The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.

Recommend to Librarian

In JoVE (1)

Other Publications (8)

Automatic Translation

This translation into German was automatically generated.
English Version | Other Languages

Articles by Chrysoula Pitsouli in JoVE

 JoVE General

Mesoscopic Fluoreszenz-Tomographie für In-vivo Imaging der Entwicklungsländer Drosophila


JoVE 1510 8/20/2009

1Center for Systems Biology, Massachusetts General Hospital, 2Institute for Biological and Medical Imaging (IBMI), Technical University of Munich and Helmholtz Center Munich, 3Department of Genetics, Harvard Medical School and Howard Hughes Medical Institute

Mesoscopic Fluoreszenz-Tomographie arbeitet darüber hinaus das Eindringen Grenzen der Gewebe-Schnitte Fluoreszenzmikroskopie. Die Technik basiert auf Multi-Projektion Beleuchtung und ein Photon Transport Beschreibung basiert. Wir zeigen in-vivo Ganzkörper-3D-Visualisierung der Morphogenese von GFP-exprimierenden Flügel Imaginalscheiben in

Other articles by Chrysoula Pitsouli on PubMed

Das Wechselspiel Zwischen DSL-Proteine ​​und Ubiquitin-Ligasen in Notch-Signalweg

Rolle Der Konservierten Intrazelluläre Motive in Serrate Signalisierung, Cis-Hemmung Und Endozytose

Kerbe ist der Rezeptor in einen Signalweg, der arbeitet in einem vielfältigen Spektrum von Entwicklungsprozesse. Seine Liganden (z.B. gesägt) sind Transmembranproteine, die deren Signalgebung Kompetenz durch die Förderung der Endozytose E3 Ubiquitin Verknüpfung, Mindbomb1 und Neuralized wird. Die Liganden hemmen auch Notch in der gleichen Zelle (Cis-Hemmung) vorhanden. Hier erkennen wir zwei konservierte Motive in der intrazellulären Domäne Serrate, die für effiziente Endozytose erforderlich sind. Das erste, ein Dileucine Motiv, ist entbehrlich für Trans-Aktivierung und Cis-Hemmung trotz endocytic Mangels, zeigen, dass die Signalisierung von Massen Endozytose getrennt werden kann. Der zweite, ein neuartiges Motiv ist notwendig für Interaktionen mit Mindbomb1/Neuralized und ist unbedingt erforderlich für Serrate, Trans-aktivieren und effizient internalisieren aber nicht dafür zu hemmen Notch signalisieren. CIS-Hemmung ist gefährdet, wenn ein ER-Aufbewahrungs-Signal Serrate hinzugefügt wird, oder wenn die Ebenen des Neuralized erhöht werden, und zusammen diese Daten zufolge auf der Zelloberfläche Cis-hemmende Wechselwirkungen auftreten. Das Gleichgewicht der Ubiquitinated/Unubiquitinated Ligand wirken somit die Signalgebung Kapazität der Zelle auf mehreren Ebenen.

In-vivo Bildgebung Von Drosophila Melanogaster Puppen Mit Mesoskopischen Fluoreszenz-Tomographie

Wir berichten eine Technik für Fluoreszenz-Tomographie, die jenseits der Grenzen der Durchdringung der Fluoreszenzmikroskopie Gewebe schneiden betreibt. Die Methode verwendet multi-projection Beleuchtung und Photon Transport Beschreibung in opaken Geweben. Wir demonstrieren Ganzkörper-dreidimensionale Visualisierung von der Morphogenese der Speicheldrüsen GFP-Ausdrücken und so Scheiben in lebenden Trakt Drosophila Melanogaster Puppen in Vivo und im Laufe der Zeit.

Nutzung Von Positionseffekte Und Der Zigeuner-Retroviren-Isolator, Genau Ingenieur Ausgedrückt Transgene

Ein Haupthindernis für erstellen präzise ausgedrückt transgene liegt die epigenetische Auswirkungen des Host-Chromatin, das sie umgibt. Hier präsentieren wir eine Strategie zur Lösung dieses Problems beschäftigt eine Gal4-inducible Luciferase Assay, systematisch Positionseffekte von Host-Chromatin und die Fähigkeit der Isolatoren, diese Effekte bei phiC31-Integration-Loci, die zufällig in der Taufliege Genom verteilt entgegenzuwirken zu quantifizieren. Wir identifizieren die Loci, die ausgenutzt werden können, um präzise Dosen von Transgenexpression an bestimmten Geweben zu liefern. Außerdem entdecken wir eine zuvor unbekannte Eigenschaft der "Zigeuner" Retroviren Isolator zur Erhöhung der Genexpression zu Ebenen severalfold größer als bei den meisten oder möglicherweise alle unisolierte Loci, in jedem Gewebe getestet. Diese Ergebnisse liefern die erste Gelegenheit, eine Batterie von transgenen zu erstellen, die zuverlässig auf hohem Niveau in praktisch jedem möglichem Gewebe durch Integration an einem einzigen Ort und umgekehrt Ingenieur eine kontrollierte phänotypische allelische Reihe ausgedrückt werden können durch die Nutzung mehrere Loci. Die Allgemeingültigkeit der unser Ansatz macht es anpassungsfähig an andere Modellsysteme identifizieren und Ändern der Loci für optimale Transgenexpression.

Entwicklungsbiologie: Unsere Fliegen Vettern Darm

Homöostase in Infizierten Epithelien: Stammzellen Die Führung übernehmen

Gewebe-Homöostase aufrechtzuerhalten und vermeiden von Krankheit, epitheliale Zellen beschädigt durch pathogene leicht ergänzt werden müssen, und dies geschieht hauptsächlich durch die Aktivierung von Stammzellen. In diesen kurzen Bericht diskutieren wir neue Entwicklungen in der aufregenden Feld Host Epithelien-Erreger-Interaktion in Drosophila sowie wie bei Säugetieren.

Synergie Zwischen Bakteriellen Infektionen Und Genetische Prädisposition in Intestinale Dysplasie

Akkumulierende Beweis schlägt vor, dass Hyperproliferating intestinale Stammzellen (SCs) und Vorfahre Krebs Einleitung, Wartung und Metastasierung zu fahren. Darüber hinaus sind chronische Entzündungen und Infektionen zunehmend für ihre Rollen in Krebs anerkannt. Trotzdem sind die Mechanismen, mit denen bakterielle Infektionen SC-vermittelte Tumorigenese initiieren können, trügerisch. Mit einem Drosophila-Modell der Pathogenese der Darm, wir zeigen, dass Darm-Infektion mit Pseudomonas Aeruginosa, ein menschliches opportunistische bakterielle Erreger, die c-Jun N-Terminal Kinase (JNK) Pathway, ein Markenzeichen der Host-Stress-Reaktion aktiviert. Das wiederum verursacht Apoptosis der Enterozyten, die größte Klasse der differenzierten Darmzellen und fördert eine dramatische Verbreitung von SCs und Vorläuferzellen, die als ein homöostatischer Ausgleichsmechanismus zur Wiederauffüllung der Apoptotic Enterozyten dient. Allerdings finden wir, dass dieser homöostatischer Mechanismus zu massiven Jägerei der Darmzellen führen kann, wenn Infektion bei Tieren mit einer latenten Onkogene Form von Ras1-Onkogen auftritt. Den betroffenen Darm entwickeln überschüssige Schichten von Zellen mit veränderter Apicobasal Polarität erinnert an Dysplasie, darauf hindeutet, dass die Infektion direkt mit dem genetischen Hintergrund bei prädisponiert Personen, SC-vermittelte Tumorentstehung zu initiieren synergize kann. Unsere Ergebnisse bieten einen Rahmen für das Studium der intestinalen bakteriellen Infektionen und deren Auswirkungen auf die undifferenzierte und ausgereifte enterischen Epithelzellen in der Anfangsphase der Darmkrebs. Bewertung der Stammvater Zelle Antworten zu pathogenen Darmbakterien könnte ein Maß für die Prädisposition für Apoptotic Enterozyten-assistierte intestinale Dysplasien beim Menschen bieten.

Embryonale Multipotenten Vorläuferzellen Umgestalten Der Drosophila-Atemwege Während Der Metamorphose

Erwachsene Strukturen in holometabolous Insekten wie Taufliege werden von Zellgruppen so engagierten zur Bildung von verschiedenen Organen erzeugt. So Zellen werden im Embryo angegeben und bis die Larvenstadien, ruhig bleiben, wenn sie vermehren und Form Organen zu unterscheiden. Das Drosophila Trachealtubus System ist ausgiebig während der Metamorphose von einer kleinen Anzahl von Airway Vorläuferzellen umgestaltet. Unter diesen sind die spiracular Zweig-Tracheoblasts für die Generation der pupal und adult abdominal Atemwege verantwortlich. Um die Koordinierung der Proliferation und Differenzierung während der Organogenese röhrenförmige Organe zu verstehen, analysierten wir den Umbau des Drosophila-Airways während der Metamorphose. Wir zeigen, dass die embryonale spiracular Branch Tracheoblasts multipotenten Zellen, die das Homeobox Übertragungfaktor Ausschneiden, Ausdrücken, die für ihr Überleben und normale Entwicklung notwendig ist. Sie geben Anlass zu drei unterschiedliche Zelle Bevölkerungen am Ende der larvalen Entwicklung, die die Erwachsenen Trachealtubus Röhrchen, das Spritzloch und der Epidermis, die rund um das Spritzloch erzeugen. Unsere Studie legt die Serie von Ereignissen, die zur Bildung eines Erwachsenen tubuläre Struktur in Drosophila führen.

Waiting
simple hit counter