性の時間の制御を植物病原性真菌イネいもち病菌が必要です。
分離とから、イネいもち病菌、イソクエン酸リアーゼ活性は, グリオキシル酸サイクルのプリンシパルの酵素を符号化する遺伝子 ICL1 の特性を記述します。ICL1 感染構造と表皮貫入の開発中に高架式を示し、目標とされた遺伝子交換遺伝子に対する病原性の完全 mbi-d によって必要であることを示した。特に、我々 開発植物組織入国前に、prepenetration 段階グリオキシル酸サイクルの損失によって影響を受けるが見つかりました。発芽、感染症関連の開発、キューティクル浸透デルタ icl1 変異の遅延です。最近のレポートはグリオキシルひと病原性真菌カンジダ ・ アルビカンスの病原性の重要性と結核菌の細菌の病原体に示されています。グリオキシル酸サイクルも微生物の病因における経路の広範なユーティリティを示すこの植物病原性真菌で重要であることが示唆されました。
イネ紋枯病菌の水耕ミックスと拮抗相互作用中トリコデルマ属担成長ダイナミクスの定量化を免疫学的アプローチ。
トリコデルマ種と真菌のホスト拮抗相互作用中のダイナミクスが明白な識別できるようにするメソッドの不在と土壌や堆肥を含むなど複雑な環境における個々 の属の定量化による深刻な妨げられている担生育菌の集団混合。さらに、メソッドが必要ですアクティブ菌糸の伸長と真菌のバイオマスなど大量にトリコデルマ種によって生成される自己消費の胞子の他のコンポーネントの識別を許可します。本研究は泥炭に基づいてマイクロコズムにおける拮抗相互作用中の土壌伝染性植物病原体 Rhizoctonia solani と生物的防除の系統トリコデルマ asperellum とトリコデルマの担成長ダイナミクスを定量化する単クローン抗体の使用を詳しく説明します。定量化はまた成長の先端赤色菌核病菌とトリコデルマの菌糸のされ、自己消費 phialoconidia からトリコデルマの場合から分泌される構成、細胞外の抗原の免疫学的検出に基づいていた。トリコデルマ特異的モノクローナル抗体 （MF2） 蛋白エピトープの蛍光抗体法およびイムノゴールド電子ゴールド顕微鏡研究トリコデルマ栽培の発芽管の形成 phialoconidia と発芽管の成長の先端からの起源生産する in vitro で示された、酵素グルコアミラーゼをバインドします。さらに、非破壊イムノブロット酵素トリコデルマ asperellum 菌糸体の泥炭の積極的な成長の中に分泌されるだったことを示した。Rhizoctonia solani 特異的モノクローナル抗体 (EH2) 同様にアクティブの菌糸成長中に分泌される糖蛋白の蛋白エピトープをバインドします。凍結乾燥させた菌糸体から派生した抽出抗原の定量化および反復可能なソースとしての較正曲線の建設のため使用されました。これらの曲線は、泥炭抽出物に担成長ダイナミクスの病原体と単一または混在種マイクロコズムで作った拮抗薬の比較を許可バイオマス同等の ELISA テストで得られる吸光度値を変換する使用されました。トリコデルマ種が正常に栄養素の R. solani と競争して病原体の担成長を防ぐためにできた。定量法非滅菌土壌ベースの小宇宙で人工的にテストされたトリコデルマの特異性 T. asperellum を接種しました。アッセイは、非常に特定され、T. asperellum 個体群動態にのみ検出します。汚染質菌類を含む土壌試料からの抽出物との交差反応性が見つかりませんでした。
真菌のメタロチオネインのイネいもち病菌の病原性が必要です。
子嚢菌類菌のイネいもち病菌におけるイネいもち病の病原菌のイネ) 植物葉表面に形成されたと機械的にキューティクルを破裂専門感染の構造と呼ばれる付着によるに感染します。我々 は、遺伝子、いもち病メタロチオネイン 1 (MMT1) は、高度成長と発展を通して mbi-d によって表されのみ六つのシステイン残基を含む珍しい 22 アミノ酸のメタロチオネインのような蛋白質をコードを識別しました。MMT1 エンコードされたタンパク質亜鉛のための非常に高い親和性を示し、強力な抗酸化として行動することができます。表示 MMT1 生産変異株の遺伝子破壊は菌糸の成長率と貧しい胞子形成を加速、金属耐性に効果がなかった。Mmt1 変異体が付着器を介したキューティクルの浸透について持って来ることができないことが植物に病気を引き起こす可能です。Mmt1 菌の細胞壁の内側に配布することが表示されます。Mmt1 のようなメタロチオネインに対する病原性の真菌が必要です真菌細胞壁の生化学の新規の役割を果たすことが示唆されました。
ワンステップ、イムノクロマト ラテラル フロー デバイスに固有枯病菌および特定の近縁種とその使用検出と定量化 R. Solani 土壌中に。
抽象性マウスハイブリドーマ細胞分泌、免疫グロブリン (Ig) M ライン GD2 モノクローナル抗体 (MAb) を作り出した吻合グループ (AG) 4 から表面抗原に対するイネ紋枯病菌の分離 (teleomorph: 紋)。腹水 GD2 ハイブリドーマ細胞をマウスで生産され、R. solani からの抗原の検出のための急速なイムノクロマト ラテラル フロー デバイス (LFD) の開発に使用し、特定の Rhizoctonia 属に関連LFD 関連とは無関係の土壌菌類からの表面抗原に対する特異性について試験しました。代表からの抗原は 3、4、5、6、7、8、9、10、11、R. solani の AGs 1 2 1 2 t 2 3 分離株し、BI LFD テストに肯定応答を与えたイネ紋枯病菌 orchidicola、t. ヒメイヌビエ R. から抗原と同様 fragariae (teleomorph: Ceratorhiza fragariae)、Ceratorhiza goodyerae repentis、Ceratobasidium cornigerum、嬢時代。R. solani AGs 2-2、2 2IIIB、2 2IV と関連菌類 R. 斑点、R. cerealis からの抗原 (teleomorph: Ceratobasium 麥)、r. crocorum (teleomorph: 紋 brebissonii）、R. 麹菌 （teleomorph Waitea circinata) と r. フジ クロイ与えた否定応答抗原と無関係な菌類疫病菌 Pythium、・ トリコデルマ Gliocladium フザリウム属を含む卵菌類の範囲から同様当然 R. solani AG3 が出没する土壌における R. solani を検出する LFD の有用性が示されました。LFD テストの結果とはよく一致した、選択培地を用いた従来の板濃縮をテストします。ポリメラーゼの連鎖反応 PCR 技術の特異性が確認された R. solani AG3 固有のプライマーを使用して、内部の系列に基づく解析によるスペーサー (ITS) 1 転写-5.8 s-ITS2 rRNA を符号化領域無関係な菌類の土壌サンプルから回復しました。LFD R. solani AG4 人工的に出没する土壌試料 （刻んだジャガイモ土壌接種材料） を定量化するために使用されました。土壌 1 g CFU の見積もり LFD における検出信号の有無に基づいていたほとんど考えられる番号方法を使って派生しました。CFU の見積もり LFD 試験で得られた、MAb GD2 を組み込んだプレートに閉じ込められた抗原 elisa アッセイで得られるものと同じ （449 CFU の美 g(-1) 土) だった。
4 保存された分子内ジスルフィド結合は、真菌の形態形成、hydrophobin の分泌と細胞壁局在が必要です。
Hydrophobins 形成蛋白質菌類によって空中菌糸, 分生胞子形成、キノコ開発、病因アセンブリ中に生成されます。8 つのシステイン残基の hydrophobins 存在し、分子内ジスルフィド結合の形成します。ここでは、8 つのシステイン l-アラニン置換対立遺伝子イネいもち病菌から MPG1 hydrophobin 遺伝子の表現する深刻な欠陥空中菌糸および胞子の開発の原因を示します。タバコプロトプ明らかに Mpg1 hydrophobin の変種は、そのままジスルフィド欠けている能力を自己集合を保持細胞の表面に分泌されないが。これはジスルフィド橋は hydrophobin に集約、欠かせないが不可欠分泌のためであること最初の遺伝学的証拠を提供します。
モノクローナル抗体の α-ガラクトシダーゼと遠藤-1, 4-β-グルカナーゼの生産の動力学トリコデルマ Hamatum によって担増殖と胞子形成の泥炭の中に定量化するのに使用します。
トリコデルマ種ユビキタス土壌と破壊的なルートの病原体による植物病害の防除剤として膨大な科学的な関心を受けている泥炭負担の saprotrophs にあります。生物防除抗生作用や hyperparasitism などのメカニズムも記載されて、生化学および分子遺伝学のこれらのプロセスを定義します。少し注意を受けた生物防除の一側面栄養素の彼らの自然環境のために競争する能力トリコデルマ属です。トリコデルマ種植物病原菌の担拡散防止有機物を植民地化を可能にする多糖類分解酵素の効率的な生産者です。本研究は泥炭中トリコデルマ属担成長モノクローナル抗体 (Mab) を関与する 2 つの酵素の生産を定量化するの使用を詳しく説明します。Mab は、ヘミセルラーゼ酵素 α-ガラクトシダーゼ (AGL) および、セルラーゼ酵素遠藤-1, 4-β-グルカナーゼ (EG) トリコデルマの生物的防除ひずみの担成長ダイナミクスの関係を使用して hamatum と併用生産泥炭に基づいてマイクロコズムにおけるこれらの酵素の検討しました。酵素活性アッセイおよび酵素タンパク質濃度の酵素抗体法 (elisa) による派生酵素生産菌の積極的な成長中の定量化の精度と感度の mAb ベースアッセイを設立しました。酵素活性およびタンパク質濃度の動向はどの活発な成長の 21 日間のサンプリング期間中に両酵素のと同様だったと泥炭で菌の胞子形成が定量化された独立の mAb ベースのアッセイを用いたします。マイクロコズム phialoconidia を接種 3 日後 T. hamatum のアクティブなバイオマスの急激な増加があった。3 日後、菌の胞子形成と一致したアクティブなバイオマスの急速な低下があった。同様の傾向は、EG 活動と濃度で目撃されました。これは、菌の活発な成長に直接の関連は、EG 生産を示した。トレンド, しかし、AGL で見つかりませんでした。その後彼らは静的なままの酵素活性およびタンパク質濃度 3 日、急増しました。高架 AGL のメンテナンスの理由は、おそらく分生子と地表から酵素の分泌に起因.ELISA、酵素が細胞質内でローカライズされているし、周辺環境への分泌細胞外これらの細胞の immunofluoresence およびイムノゴールド電子顕微鏡研究を示した。オリゴ糖のリリース構成の胞子結合酵素による高分子のヘミセルロースから AGL 誘導につながるし、胞子発芽の環境の cue は、として行動できることを仮定しました。
イネいもち病および宿主抵抗性の誘導に必要な P 型 Atp アーゼ。
植物の病気を引き起こすには、病原微生物蛋白質彼らは植物の防御を抑制し、組織への浸潤を促進する植物、セルに直接配信するメカニズムを進化しています。どのように多くの世界の最も深刻な植物の病気の原因、植物病原糸状菌タンパク質植物感染時に配信は、現在知られています。ここでは、P 型 atp アーゼ エンコーディング遺伝子、MgAPT2、経済的に重要なイネいもち病病原体いもち病菌のキャラクタリゼーション植物感染時に開口放出を必要と報告します。目標とされた遺伝子置換 MgAPT2 葉面散布の両方に必要な感染ルートは、菌と宿主防衛反応で互換性のない反応の急速な誘導をことを示した。DeltaMgapt2 変異株における細胞外酵素の範囲の分泌が障害され、異常ゴルジ体のような親株を蓄積します。しかし、MgAPT2 の損失大幅に菌糸の伸長または胞子のイネいもち病の確立植物感染時に動作する MgApt2 依存型分泌プロセスの使用を含むことを示す、影響しません。
糸状の植物病原体の進化： 真核生物の王国の間で遺伝子交換。
糸状菌と卵菌類は、植物の材料、木材などの複雑な栄養素を打破し、結果の単純な糖とアミノ酸による osmotrophy を回復するために酵素を分泌する糸状の菌糸のネットワークを生産することによって成長真核微生物です。これらの生物は、外観とライフ スタイルの両方で非常に類似している、最も経済的に重要な植物病原体の一部します。ただし、菌類と卵菌類の形態的類似性は彼ら最も遠縁真核生物の進化グループの一部を表しは共有 osmotrophic の成長の習慣は、収斂進化の結果であると解釈されますので、誤解を招くです。卵菌類光合成藻類では Chromalveolata の一部として分岐に対し、菌類、動物と分岐します。この報告では, 複数の遺伝子の水平転送 （伝播） 糸状子嚢菌類菌類から遠縁卵菌類に発生したこと強いの系統学的証拠を提供します。私達はまた関連遺伝子ファミリーのサブセットは当初、原核生物-菌類の HGT. の製品だった証拠を提示します。菌 oomycete の伝播と関連付けられた遺伝子産物の予測関数は、このプロセスは osmotrophic、真核生物のツリーの 2 つのブランチに糸状のライフ スタイルの進化に重要な役割を果たしていることをお勧めします。
蛍光顕微鏡法およびイムノゴールド EM 植物の真菌感染症を調査するため。
菌の活動を行っている人間の生活を複雑に絡み合った真核生物の多様なグループです。植物の生産性、人間の病気のエージェントとして、薬と酵素のソースとして、実験のモデル生物としてへの参画の生物とその蛋白質の製品を追跡するため、高感度および特定の技術の開発が生じました。高い特異モノクローナル抗体を用いたテクニックは菌類の可視化、自然環境で許可されているし、彼らは細胞内レベルで抗原の研究を容易にしました。ここでは、3 つこのようなテクニックは、蛍光抗体法 (IF)、免疫酵素染色 (IES) とは、真菌の生物学の研究では広範な適用性を発見したし、はまた他の真核生物の研究で使用するために適応することができます免疫電顕 (IEM) について説明します。結果から IF と IES 手続きを 4-5 h. 試料内得 IEM 約 4 日間かかるため。ゴールド ラベル付けおよびサンプルの可視化 4 h 以内が完了ことができます。
動機づけ強化療法摂食障害の入院治療の補助手段としてグループ化: 予備的研究。
自分の病気を克服する摂食障害 (ED) 患者の動機を育成の難しさは、広く成功した治療の過程で大きなハードルと見なされます。ただし、以前の研究は具体的にターゲット貧しい動機入院を正当化する十分な重度の病気を持つ患者さんの中に設計介入の使用が掛かりません。
イムノクロマト側方流動装置侵襲性アスペルギルス症の急速な血清診断のための開発。
アスペルギルス免疫不全の人間の侵襲性真菌感染症の原因としては、カンジダ種にのみ 2 番目ですコスモポリタン担菌類であります。侵襲性アスペルギルス症 (IA) 電流阻止試験は基づいてガラクトマンナン （GM） の循環の検出に患者の血清中 EB A2 テトラ (5--> 1) をバインドするラット モノクローナル抗体 (MAb) を使用して - β-galactofuranoside、GM で ehv-4 相同抗原エピトープ。潜在的な交差 MAb EB A2 の β-ラクタム系抗生物質や食料品の汚染の GM との非アスペルギルス菌と細菌リポタイコ酸アイオワの診断のためのサロゲート マーカーとして機能することができます非 GM 抗原を発見する努力を求めています。本稿では、マウス MAb、恒常 A. fumigatus の活発な成長中に分泌される糖蛋白質の細胞外の抗原に存在蛋白エピトープに結合する JF5 の開発について説明します。MAb はひと血清アスペルギルス抗原の急速 (15 分) 検出、イムノクロマト側方流動デバイス (LFD) を開発していました。テストはアスペルギルス抗原と反応が、臨床的に重要な菌類の多数からの抗原とは、カンジダ種, クリプトコッカス レトロスペクティブ Fusarium solani、菌血症例、Pseudallescheria boydii、Rhizopus oryzae などない、非常に特定です。LFD の疑いまたは IA その臨床症状とテストの結果に基づいて GM および真菌 （1） 3--> が示されて患者血清試料中の循環抗原を検出することができた - β-グルカン。アイオワの高い危険を持っている脆弱な患者のルーチン検査の診断プラットホーム LFD の使用の容易さを提供します
植物の病原体モノクローナル抗体の生産。
植物病理学におけるモノクローナル抗体の利用は、品質と疾患の検出方法の特異性を向上させました。ハイブリドーマ無限の生産病原体種またはも亜種のレベルを識別するために使用することができます非常に特定の抗体のことができます。
新興の人間の病原体の Pseudallescheria Boydii は、非常に特異モノクローナル抗体を使用して追跡。
Pseudallescheria boydii は、長い白粒 mycetoma 免疫担当の人間では、原因に知られているが、それは最近、日和見病原体の免疫不全の個人や避難津波やハリケーンなどの自然災害の潜在的に致命的な侵襲性感染症の原因となって、人間として浮上しています。アスペルギルス、角膜 prolificans などの感染症を引き起こす他硝子の菌類のと同様の形態の特徴を示すので、P. boydii の診断は問題があります。免疫グロブリン M の開発 (igm 抗体) と IgG1 カッパ軽鎖モノクローナル抗体 (Mab) P. boydii と特定の密接に関連する菌類に固有について述べる。MAbs 胞子と菌糸の細胞壁の p. boydii と症例で存在の細胞外 120 kDa 抗原の主要抗原炭水化物エピトープをバインドします。MAbs は、S. prolificans、角膜 dehoogii または A. fumigatus、カンジダ、クリプトコッカス レトロスペクティブ、Fusarium solani Rhizopus oryzae など、臨床的に関連する菌類の数が多いとは反応しません。MAbs 蛍光抗体法および二重抗体サンドイッチ elisa の試金 (DAS ELISAs) 正確に p. boydii 他伝染菌類から区別するためにおよび環境試料中の病原体を追跡するために使用されました。DAS ELISA の特異性は内部転写スペーサー 1 (ITS1) のシーケンスによって確認された - 5.8 - s rRNA を符号化 ITS2 地域環境分離株の。
ゲノミクス解析植物と菌類間の稀で、古代の遺伝子の水平移動のパターンを示します。
遺伝子の水平伝達 （伝播） は、遺伝物質の伝達種境界を越えてについて説明し、多くの微生物の系統で進化的現象として重要であります。植物の進化の歴史における伝播の役割は、しかし、主に未踏です。ここでは、我々 は六つのゲノムを比較すると 159 の原核生物と真核生物の種の植物し、菌類からの対応する遺伝子に最高の類似性を示す 1689年遺伝子を識別します。我々 は、識別される全 1689年遺伝子の系統とイネ) ゲノム (3177 遺伝子ファミリー) から利用できるすべての相同物グループを構築し、これら 14 候補植物菌類伝播イベントを定義するために使用します。アカウントのサイト率の不均質性の方法を使用してこれら 14 のデータ セットの包括的な系統樹解析植物と菌類の間伝播パターン、頻度を示す 9 つの伝播のイベントのサポートを示した。5 HGTs 菌類の植物の転送、4 植物-菌類の HGTs だった。なし真菌植物 HGTs の被子植物の受信者に関与。これらの結果から伝播、その phagotrophy、セル別の全体の消費量は必ずしも真核生物間伝播のための前提条件ではないことを示唆する個体の障壁の現在のビューを変更します。推定機能アノテーション伝播候補遺伝子の 2 つの菌類の植物転送表現型生命にとって重要な土壌環境で追加されていることを示唆しています。我々 の研究では、植物と菌類の遺伝的交流は被子植物の間で特に、極めて稀であるが、彼らの進化の歴史の中が発生しましたおり血統を植えることの重要な代謝の特徴を追加ことを示唆しています。
側方流動技術とガラクトマンナンと (3-> 1) の比較 - β-グルカン アッセイの侵襲性肺アスペルギルス症の検出。
我々 は水平フロー デバイス ガラクトマンナンと (3--> 1) に比べて - β-グルカン アッセイ侵襲性アスペルギルス症、肺疾患の確立されたモルモット モデルで検出します。ラテラル フロー デバイス正以前 （3 日目） (1) 3--> よりとなった - β-グルカンとガラクトマンナン アッセイ （5 日）、肯定的なすべてのサンプルで各アッセイ 7 日。
侵襲性アスペルギルス症の検出。
真菌アスペルギルスによる侵襲性アスペルギルス (IA) は、化学療法や骨髄移植の頻繁かつ生命を脅かす合併症率死亡率と罹患率の高さです。IA の診断は複雑で、生検試料中の真菌の同定によってのみ確認できます。組織診断キャプチャ自体に有害、あり、このため多くの患者経験的抗真菌治療を受けるよりむしろ生検を受けます。ただし、治療はそれを運ぶ重要な側効果し、法外に高価です。このため、感染の早期発症を追跡し、抗真菌薬の合理的な管理を許可するために使用することができます敏感な特定の診断テストを開発する試みられています。アスペルギルス抗原を循環は信頼性が低く、証明を検出し、だから集中するひと免疫血清を用いた nonculture ベースの診断での初期の試みは、ハイブリドーマのモノクローナル抗体 (Mab) 署名分子感染を検出するために使用になってください。このような 1 つの署名の検出分子、ガラクトマンナン (と関連付けられている galactomannoprotein 分子) 商業 Platelia 酵素免疫測定法 (EIA) の基礎を形成、広範な発見したアッセイ IA の診断を使用します。それにもかかわらず、その精度をめぐる懸念を意味する菌体細胞壁成分 （1） 3--> の検出を含む診断への代替戦略が求められていること d β--グルカンおよびポリメラーゼの連鎖反応 (PCR)。"Panfungal"（1） 3--> の貧しい特異性-β d-グルカン テストおよび PCR の試金の標準化の現在の不足は、サロゲート マーカーの感染を検出しは「ポイント オブ ケア」診断機器に組み込まれている次世代アッセイ MAb ベースの最近の開発につながっています。この章は (3--> 1) 抗体抗原の開発検証-β d-グルカン、および IA 検出, 正確な病の診断と感染のモデルがどのように動物を取り巻く現在の懸念に対する核酸のアプローチは、アッセイの開発と検証を通知する使用できます。
サワー腐敗病菌の生産するトマト果実および高い特異モノクローナル抗体を用いた ELISA によるジュースの検出。
生産するサワー腐朽のトマト、柑橘系の果物、野菜、原因一般的な土壌伝染性真菌であり、トマトの主要な汚染物質の処理装置です。この作業の目的はモノクローナル抗体とその検出トマト果実およびジュースの診断アッセイを作ることでした。ハイブリドーマの技術を使用して、細胞株 (FE10) は免疫グロブリン クラス G. して密接に関連したリゾクトニア種 Galactomyces 生産とアナモルフィック種生産 europaeum と生産 pseudocandidum g. の生産/G. する複雑で特定されたメートル （IgM） に属するモノクローナル抗体生産に生成されました。MAb いくつかを含む無関係の菌類の広い範囲でクロス反応しなかったない作物生産、加工中に発生する可能性が高い。MAb arthroconidia の表面および菌糸 G. するのに現在 ehv-4 相同抗原高分子固まり (目 200 kDa) 細胞外多糖類の抗原をバインドします。MAb は非常に特定の elisa アッセイ (elisa 法) 正確に感染したトマト果実およびジュースの菌を検出するために使用されました。ELISA の特異性 (その) 1 の内部転写スペーサーを配列することによって確認された-5.8 s-ITS2 rRNA を符号化地域自然感染トマトから分離された菌類の。
植物成長促進菌トリコデルマ Hamatum GD12 の遺伝子組み換え株の担の競争力と生物防除フィットネス。
トリコデルマ種持続可能な作物生産における農薬や化学肥料に信頼できる選択肢の開発のための巨大な潜在性を保持するユビキタス土壌菌類であります。本稿では, 植物の生産性で大幅な改善トリコデルマ hamatum の植物成長促進と生物防除株の遺伝子改変によって満たすことができることが、これらの改善病気の圧力が唯一の不在で得られることを示します。定量的モノクローナル抗体を用いた ELISA を用いて,、N-acetyl-β-d-glucosaminidase-deficient 変異体の t. hamatum、対応する遺伝子の分子標的の変異によって生成土壌におけるイネ紋枯病菌拮抗相互作用中に担競争力の不自由があることを示します。そして, そのフィットネス中古出芽枯病菌核病菌の菌核病の生物防除剤としては大幅に縮小され、植物の成長を促進する能力は、両方の病原体の存在によって制約されています。この作業は、T. hamatum を介した植物成長-プロモーションの利益は単一有益な形質の遺伝的操作によって満たすことができますが、このような変更が担競合他社との土壌病原菌拮抗薬としてその成功に貢献するその生物学と生態学の他の側面上の負の影響を持っていることを示しています。仕事は菌糸のアーキテクチャと分泌の可能性の間に明確なリンクを示す、真菌の形態形成にとって重要な意味を持っています。さらに、必要性作物覚醒剤と植物農学の防除として使用するための遺伝子組み換えトリコデルマ系統の開発への全体的アプローチを強調表示します。
