Translate this page to:
French
In JoVE (1)
Other Publications (5)
Automatic Translation
This translation into French was automatically generated.
English Version | Other Languages
Articles by Derek C. Adams in JoVE
JoVE General
Isolement et culture de cellules de la zone néphrogénique du rein d'embryon de souris
1Department of Molecular Medicine, Maine Medical Center Research Institute, 2Molecular Medicine and Gene Therapy, Lund University Hospital
Dans ce rapport, nous décrivons une méthode pour l'isolement et la culture de la niche de cellules progénitrices du rein d'embryon de souris qui peuvent être utilisées pour étudier les voies de signalisation réglementant cellules souches / progénitrices du rein en développement. Ces cellules cultivées sont très accessibles à de petites molécules et le traitement de protéines recombinantes, et surtout aussi à la transduction virale, ce qui permet une manipulation efficace des voies candidat.
Other articles by Derek C. Adams on PubMed
Un Journaliste in Vivo De BMP Signaling in Organogenèse Révèle Des Cibles Dans Le Rein En Développement
Protéines morphogénétiques osseuses (PGB) régulent les processus essentiels durant l'organogenèse, et une compréhension fonctionnelle de ces protéines sécrétées dépend de l'identification de leurs cellules cibles. Dans cette étude, nous générons un journaliste transgénique pour les études d'organogenèse qui nous permet de définir l'activation de voie BMP dans le rein en développement.
Chordin-like 1 Gastrulation Torsadée 1 Règlent Lésions Rénales Suivantes Signalisation De BMP
Stimulation de la voie de la protéine morphogénétique (BMP) OS protège le rein des lésions aiguës et chroniques. Nombreux régulateurs dans le rein contrôlent BMP signaling, offrant de nombreuses cibles pour des manipulations thérapeutiques. Ici, nous avons criblé de modulateurs de BMP signaling dans le segment de S3 sensible à l'ischémie et a conclu que 1 Chordin semblable est exprimé dans ce segment du néphron humain et souris. 1 Type chordin antagonise spécifiquement BMP7, qui s'exprime dans le néphron distal voisin, et cela dépend de la présence de la protéine Twisted gastrulation. Sur la dégénérescence induite par l'ischémie du segment S3, nous avons observé une réduction de Chordin comme 1 expression coïncide avec l'intense BMP signaling in les tubules du rein récupération. Expression restaurée accompagné de redifférenciation épithéliums de tubule proximal, encore une fois qui coïncide avec une diminution de signalisation de BMP. Nous proposons que Chordin comme 1 réduit la BMP7 la signalisation dans les tubules proximaux en bonne santé, et la perte de cette activité sur la desquamation de l'épithélium lésé favorise la BMP7 signalisation dans l'épithélium de repopulation, dédifférenciées. Comme régénérant des épithéliums différencier, Chordin comme 1 est à nouveau exprimé, contrarier la BMP7. Ces données suggèrent un mécanisme de régulation dynamique de la renoprotective BMP7 signalisation dans le segment S3 du tubule proximal.
L'étiquette à Long Terme En Conservant La Population De La Papille Rénale Se Pose Grâce à Une Croissance Régionale Divergente Du Rein
Expériences à long terme de chase impulsion a déjà identifié une population assez importante des cellules BrdU-conservant au sein de la papille rénale. L'origine de ces cellules a été difficile, et dans ce travail, nous testons l'hypothèse qu'ils deviennent quiescentes tôt au cours de la croissance développement et orgue de rein. En effet, nous trouvons que BrdU-maintien des cellules de la papille peuvent être étiquetés uniquement par impulsions avec BrdU embryonnaires jour de (E) 11,25 à jour après la naissance de la (P) 7, la période approximative de développement rénal chez la souris. Signal BrdU dans le cortex et la médulla externe est rapidement diluée par une prolifération cellulaire durant le développement embryonnaire et la croissance des juvéniles, alors que les cellules à l'intérieur de la papille se différencient et sortir du cycle cellulaire pendant l'organogenèse. En effet, de E17.5, peu ou pas de prolifération active peut être vu dans la papille distale, indiquant la maturation de cette structure d'une manière distale-à-proximale pendant l'organogenèse. Nous concluons que BrdU-maintien des cellules de la papille représentent une population de cellules que suspendre durant le développement embryonnaire et localiser dans une région du rein qui mûrit très tôt. Nous proposons donc que sélective rétention papillaire de BrdU naît grâce à une combinaison de ralentissement régionalisé et sortie de, le cycle cellulaire au sein de la papille, pendant la période de développement rénal en cours et une vaste croissance proliférative du rein juvénile résultant en dilution de BrdU au-dessous du niveau de détection dans les régions extra-papillary.
BMP7 Encourage La Prolifération Des Cellules Progénitrices Néphron Via Un Mécanisme Dépendant De JNK
La formation itérative de néphrons durant le développement embryonnaire s'appuie sur une reconstitution continue de cellules progénitrices tout au long de la néphrogénèse. Définissant les mécanismes moléculaires qui maintiennent et réglementent ce pool d'ancêtre est essentielle à la compréhension néphrogénèse dans des contextes de développement et régénératrices. Entretien des progéniteurs de néphron est absolument dépendante de signalisation BMP7 et null Bmp7 souris présentent une perte rapide de géniteurs. Toutefois, le mécanisme de transduction de signal fonctionnant en aval de la BMP7 ainsi que la cellule cible précis restent indéfinis. Utilisant un système d'isolation roman progénitrices primaire, nous avons étudié les résultats biologiques et de transduction de signal induites par la BMP7. Nous trouvons que BMP7 directement et rapidement active JNK signaling in progéniteurs néphron entraînant la phosphorylation de Jun et de facteurs de transcription ATF2. Cette signalisation se traduit par l'accumulation de la cycline D3 et de la prolifération ultérieure des progéniteurs PAX2(+), inversement corrélées avec la perte des progéniteurs de néphron vu dans le rein Bmp7 null. Activation de Jun et ATF2 est fortement diminuée dans les reins Bmp7 null, fournissant une importante corrélation in vivo. BMP7 donc favorise la prolifération directement dans des progéniteurs de néphron en activant les circuits de signalisation de JNK.
Follistatin-like 1 Régule L'expression De IL-1β Rénale Dans La Néphrotoxicité Du Cisplatine
Follistatin-like 1 (FSTL1) est une protéine sécrétée par homologie à la fois follistatine et la famille SPARC/BM40 des protéines protéines. Dans cette étude, nous avons cherché à déterminer les profils d'expression des Fstl1 et de son récepteur apparenté Dip2a chez l'adulte et pour évaluer les conséquences de l'inactivation de la Fstl1 sur le développement et l'homéostasie du rein. Nous trouvons que FSTL1 circule en quantité élevée chez l'homme et de la souris et qu'il s'exprime aussi localement dans l'anse de Henle dans les reins. Pour commencer à comprendre les fonctions in vivo de Fstl1, nous avons généré un mutant de souris à l'aide d'une approche genetrap. Le hypomorphic Fstl1 genetrap souche affiche une forte réduction dans l'expression de la FSTL1 au niveau de la protéine, mais il ne montre pas d'anomalies du développement manifestes. FSTL1 a précédemment impliqué dans les processus morbides divers comme un régulateur de l'expression des cytokines inflammatoires, et nous avons évalué la réponse de la souche genetrap de lésion rénale aiguë induite par le cisplatine, un modèle de maladie avec pathologie très dépendants de cytokine. Nous constatons que, bien que les concentrations de TNF-α et Il6 sont inchangées comparativement à expression d'Il-1β sauvage, rénale est augmentée chez les souris de genetrap après un traitement de cisplatine. Par ailleurs, histopatological analyse, l'expression du marqueur de blessures des tissus Havcr1 et mesure de la créatinine sérique démontrent que la réduction de l'expression Fstl1 sensibilise le rein à la néphrotoxicité du cisplatine aiguë, suggérant un rôle pour répression médiée par les FSTL1 Il-1β en protection du rein contre les blessures aiguës néphrotoxiques.
