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Articles by Erica Andersen in JoVE
JoVE General
細胞運動やゼブラフィッシュ胚における個々の神経細胞と神経堤細胞のアクチン細胞骨格のライブイメージング
1Genetics Training Program, University of Wisconsin-Madison, 2Department of Anatomy, University of Wisconsin-Madison, 3Department of Zoology, University of Wisconsin-Madison, 4Cell and Molecular Biology Training Program, University of Wisconsin-Madison
このプロトコルは、ゼブラフィッシュ胚の生体内で個々の神経細胞や神経堤細胞のイメージングを説明します。このメソッドは、蛍光共焦点タイムラプス顕微鏡を使用して細胞の行動とアクチンの局在を調べるために使用されます。
Other articles by Erica Andersen on PubMed
サブユニットをフライとワームのポリコーム グループ錯体のヒストンのメチル基転移酵素の活動への貢献。
ショウジョウバエ キイロショウジョウバエ ポリコーム グループ (PcG) リプレッサーの ESC-E(Z) 複合体はヒストン H3 メチル基転移酵素 (HMTase) です。この複雑な無音 Hox 遺伝子と植物の開花のワームの関連 HMTases コントロールの生殖細胞形成を飛ぶし、X 不活化の哺乳類。複雑なフライには触媒ドメインを設定サブユニット、E(Z)、プラス 3 無触媒サブユニット、SU (Z) 12、ESC と NURF 55 が含まれています。4 サブユニットの複合体である目 E(Z) だけで 1,000 倍より積極的。ここで ESC と SU (Z) 12 E(Z) HMTase 活動の増強に重要な役割を再生することを示します。また、ESC の損失グローバル メチル化ヒストン H3 リジン 27 ハエの胚の破壊することを示す.サブユニット変異触媒の活動に必要なおよび/または特定のパートナーにバインディングのドメインを識別します。我々 はミスセンス変異の ESC、E(Z) の CXC ドメインと保存された VEFS ドメインの SU (Z) 12、表面のループで各 HMTase 活動を混乱させるが、複雑なアセンブリを保持について説明します。したがって、E(Z) 設定ドメインにアクティブな HMTase を生成するために複数のパートナーの入力が必要です。また E(Z) の相同物を含む組換えワーム コンプレックス、MES 2 いる MES-6、ESC ホモログとパイオニア タンパク質 MES 3 に依存、堅牢なの HMTase 活動を見つけます。したがって、はえおよび哺乳類の PcG 錯体は絶対に SU (Z) 12 必要が、ワーム コンプレックスが異なるパートナー セットから HMTase 活動を生成します。
特異的代替 Esc キーと Esc キーのようなサブユニットのポリコーム グループ ヒストン メチルトランスフェラーゼの複雑なショウジョウバエの開発中が展開されます。
余分なセックス櫛 (ESC) 蛋白質キー無触媒サブユニット ESC エンハンサー学会 [E(Z)] ヒストン メチルトランスフェラーゼの複雑なのであるポリコーム グループ (PcG) リプレッサーであります。生存 esc 急性成人期への母体製品のみに基づいて、ピーク esc キー式胚の段階中に esc キーが初期の開発時に最も重要なであることを示します。対照的に、同じコンプレックス、E(Z) とサプレッサーの学会-12 [SU （Z） 12] は、2 つ他 PcG リプレッサーは生存率および Hox 遺伝子発現抑制のための開発全体が必要です。ここで ESC-Like （ESCL) その生化学的、分子、および遺伝的特性は、出生時に ESC トレーニングの長年のパラドックスを説明できると呼ばれる小説フライ PcG リプレッサーについて説明します。発達の西部のしみは、60 ％ esc キーに同じです、ESCL ピークが豊富でセアカゴケグモの段階の間に表現されることを示します。ESCL esc キーの代わりを含む組換え錯体ヒストン H3 リジン特異性および活動レベル K27、esc キーを含む複雑なのと同様のメチル化することができます。Coimmunoprecipitations は、ESCL E(Z) セアカゴケグモの細胞を関連付けます ESCL 翅原基 （規制の DNA を密接に E(Z) とを追跡するクロマチン immunoprecipitations を示すことを示します。さらに、用量削減 escl + esc 損失関数表現型を高め、（解除 ESC/ESCL 翼ディスク由来細胞でのダブル RNA 干渉ノックダウンを引き起こします。ESCL と ESC E(Z) メチル基転移酵素複合体と同様の機能があるが特異的に開発が進むにつれて展開されている示唆されました。
セルの動作およびF-アクチンのin Vivoイメージング·ペリフェラル対中央感覚軸索開発のLIM-HD転写因子規則を明らかに
特定の神経細胞形態の開発は、軸索形成、伸長や分岐を含む細胞運動プロセスを正確に制御する必要があります。繊維状アクチン（F-アクチン）細胞骨格の動的なリモデリングは、これらのプロセスのために重要であるが、ほとんどは、生体内での運動軸索の動作およびF-アクチンダイナミクスを制御するメカニズムについて知られています。ニューロンの構造は本質的な転写因子の活性によって部分的に指定されている、まだ転写および軸索の動作の間に分子や細胞のステップはよく理解されていない。ゼブラフィッシュRohon·ビアード（RB）の感覚ニューロンは、脊髄や皮膚をinnervates末梢軸索に延びている中央の軸索で、ユニークな形態を持っています。 LIMホメオドメイン（LIM-HD）転写因子の活性は、末梢RB軸索の形成に必要とされています。神経細胞の形態形成がin vivoで制御する方法を理解し、LIM-HD転写因子の活性は差動対の末梢中枢神経軸索を制御する方法は、軸索の動作およびin vivoでのF-アクチン分布のライブイメージングを使用しています。
