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Articles by Erica L. Benard in JoVE

 JoVE Immunology and Infection

斑马鱼的胚胎细胞内细菌病原体感染


JoVE 3781 3/15/2012

1Department of Molecular Cell Biology, Institute of Biology, Leiden University, 2Department of Medical Microbiology and Infection Control, VU University Medical Center, 3Australian Regenerative Medicine Institute, Monash University

透明斑马鱼的胚胎已经证明有用的模型可视化和主机之间的先天免疫细胞和细胞内细菌病原体的功能,如研究的相互作用,

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巨噬细胞特异性基因 Spi1 定向天然免疫中的功能。

Spi1/Pu.1 转录因子髓细胞发育的脊椎动物中发挥重要的作用。尽管 Spi1 的广泛研究,控制的基因组很大程度上不得而知。若要标识依赖 Spi1 的基因,我们使用结合荧光激活细胞分选髓细胞胚胎细胞的转基因斑马鱼胚胎中击倒采用芯片技术战略。这种方法的具体绿色荧光蛋白标记细胞类型中使用 knockdowns 是非常成功地查明 Spi1 针对先天免疫中的 macrophagespecific 基因。我们发现基因组编码 spi1 组合式,这也丰富在荧光激活细胞排序胚胎髓系细胞的 spi1:GFP 转基因线上。代表假定 myeloidspecific Spi1 靶基因,这个基因组包含所有 5 以前确定的依赖 Spi1 的斑马鱼基因以及新型免疫相关基因的一大套。与中性粒细胞和巨噬细胞标记的共定位研究表明基因 cxcr3.2、 mpeg1、 ptpn6、 mfap4 都表示,特别是在早期胚胎巨噬细胞。在功能的方法中,我们展示了该基因 cxcr3.2,编码的趋化因子受体 3.2,涉及的巨噬细胞迁移到该站点的细菌感染。因此,我们基于我们联合转录组分析,发现新型早期的巨噬细胞特定标记基因,包括关键的巨噬细胞信号转导中非特异性免疫反应。

传染病建模与先天免疫功能的斑马鱼胚胎。

主要的细胞类型的先天免疫系统、 巨噬细胞和嗜中性粒细胞,制定期间的斑马鱼胚胎发生的头两天。透明斑马鱼胚胎中出色可追溯与病原微生物的这些免疫细胞相互作用。各种工具和方法最近已用于可视化和隔离斑马鱼胚胎先天免疫细胞、 由不同的微量注射技术,建立感染和分析后微生物识别主机非特异性免疫反应。这里,我们对这些方法的应用提供了实用指南和审查当前先进的斑马鱼传染性疾病研究。

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