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Articles by Erica Andersen in JoVE
JoVE General
세포 운동성 및 Zebrafish 태아의 개별 뉴런과 신경 크레스트 세포의 굴지의 Cytoskeleton의 라이브 영상
1Genetics Training Program, University of Wisconsin-Madison, 2Department of Anatomy, University of Wisconsin-Madison, 3Department of Zoology, University of Wisconsin-Madison, 4Cell and Molecular Biology Training Program, University of Wisconsin-Madison
이 프로토콜은 zebrafish 배아를 생활에서 개별 뉴런 또는 신경 능선 세포의 이미징을 설명합니다. 이 방법은 형광 공촛점 시간 경과 현미경을 사용하여 셀룰러 행동과 굴지의 현지화을 검사하는 데 사용됩니다.
Other articles by Erica Andersen on PubMed
소 단위 비행 및 웜 Polycomb 그룹 단지의 히스톤 Methyltransferase 활동에 기여
Drosophila melanogaster Polycomb 그룹 (PcG) repressors의 ESC-E(Z) 복합 히스톤 H3 methyltransferase (HMTase) 이다. 이 복잡 한 침묵 Hox 유전자 및 벌레, 식물, 꽃에 관련 된 HMTases 제어 세균 선 개발 비행 및 X 포유류에서 비활성화 합니다. 복잡 한 비행 포함 설정된 도메인 촉매 소 단위, E(Z), 플러스 3 noncatalytic 소 단위, 수호 (Z) 12, ESC, 및 NURF-55. 4 소 단위 복잡 한 > 1,000-fold E(Z) 혼자 보다 적극적인. 여기 우리는 ESC와 수호 (Z) 12 potentiating E(Z) HMTase 활동의 핵심 역할 플레이 보여줍니다. 우리는 또한 ESC의 손실 히스톤 H3 lysine 27 플라이 배아에서의 글로벌 메 틸 방해 보여. 소 단위 돌연변이 촉매 활동에 필요한 또는 특정 파트너에 바인딩 도메인을 식별 합니다. 우리는 각 HMTase 활동을 중단 하지만 복잡 한 어셈블리를 보존 하는 ESC, E(Z), CXC 도메인 및 보존된 VEFS 도메인의 수호 (Z) 12, 서피스 루프에서 missense 변이 설명. 따라서, E(Z) 설정 도메인 활성 Hmtase를 생산 하기 위해 여러 파트너 입력을 필요 합니다. 우리 또한 확인 E(Z) 체를 포함 하는 재조합 형 웜 복잡 MES 2 MES 6, ESC 체 및 MES-3, 선구자 단백질에 의존 하는 강력한 HMTase 활동. 따라서, 웜 복잡 하지만 비행 및 포유류 PcG 단지 절대적으로 수호 (Z) 12, 고유한 파트너 집합에서 HMTase 활동을 생성 합니다.
대체 Esc 키와 Esc 키와 같은 하위 단위 복잡 한 Polycomb 그룹 히스톤 Methyltransferase의 차동 Drosophila 개발 하는 동안 배포 됩니다
여분의 섹스 빗 (ESC) 단백질은 복잡 한 zeste [E(Z)] 히스톤 methyltransferase ESC 증강에 키 noncatalytic 소 단위입니다 Polycomb 그룹 (PcG) 진압. Esc homozygotes 성인 기의 생존 기반으로 모성 제품 및 배아 단계 동안 피크 ESC 식을 나타내는 ESC는 가장 중요 한 초기 개발 중. 반면, 같은 복잡 한, E(Z) 및 zeste-12 [수호 (Z) 12], 억압에 다른 두 PcG repressors는 Hox 유전자 억압에 대 한 생존 능력 개발을 통해 필요 합니다. 여기 우리 소설 플라이 PcG 진압, ESC-Like (ESCL), 생화학, 분자, 그리고 유전 속성을 가진 postembryonic 시간 동안 esc 키 dispensability의 오랜 역설을 설명할 수 있다 라고 설명 합니다. 발달 서쪽 오 점 보기 esc 키와 동일한 60% 인 ESCL postembryonic 단계 동안 피크 풍부한 표현 됩니다. Esc 키 대신 ESCL를 포함 하는 재조합 형 단지 K27, esc 키를 포함 하는 복잡 한 비슷한에 대 한 활동 레벨과 lysine 특이성 H3 히스톤을 methylate 수 있습니다. Coimmunoprecipitations ESCL E(Z) postembryonic 셀에 연관 chromatin immunoprecipitations 쇼 윙 디스크에 Ubx 규제 DNA에 ESCL E(Z)와 밀접 하 게 추적을 보여줍니다. 또한, 복용량 감소 escl + esc 기능 손실 고기를 강화 하 고 날개 디스크 파생 된 셀에서 ESC/ESCL의 더블 RNA 간섭 최저의 원인 Ubx derepression. 이러한 결과 ESCL 및 ESC E(Z) methyltransferase 단지에서 비슷한 기능을가지고 있지만 개발 수익금으로 배포 차동 좋습니다.
셀 동작 및 F 말라의 in Vivo 영상 임 HD 녹음 방송 요인 규제를 중앙 감각 축 삭 개발 대 주변을 보여준다
특정 신경 형태학의 개발 축 삭 형성을 포함 하 여 세포 운동 성 프로세스 정밀 하 게 제어할 필요 파생물 및 분기. 동적 filamentous 말라 리 모델링 (F-말라) cytoskeleton이 중요 이러한 프로세스; 그러나, 약간의 운동 축 삭 동작 및 F 말라 역학 vivo에서 제어 하는 메커니즘에 대 한 알려져 있다. 내장 전사 요소 활동 하 여 신경 구조를 일부 지정 아직 전사 및 축 삭 동작 사이의 분자 및 세포 단계 잘 이해 되지 않는다. Zebrafish Rohon 수염 (RB) 감각 신경 세포는 척수에 확장 하는 중앙 축 삭과 피부 innervates 주변 축 삭의 독특한 형태. 임 (임-HD) homeodomain 전사 인자 활동은 주변 RB axons의 형성에 대 한 필요 합니다. 이해를 축 삭 행동과 F 말라 배포 vivo에서의 라이브 이미징 사용 신경 morphogenesis vivo 및 어떻게 임 HD 녹음 방송 요인 활동 차동 조절 중앙 축 삭 대 주변에서 제어 하는 방법.
