La Récupération Fonctionnelle Après Traumatisme Spinal Cord Injury Médiée Par Un échafaudage De Polymère Unique Ensemencée Avec Des Cellules Souches Neurales

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Mar, 2002  |  Pubmed ID: 11867737

Pour une meilleure réparation directe après lésion de la moelle épinière (SCI), nous avons conçu un implant modelé sur la moelle épinière intacte, composé d'un échafaudage de polymère multicomposants ensemencée avec des cellules souches neurales. Implantation de l'unité des cellules souches neurales-échafaudage dans un modèle de hémisection rat adulte de SCI promu l'amélioration à long terme en fonction (persistent pendant 1 an chez certains animaux) par rapport à un groupe témoin de la lésion. À postinjury de 70 jours, les animaux porteurs d'échafaudage-plus-cellules présentaient des coordonnés, supportant le poids du membre postérieur stepping. Analyses immunocytochimiques et histologie a suggéré que cette reprise pourrait être attribuable en partie à une réduction de la perte de tissu de processus de lésion secondaire ainsi que dans la cicatrice gliale diminuée. Traçage des voies a démontré les fibres du faisceau pyramidal en passant par l'épicentre de la blessure au cordon caudal, un phénomène non présent dans les groupes non traités. Avec la preuve d'expression locale accrue de GAP-43 ne pas observée chez les témoins, ces résultats suggèrent une composante de régénération possible. Ces résultats peuvent suggérer une nouvelle approche de la SCI et, plus largement, peuvent servir de prototype pour des stratégies pluridisciplinaires contre des problèmes neurologiques complexes.

Cellules Ressemblant à Des Souches Neuronales Transplantées Clonales Répondent à La Stimulation Photique à Distance Suite à L'incorporation Dans Le Noyau Suprachiasmatique

Experimental Neurology. Apr, 2002  |  Pubmed ID: 11922658

Neurales ressemblant à des souches cellules multipotentes (CNS) provenant de la région un cerveau et transplanté dans une autre région semblent se différencier en phénotypes neuronales et gliales autochtones sur le site d'implantation. Si ces cellules provenant de donneurs sont convenablement intégrés reste sans réponse. Afin de vérifier cette possibilité, nous avons utilisé le noyau suprachiasmatique (SCN) de l'hypothalamus, site d'une horloge circadienne connue, comme une cible nouvelle greffe. Quand un clone des CNS initialement dérivé de cervelet de souris néonatales a été transplanté dans des embryons de souris, les cellules intégrées dans le SCN sur une étroite fenêtre gestationnelle qui correspondait à la conclusion de la neurogenèse SCN. Coloration immunohistochimique a suggéré que les cellules provenant de donneurs dans le SCN synthétisent peptide neurotransmetteur (arginine vasopressine) caractéristique des neurones de la SCN. Cellules SCN provenant de donateurs ont réagi à des impulsions de lumière en exprimant la protéine immunoréactive de c-Fos dans un modèle qui est approprié pour les cellules natives de SCN. Cette réponse spécifique à une région et physiologiquement appropriée à la stimulation naturelle d'une entrée sensorielle à distance implique qu'endogènes et dérivés du donneur de cellules forment vrais chimères SCN, suggérant qu'exogènes CNS greffées aux emplacements ectopiques peuvent s'intégrer de façon significative.

Limites Dans La Réparation Du Cerveau

Nature Medicine. Sep, 2002  |  Pubmed ID: 12205449

Transplanté Des Cellules Souches Neurales Survivre, Différencier Et D'améliorer La Fonction Motrice Neurologique Après Traumatisme Crânien Expérimental

Neurosurgery. Oct, 2002  |  Pubmed ID: 12234415

En utilisant le clone de cellules souches neurales (NSC) C17.2, nous avons évalué la capacité des CNS murines transplantées pour atténuer les déficits cognitifs et neurologiques après traumatisme crânien.

Des Cellules Souches Neurales Afficher Un Mécanisme Intrinsèque Pour Le Sauvetage Des Neurones Dysfonctionnels

Nature Biotechnology. Nov, 2002  |  Pubmed ID: 12379867

Nous avons examiné l'hypothèse que des cellules souches neurales (CNS) possèdent une capacité intrinsèque à « sauver » les neurones dysfonctionnels dans le cerveau des souris âgées. L'étude a porté sur un type de cellules neuronales avec projections stéréotypées qui est généralement compromis dans le neurone dopaminergique du cerveau âgé (DA). Implantation unilatérale de murines CNS dans les midbrains des souris âgées, où la présence de stablement avec facultés affaiblies mais issue DA neurones a été augmentée par un traitement avec 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP), a été associée à reconstitution bilatérale du système mesostriatal. Essais fonctionnels en parallèle la récupération spatio-temporelle de la tyrosine hydroxylase (TH) et activité de la dopamine transporter (DAT), qui, à son tour, reflète la distribution spatio-temporelle des cellules provenant de donneurs. Bien que conversion spontanée des CNS de donneurs de cellules TH(+) contribué à cortico reconstitution dans les zones appauvries DA, la majorité des neurones dopaminergiques dans le système de mesostriatal était des cellules hôtes « sauvé ». Progéniteurs indifférenciés donneur exprimant spontanément neuroprotecteurs substances fourni une base moléculaire plausible pour cette conclusion. Ces observations suggèrent que les structures d'accueil peuvent bénéficier non seulement de remplacement NSC-dérivé de neurones perdus, mais aussi de l'effet « Chaperon » de certaines descendances dérivées de NSC.

Le Cerveau Lésé Interagit Réciproquement Avec Des Cellules Souches Neurales, Soutenus Par Des échafaudages Pour Reconstituer Les Tissus Perdus

Nature Biotechnology. Nov, 2002  |  Pubmed ID: 12379868

Une lésion hypoxique ischémique est un prototype pour insultes caractérisée par la perte de tissu large. Ensemencement des cellules souches neurales (CNS) sur un échafaudage de polymère a été par la suite implantés dans les cavités de l'infarctus du myocarde de cerveaux de souris blessées par une hypoxie-ischémie nous a permis d'observer les multiples interactions réciproques qui spontanément s'ensuivre entre les CNS et le cerveau largement endommagé : perte parenchymateuse a été considérablement réduit, un réseau complexe de nombreux neurites très arborisés de deux neurones provenant de donateurs et de hôte est apparu, et certaines connexions anatomiques semblent être reconstitué. Le complexe de NSC-échafaudage modifié la trajectoire et la complexité des neurites corticales hôte. Réciproquement, les neurones provenant de donateurs étaient apparemment capables de l'excroissance des neurites adressée par écrit, adaptée à la cible (qui s'étend des axones vers l'hémisphère opposé) sans instruction externe spécifique, induction ou manipulation génétique de cellules de cerveau ou donateur hôte. Ces « biobridges » semble dévoiler ou compléter une réponse réparatrice constitutive en facilitant une série d'interactions réciproques entre le NSC et hôte, favorisant la différenciation neuronale, amélioration de l'élaboration des processus neuronaux favorisant la reconstitution du tissu cortical et promouvoir la connectivité. L'inflammation et la cicatrisation ont aussi été réduits, facilitant la reconstitution.

Des Cellules Souches Neurales Exprimer Spontanément Des Traits Dopaminergiques Après La Transplantation Dans Le Rat Intact Ou 6-hydroxydopamine-lésé

Experimental Neurology. Sep, 2002  |  Pubmed ID: 12429210

La capacité de différencier les cellules souches neurales (CNS) dans les neurones de dopamine est fondamentale pour leur rôle dans les thérapies de remplacement cellulaire pour les maladies neurodégénératives comme la maladie de Parkinson. Nous montrons ici que lorsqu'une lignée clonale (C17.2) des CNS indifférenciés est transplantée dans le striatum intact ou 6-hydroxydopamine-lésé, les cellules se retirent de du cycle cellulaire (BrdU(-)), migrer intensivement dans le striatum de l'hôte et expriment des marqueurs associés à neuronale (beta-tubuline III(+), NSE(+), NeuN(+)) mais pas gliales (GFAP(-), MBP(-), différenciation d'a2b5(-)). Ce qui est important, de 2 à 5 semaines de postgrafting, dans la plupart de ces transplantations, les cellules presque tout implantées expriment le synthétisant la dopamine enzymes tyrosine hydroxylase et aromatiques aminé décarboxylase, entraînant parfois des changements dans le comportement moteur. En revanche, aucun CNS ne tachent pour la dopamine-bêta-hydroxylase, acétyltransférase de choline, acide glutamique décarboxylase ou la sérotonine. Nous concluons que, suivante la transplantation dans le rat intact ou 6-hydroxydopamine-lésé, le cerveau adulte contienne des indices intrinsèques suffisantes pour diriger l'expression spécifique des traits dopaminergique dans les cellules souches neuronales immatures multipotentielle.

Des Cellules Souches Neurales Pour Réparation De CNS: état De La Technique Et Des Orientations Futures

Advances in Experimental Medicine and Biology. 2002  |  Pubmed ID: 12614070

Programmes Génétiques Et Les Réponses Des Cellules Souches/progénitrices Neurales Au Cours De La Démyélinisation : Potentiels Aperçu Des Mécanismes De Réparation Dans La Sclérose En Plaques

Physiological Genomics. Aug, 2003  |  Pubmed ID: 12923300

Ces dernières années, il est devenu évident que le système nerveux central chez les mammifères adult contienne une population de cellules souches neuronales (CNS) décrit comme des cellules immatures, indifférenciés, multipotentes, qui peuvent être appelés pour réparation en neuro-dégénératives et les maladies démyélinisantes. CNS peuvent donner lieu à des progéniteurs d'oligodendrocytes (OPCs) et autres cellules de myélinisants. Cet article passe en revue les progrès récents dans l'élucidation des programmes génétiques et dynamique du NSC et OPC prolifération, différenciation et l'apoptose, y compris la réponse afin de démyélinisation. Nouvelles connaissances des molécules qui pourraient être impliqués dans de telles réactions peuvent contribuer à la conception du futur traitement axé sur les cellules souches de maladies comme la sclérose en plaques démyélinisantes.

Biologie Des Cellules Souches Neurales Peut-être être Bien Adaptée Pour L'amélioration Des Thérapies De Tumeur De Cerveau

Cancer Journal (Sudbury, Mass.). May-Jun, 2003  |  Pubmed ID: 12952304

Des cellules souches neurales (CNS) sont capables d'un énorme potentiel migratoire aux domaines de la pathologie dans le système nerveux central. Implanté dans un système nerveux malade ou blessé, CNS peuvent parcourir de grandes distances à et dans les zones d'anomalies diffuses, mais aussi discrets pour une greffe. La prise de greffe est souvent suivie d'intégration dans le milieu neuronal, accompagné de l'expression génétique stable des CNS. En outre, la pluripotence des CNS leur confère la capacité de remplacer des tissus malades de manière appropriée. Des preuves récentes ont également suggéré que les CNS exogènes implantées peuvent influer sur le microenvironnement environnant, telles que la promotion de la protection et/ou de régénération des voies nerveuses hôte. Ces caractéristiques des CNS semble rendre les agents idéales pour le traitement de différentes pathologies du système nerveux central, en particulier les tumeurs cérébrales. Les tumeurs cérébrales sont généralement difficiles à traiter en raison de la situation unique des lésions. Dans les gliomes primaires, le caractère extensif infiltrante de cellules tumorales représente un défi pour leur éradication effective et totale, d'où le taux élevé de récidive de défaillance et de la maladie de traitement. En outre, les structures du cerveau normal sont déformées et sont souvent détruits par le néoplasme croissant. Même avec un traitement efficace pour la résection chirurgicale et de détruire les tissus néoplasiques, le cerveau est toujours blessé, qui laisse souvent le patient dans un État affaibli. La capacité unique des CNS chez « à » sur les cellules tumorales suivie par la livraison d'un fait produit du gène désiré le NSC un agent très prometteur dans le traitement de tumeur de cerveau. Virus cytolytiques et gènes codant pour des cytokines anti-tumorale, pro-drogue conversion enzymes et neurotrophiques divers facteurs ont été conçus en CNS engraftable pour livraison aux tumeurs. Lorsqu'ils sont spécialement marqués, ces CNS injectés peuvent être visualisés à l'aide de nouvelles techniques d'imagerie et suivis in vivo dans les animaux vivants dans le temps réel. Si les CNS ont également étaient capables de participer à la réparation ultérieure et de régénération de la touchées par les tumeurs cérébrales-à présenter un potentiel mais encore Lebesgue des aspects de cette intervention-alors son rôle dans la thérapie antitumorale de complicité serait complète. Il est important de souligner, toutefois, que l'utilisation des CNS est d'appoint et n'est pas un remplacement pour les autres traitements qui doivent être utilisés en parallèle.

Des Perspectives Réalistes Pour Therapeutics Sur Les Cellules Souches

Hematology / the Education Program of the American Society of Hematology. American Society of Hematology. Education Program. 2003  |  Pubmed ID: 14633792

Les études sur la régénération du système hématopoïétique ont conduit à la définition d'un grand nombre des principes fondamentaux de la biologie des cellules souches. Thérapies basées sur une plage de cellules souches de tissus ont été largement présentée comme une nouvelle modalité de traitement, laissant présager une nouvelle spécialité émergente appelée médecine régénérative qui promet d'exploiter les cellules souches embryonnaires à partir de sources et somatiques de fournir des thérapies cellulaires pour le remplacement génétique, malin, et dégénératives les conditions. Aperçus à la charge de la biologie des cellules souches aussi présager le développement de protéines et de petites molécules thérapeutiques qui agissent sur les cellules souches endogènes qui favorisent la réparation et la régénération. Une grande partie de l'enthousiasme pour la médecine régénérative retrouvée provient de l'espoir que les progrès dans le laboratoire sera suivi peu après par des traitements révolutionnaires dans la clinique. Mais comment peut-on sorte par le battage médiatique pour juger de la vraie promesse? Sont des biologistes de cellules souches et les attentes de construction des médias qui ne peuvent être satisfaites? Quelles maladies peuvent être traitées, et quand peut-on s'attendre à un succès? Dans cette revue, nous décrivons les domaines d'investigation qui capturent le plus d'attention, et examiner l'état actuel des connaissances scientifiques et des controverses concernant les propriétés de l'embryon et les cellules somatiques souches (adultes). Notre objectif est de fournir un cadre pour apprécier la promesse tout en même temps de comprendre les défis derrière la traduction fondamentale en biologie des cellules souches cliniques de nouvelles thérapies.

Signalisation De L'EGFR Constitutive Confère Un Phénotype Mobile à Des Cellules Souches Neurales

Molecular and Cellular Neurosciences. Dec, 2003  |  Pubmed ID: 14697673

Le récepteur du facteur de croissance épidermique (EGFR) s'est avéré jouer un rôle important dans le développement du cerveau, y compris la migration, prolifération, différenciation et la survie des cellules souches et précurseur. Pour examiner de plus près les exigences temporelles et spatiales d'erbB signaux dans les cellules souches neurales non validées (CNS), nous avons exprimé le récepteur EGF indépendante du ligand EGFRvIII, dans C17.2 CNS. Ces CNS sont connus à migrer et à manifester une réponse tropique aux environnements neurodégénératives in vivo, mais pour qui un mécanisme sous-jacent reste peu clair. Nous montrons qu'erbB améliorée de signalisation via l'activité de la kinase constitutive de EGFRvIII en CNS soutient un phénotype immature et améliore la migration de la NSC.

Destin Des Cellules Multipotentes Précurseurs Neuronaux Transplantées Dans La Rétine De Souris Appauvri Sélectivement Des Cellules Ganglionnaires De La Rétine

Experimental Neurology. Mar, 2004  |  Pubmed ID: 14980806

Dans certaines régions du SNC, l'épuisement d'une catégorie donnée de neurone peut provoque des modifications dans le micro-environnement qui influent sur la différenciation de cellules précurseurs neurales nouvellement greffés. Cette hypothèse a été testée dans la rétine en induisant l'apoptose de cellules (RGC) ganglionnaires de la rétine chez les souris femelles adultes et néonatales et en examinant si par voie intravitréenne greffé des cellules précurseurs neurales mâle (C17.2), cellule souche neurale (NSC)-comme la lignée clonale, soit intégré à ces rétines sélectivement appauvris. Chez les nouveau-nés, mort rapide de RGC est induite par l'enlèvement du colliculus supérieur contralatéral (SC), chez les adultes, mort RGC retardée a été induite par transection unilatéral nerf optique (sur). Les cellules ont été injectées par voie intravitréenne 6-48 h après l'ablation de SC (nouveau-nés) ou 0-7 jours après le dommage (adultes). Les cellules ont été aussi injectés dans rétines de nouveau-nés et adultes non-RGC appauvri. À 4 ou 8 semaines, les cellules transplantées ont été identifiés à l'aide d'un marqueur du chromosome y et l'hybridation in situ ou par leur expression du produit du gène rapporteur lacZ Escherichia coli bêta-galactosidase (bêta-gallon). Aucune cellule C17.2 ont été identifiés dans les yeux d'axotomised adulte-injecté en retard RGC apoptose (n = 16). Cellules du donneur ont été toutefois solidement intégrés au sein de la rétine chez 29 % (15/55) des souris ayant reçu des injections de cellules C17.2 24h après ablation de SC néonatale ; 6-31 % des cellules survivantes ont été trouvés dans la couche RGC (GCL). Ces cellules NSC étaient également présents dans les rétines intacts, mais en moyenne, il y avait moins de cellules en GCL. SC-ablation souris, plus les cellules greffées n'expriment pas les marqueurs spécifiques à la rétine, bien que cellules donateurs occasionnels à la DAG étaient immunopositifs pour la tubuline bêta-III, une protéine fortement exprimée par, mais pas uniquement, en voie de développement ont visé les CGR. RGC épuisement rapide ainsi accrue des cellules à intégrer la GCL, mais les cellules greffées C17.2 ne semblaient pas se différencient en un phénotype RGC.

MINOCYCLINE Inhibe La Libération Du Cytochrome Mitochondrial Déclenchés Par Contusion C Et Atténue Les Déficits Fonctionnels Après Lésion Médullaire

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Mar, 2004  |  Pubmed ID: 14981254

Nous avons examiné si la libération induite par la transition de perméabilité du cytochrome c mitochondrial est une cible thérapeutique potentielle pour le traitement des lésions médullaires graves (SCI). Selon les rapports précédents, minocycline, une deuxième génération tétracycline, exerce neuroprotection partiellement en inhibant la libération du cytochrome mitochondrial c et microgliose réactive. Tout d'abord, nous avons évalué libération du cytochrome c à l'épicentre de la lésion après une SCI contondant T10 chez le rat. Libération du cytochrome c a culminé à environ postinjury de 4-8 h. Une étude de dose-réponse a généré un schéma pharmacologique sûr activé minocycline i.p. d'abaisser significativement cytosolique cytochrome c à l'épicentre de 4 h après lésion médullaire. Dans l'étude à long terme, i.p. minocycline (90 mg/kg administrée 1 h après SCI suivie de 45 mg/kg administrée toutes les 12 h pendant 5 jours) locomotion de membre postérieur à long terme nettement améliorée par rapport à celle des témoins. Recouvrements moteurs fonction et membre postérieur réflexes coordonnés également ont été considérablement améliorées. Histopathologie suggère que la minocycline traitement atténuer la perte de tissu de la phase tardive, avec l'épargne significative de substance blanche et la face ventrale des motoneurones corne aux niveaux adjacents à l'épicentre. En outre, la protéine fibrillaire acide gliale et 2 «, 3 » nucléotide cyclique 3' phosphodiestérase immunocytochimie montrent une réduction évidente des astrogliosis et amélioré la survie des oligodendrocytes. Par conséquent, la libération du cytochrome c mitochondrial est un mécanisme de lésion secondaire important dans SCI. médicaments avec effets multiformes à contrarier ce processus et microgliose peut protéger une partie de tissu médullaire qui est cliniquement significative pour la récupération fonctionnelle. Minocycline, avec son innocuité clinique éprouvée, capacité à traverser la barrière hémato - encéphalique et efficacité démontrée au cours d'une fenêtre thérapeutique cliniquement pertinente, peut être une thérapie efficace pour aiguë SCI.

Réalité Et De L'Immortalité - Cellules Souches Neurales Pour Des Thérapies

Nature Biotechnology. Mar, 2004  |  Pubmed ID: 14990948

Bilan Et Planification Pour La Prochaine Décennie: Perspectives Réalistes De Thérapies Cellulaires Pour Le Système Nerveux

Journal of Neuroscience Research. Apr, 2004  |  Pubmed ID: 15048913

En pensant à l'application pratique de la biologie des cellules souches à des situations cliniques - en particulier pour le système nerveux central (SNC)-il est instructif de se rappeler que la cellule souche neurale (NSC) domaine - comme un prototype pour les cellules souches somatiques en général -émergé comme le sous-produit imprévu des enquêtes menées par les neurobiologistes du développement dans les aspects fondamentaux de la détermination neurale, l'engagement, et de la plasticité. Le comportement des cellules souches est finalement l'expression de principes de développement, un vestige de séduisante aux stades les plus plastique et générative de l'organogenèse. En essayant d'appliquer la biologie des cellules souches thérapeutiquement, il est instructif de toujours garder à l'esprit le rôle que la cellule souche joue dans le développement et à quels indices il a été «conçu» pour répondre en essayant de comprendre la «logique» derrière son comportement (à la fois ce Les enquêteurs veulent voir et ce que les enquêteurs ne veulent pas voir). En outre, dans les paradigmes de la transplantation, l'interaction entre les CNS et greffées d'accueil bénéficiaire est un processus dynamique, complexe, une interaction permanente réciproque où les deux entités sont constamment en mouvement. Dans cette revue, nous proposons une "feuille de route" à la clinique, avec un accent particulier sur les signaleurs «nids de poule» et «dos-d'âne» à travers lequel nous devons naviguer. Malgré les exhortations à être circonspect, nous vous proposons également des processus pathologiques qui peuvent être à la portée des réserves prouvées propriétés de cellules souches et pourrait être accessible dans un avenir relativement proche.

Express Costimulation Molécules Qui Sont Réglementés Différemment Par Inflammatoire Des Cellules Souches/progénitrices Neurales Et Stimuli Apoptotiques

The American Journal of Pathology. May, 2004  |  Pubmed ID: 15111308

Augmentation de l'expression de la molécule de costimulation CD80 (B7-1) a été notée dans la zone sous-ventriculaire du cerveau au cours de l'encéphalomyélite allergique expérimentale (EAE). Cette région du cerveau est une niche de cellules souches neurales (NSC) chez l'adulte. Nous montrons que CNS isolés d'adulte cerveau expresse CD80 et CD86 (B7-2) et que cette expression est augmentée après une exposition à l'IFN-gamma ou TNF-alpha, les cytokines Th1 prototypiques exprimées au cours de l'EAE. CD80 et CD86 exprimées par les CNS sont fonctionnels et peuvent costimulate des cellules allogéniques dans une réaction lymphocytaire mixte. En outre, mise en réseau de CD80 sur la surface de résultats CNS dans l'apoptose des CNS. In vitro, nous montrons que les cellules T peuvent interagir avec les CNS et forme de conjugués avec redistribution du CD3 sur la surface des cellules T dans la zone de contact. Ces résultats soulèvent la possibilité que, au cours des maladies inflammatoires telles que EAE CNS, CNS peuvent exprimer les molécules immunitaires et interagir avec l'environnement inflammatoire potentiellement causer des blessures aux CNS, qui peut avoir des implications pour les mécanismes de réparation dans le système nerveux central.

Cellules Souches : Cross-talk Et Du Développement Des Programmes

Philosophical Transactions of the Royal Society of London. Series B, Biological Sciences. May, 2004  |  Pubmed ID: 15293810

La thèse avancée dans cet essai est que les cellules souches, en particulier ceux dans le système nerveux sont composants d'une série d'innées « programmes » que non seulement assurer un développement normal, mais persistent tout au long de la vie afin de maintenir l'homéostasie face aux perturbations-à la fois petit et grand. Ces programmes de codent ce qui a fini par être appelé « plasticité ». Les cellules souches est un des dépôts de cette plasticité. La présente analyse examine les éléments de preuve que l'interaction entre les cellules souches neurales (comme une cellule somatique prototype) et les pays en développement ou cerveau blessé est un ensemble de réciproque dynamique, complexe et en cours d'échanges où les deux entités sont constamment en mutation. Nous croyons que cette interaction peut être vu près d'un point de vue « biologie systémique ». De plus, on avance la notion que les clones de cellules de tige exogènes dans les paradigmes de la transplantation ne peuvent pas seulement considérer pour leur potentiel thérapeutique, mais aussi comme des outils biologiques pour « interroger » l'environnement normal ou anormal du système nerveux central, indiquant quels repères saillants (parmi les nombreux présents) dirigez réellement l'expression de ces « programmes » ; en d'autres termes, en utilisant les cellules souches comme une « cellule de journaliste ». Basé sur ce type d'analyse, nous vous suggérons des responsables de cette « cross-talk » voies moléculaires pertinentes qui, à son tour, conduisent à la prolifération, la migration, Genèse cellulaire, trophique prend en charge, protection, orientation, désintoxication, sauvetage, etc.. Ce type de compréhension du développement, nous vous proposons, est nécessaire pour le développement de stratégies thérapeutiques pour les maladies neuro-dégénératives et autres affections du système nerveux chez l'homme. Comprendre les voies moléculaires pertinentes du phénotype de réparation des cellules souches devrait être une priorité, à notre avis, pour le champ de l'ensemble des cellules souches.

Différenciation Et Tropic/trophiques Effets Exogènes Précurseurs Neuronaux Dans La Moelle épinière Adulte

The Journal of Comparative Neurology. Nov, 2004  |  Pubmed ID: 15514921

Le sort des cellules souches neurales exogènes (CNS) dans l'environnement du système nerveux adulte continue d'être l'objet d'un débat. Dans la présente étude, les auteurs rapportent que les cellules du CCS murin clonent C17.2, lorsque greffés sur les segments lombaires de la moelle épinière de rats adultes, survivent et subissent une différenciation partielle. C17.2 cellules migrent avidement vers axonales étendues et les racines nerveuses et se différencient en cellules engainantes nonmyelinating. Notamment, C17.2 cellules induisent la formation de novo des tracts d'axone hôte visant à innervation du greffon. Différenciation et propriétés inductives des cellules C17.2 sont indépendantes de la présence de lésions à la moelle épinière. Les interactions trophiques/tropic de CNS C17.2 avec les axones de l'hôte, les contacts d'axon avides C17.2 cellule-hôte et les propriétés engainantes de ces cellules sont liées à leur profil moléculaire complexe, qui comprend l'expression des cytokines trophique et des neurotrophines comme facteur neurotrophique dérivé des cellules gliales et brain-derived neurotrophic factor, les récepteurs du facteur de croissance gliale comme ErbB-2 ; et PASK, l'homologue mammalien du gène fray impliqué dans ensheathment de l'axone. Ces résultats montrent que les CNS ne jouera pas seulement un rôle d'appui essentiel dans la réparation des lésions axonales dans la moelle épinière adulte mais peuvent également être utilisés comme sondes pour explorer les bases moléculaires du potentiel de régénération du système nerveux mature après une blessure.

Cellules Souches Neurales Se Protéger Contre Les Induite Par Le Glutamate Excitotoxicité Et Promouvoir La Survie Des Neurones Moteurs Endommagés Par La Sécrétion De Facteurs Neurotrophiques

Molecular and Cellular Neurosciences. Nov, 2004  |  Pubmed ID: 15519246

Outre leur capacité à donner naissance à des neurones et la glie, ou les cellules souches neurales (CSN) semblent intrinsèquement sécrètent des facteurs neurotrophiques bénéfiques pour les neurones lésés. Pour tester ce potentiel, nous avons implanté NSCs sur ou à proximité de cultures de la moelle épinière. Lorsque NNC ont été placés à côté des sections de la moelle épinière, moteur axones des neurones a progressé vers les CNS. En outre, le milieu conditionné à partir de cultures NCCS était également capable d'induire la croissance axonale similaire, ce qui suggère que ces facteurs NCCS sécrètent solubles qui ont tropique et / ou des propriétés trophiques. ELISA révélé que le sécrètent NNC cellules gliales ligne de facteur (GDNF) et de facteur de croissance nerveuse (NGF). Fait intéressant, préincubation du milieu conditionné par le GDNF-anticorps bloquants aboli la croissance axonale. Nous avons également montré que les CNS peuvent protéger les cultures contre les dommages de la moelle épinière excitotoxique induite expérimentalement. Le potentiel neuroprotecteur de NNC a en outre été confirmé in vivo par leur capacité à protéger contre la mort du neurone moteur.

Réalisé La Migration Des Cellules Souches Neuronales Aux Sites De Blessure CNS Par La Voie Du Récepteur 4 De Facteur De Culture Cellulaire Du Stroma 1alpha/CXC Chimiokine

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Dec, 2004  |  Pubmed ID: 15608062

Migration vers la pathologie est la première étape cruciale dans la mobilisation des cellules souches pendant la régénération. Des cellules souches neurales (CNS) migrent dans le parenchyme le long des routes stéréotypées de manière précise et dirigée à travers de grandes distances, vers des sites de lésions dans le système nerveux central, où ils pourraient se livrent niches contenant local transitoirement exprimé signaux réparatrice. Les mécanismes moléculaires pour la mobilisation de NSC n'ont pas été identifiés. Parce que les CNS semblent à domicile de même pour les sites pathologiques dérivé des étiologies disparates, nous émettons l'hypothèse que la réaction inflammatoire, une caractéristique commune à tous, guide le comportement des cellules potentiellement réparatrices. Preuve de concept, nous montrons que les CNS humaines migrent in vivo (y compris de l'hémisphère controlatéral) vers une zone infarcie (une blessure de la CNS représentative), où des astrocytes et l'endothélium régulent du facteur chimiotactique inflammatoire stromal cell-derived factor 1alpha (SDF-1alpha). CNS expriment des récepteurs de chimiokines CXC 4 (CXCR4), les récepteurs apparentés de SDF-1alpha. Exposition des SDF-1alpha aux CNS repos accroît la prolifération, favorise la transmigration et la migration de la chaîne et active les voies moléculaires intracellulaires médiant l'engagement. CXCR4 blocus abroge sa migration de chaîne axée sur la pathologie, un mode pertinent au cours du développement de la migration tangentielle qui, si récapitulés, pouvait expliquer homing sentiers stéréotypées. Nos données indiquent que les SDF-1alpha/CXCR4, représentatives du milieu inflammatoire caractérisant les nombreuses pathologies, comme un mécanisme qui active les programmes moléculaires NSC lors de blessures et suggère que l'inflammation peut considérer non seulement comme jouant un rôle négatif, mais aussi comme fournissant des stimuli qui recrutent des cellules avec une capacité régénératrice de la promotion de l'homéostasie. CXCR4 expression dans les zones germinales suggère que NSC homing après que des blessures et la migration au cours du développement peuvent invoquer des mécanismes similaires.

Un Examen Et Une Justification De L'utilisation De Transplantation Cellulaire Comme Une Stratégie Thérapeutique Pour Les Traumatisés Crâniens

Journal of Neurotrauma. Nov, 2004  |  Pubmed ID: 15684646

Des recherches expérimentales au cours des dix dernières années a considérablement accru notre compréhension de la physiopathologie du traumatisme crânien (TCC) et permettent de développer des thérapies pharmacologiques neuroprotecteurs. Les résultats encourageants des interventions pharmacologiques expérimentales, cependant, n'ont pas été traduits dans des essais cliniques avec succès, à ce jour. Traumatisme crânien pense maintenant comme une maladie dégénérative progressive caractérisée par la perte de cellules. La capacité limitée d'autoréparation du cerveau suggère que le rétablissement fonctionnel suivant TBI est susceptible de nécessiter une transplantation cellulaire des cellules exogènes pour remplacer ceux perdus à un traumatisme. Les progrès récents dans les techniques de transplantation de système nerveux central impliquent des améliorations techniques et expérimentales et l'analyse de la faisabilité et l'efficacité de la transplantation d'une plage de cellules souches, cellules souches et des cellules postmitotiques. Transplantation cellulaire a commencé à être évalué dans plusieurs modèles de TBI expérimentale, avec des résultats prometteurs. Ce qui suit est un recueil de ces études de nouveaux et passionnants, y compris une discussion critique de la raison d'être et avertissements associés aux techniques de transplantation cellulaire en recherche expérimentale sur le TBI. Raffinements supplémentaires dans les recherches futures sont susceptibles d'améliorer les résultats de traitements axés sur la transplantation pour TBI.

Les Cellules Souches Neurales Implantées Dans Les Singes Traités MPTP Augmenter La Taille De Cellules Positives à Hydroxylase De Tyrosine Endogène Dans Le Striatum : Un Retour Au Contrôle Des Mesures

Cell Transplantation. 2005  |  Pubmed ID: 15929553

Les cellules souches neurales (NSC) montrent à migrer vers les zones endommagées, produisent des facteurs trophiques et remplacer des cellules perdues d'une manière qui pourrait être thérapeutiques pour la maladie de Parkinson (MP). Cependant, il y a très peu d'information sur les effets de la CSN sur les populations cellulaires endogènes. Dans la présente étude, les effets du NSC humaine implanté (HNS) sur endogène de tyrosine hydroxylase positifs (cellules TH +) après le traitement avec 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetra-hydropyridine (MPTP) ont été explorés chez les primates non-humains. Après avarie MPTP et dans PD, le cerveau de primate se caractérise par une diminution nombre de neurones dopaminergiques dans la substantia nigra (SN) et une augmentation des neurones exprimant TH dans le noyau caudé. Pour déterminer comment NSC implanté susceptibles d'affecter les populations de ces cellules, 11 St. Kitts sur des singes verts africains ont été traités avec la neurotoxine dopaminergique sélectif, PFMP. NSC humaine ont été implantés dans la gauche et droit du noyau caudé et le SN droit de huit des singes traités PFMP. 4 Ou 7 mois après les implants de NSC, le cerveau ont été retiré et la taille et le nombre de cellules TH + dans les zones cibles ont été évalués. Les résultats ont été comparés aux données obtenues des singes normal témoin non traité et aux trois singes traités MPTP mises. La majorité des HNS trouvée sur le plan bilatéral le long de la voie sont et dans la substantia nigra, bien que relativement que peu ont été trouvés dans le noyau caudé. En présence de NSC, le nombre et la taille des cellules TH + noyau caudés retournée aux taux témoins non traitées PFMP. Changements induite par le MPTP et induite par le HNS dans le putamen sont moins apparents. Nous concluons que le traitement MPTP après le primate, HNS empêchent l'augmentation induite par le MPTP des cellules TH + dans le noyau caudé et putamen, indiquant que HNS peut être bénéfique pour la maintenance d'un environnement normal striataux.

Profil D'expression D'un Clone Opérationnellement Définie Par Les Cellules Souches Neurales

Experimental Neurology. Aug, 2005  |  Pubmed ID: 15992799

Les cellules souches neurales (CNS) sont les cellules plus primordiales et moins engagés du système nerveux, les cellules qui existent avant la spécification régionale se développe. Parce que les marqueurs détectables cytosquelettes suffisamment spécifique et sensible pour définir un NSC n'ont pas encore été entièrement définis, nous avons pris l'avis que, pour qualifier une « cellule souche » dans le système nerveux--contrairement à un "ancêtre" ou "précurseur" (dont l'engagement lineage est plu restreint)--une seule cellule dérivée de neuroectodermally doit répondre à une définition opérationnelle qui est essentiellement semblable à celle utilisée dans l'hématopoïèse. En d'autres termes, il doit posséder les propriétés fonctionnelles suivantes: (1) "Multipotency", c'est-à-dire, la capacité de produire des cellules matures dans toutes les trois lignées de neuronales fondamentales dans tout le système nerveux--(de tous les sous-types), les neurones, les astrocytes (de tous types), oligodendrocytes--dans plusieurs contextes régionales et du développement et du développement de façon adaptée à l'étape et région. (2) La capacité de remplir une région en développement et/ou de repeupler une région ramollie ou dégénérée du système nerveux avec les types de cellules appropriées. (3) La capacité d'être transplantés en série. (4) « Auto-renouvellement », c'est-à-dire, la capacité de produire des cellules-filles (y compris les nouvelles CNS) à fort potentiel et des propriétés identiques. Après avoir identifié un clone de cellules neurales murin qui remplirait cette stricte définition opérationnelle--contrairement à d'autres études qui ont utilisé des critères moins rigoureuses ou non opérationnels pour définir un NSC (par exemple, l'essai de "Neurosphère")--nous avons ensuite examiné, en comparant les profils d'expression génique, la relation une telle cellule pourrait avoir à (a) une cellule somatique de souche multipotente depuis un autre système ou organe (les cellules souches hématopoïétiques [CSS]) ; (b) les cellules souches pluripotentes provenant de la cellule interne masse et donc sans affectation de l'orgue (une cellules souches embryonnaires) ; (c) neurales cellules isolement et maintient principalement sous forme de neurospheres mais sans avoir été soumis à ce qui précède mentionnés écran opérationnel (« dérivés de CNS neurospheres"). Ces autorenouveler et opérationnellement définie par CNS--qui ont été identifiés non seulement par des marqueurs, mais par des essais fonctionnels dans leurs systèmes respectifs et dont l'état de différenciation pourrait être synchronisé--partagé un grand nombre de gènes. Bien que, comme prévu, les gènes de souches ressemblant plus ont été exprimées par les ces, CNS et CSH ont partagé un certain nombre de gènes. Dérivé de CNS neurospheres, exprimé en revanche, moins de gènes « tige-like » qui s'est tenues en commun par les autres populations définies opérationnellement les cellules souches. Plutôt, ils affichent un profil plus compatible avec les cellules neuronales différenciées. (Gènes d'identité neuronal ont été transmiss avec le clone de NSC). Fait intéressant, lorsqu'il est le clone de NSC définies sur le plan opérationnel a été cultivé comme un Neurosphère (plutôt qu'en monocouche), son modèle d'expression passés d'un motif "tige" un plus "différenciée" un, ce qui suggère que la Neurosphère, sans validation fonctionnelle, peut être un mauvais modèle pour prédire l'attributs de cellules souches car il est constitué de populations hétérogènes de cellules, seulement une petite proportion de qui sont vraiment "tige-like". En outre, lorsque des définitions opérationnelles sont employées, un ensemble commun de gènes semblables tige émerger à travers les cellules souches somatiques et embryonnaires des divers systèmes d'organe, y compris le système nerveux.

Un Rôle Pour La Biologie Des Cellules Souches Dans Les Aspects Physiologiques Et Pathologiques Du Vieillissement

Journal of the American Geriatrics Society. Sep, 2005  |  Pubmed ID: 16131354

La cellule souche est une composante essentielle d'un développement phénomène l'une des composantes clés d'un programme fondamental de l'organogenèse et le maintien de l'homéostasie long de la vie. La cellule souche confère plasticité du processus. Parce que le vieillissement fait partie de l'arc de développement, une compréhension de la cellule souche est essentiel au vieillissement de la compréhension et quelques-unes des conditions dégénératives qui l'accompagnent. Parce que les cellules souches peuvent être isolées et manipulées ex vivo, puis réimplantés dans les organes, ils peuvent servir une variété de fonctions. Ils ont la capacité de migrer sur de longues distances et en ciblant des conditions pathologiques, d'exprimer des gènes thérapeutiques et de répondre aux signaux qui déplacent leur différenciation vers des lignées déficientes. Par conséquent, les cellules souches peuvent être utilisées pour le remplacement des cellules, pour des interventions thérapeutiques, et potentiellement de modifier le vieillissement.

La Mort Cellulaire Induite Par La Caspase Prédomine Après Greffe De Cellules Progénitrices Neurales Dans Le Cerveau De Rat Traumatiques Blessés

Brain Research. Dec, 2005  |  Pubmed ID: 16309635

Cellules progénitrices neurales (PNJ) ont démontré être un traitement prometteur pour le transfert de cellules de remplacement et des gènes des maladies neurologiques, y compris de traumatisme crânien (TCC). Cependant, PNJs survivent souvent mal après transplantation malgré l'immunosuppression et les mécanismes de mort cellulaire greffon sont inconnus. Dans cette étude, nous avons évalué par caspase et la calpaïne mécanismes de mort cellulaire de cellules progénitrices de souris néonatales C17.2, transplanté à 24 h après latéral percussion fluide crânien (FP) chez les rats. Rats Sprague-Dawley mâles adultes (n = 30) ont été soumis à la blessure FP latéral (n = 18) ou simulacre de chirurgie (n = 12). C17.2 cellules marquées avec colorant fluorescent vert (CMFDA) ont été greffés dans le cortex profond et, et les animaux ont été sacrifiés à 24h, 72 h et après 1 semaine. Pro-apoptotic caspase-mediated clivage produits (Ab246) et clivage induite par la calpaïne (Ab38) ont été détectées dans les cellules implantées par immunohistochimie. Seuls 2 à 4,5 % de greffés PNJ trouvées pour survivre après 24h, indépendamment du statut de la lésion du cerveau de l'hôte, bien que les animaux cerveau-blessés avait significativement moins de cellules greffon qu'animaux sham-blessés. Limited caspase et greffon calpaïne médiée par la mort cellulaire a été observée chez les animaux sham - et cerveau-blessés, et la mort cellulaire induite par la caspase greffon a été significativement plus élevée que la mort cellulaire induite par la calpaïne greffe chez tous les animaux. Animaux cerveau-blessés a augmenté significativement la mort cellulaire induite par la caspase greffe par rapport aux animaux sham-blessés. Ces résultats suggèrent que la caspase tant calpaïne famille de protéases est impliquée dans la mort cellulaire greffon, et cette mort cellulaire par apoptose de caspase-mediated greffon prédomine dans le TBI suivant période post-traumatique aiguë.

Explorer Un Terrain D'entente Dans Le Débat éthique De Cellules Souches--une Perspective Pour Les Scientifiques : Introduction à Ce Numéro Spécial De Commentaires De Cellules Souches

Stem Cell Reviews. Dec, 2005  |  Pubmed ID: 17142867

Cellules Souches Neurales D'immunomodulateurs Pour Le Traitement De Tumeurs Cérébrales

Expert Opinion on Biological Therapy. Dec, 2006  |  Pubmed ID: 17223735

Les progrès dans la compréhension des cellules souches ont permis le développement de nouveaux traitements pour les tumeurs cérébrales. Les cellules souches neurales (CNS) possèdent la capacité de migrer à travers le système nerveux central. En exploitant le tropisme des CNS à diverses pathologies neuronales (p. ex., gliome, dégénérescence, course et ainsi de suite) et la livraison de diverses cytokines immunomodulatrices, de nouveaux traitements pour les tumeurs cérébrales ont été étudiées. Ces nouvelles stratégies offrent une spécificité nettement plus que les schémas thérapeutiques existantes, telles que la chirurgie, de radiation et de chimiothérapie. Méthodes à isoler et à cultiver les CNS sont mieux compris, applications cliniques de cette stratégie thérapeutique peuvent inévitablement émerger. Ici, les avances précliniques et les résultats soutenant l'efficacité des cellules souches sont examinées. En outre, les obstacles au développement clinique et des méthodes pour contourner ces mises en garde sont discutés.

Survie De Transplantation Des Cellules Souches Neurales Dans Le Cerveau Des Souris : évaluation De L'effet De L'immunité Et L'ischémie En Utilisant L'imagerie En Temps Réel De Bioluminescent

Radiology. Dec, 2006  |  Pubmed ID: 17114629

Pour utiliser l'imagerie bioluminescente dans un modèle murin de transplantation pour surveiller les réponses in vivo de transplantés luciférase-gène-positifs neurales progénitrices cellules (PNJ) à l'ischémie et l'immunité de l'hôte.

La Récupération Fonctionnelle Induite Par L'activité Physique Après Une Lésion De La Moelle épinière : Rôle Potentiel Des Cellules Souches Neurales

Regenerative Medicine. Nov, 2006  |  Pubmed ID: 17465758

Données d'élucider la complexité de la physiopathologie de lésion de la moelle épinière se présenteront, il est plus en plus reconnu que la réparation réussie nécessitera probablement une approche diversifiée qui combine les tactiques de diverses disciplines biomédicales, y compris la pharmacologie, la transplantation de cellules, la thérapie génique et sciences des matériaux. Récemment, nouveaux éléments de preuve mettant en évidence le bénéfice de l'activité physique et les interventions de réhabilitation au cours de la phase post-traumatique a fourni de nouvelles possibilités dans la réalisation efficaces de réparation après une lésion de la moelle épinière. Cependant, avant une stratégie thérapeutique globale qui utilise parfaitement les avantages de chacune de ces disciplines peut être conçue, les mécanismes de base par lequel ces diverses interventions agissent doivent être complètement explorées et importantes des interactions synergiques et antagonistes identifiées. En examinant les mécanismes par lequel physique récupération fonctionnelle basée sur l'activité après que lésion de la moelle épinière est effectuée, les cellules souches neuronales endogènes, à notre avis, engendrent un rôle potentiellement important. Des cellules souches neuronales multipotentes possèdent de nombreuses facultés qui encouragent la reprise, y compris la capacité d'évaluer le microenvironnement local et livrer biofacteurs qui favorisent la neuroplasticité et régénération, ainsi que le potentiel pour reconstituer les éléments cellulaires endommagés ou arrachés. Fait encourageant, la récupération fonctionnelle en raison des thérapies à base d'activité physiques semble relativement robuste, même lorsque le traitement est amorcé dans la phase chronique de la moelle épinière. Dans cet article, nous passons en revue les résultats expérimentaux liés à notre hypothèse que les cellules souches neuronales endogènes Médiateur la récupération fonctionnelle, il est indiquée dans la moelle épinière suite à des traitements fondés sur l'activité physiques. Dans l'ensemble, les données préconise l'incorporation de l'augmentation de l'activité physique comme une composante du traitement multidimensionnel de la moelle épinière et soulignent la nécessité d'employer des approches mécanistes recherche pour le développement des futures avancées dans la réadaptation de blessures neurologiques et de troubles.

Modèles Animaux De Grande Taille Sont Critiques Pour Avancer Rationnellement Les Thérapies Régénératives

Regenerative Medicine. Jul, 2006  |  Pubmed ID: 17465832

Thérapie Génique: Peut Cellules Souches Neurales Deliver?

Nature Reviews. Neuroscience. Jan, 2006  |  Pubmed ID: 16371952

Les cellules souches neurales sont une population d'auto-renouvellement qui génère des neurones et cellules gliales du cerveau en développement. Elles peuvent être isolées, ont proliféré, manipulé génétiquement et différenciées in vitro et réintroduits dans un pays en développement, adulte ou CNS pathologiquement altérés. Les cellules souches neurales ont été pris en considération pour une utilisation dans les thérapies de remplacement cellulaire dans diverses maladies neurodégénératives, et une caractéristique inattendue et potentiellement précieux de ces cellules a été récemment révélé - ils sont de grands migrateurs et semblent être attirés par les zones de pathologie cérébrale ischémique telles que et des lésions néoplasiques. Ici, nous nous interrogeons sur les moyens par lesquels les cellules souches neurales pourraient être exploités en tant que véhicules de livraison pour la thérapie génique dans le SNC.

Effets Thérapeutiques Du Clenbuterol Dans Un Modèle Murin De La Sclérose Latérale Amyotrophique

Neuroscience Letters. Apr 10-17, 2006  |  Pubmed ID: 16388902

Nous avons étudié les effets du clenbutérol, un agoniste des récepteurs adrénergiques bêta 2 avec connu anabolisant et propriétés neuroprotectrices, G93A-SOD1 chez la souris, un modèle murin transgénique de familiale la sclérose latérale amyotrophique (ALS). Par rapport aux commandes du véhicule imprégnées d'une solution saline (0,2 ml/kg/jour ; i.p.), début pathologiques G93A-SOD1 souris traitées avec le clenbutérol (1,5 mg/kg/jour ; i.p.) a démontré une apparition retardée des signes du membre postérieur mesurée par rotarod performance, progression de la maladie a ralenti, ainsi que les tendances vers des pertes mitigés des motoneurones lombaires et du poids corporel. Les réponses chez les souris femelles G93A-SOD1 étaient favorables à ceux des hommes, ce qui suggère des effets synergiques entre le clenbutérol et les facteurs de sexe. Dans l'ensemble, nos résultats suggèrent que le clenbuterol offre des effets thérapeutiques sur la dégénérescence neuromusculaire ALS.

Réseaux De Nanoparticules D'or Et Bactériophage Comme Capteurs Biologiques Et Les Agents De La Cellule-cible

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Jan, 2006  |  Pubmed ID: 16434473

Assemblages moléculaires biologiques sont excellents modèles pour le développement des systèmes nano avec propriétés biomédicales souhaitables. Nous rapportons ici une approche pour la fabrication de spontané, biologiquement actifs réseaux moléculaires consistant en bactériophage (phage) directement monté avec des nanoparticules d'or (Au) (appelé UA-phage). Nous montrons que, lorsque le phage sont conçus afin que chaque particule de phage affiche un peptide, ces réseaux préservent les cellule récepteurs superficiels attributs de liaison et internalisation du peptide affiché. L'organisation spontanée de ces réseaux ciblés peut être manipulée plus loin par l'incorporation de l'imidazole (UA-phage-imid), qui induit des changements dans la structure fractale et proche infrarouge des propriétés optiques. Les réseaux peuvent être utilisés en tant qu'étiquettes pour fluorescence accrue et microscopie à fond noir, détection de diffusion Raman exaltée de surface et conversion photon-chaleur infrarouge proche. Ensemble, les caractéristiques physiques et biologiques au sein de ces réseaux ciblés offrent une intégration multifonctionnelle pratique au sein d'une entité unique avec potentiel pour des applications biomédicales basés sur la nanotechnologie.

Au-delà De La Fraude - Les Cellules Souches La Recherche Se Poursuit

The New England Journal of Medicine. Jan, 2006  |  Pubmed ID: 16436761

Science Peut Sortir De L'impasse éthique Dans La Recherche Sur Les Cellules Souches ?

Nature Biotechnology. Apr, 2006  |  Pubmed ID: 16601717

Progrès dans notre compréhension du contrôle du développement embryonnaire humain pourraient offrir des solutions aux dilemmes moraux liés à la recherche de cellules souches embryonnaires humaines.

Des Cellules Progénitrices Neurales Machinés Pour Sécréter GDNF Montrent La Survie Améliorée, La Différenciation Neuronale Et Améliorer La Fonction Cognitive Après Traumatisme Crânien

The European Journal of Neuroscience. Apr, 2006  |  Pubmed ID: 16630059

Nous avons cherché à évaluer le potentiel de C17.2 des cellules progénitrices neurales (PNJ) conçu à sécréter le facteur neurotrophique dérivé ligne cellule gliale (GDNF) afin de survivre, de différencier et de promouvoir la récupération fonctionnelle après la prise de greffe dans le cerveau des rats Sprague-Dawley mâles adultes soumis à latéral des lésions cérébrales fluid percussion. Tout d'abord, nous avons démontré la suite expression corticale des éléments récepteurs GDNF (GFRalpha-1, c-Ret), ce qui suggère que le GDNF pourrait avoir un effet physiologique dans la période post-traumatique immédiate. Deuxièmement, nous avons démontré que la surexpression de GDNF réduit la mort apoptotique NPC in vitro. Enfin, nous avons démontré que la survie améliorée de la surexpression de GDNF, promu la différenciation neuronale de GDNF-PNJ à 6 semaines, comparativement aux cellules untransduced de C17.2 (MT), suite à la transplantation dans le cortex et des rats à après lésion de 24h, et que les animaux cerveau-blessés recevant des greffes de GDNF-C17.2 a montré amélioration de l'apprentissage par rapport à ces véhicule récepteur ou cellules MT-C17.2. Nos résultats suggèrent que la transplantation de GDNF exprimant des PNJ dans la période post-traumatique aiguë favorise la survie du greffon, migration, la différenciation neuronale et améliore les résultats cognitifs après traumatisme crânien.

Purkinje Dégénérescence Des Neurones Chez Des Souris Mutantes Nerveux (nr) Est Véhiculée Par Une Voie Métabolique Impliquant Des Excès Activateur Tissulaire Du Plasminogène

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. May, 2006  |  Pubmed ID: 16682647

Purkinje neurones (PNs), les cellules centrales dans les circuits cérébraux et la fonction, constituent une population vulnérable à plusieurs maladies humaines génétiques, malignes, hypoxiques et toxiques. Chez la souris mutante nerveux (nr), la majorité des PNs décèdent dans les semaines postnatales de la quatrième à la cinquième, mais les molécules responsables est inconnue. Tout d'abord, nous révélons une augmentation remarquable de mRNA expression et la concentration protéique dans le cervelet nr de l'activateur tissulaire du plasminogène (tPA), un gène étroitement lié au locus cartographiés mais comme-encore-uncloned nr. Preuve que tPA excessif déclenche la mort PN nr a été obtenue avec organotypiques exprimant le phénotype PN nr, dans lequel un inhibiteur de la tPA a conduit à la survie accrue nr PN. Un antagoniste de la protéine kinase C, un composant en aval dans la voie de la tPA, a également augmenté la survie PN nr. Des cibles supplémentaires en aval dans la voie de la tPA (le channel mitochondrial anionique voltage-dépendants, brain-derived neurotrophic factor et la neurotrophine 3) étaient aussi anormales, en parallèle avec les changements de morphologie mitochondriale PN, la croissance dendritique et synaptogenèse qui culminent dans la nr PN mort et moteur incoordination. Nous proposons donc une voie moléculaire par lequel le tPA excessive dans le cervelet nr intervient dans la dégénérescence PN.

Cellules Souches Neurales Comme Vecteurs Thérapeutiques Cancer Du Roman

European Journal of Cancer (Oxford, England : 1990). Jun, 2006  |  Pubmed ID: 16697638

La ressemblance saisissante d'un grand nombre des comportements des tumeurs cérébrales aux propriétés intrinsèques de la cellule souches/progénitrices neurales a déclenché un intérêt récent double en armant des cellules souches afin de suivre et de contribuer à l'éradication des tumeurs et à l'écoute de la biologie des cellules souches comme en quelque sorte partie intégrante de l'apparition et la propagation de la tumeur elle-même. Ces aspects sont examinés et discutés ici.

Les Cellules Souches Neurales Peuvent être Particulièrement Adaptés Pour Le Remplacement De La Thérapie Et La Cellule Gène Combinée : Preuve De La Prise De La Greffe De Cellules Souches Exprimant Neurotrophine-3 Lésion Cérébrale Hypoxique-ischémique

Experimental Neurology. May, 2006  |  Pubmed ID: 16714016

Auparavant, nous signalé que, lorsque clonales des cellules souches neurales (CNS) ont été transplantées dans le cerveau des souris postnatals, soumis à des blessures (HI) hypoxique-ischémique unilatérale (idéalement de 3 à 7 jours après infarctus du myocarde), cellules dérivées de donateurs hébergement préférentiellement (de même éloignées) à et intégré intensivement dans les grandes zones ischémiques qui a duré de l'hémisphère. Une sous-population de CNS et hôte des cellules, en particulier dans la pénombre, « décalé » leur différenciation vers les neurones et les oligodendrocytes, les types de cellules généralement endommagé suite à une asphyxie et moins probable pour se régénérer spontanément et en quantité suffisante dans le système nerveux central « post-developmental ». Que pas les neurones et les oligodendrocytes quelques ont été générés à partir de CNS dans cortex postnatal intact, a suggéré que nouveaux signaux sont transitoirement élaborés suite HI auquel CNS peuvent répondre. Les neurones de « remplacement » représentaient environ 5 %. Neurotrophine 3 (NT-3) est connu pour jouer un rôle dans l'induction de la différenciation neuronale au cours du développement et peut-être après une blessure. Nous avons démontré que les CNS expriment des récepteurs fonctionnels TrkC. En outre, les cellules du donneur a continué d'exprimer un transgène reporter étranger solidement dans le cerveau endommagé. Par conséquent, il est apparu possible que la différenciation neuronale de CNS exogènes (ainsi que les progéniteurs endogènes) peut-être être améliorée si le donateur CNS ont été conçu avant la transplantation à (sur) exprimant un gène bioactif tels que NT-3. Un sous-clone de CNS transduites avec un rétrovirus codant NT-3 (rendement > 90 % neurones in vitro) a été implanté dans le cerveau de souris unilatéralement asphyxiés postnatal jour 7 (émulation d'une des causes de la paralysie cérébrale). Le sous-clone a NT-3 efficace in vivo. La proportion des neurones NSC dérivés a augmenté d'environ 20 % dans la cavité de l'infarctus du myocarde et > 80 % dans la pénombre. Les neurones distinguent diversement davantage en cholinergiques, GABAergiques et glutamatergiques sous-types, approprié au cortex. Dérivé de donneurs de cellules gliales étaient rares et astroglials cicatrices a été affaiblie. NT-3 probablement fonctionné non seulement sur les cellules du donneur de façon autocrine/paracrine, mais aussi sur les cellules de l'hôte pour améliorer la différenciation neuronale des deux. Pris ensemble, ces observations suggèrent (1) la faisabilité de prendre une réponse biologique fondamentale à l'injure et il augmente à des fins de réparation et (2) l'utilisation potentielle des migrateurs CNS dans certaines conditions dégénératives pour remplacement de thérapie et de la cellule gène combinée simultanée au cours de la même procédure dans le même destinataire à l'aide de la même cellule (une propriété unique de cellules souches comme attributs).

Humaines Neurospheres Dérivés Du Système Nerveux Central Foetal Sont Au Niveau Régional Et Dans Le Temps Spécifié, Mais Ne Sont Pas Validées

Experimental Neurology. May, 2006  |  Pubmed ID: 16714017

Prolifération de cellules individuelles ont été isolés provenant de diverses régions de la CNS (télencéphale, diencéphale, mésencéphale, cervelet, pons et bulbe rachidien et la moelle épinière) des cadavres de foetus humains à 13 semaines de gestation et cultivés comme neurospheres dans les cultures à long terme. Nous avons étudié la question de savoir si des cellules souches neurales (CNS) ou cellules souches dans des sphères ont des caractéristiques spécifiques de régionales ou temporelles en ce qui concerne la croissance, la différenciation et l'expression des gènes spécifiques à une région, et si ces caractéristiques moléculaires sont réversibles. Quel que soit l'origine régionale, tous les neurospheres trouvées à contenir des cellules de différents sous-types, ce qui suggère que les CNS multipotentes, cellules souches ou cellules gliales radiales coexistent avec restreints progéniteurs neurones ou gliales dans le neurospheres. Neurospheres partir du prosencéphale a augmenté plus rapidement et ont donné lieu à sensiblement plus de neurones que fait ceux du cerveau postérieur ou du mésencéphale, et des différences régionales dans la différenciation neuronale semblent être subies lors du passage à long terme des neurospheres dans la culture. Il y avait également une tendance vers une réduction en émergence neuronale de la neurospheres respectifs au fil du temps dans la culture, bien que les pourcentages de neurones générés à partir de dérivés de cervelet neurospheres augmentent de façon spectaculaire. Ces résultats suggèrent que les différences dans la différenciation neuronale pour les divers neurospheres sont déterminées de spatialement et temporellement. En outre, les propriétés de glial fibrillary acidic protein (GFAP), glutamate et l'acide gamma - aminobutyrique (GABA) - exprimant des cellules dérivées de neurospheres des régions respectives CNS semblent être différents au niveau régional et dans le temps. Isolé neurospheres humain des différents compartiments de CNS exprime les marqueurs moléculaires distinctifs de l'identité régionale et maintenues ces modes d'expression de gènes spécifiques à la région durant le passage à long terme in vitro. Pour déterminer le potentiel de neurospheres humain pour la plasticité régional sort, seul sphères de leurs régions respectives ont été cultivées avec des coupes de cerveau de souris embryonnaires jour 16,5 (E16.5 d). Repères spécifiques à partir des tissus de cerveau de souris en développement induit par le neurospheres humain pour exprimer des gènes différents marqueurs d'identité régionale et pour réprimer l'expression des gènes marqueurs de leurs origine. Ainsi, même les identités régionales au début de neurospheres humaine ne peuvent pas être irréversibles et peuvent être modifiées par des signaux inductifs locales. Ces résultats ont des implications importantes pour la compréhension des caractéristiques de croissance et différenciation moléculaire spécification de neurospheres humaine dérivée de la CNS en voie de développement, ainsi que le potentiel thérapeutique pour réparation neuronale.

Lésion Aiguë Ordonne à La Migration, La Prolifération Et La Différenciation Des Cellules Souches Organes Pleins : Preuve De L'effet De L'hypoxie-ischémie Dans Le Système Nerveux Central Sur Les Cellules Souches Neurales Clonale « Reporter »

Experimental Neurology. May, 2006  |  Pubmed ID: 16737696

Les cellules neurales clonales avec des caractéristiques semblables à des souches intègrent convenablement dans les pays en développement et dégénérescence centrale et système nerveux périphérique tout au long de la neuraxis. En réponse à hypoxique-ischémique (HI) blessure, déjà implanté, intégrés, et repos clonales neural stem cells (CNS) réintègre le cycle cellulaire, migrer préférentiellement vers le site de l'ischémie et se différencier en neurones et oligodendrocytes, le cellules neurales types généralement perdu suivant HI crânien transitoirement. Aussi, elles régénèrent l'approvisionnement en cellules souches/progénitrices résident immatures non validées. Bien qu'elles auront des astrocytes, des cicatrices sont inhibée. Ces réponses semblent se produire plus robuste dans une « fenêtre » de 3 à 7 jours HI suivant au cours de laquelle les signaux sont élaborés que réguler positivement programmes génétiques au sein du NSC qui médient prolifération, la migration, la survie et la différenciation, dont la plupart semble être résilié une fois la fenêtre « ferme » et la phase chronique s'ensuit, envoyant les CNS dans un état de repos. Ces idées dérivé en utilisant les cellules souches dans un nouveau rôle--comme une cellule de « reporter »--à suivre et à sonder l'activité des cellules souches endogènes ainsi quant à « interroger » et « signaler » les gènes différentiellement induites par l'aiguë vs milieu chroniquement blessé. CNS peuvent être capables du remplacement des cellules, des gènes et des facteurs non diffusibles de deux manière généralisée ou plus circonscrite (selon les besoins thérapeutiques de la situation clinique). Ils peuvent être particulièrement sensibles à certains types de maladies neurodégénératives. Nous soumettons que ces différentes fonctions sont simplement l'expression normale des propriétés biologiques fondamentale homéostasie-préservation et les attributs d'une cellule souche qui, si utilisé rationnellement et de concert avec cette biologie, peut être exploitée à des fins thérapeutiques.

Numéro Spécial : L'intersection De La Biologie Des Cellules Souches/progénitrices Et Hypoxique-ischémique Cérébral Lésion/accident Vasculaire Cérébral

Experimental Neurology. May, 2006  |  Pubmed ID: 16798271

Résistance Intrinsèque Des Cellules Souches Neurales En Métabolites Toxiques Peut Rendre Bien Adapté Pour Les Troubles Des Cellules Non Autonomes : Evidence from Un Modèle Murin De La Leucodystrophie De Krabbe

Journal of Neurochemistry. Jun, 2006  |  Pubmed ID: 16805770

Alors que les cellules souches neuronales transplantées (CNS) montrent prometteuses pour remplacement cellulaire dans les modèles d'un certain nombre de troubles neurologiques, ces exemples ont généralement été dans des conditions où les cellules de l'hôte deviennent dysfonctionnels en raison d'une étiologie autonome cellule, c'est-à-dire une cellule « malade » au sein d'un environnement relativement favorable. Il a longtemps été jugé que remplacement de cellules dans un milieu toxique serait probablement impossible ; cellules donneuses succomberaient à peu près les mêmes cellules de façon aussi endogènes avaient. De nombreuses maladies métaboliques sont caractérisés par cette situation, ce qui suggère qu'ils seraient pauvres cibles pour les thérapies de remplacement cellulaire. En revanche, les modèles de ces maladies pourraient s'avérer idéales pour tester la capacité pour le remplacement de cellules dans des conditions difficiles. Chez la souris twitcher (twi)--comme dans les patients avec Krabbe ou la leucodystrophie à cellules globoïdes (GLD), pour laquelle il sert un authentique modèle--perte d'activité galactocérébrosidase (GalC) se traduit par l'accumulation de la psychosine, un glycolipide toxique. Souris twi, comme des enfants avec GLD, pièce inexorable détérioration neurologique, probablement à la suite des oligodendrocytes dysfonctionnels et finalement dégénérés avec perte de la myéline. On croit que la physiopathologie GLD est liée à un environnement rempli de psychosine qui tue non seulement les oligodendrocytes hôte mais théoriquement toutes les nouvelles cellules placées dans ce milieu. Grâce à l'implantation des CNS dans le cerveau des souris de twi adultes néonatale et pour enfants/jeunes, nous avons déterminé que la remyélinisation et remplacement de l'oligodendrocyte généralisée est réalisable. CNS semblent être intrinsèquement résistant à la psychosine--plus encore dans leur état indifférencié que lorsque réalisé ex vivo pour devenir des oligodendrocytes. Cette résistance peut être renforcée par les CNS pour surexpriment GalC d'ingénierie. Certains twi souris greffées avec ces CNS machinés avaient plus épais blanc étendues et vécu 2 - 3 fois plus longtemps que prévu. Alors que leur cerveau présentaient des niveaux détectables de GalC, c'était probablement plus importante que leurs niveaux psychosine était plus faibles que chez les souris twi mourut à un âge plus jeune. Ce concept de résistance basée sur l'état de différenciation étendu aux CNS humaines qui pourraient de même survivre dans le cerveau de twi. Pris ensemble, ces résultats suggèrent un certain nombre de points concernant les thérapies cellulaires contre les maladies dégénératives avec une composante non autonome cellule éminents : remplacement cellulaire est possible si les cellules résistantes à l'environnement toxique sont employés. En outre, un aspect important de la réussite du traitement sera probablement non seulement remplacement cellulaire, mais aussi Croix-correction des cellules hôtes pour leur fournir de l'activité de l'enzyme et donc la résistance. Alors que les oligodendrocytes remplacement seul n'est pas un traitement suffisant pour GLD (même si vaste), le remplacement des cellules et molécules--par exemple avec le CNS qui pourraient aussi bien devenir oligodendrocytes et des « pompes » pour GalC--apparaît comme une base prometteuse pour une stratégie multidisciplinaire. Plus les maladies neurologiques sont complexes de cette façon et auront probablement besoin d'approches aux multiples facettes, peut-être avec la CNS agissant comme la « colle ».

Cryoconservation D'un Refroidissement Lent Avec Le DMSO Diminution De La Production De Oct-4 Marker Pluripotence Dans Cellules Souches Embryonnaires Humaines

Cryobiology. Oct, 2006  |  Pubmed ID: 16839540

Nous avons testé un "standard" cryoconservation protocole (refroidissement lent avec le DMSO 10%) sur les cellules souches embryonnaires humaines (CSEh) en ligne H9 contenant un Oct-4 (POU5F1) promoteur-moteur, renforcée protéine fluorescente verte (EGFP) journaliste pour surveiller l'entretien de la pluripotence. Les cellules ont été refroidi à -80 ° C dans des cryotubes puis transféré dans un congélateur à -80 degrés C. Les cellules ont été tenu à -80 degrés C pendant 3 jours («stockage à court terme") ou 3 mois («stockage à long terme"). Flacons ont été décongelés dans un bain d'eau 36 degrés C et les cellules ont été cultivées pendant 3, 7 ou 14 jours. L'iodure de propidium (PI) a été utilisé pour évaluer la viabilité cellulaire par cytométrie en flux. Cellules de contrôle ont été passées le même jour que les cellules congelées ont été décongelées. La majorité des cellules dans les cultures de CSEh contrôle étaient Oct-4, positives et presque 99% de cellules + EGFP étaient vivants tel que déterminé par l'exclusion de la PI. En revanche, les cellules congelées, même après 3 jours de culture, ne contenait que 50% des cellules vivantes, et seulement 10% étaient EGFP-positif. Après 7 jours de culture, la proportion de cellules mortes a diminué et il ya eu une augmentation de la population Oct-4-positive, mais l'examen microscopique a révélé de grandes plaques de EGFP-cellules négatives au sein des grappes de colonies, même après 14 jours de culture. Après 3 mois de stockage à -80 degrés C l'effet délétère de la congélation a été encore plus prononcée: les échantillons retrouvé un nombre quantifiable de cellules positives pour EGFP seulement après 7 jours de culture suivant la décongélation. Il est conclu que de nouveaux protocoles et les médias sont nécessaires pour CSEh congélation et l'entreposage sécuritaire à -80 degrés C ainsi que des études sur les mécanismes liés au stress événements associés à la cryoconservation des cellules.

Les Cellules Souches Neurales Sauver Les Neurones De Purkinje Nerveux En Rétablissant L'homéostasie Moléculaire De L'activateur Tissulaire Du Plasminogène Et De Cibles En Aval

The Journal of Neuroscience : the Official Journal of the Society for Neuroscience. Jul, 2006  |  Pubmed ID: 16870729

Des cellules souches neurales (CNS) offre spécial perspectives thérapeutiques car ils peuvent être isolés dans le SNC, expansion ex vivo et réimplantés dans SNC malade où ils non seulement migrent et se différencient selon les repères à partir de tissus de l'hôte mais semblent aussi être susceptible d'affecter les cellules hôtes. Dans le neurone de Purkinje nerveux (nr) souris mutantes mitochondries (PN) deviennent anormales de la deuxième semaine après la naissance et une majorité de PNs meurent dans les 4 à 5 semaines. Nous avons identifié précédemment dans le cervelet nr un décuplement de l'activateur tissulaire du plasminogène (tPA) constitue un élément clé du mécanisme causant la mort PN nr. Nous rapportons ici qu'indifférenciées sauvage murines CNS, lorsque transplantés dans le cortex cérébelleux nr nouveau-né, ne pas remplacer l'hôte PNs mais contacter PNs en péril et soutenir leur fonction mitochondriale, la croissance dendritique et synaptogenèse, par la suite menant à la rescousse d'hôte PNs et restauration de coordination motrice. Cette protection de nr PNs est également vérifiée par un modèle organotypique in vitro de tranches où les tranches de cervelet de nr sont co-cultivées avec CNS. Plus important encore, les CNS intégrés dans le cervelet nr jeune rectifier tPA excessive ARNm et protéines pour fermer à des niveaux normaux et de protéger la voie mitochondriale anionique voltage-dépendants et les neurotrophines, cibles en aval du système protéolytique tPA/plasmine. Ce rapport démontre pour la première fois que CNS peuvent sauver les neurones de l'hôte en péril en remédiant à leur expression de gène, élevant des cellules souches somatiques potentiel thérapeutique au-delà uniquement les stratégie de remplacement cellulaire.

Définir La Réelle Sensibilité Et Spécificité Du Test Neurosphère En Biologie Des Cellules Souches

Nature Methods. Oct, 2006  |  Pubmed ID: 16990812

Pour plus d'une décennie le 'test Neurosphère"a été utilisé pour définir et mesurer le comportement des cellules souches neurales (NSC), avec des analyses similaires utilisés maintenant dans d'autres systèmes d'organes et le cancer. Nous avons demandé si les neurospheres sont des structures clonales dont diamètre, le nombre et la composition reflètent exactement la prolifération, l'auto-renouvellement et la multipotentialité d'une NNC fondateur unique. À l'aide de la microscopie vidéo time-lapse, expériences de coculture avec des cellules génétiquement marquées et l'analyse du volume des sphères, nous avons observé que les neurospheres sont fortement motiles structures sujettes à fusible même dans des conditions de culture ostensiblement « clonal ». Neurospheres chimériques ont été répandue indépendant des âges, des espèces et des structures neurales. Ainsi, la dynamique intrinsèque de neurospheres, dosés conventionnelle, introduit des facteurs de confusion. Des conditions plus précises (par exemple, une cellule unique par palette de placage) sera cruciales pour évaluer la clonalité et nombre de sort des cellules souches. Ces mises en garde ont probablement des incidences sur l'utilisation de « cytosphères » comme un test dans d'autres systèmes d'organes et d'autres types de cellules, normales et néoplasiques.

Interactions Adhésives Entre Cellules Souches Neurales Humaines Et Enflammé Endothélium Vasculaire Humain Sont Médiées Par Les Intégrines

Stem Cells (Dayton, Ohio). Nov, 2006  |  Pubmed ID: 17071855

Comprendre les mécanismes par lesquels les cellules souches chez précisément aux régions de blessure ou de la dégénérescence de l'importance pour la médecine régénérative à la fois fondamentale et appliquée. Optimisation des processus de régénération peut dépendre de l'identification de la gamme de molécules que le trafic de subserve sur les cellules souches. Le «roulement» des cellules sur l'endothélium extravasating dans des conditions d'écoulement physiologique est la première étape essentielle dans la cascade de ralliement et détermine l'adhésion cellulaire et de la transmigration. En utilisant une chambre à flux laminaire pour simuler physiologique contrainte de cisaillement, nous avons exploré un aspect de ce processus en utilisant des cellules souches neurales (hNSCs). Nous avons observé que les interactions entre hNSCs et facteur de nécrose tumorale-alpha (TNF-alpha) stimulée par l'endothélium humain (simulant un milieu inflammatoire) sont médiés par une sous-classe des intégrines - alpha2, alpha6, et beta1, mais pas alpha4, alphaV, ou la voie de chimiokine CXCR4-médiée des cellules stromales-derived factor-1alpha - suggérant que non seulement les mécanismes de médiation hNSC homing via le système vasculaire diffèrent des mécanismes de médiation par le biais de ralliement du parenchyme, mais aussi que chaque étape invoque une voie distincte de médiation une institution spécialisée fonction dans la cascade hNSC homing. (TNF-alpha régule à la hausse également la stimulation vascular cell adhesion molécule-1 d'expression sur les hNSCs eux-mêmes et les augmentations NSC-endothéliales des interactions.) L'utilisation sélective de sous-groupes de l'intégrine à la médiation domiciliation des cellules d'origine neuro-ectodermique peut également être utilisé pour s'assurer que les cellules au sein de la circulation systémique sont livrés à la région pathologique d'un organe donné, à l'exclusion des autres, peut-être indésirables, les organes.

Le Bord D'attaque De Stem Cell Therapeutics

Annual Review of Medicine. 2007  |  Pubmed ID: 17100553

Les cellules souches, en raison de leur propriété de définition d'autorenouvellement, représentent une source illimitée des cellules humaines potentiellement fonctionnels pour la recherche fondamentale et la médecine régénérative. Après avoir validé la faisabilité des stratégies thérapeutiques basés sur les cellules ces dix dernières années, surtout grâce à l'utilisation des cellules de rongeurs, le domaine des cellules souches a maintenant entrepris une caractérisation détaillée de cellules humaines. Récents progrès a inclus des conditions de culture cellulaire améliorée, propagation à long terme, une différenciation dirigée et transplantation des deux cellules souches embryonnaires et somatiques. Des progrès continus dans la compréhension de la biologie de base les cellules souches humaines, combinée avec une meilleure poignée sur la fondamentale physiopathologie des maladies humaines, l'on veut cibler y compris (l'utilisation de cellules souches humaines primates) et d'autres grands modèles animaux de maladies humaines, devraient contribuer à déplacer cette application plus proche de la clinique de la technologie.

Réparation Du Cerveau Quo Vadis ? Un Voyage Long Axonal Dans Le SNC Adult

Cell Stem Cell. Oct, 2007  |  Pubmed ID: 18371370

Récemment dans la revue Nature Neuroscience, Gaillard et coll. (2007) étude des projections axonales des explants corticale embryonnaires greffées à aiguë endommagé adulte cortex moteur. Après avoir tenté d'écarter la possibilité de fusion du tissu donneur préexistantes des circuits de l'hôte, les auteurs rapportent les projections axonales robuste donneur sur de longues distances et intégration synaptique dans des régions cibles appropriées pour le système moteur.

Une Ligne Nouvelle, Immortel Et Multipotentes Cellules Souches Neurales Humaines Générant Des Oligodendrocytes Et Des Neurones Fonctionnels

Stem Cells (Dayton, Ohio). Sep, 2007  |  Pubmed ID: 17556596

La découverte et l'étude des cellules souches neurales ont révolutionné notre compréhension du processus neurogénétique et leur capacité inhérente d'adopter le comportement de croissance expansive in vitro est d'une importance primordiale pour le développement de nouvelles thérapeutiques basées sur le remplacement de cellules neurales. Les progrès récents dans les essais de haut débit pour la découverte de gène et de développement de médicaments dictent la nécessité d'une expansion rapide, reproductible, à long terme des cellules souches neurales (hNSCs). Dans cette perspective, le complément de lignées cellulaires de type sauvage actuellement disponibles est insuffisant. Nous décrivons ici la mise en place d'une ligne stable cellules souches neurales humaines (immortalisées CNS humaines [IhNSCs]) par v-myc-mediated immortalisation de hNSCs précédemment dérivée de type sauvage. Ces cellules démontrent, de trois à quatre fois la prolifération plus rapide que les cellules de type sauvage en réponse aux facteurs de croissance, mais conservent des propriétés plus ou moins similaires, notamment multipotentiality. En biologie moléculaire, biochimie, immunocytochimie, microscopie de fluorescence et en électrophysiologie, nous montrons que, lors du retrait du facteur de croissance, IhNSCs complètement hyporéactivité expression de v-myc, cesser la prolifération et se différencient en phase terminale en trois lignées principales de neurones : les neurones, astrocytes et oligodendrocytes. Ces derniers sont fonctionnelles, les cellules matures affichage claires des caractéristiques morphologiques et physiologiques des incurables différenciées neurones, qui englobe surtout les GABAergique glutamatergique et phénotypes cholinergiques. Enfin, IhNSCs produire de véritables oligodendrocytes dans les fractions jusqu'à 20 % du nombre total de cellules. Cette méthode diffère la propension négligeable de hNSCs pour générer des oligodendrocytes signalés jusqu'à présent. Ainsi, les auteurs décrivent une ligne HNS immortalisées dotée de propriétés de hNSCs normal et appropriée pour développer le roman, essais fiables et reproductible gène haut débit et dépistage des drogues qui sont indispensables dans les diagnostics et études de thérapie cellulaire.

Amélioration Comportementale Dans Le Modèle Du Parkinson, Un Primat Est Associée à Plusieurs Effets Homéostatiques De Cellules Souches Neurales Humaines

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Jul, 2007  |  Pubmed ID: 17586681

Les cellules souches ont été largement supposés pour être capable de remplacer les cellules perdues ou endommagées dans un certain nombre de maladies, y compris la maladie de Parkinson (MP), dans laquelle les neurones de la filière de la substantia nigra (SN) et ne parviennent pas à fournir le neurotransmetteur, la dopamine (DA), dans le striatum. Nous rapportons qu'indifférenciées humains cellules souches neurales (hNSCs) implantés dans les primates parkinsoniens 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine-treated a survécu, ont émigré, et avait un impact fonctionnel tels qu'évalués quantitativement l'amélioration comportementale dans ce modèle DA-déficit, à qui les parkinsoniens signe directement correspondent aux niveaux réduits de DA. Un petit nombre de descendants de HNS différenciées en tyrosine hydroxylase (TH) et/ou de la dopamine (DAT) de transporteur immunopositifs cellules, ce qui suggère que le microenvironnement dans et autour de l'hôte adulte lésé SN permet encore de développement d'un phénotype de DA de cellules progénitrices sensible. Un nombre beaucoup plus important de cellules dérivées de HNS qui n'exprimaient pas neuronale ou marqueurs DA se trouvait disposés le long du chemin sont persistants, juxtaposé à des cellules hôtes. Ces hNSCs, qui expriment les facteurs DA-protection, étaient donc bien placés pour influencer les cellules hôtes TH + et médiation autres ajustements homéostatiques, comme en témoigne un retour endogène ratios neuronal de nombre à la taille base, préservation des circuits sont hôte existantes et un effet normalisant sur l'agrégation de l'alpha-synucléine. Nous proposons que les multiples modes d'interaction réciproque entre hNSCs exogène et le milieu hôte pathologique sous-tendent l'amélioration fonctionnelle observée dans ce modèle de PD.

Les Cellules Souches Neuronales Injectées Dans La Cochlée Endommagée Son Migrer Tout Au Long De La Cochlée Et Les Marqueurs Expresses Des Cellules Ciliées, Soutenant Les Cellules Et Les Cellules De Ganglion Spiral

Hearing Research. Oct, 2007  |  Pubmed ID: 17659854

Plupart des cas de surdité sont causés par la mort ou un dysfonctionnement de l'un des nombreux types de cellules cochléaires. Nous avons examiné si les cellules d'une lignée de cellules souches neurales pourraient remplacer les types de cellules cochléaires perdus après l'exposition au bruit intense. À cette fin, nous transplantés une ligne clonale de cellules souches dans les timbales scala sonore endommagé des souris et des cobayes. Utilisant morphologiques, expression de la protéine et critères génétiques, les cellules souches ont été trouvés avec les caractéristiques des deux tissus nerveux (satellite, ganglion spiral et les cellules de Schwann) et les cellules de l'organe de Corti (cellules ciliées, cellules de soutien). En outre, des animaux exposés au bruit, l'injection de cellules souches ont montré une augmentation faible mais significative du nombre de cellules satellites et Type j'ai spirale neurones ganglionnaires par rapport aux non-injecté des animaux exposés au bruit. Ces résultats indiquent que les cellules de cette lignée de cellules souches neurales migrent de timbales des scala à canal de Rosenthal et l'organe de Corti. De plus, ils suggèrent que les cellules de cette lignée de cellules souches neurales peuvent dériver certaines informations nécessaires depuis le microenvironnement de la cochlée se différencier en cellules de remplacement dans la cochlée.

Implantation De Cellules Souches Neurales Prolonge La Vie Chez Les Souris De Niemann-Pick C1

Journal of Applied Genetics. 2007  |  Pubmed ID: 17666780

Afin d'évaluer les effets phénotypiques d'implanté des cellules souches neurales (CNS) dans le modèle murin de la maladie de Niemann-Pick C (NPC), nous injecter un clone bien caractérisé des CNS murines le sembable Npc1(-/-) néonatale et des souris témoins. Les cellules implantées ont survécu et ont été abondantes dans certaines régions du cervelet. Durée de vie était allongée en souris NPC avec les CNS implantés. Toutefois, le taux de gain de poids et perte de poids ultérieure résultant de neurodégénérescence, n'était pas significativement différent de contrôles un-injected. Ataxie a été mesurée par la performance de la tige tournante. Le taux de déclin dans le temps sur la tige tournante n'était pas significativement ralenti. Ainsi, dans ce petit groupe de souris NPC, une seule administration dans la période néonatale des CNS (qui étaient pas conçues pour surexpriment le gène manquant et pas dirigé dans le parenchyme) était seulement partiellement thérapeutique.

La Transplantation De Cellules Progénitrices Neurales Et Imagerie Dans Un Modèle Animal Grand

Neuroscience Research. Nov, 2007  |  Pubmed ID: 17897743

Pour évaluer la thérapie de transplantation cellulaire (NPC) de souches/progénitrices neurales dans des maladies neurodégénératives, les modèles de chat, nous avons isolé, élargi et caractérisé féline PNJ (fNPCs) de cerveau de chat foetal normal. Félines PNJs sensibles à la fois facteur de croissance épidermique humain (hEGF) et le facteur de croissance de fibroblaste humain 2 (hFGF2) se sont multipliés comme neurospheres, qui ont été en mesure de différencier les neurones et les cellules gliales. L'analyse des facteurs de croissance, a indiqué que les hEGF et hFGF2 sont requis pour la prolifération des fNPCs. Contrairement à l'effet sur les PNJs humaines, facteur inhibiteur de la leucémie humaine (hLIF) amélioré de différenciation des fNPCs. FNPCs expansés ont été injectées dans le cerveau des chats adultes normaux. L'analyse immunohistochimique a montré que la majorité des cellules transplantées se trouvaient adjacent au site d'injection et certains fNPCs se différencient en neurones. La survie des transplantés fNPCs au fil du temps a été suivie à l'aide d'une technologie d'imagerie non invasive bioluminescente. Cette étude fournit la première preuve d'allotransplantation de fNPCs dans SNC féline. Les chats ont des origines génétiques hétérogènes et possèdent des maladies neurologiques qui ressemblent beaucoup à des maladies humaines analogues. La caractérisation des fNPCs et exploration d'imagerie bioluminescente non invasif pour effectuer le suivi des cellules transplantées dans cette étude permettra à évaluation de la thérapie de transplantation de NPC en utilisant des modèles félines de maladies neurologiques.

Injection De Souris Et L'homme Des Cellules Souches Neurales Dans Néonatale Niemann-Pick A Modèle De Souris

Brain Research. Apr, 2007  |  Pubmed ID: 17289003

Souris clonée C17.2 neural stem cells (CNS) ou CNS humaines ont été injectées dans cinq sites CNS en très grand nombre (100 000 cellules/site, soit un total de 500 000 cellules) dans 18 souris néonatales homozygotes pour une suppression ciblée (knockout) du gène de la sphingomyélinase acide (ASM) (appelé souris ASMKO), un modèle fidèle des humaine Niemann-Pick type une (NP-A) maladie et 10 chez la souris sauvage, tout sur le fond de C57BL/6J. Injecté de souris ne sont pas immunodéprimés et tous ont survécu à l'âge adulte. Injection non ASMKO contrôles avaient développé une vacuolisation neuronale et gliale généralisée et accumulation lysosomiale de sphingomyéline et cholestérol lorsque examinés histologiquement à 16 semaines d'âge. Contrairement aux enfants atteints de maladie de NP-A, les souris ASMKO aussi perdent progressivement les neurones de Purkinje cérébelleuses sont ataxiques et montrent une baisse progressive parallèle dans rotorod performance. À 16 semaines, NSC-injecté des souris ont montré une diminution dramatique de vacuolisation neuronale et gliale (par coloration histologique standard) et à l'accumulation de cholestérol (par filipin fluorescence coloration) partout dans le néocortex cérébral, le formation hippocampique, le striatum et le cervelet, avec moindre mais nette amélioration tout au long du tronc cérébral. Amélioration a été modestement mais toujours mieux dans l'homme HFT13 injection que chez des souris injectées C17.2 ASMKO souris. Amélioration dans le cerveau ASMKO était plus répandue que la distribution des CNS, une indication que ASM doit avoir été sécrétée et diffusée aux concentrations thérapeutiques au-delà du territoire occupé par les CNS. Cependant, bien que les cellules de Purkinje sauvetage a été réalisé avec la CNS dans certains autres modèles de la maladie, perte de neurones de Purkinje et baisse du rendement de rotorod étaient encore présents dans la souris injectées de ASMKO.

Cellules Souches Agissent Par Des Mécanismes Multiples Au Profit De Souris Atteintes Neurodégénératives Maladie Métabolique

Nature Medicine. Apr, 2007  |  Pubmed ID: 17351625

Intracrânienne transplantation de cellules souches neurales (CNS) retardé l'apparition de la maladie, préservé de la fonction motrice, réduit la pathologie et prolonge la survie dans un modèle murin de la maladie de Sandhoff, un gangliosidosis létale. Bien que dérivé donneur neurones étaient rhinophore actifs au sein de régions chimériques, faible degré de remplacement neuronale seul pourrait expliquer pas l'amélioration. CNS également une augmentation des concentrations de bêta-hexosaminidase cerveau, réduit le stockage ganglioside et diminué microgliose activés. En outre, lorsque glycosphingolipide orale inhibiteurs de biosynthèse (inhibiteurs de la bêta-hexosaminidase substrat) ont été combinées avec la transplantation de NSC, synergie importante a abouti. Efficacité prolongée aux CNS humaines, aussi bien à ceux qui sont isolés directement depuis le système nerveux central (SNC) et à celles obtenues à partir de cellules souches embryonnaires secondairement. Appréciant que les CNS présentent un vaste répertoire d'actions potentiellement thérapeutiques, dont le remplacement neuronale est mais un, peut aider à élaborer des stratégies multimodales rationnelles pour le traitement des maladies neurodégénératives.

Isolement D'amniotique Lignées De Cellules Ayant Un Potentiel Pour La Thérapie

Nature Biotechnology. Jan, 2007  |  Pubmed ID: 17206138

Cellules souches capables de distinguer de multiples lignées peuvent être utiles pour la thérapie. Les auteurs rapportent l'isolement de cellules humaines et rongeurs amniotique liquide dérivé souches (AFS) qui expriment des marqueurs de cellules souches embryonnaires et adultes. Les cellules indifférenciées AFS développer intensivement sans mangeoires, doubles en 36 h et ne sont pas tumorigènes. Lignes maintenues pendant plus de 250 doublements de population retenu des télomères longs et un caryotype normal. Les cellules de l'AFS sont largement multipotentes. Clonales lignées humaines vérifiées par marquage rétroviraux ont été induites à se différencier dans les types de cellules qui représente chaque couches germinales embryonnaires, y compris les cellules d'adipocytaire, ostéogénique, myogène, endothélial, lignées neuronales et hépatiques. Les exemples de cellules différenciées provenant de cellules humaines de AFS et l'affichage des fonctions spécialisées des cellules neuronales lignée sécrétant le neurotransmetteur L-glutamate ou exprimant la G-protéine-dépendants des canaux de potassium vers l'intérieur rectifiant, cellules hépatiques lignée production d'urée et des cellules de la lignée ostéogénique formant tissulaire osseuse.

Modification Génétique De Cellules Souches Neuronales

Molecular Therapy : the Journal of the American Society of Gene Therapy. Mar, 2008  |  Pubmed ID: 18253153

Les cellules souches neurales (CNS) sont le principal vecteur de thérapies génétiques et moléculaires dans le système nerveux central (CNS). La durabilité des CNS a été assurée par le biais de la manipulation génétique in vitro et in vivo. Lignes de NSC ont été immortalisées et contrôlées pour la croissance des cellules de la même façon. Leur potentiel à se différencier et leur plasticité génétique font la modalité de choix pour la transplantation cellulaire. Après la transplantation, CNS présentent également des capacités inhérentes de migratrices sur de longues distances et une remarquable capacité à intégrer dans les structures du cerveau. Cela rend CNS le candidat idéal pour la livraison et l'expression des gènes thérapeutiques. Modèles murins de maladies CNS ont déjà démontré l'efficacité d'un tel traitement induite par le NSC, et autres enquêtes sont en cours pour combler le fossé en véritable application clinique. Enfin, les possibilités d'imagerie avec NSC greffes sont infinies, et ils seront un élément central pour la transplantation humaine sûr et efficace. Ce document donne un aperçu sur les CNS et les différentes méthodes dans lesquelles ils ont été manipulés génétiquement pour étude biologique.

Stem Cell-mediated Régénération Du Disque Intervertébral : Défi Cellulaire Et Moléculaire

Neurosurgical Focus. 2008  |  Pubmed ID: 18341398

Cellules souches et médecine régénératrice sont très prometteurs pour les maladies des disques intervertébraux (IVD). Les implications thérapeutiques de l'utilisation des cellules souches pour réparer les disques dégénérés et traiter les maux de dos sont très attendues par les communautés scientifiques et cliniques. Bien que l'environnement avasculaire de la DIV constitue un défi pour la régénération induite sur les cellules souches, les cellules s'ont été découverts dans les disques dégénérés, permettant aux scientifiques de revisiter l'environnement hostile de l'IVD comme cible pour la thérapie de cellules souches. Les questions maintenant sous enquête comprennent le calendrier de livraison de la cellule et la manipulation des cellules souches pour les rendre plus efficaces et adaptative dans le créneau de l'IVD. Cet examen porte sur les mécanismes qui sous-tendent la dégénérescence discale, mais aussi les défis moléculaires et cellulaires impliqués dans la direction de cellules souches pour le type de cellule souhaitée pour la transplantation intradiscal.

Cellules Souches Tumorales Et La Microenvironmen De La Tumeur Du Cerveau

Neurosurgical Focus. 2008  |  Pubmed ID: 18341404

Les progrès récents dans la recherche sur les cellules souches et de la neurobiologie développementale ont découvert de nouvelles perspectives permettant d'enquêter sur les diverses formes de cancer. Plus précisément, l'hypothèse que les tumeurs se composent d'une sous-population de cellules malignes semblables aux cellules souches est d'un grand intérêt pour les scientifiques et les cliniciens et a été surnommé le « hypothèse de cellules souches du cancer. » La région dans laquelle cette affirmation est le plus pertinente est l'intérieur du cerveau. Les cellules souches cancéreuses ont été isolées de tumeurs au cerveau qui présentent des caractéristiques de la différenciation et la prolifération normalement ne vu que dans les cellules souches neurales. Ces cellules souches de cancer peuvent être responsables de la prolifération, la survie et l'origine de la tumeur. En outre, ces cellules doivent être considérées au sein de leur microenvironnement immédiat lors de l'étude des mécanismes de la tumorigenèse. Preuve du cerveau tumeur des cellules souches est revu ainsi que le rôle de l'environnement de la tumeur comme le contexte dans lequel ces cellules doivent être comprises.

Les Cellules Souches Neurales Humaines Migrent Le Long De La Voie Sont Dans Un Modèle De Primate De La Maladie De Parkinson

Experimental Neurology. Jun, 2008  |  Pubmed ID: 18394605

Bien que la preuve de migration axés sur les dégâts d'un cellules souches neurales (NSC) a été bien documenté dans les rongeurs, à notre connaissance, il n'a jamais été confirmé ou quantifiées à l'aide humaine NSC (HNS) dans une modélisation d'un état de maladie neurodégénérative humaine de primates non humains adultes. Dans ce rapport, nous tentons de fournir cette confirmation, potentiellement faire progresser les concepts de base des cellules souches vers la pertinence clinique. hNSCs ont été implantées dans le noyau caudé (bilatéral) et la substantia nigra (unilatéralement) de 7, adultes St. Kitts African green singes (Chlorocebus sabaeus) avec une exposition antérieure à 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine systémique (MPTP), une neurotoxine qui perturbe la dopaminergiques sont voie. Une analyse quantitative détaillée des flux migratoires de HNS à deux points dans le temps (4 à 7 mois) après la transplantation a été réalisée. Cartographie contour de densité des hNSCs le long des axes dorsale-ventral et médial-latéral du cerveau suggère que > 80 % des hNSCs ont migré depuis le point d'implantation et le long de la voie sont affaiblies. Bien que les 2/3 des hNSCs ont été transplantés dans le noyau caudé, < 1 % de cellules injectées total 3x10(6) ont été identifiés à ce site. Le HNS migration ne semble pas envisager une lignée neuronale. Dans la voie du striatum et sont, mais pas dans la substantia nigra, certains hNSCs se sont avérées ont pris une lignée gliale. La propriété des cellules souches neurales s'aligner le long d'une voie neurale rendue dysfonctionnelle par une maladie donnée est potentiellement un précieux outil clinique.

Transplantation De Cellules Souches Neurales Dans Le Cerveau De Souris

Current Protocols in Neuroscience / Editorial Board, Jacqueline N. Crawley ... [et Al.]. Jan, 2008  |  Pubmed ID: 18428671

Les cellules souches neurales (CNS) sont les cellules engagés plus primordiaux, moins du système nerveux, et greffe de ces cellules multipotentes tient la promesse d'une thérapie régénératrice pour de nombreuses maladies du système nerveux central (SNC). Cette unité décrit des méthodes pour la transplantation dans le cerveau de souris adultes, cerveau embryonnaire de souris et souriceaux nouveau-nés NSC. Une description des options pour la détection des cellules du donneur étiquetées dans le cerveau de souris implantée est fournie avec un protocole d'exemple pour la détection des cellules exprimant le gène lacZ in situs. On trouve également un protocole pour la préparation des CNS à la transplantation.

L'inflammation Comme Un Entremetteur : Revisiter La Fusion Cellulaire

Nature Cell Biology. May, 2008  |  Pubmed ID: 18454127

Livraison De Cellules Souches Neurales De La Moelle épinière Dans Un Modèle Ovin De La Chirurgie Fœtale Pour Le Spina Bifida

Surgery. Sep, 2008  |  Pubmed ID: 18707035

Nous introduisons la notion de prestation prénatale les cellules souches neurales (NSC) à la moelle épinière comme adjuvant pour réparation foetale du spina bifida.

Préparation De Autogène Cellules Nourricières Humaines Pour La Croissance Des Cellules Souches Embryonnaires Humaines

Current Protocols in Stem Cell Biology. Mar, 2008  |  Pubmed ID: 18770638

Cellules souches embryonnaires humaines (CSEh) qui sont actuellement distribuées en vertu de directives du NIH, ainsi que beaucoup de ceux qui ne sont pas sur le registre des NIH, ont été dérivées et maintenues en coculture avec la croissance des fibroblastes embryonnaires de souris arrêtés (MEF). L&#39;utilisation de ce système de soutien de la souris peut compromettre le potentiel thérapeutique de ces CSEh en raison du risque de transmission xenopathogens. Sinon, pour réduire ce risque, les méthodes de culture aux CSEh indifférenciées sur autologues CSEh dérivées des couches nourricières de l&#39;homme ont été mis au point. Ce système de cellules nourricières provenant de CSEh prolonge avec succès la croissance des CSEh indifférenciées et élimine les facteurs de risque et les préoccupations concernant l&#39;utilisation xénogéniques ou inconnus mangeoires allogéniques. Dans cette unité, nous fournissons les protocoles nécessaires pour un système d&#39;alimentation humaine autogène qui soutient efficacement la croissance CSEh et maintien de la pluripotence. Curr. Protocole. Tige Cell Biol. 04:01 C.5.1-1C.5.15. (C) 2008 par John Wiley &amp; Sons, Inc

Cellules Souches/progénitrices Neurales Modulent La Réponse Immunitaire En Supprimant Les Lymphocytes T Avec L'oxyde Nitrique Et La Prostaglandine E2

Experimental Neurology. Mar, 2009  |  Pubmed ID: 19109951

Nous et autres avons rapporté que les cellules souches/progénitrices neurales (CNS) pourraient exercer une activité anti-inflammatoire directe. Cette action a été attribuée, en partie, à la suppression des cellules T. Cependant, comment les lymphocytes deviennent supprimées par CNS ne sont pas résolue. Dans cette étude, nous avons exploré un de ces mécanismes et a contesté certaines hypothèses précédemment avancées s'agissant de répression de lymphocytes induite par le NSC sous-jacent. Nous avons utilisé un système facilement observable et balayages dans laquelle les lymphocytes T activés et non activés étaient cultivés avec un clone bien caractérisé stable des CNS murines exprimant le gène lacZ. Comme les précédents, les CNS trouvées pour inhiber la prolifération des lymphocytes T. Toutefois, cette inhibition par CNS n'était pas en raison de la suppression de l'activation des cellules T ou d'induction de l'apoptose des lymphocytes T au cours de l'étape d'activation précoce. Des niveaux élevés de l'oxyde nitrique (NO) et la prostaglandine E2 (PGE2) ont été induites chez le T cellules quand co-culture avec des CNS. En outre, NOS inductibles (iNOS) et microsomique type 1 EGP (mPGES-1) ont été facilement détectable dans le CNS en co-culture avec des T-cellules, mais pas du tout dans le CNS cultivés seuls ou dans les cellules de T cultivées avec ou sans CNS activées. Cette constatation suggère que les lymphocytes T activés induit pas et la production de PGE2 dans les CNS. En outre, prolifération des lymphocytes T inhibée par co-culture avec les CNS a été considérablement restaurée par les inhibiteurs non et la production de PGE2. Par conséquent, CNS semblent supprimer T-cellules, au moins en partie, par non et production de PGE2 qui, à son tour, pourrait expliquer la réduction bien documentée de l'immunopathologie du système nerveux central par transplantés CNS.

Les Lignées De Cellules Précurseurs Neurales Promouvoir La Ramification Des Neurites

The International Journal of Neuroscience. 2009  |  Pubmed ID: 19116829

Les cellules de Schwann et de cellules progénitrices primaire amélioreront la régénération à travers les défauts des nerfs périphériques. Cette étude a examiné l'incidence des cellules précurseurs neurales immortalisés sur la régénération des défauts de nerf de rat. À travers 10 mm lacunes, neurinomes forment sans câbles neurales avec C17.2 - ou RN33B-transplantation de cellules, mais neurales câbles formés à travers 5 mm lacunes ensemencées avec des cellules RN33B. In vitro, neurites des ganglions de la racine dorsale allongées Schwann et RN33B cellules ; RN33B cellules induit des neurites ramification avec excroissance totale plus courte. Formation câble neural in vivo a été probablement déterminée par l'équilibre de l'orientation et les facteurs induisant la branche sécrétée par Schwann et transplanté des cellules précurseurs.

Rôle De Monocyte Chemoattractant Protein-1 (MCP-1/CCL2) Dans La Migration Des Cellules Progénitrices Neurales Vers Des Tumeurs Gliales

Journal of Neuroscience Research. May, 2009  |  Pubmed ID: 19125409

Cellules progénitrices neurales (PNJ) ont été étudiés comme des vecteurs potentiels pour le traitement de tumeur cérébrale parce qu'ils auraient dû être divulgués pour migrer vers le système nerveux central gliomes et peuvent être génétiquement conçus pour offrir des agents cytotoxiques aux tumeurs. Les mécanismes qui régulent la migration des PNJ pour les tumeurs ne sont pas totalement comprises. Par microarray analysis, réaction en chaîne par polymérase, enzyme-linked immunosorbent assay et immunohistochimie, nous avons constaté que monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1/CCL-2) a été exprimé dans les cellules de tumeur du cerveau expérimentale in vivo et in vitro. CCR2, le récepteur de la MCP-1, ont été exprimées sur les PNJs C17.2. Nous avons utilisé un dosage de chambre de Boyden mis à jour l'et trouvé la migration accrue des PNJs in vitro en réponse à la MCP-1. Au moyen d'un modèle in vivo pour la migration de la PNC, nous avons trouvé preuve de migration NPC vers ces champs d'infusion de MCP-1 dans le cerveau de rat. Une compréhension des mécanismes de migration NPC peut servir à améliorer la prestation des agents cytotoxiques aux cellules de tumeur de cerveau.

Découverte D'un Complexe De Protéines Fonctionnelles De La Nétrine-4, Chaîne Gamma1 Laminine Et Intégrine Alpha6beta1 Dans Les Cellules Souches Neurales De Souris

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Feb, 2009  |  Pubmed ID: 19193855

Interactions moléculaires et cellulaires, coordonner l'origine et le destin des cellules souches neurales (CNS) dans le cerveau adulte sont loin étant entendu. Nous présentons un complexe protéique de cette prolifération des contrôles et la migration des adultes CNS destinés au bulbe olfactif de la souris (OB). Sélection combinatoire, basée sur la technologie d'affichage de phage a révélé un complexe auparavant non reconnu entre la protéine soluble nétrine-4 et la laminine gamma1 sous-unité qui active à son tour un alpha6beta1 intégrine-mediated signaling pathway in CNS. différenciation des CNS est accompagnée d'une diminution des récepteurs de la nétrine-4, indiquant que la nétrine-4 participe à la propagation continue de cette population de cellules souches. Notamment, les cellules souches elles-mêmes ne synthétisent pas la nétrine-4. En outre, nous montrons que la nétrine-4 est produit par les astrocytes GFAP-positive sélectionnés situés à proximité de nouveaux neurones migrant dans la partie antérieure du flux migratoire rostral (RMS) et au sein de l'ob. Nos résultats présentent un mécanisme moléculaire unique médiation diaphonie astrocytaires/neuronale qui régule la neurogenèse en cours dans le système olfactif adulte.

Neuro-imagerie Comme Base Pour La Thérapie Rationnelle Des Cellules Souches

Pediatric Neurology. Mar, 2009  |  Pubmed ID: 19218036

Néonatale cérébrale hypoxique-ischémique globaux ou focal demeure une condition fréquente et dévastatrice, avec graves séquelles à long terme. Une question importante dans tout essai clinique néonatale des agents neuroprotecteurs a trait à l'élaboration des mesures précises de la gravité des blessures, ainsi que des mesures adéquates de la réponse au traitement. Techniques avancées d'imagerie par résonance magnétique peuvent acquérir des données en série et non invasives sur la structure du cerveau, l'activité métabolique et la réponse au traitement des blessures. Ces méthodes d'imagerie doivent validation dans des modèles animaux appropriés pour les études de recherche translationnelle chez le nouveau-né humain. Cette revue décrit plusieurs approches qui utilisent l'imagerie ainsi que la spectroscopie de résonance magnétique protonique pour évaluer la gravité de la lésion ischémique (par exemple, pour la sélection des candidats possibles) et de surveillance de la progression et l'évolution des dommages au fil du temps et comme indicateur de réponse au traitement ou de récupération. Les données préliminaires sont présentées sur comment l'imagerie peut être utilisé après l'implantation de cellules souches neurales pour caractériser le taux de migration, l'ampleur de la prolifération des cellules souches et leur emplacement final. L'imagerie a le potentiel pour permettre une surveillance des multiples dimensions de traitements neuroprotecteurs et est susceptible de contribuer à l'efficacité et la sécurité lors des essais cliniques utilisant des cellules souches neurales ou autres agents neuroprotecteurs deviennent disponibles.

La Dynamique De L'expression De Transgènes à Long Terme Dans Les Cellules Souches Neurales Implantées

The Journal of Comparative Neurology. Jul, 2009  |  Pubmed ID: 19399895

Pour évaluer la dynamique et des variables confusionnelles qui influencent l'expression de transgènes dans les cellules souches neurales (CNS), nous avons généré des clones de NSC distincts d'un même pool de cellules, portant le même gène de journaliste transcrit à partir du même promoteur, transduites par le même vecteur rétroviral et transplanté de même à l'état de différenciation même, à la fois et l'emplacement, dans le cerveau de la même portée des souris nouveau-néeset suivi en parallèle pour plus d'un an in vivo (sans immunosuppression). Les seules variables étaient donc transgène insertion chromosomique site et copie le numéro. Nous avons ensuite adapté et optimisé une technique qui teste, cellulaire, à la simple persistance de stem cell-mediated transgene expression in vivo, basé sur la corrélation entre la présence du transgène dans le noyau d'une donnée de la NSC (par hybridation in situ fluorescence [poisson]) avec la fréquence du produit de ce transgène dans la même cellule (par immunohistochimie combiné [IHC]). Dans les conditions énoncés ci-dessus, le site d'insertion est probablement la plus contributive variable dicter downregulation de transgene dans un NSC après 3 mois d'in vivo. Nous avons également observé que cet obstacle pourrait être contrecarré efficacement et en toute sécurité par simples infections séries (aussi peu que trois) insertion de copies redondantes du transgène dans le donateur éventuel NSC. (La préservation des mécanismes de contrôle de la croissance normale et une absence de potentiel tumorigène peuvent être aisément projetés et assurés ex vivo avant la greffe.) La stratégie combinée de poisson/IHC utilisée ici pour le suivi de la dynamique d'expression du transgène au niveau unicellulaire in vivo peut servir pour d'autres types de gènes thérapeutiques et entretien ménager dans les cellules souches endogènes et exogènes de nombreux organes et lignages.

À Long Terme Réseau Adhérentes Multicouche (homme) Expansion Et L'entretien, La Caractérisation, Chimique Et Génétique Manipulation Et La Transplantation De Cellules Souches Neurales De Cerveau Foetal Humain

Current Protocols in Stem Cell Biology. May, 2009  |  Pubmed ID: 19455542

Les cellules humaines tige/précurseurs neuronaux (HNS/hNPC) ont été ciblés pour les applications dans une variété de modèles de recherche et comme des candidats potentiels pour des modalités thérapeutiques à base de cellules dans les troubles du système nerveux central (SNC). À cette fin, la dérivation réussie, expansion et maintenir indifférenciée HNS/hNPC in vitro, comme micro-niches neurogènes artificiels extensibles, promet une diversité d'applications ainsi que les possibilités futures pour une variété de paradigmes expérimentaux modélisation neurogenèse humaine précoce, la migration neuronale et troubles neurogénétiques et pourrait également servir de plate-forme pour le dépistage des drogues de petites molécules dans le système nerveux central. En outre, greffes de hNPC fournissent un substrat alternatif pour la régénération cellulaire et la restauration des tissus endommagés dans les maladies neurodégénératives comme la maladie de Parkinson et la maladie d'Alzheimer. Cellules souches/progénitrices neurales humaines somatique (NSC/NPC) ont été dérivées d'une variété de sources cadavériques et prouvés engraftable d'une manière appropriée de cytoarchitecturally dans le rongeur en voie de développement et adulte et le cerveau de singe tout en conservant les capacités migratoires et fonctionnelles dans les modèles pathologiques de la maladie. Dans la section suivante, nous décrivons une procédure que nous avons avec succès employé pour maintenir sur le plan opérationnel défini humaine somatique NSC/NPC du développement foetal, prématuré postnatal et adult prosencéphale cadavérique. Plus précisément, nous exposons la méthodologie détaillée pour expansion in vitro, la maintenance à long terme, la manipulation et la transplantation de ces précurseurs multipotentes.

Maintenance Et Génie Neural Stem Cells Livraison De Thérapie Codée Génétiquement Aux Tumeurs Du Cerveau

Methods in Molecular Biology (Clifton, N.J.). 2009  |  Pubmed ID: 19582432

Malgré les progrès réalisés dans le traitement du cancer, le pronostic des patients souffrant de tumeurs malignes du cerveau reste lamentable. Néoplasmes de haute qualités, comme les gliomes, sont très envahissantes et frayent des microsatellites largement disséminées qui ont limité l'efficacité des traitements chirurgicaux et d'appoint. L'hypothèse de cellules souches du cancer suggère que les traitements chimiothérapeutiques classiques tuent différenciées et différenciation des cellules qui forment souvent la majeure partie de la tumeur. Un souci majeur est que les cellules qui donnent naissance à la tumeur, les cellules souches cancéreuses, demeurent intacts et peuvent être responsables d'une rechute de la maladie. Un traitement d'appoint pour le traitement du cancer actuel est donc essentiel pour la survie des patients atteints de tumeurs cérébrales. Nous avons conçu avec succès de tropisme tumeur des cellules souches neurales pour livrer des produits antinéoplasiques gène directement aux cellules productrices de tumeur. Cette stratégie thérapeutique potentielle peut éradiquer en toute sécurité de cellules productrices de tumeur du cerveau tout en minimisant les dommages aux cellules normales et saines.

La Transplantation De Cellules Souches Neurales Bénéficie Une Maladie Monogénique Neurométaboliques Pendant La Phase Symptomatique De La Maladie

Stem Cells (Dayton, Ohio). Sep, 2009  |  Pubmed ID: 19591217

Bien que nous et autres avons démontré que les cellules souches neurales (CNS) peuvent avoir une incidence des conditions neurogénétiques maladies lysosomales lorsque transplantée à la naissance, il est resté peu clair si ces interventions peuvent avoir un impact la maladie prive bien établie, une situation souvent rencontrée sur le plan clinique. Nous rapportons ici que lorsque les CNS ont été données injectées dans le cerveau des adulte Sandhoff symptomatique (Hexb(-/-)) souris, cellules migré loin du site d'injection et intégrés dans l'hôte cytoarchitecture, restaurer l'activité de l'enzyme bêta-hexosaminidase et promouvoir l'amélioration neuropathologique et comportementale. Souris durée de vie accrue, la fonction neurologique est améliorée, et la progression de la maladie ont été ralentie. Ces bénéfices cliniques corrélés avec correction neuropathologiques de la maladie aux niveaux cellulaires et moléculaires, ce qui reflète les multiples actions bénéfiques potentielles des cellules souches, y compris les enzyme Croix-correction remplacement cellulaire, tropic et soutien directe action anti-inflammatoire. Pathotropism (migration et retour des CNS vers sites pathologiques) pourrait être mis en image en temps réel imagerie par résonance magnétique. Chimiokines différentiellement exprimés pourraient jouer un rôle dans la direction de la migration des cellules souches transplantées aux sites de pathologie. Significativement, les effets thérapeutiques des CNS implanté à même un seul endroit était étonnamment répandue due à la migration cellulaire et diffusion de l'enzyme. Parce que de nombreuses actions bénéfiques des CNS observés dans les cerveaux de nouveau-nés ont été récapitulés dans le cerveau adulte au profit des bénéficiaires de Sandhoff, interventions axées sur le NSC peuvent également être utiles chez les sujets symptomatiques avec maladie établie.

Phosphoproteomic Analyse De Cellules Souches Embryonnaires Humaines

Cell Stem Cell. Aug, 2009  |  Pubmed ID: 19664994

La phosphorylation des protéines, bien que critique à comportement cellulaire, a été undercharacterized en cellules pluripotentes. Par conséquent, nous avons effectué phosphoproteomic analyses des cellules souches embryonnaires humaines (CSEh) et leurs dérivés différenciés. Un total de 2546 sites de phosphorylation ont été identifiés sur les phosphoprotéines 1602 ; 389 protéines contenaient des identifications de site de phosphorylation plus dans les CSEh indifférenciés, tandis que 540 contenait plusieurs de ces identifications dans les dérivés différenciés. Phosphoprotéines dans récepteur tyrosine kinase (RTK), voies de signalisation étaient nombreux dans les CSEh indifférenciées. Analyses cellulaires corroborent ce constat en montrant que les multiples RTK appuie en collaboration CSEh indifférenciées. En plus de bFGF, EGFR, VEGFR et PDGFR activation était essentielle à l'état indifférencié des CSEh. PDGF-AA complété une concentration bFGF une pour maintenir les CSEh indifférenciées. Conformément à la phosphoprotéomique, activité JNK participe à entretien des CSEh indifférenciées. Ces résultats appuient l'utilité des données phosphoproteomic, fournissent une orientation pour étudier la fonction des protéines dans les CSEh et complément la transcriptomique/épigénétique pour élargir notre compréhension de la décision de hESC sort.

Système De Culture Pour La Spécification De L'oligodendrocyte Rongeurs Et Humaine, Progression De La Lignée Et La Maturation

Current Protocols in Stem Cell Biology. Sep, 2009  |  Pubmed ID: 19725014

Ici, nous documentons les protocoles pour la production, l'isolement et la maintenance du phénotype oligodendrocyte de rongeurs et humains des cellules souches neurales. Notre méthode unique repose sur une série de milieux chimiquement définis, spécialement conçu et soigneusement caractérisés pour chaque stade de développement des oligodendrocytes pendant qu'ils avancent de progéniteurs d'oligodendrocytes à maturité, les oligodendrocytes myélinisantes.

Une Cellule De Tige Plus Sûre : En Garde Contre Le Cancer

Nature Medicine. Sep, 2009  |  Pubmed ID: 19734873

Diaphonie Entre Les Cellules Souches Et Le Cerveau Dysfonctionnel Est Facilitée En Manipulant La Niche : Preuve D'une Molécule D'adhérence

Stem Cells (Dayton, Ohio). Nov, 2009  |  Pubmed ID: 19785036

Dans le cerveau lésé, le comportement des cellules souches/progénitrices neurales (CNS) est régi par plusieurs facteurs convergents rencontrées dans la niche, qui se compose de plusieurs types de cellules neuronales et non-neurale. Les signaux émanant de l'hôte perturbent la migration, la survie, distribution et sort des CNS transplantés, qui à son tour peut créer des micro-environnements hôte qui favorisent un retour à l'homéostasie. Nous avons testé l'hypothèse que la surexpression de molécules facilitateur clés qui définissent le créneau de la blessure pourrait améliorer cette interaction bidirectionnelle de cellules souches-hôte à avantage thérapeutique. Comme preuve de concept, nous avons examiné si la niche avec la molécule d'adhérence cellulaire neuronale L1 de conditionnement pourrait améliorer la récupération dans un modèle prototypique neurodégénératives, le milieu induite par le MPTP de la maladie de Parkinson chez des souris âgées-où la diaphonie entre les CNS et les hôtes en péril neurones dopaminergiques est connu pour être crucial pour sauver la fonction et la connectivité de ce dernier. Chez les souris lésés (et dans les contrôles unlesioned), nous avons surexprimé L1 dans les CNS à être transplanté dans le mésencéphale ventral. Plusieurs paires combinaisons expérimentales ont été testés selon les variations de faire une exception L1 surexprimant versus CNS nonoverexpressing dans le type sauvage (WT) par rapport à des souris transgéniques surexprimant-L1 (spécifiquement L1 transcrit à partir du promoteur GFAP et, partant, surexprimé dans les astrocytes hôte). Enrichissement pour L1-particulièrement lorsqu'elle est exprimée en même temps en donneur CNS et hôte cerveau-conduit à une distribution rapide et importante des CNS exogènes, qui à son tour sauvé (avec une efficacité supérieure chez les souches témoins) hôte dysfonctionnel certains INEF neurones, même lorsque la greffe a été retardée d'un mois. Surexpression de la L1 par CNS a également amélioré leur différenciation en neurones exprimant l'hydroxylase de tyrosine en WT et hôtes transgéniques. Interaction hôte-greffon ont ainsi favorisée en augmentant progressivement les niveaux de L1. Plus largement, cette étude appuie l'opinion que manipuler les composants de la niche (par exemple, une molécule d'adhérence) qui facilitent la diaphonie entre les cellules souches et le cerveau dysfonctionnel peut-être offrir des nouvelles stratégies pour neurotransplantation plus efficace, notamment lorsque le traitement est retardé comme dans les lésions chroniques ou à un stade avancé d'une maladie neurodégénérative.

Précautions Importantes Lors De La Dérivation Des éléments Neuraux Spécifiques Au Patient Des Cellules Pluripotentes

Cytotherapy. 2009  |  Pubmed ID: 19903095

Cellules souches neurales humaines multipotentes (HNS) ont été traditionnellement isolés directement depuis le système nerveux central (CNS). À ce jour, comme un outil thérapeutique dans le traitement des troubles neurologiques, résultats les plus prometteurs ont été obtenus utilisant HNS isolé directement à partir du neuroectoderme foetal humain. La capacité de propagation de ces tissus dérivés HNS est souvent limitée, cependant, il est difficile d'établir une culture à grande échelle. Après la prise de greffe, ces HNS montrent souvent faible efficacité dans la génération de cellules neuronales désirés nécessaires pour la reconstruction du milieu hôte endommagés et, par conséquent, n'ont pas réussi à donner des résultats satisfaisants dans les essais cliniques jusqu'à présent. Par ailleurs, les cellules souches embryonnaires humaines (CSEh) offrent un réservoir pluripotentes pour dérivation in vitro d'un riche éventail de bien caractérisés engagés souches/progénitrices/précurseur neuronal lignée cellules qui peut, théoriquement, être choisies avec précision leur état plus sûre et plus efficace de plasticité pour relever un défi clinique donné. Toutefois, la nécessité de « étrangers » additifs biologiques et l'inclinaison de la différenciation multilignée peut exploiter directement ces HNS de culture cellulaire chez les patients problématiques. Le HNS, lorsque dérivée de cellules pluripotentes sous protocoles actuellement utilisés dans le domaine, ont tendance à afficher non seulement un faible rendement dans la différenciation neuronale, mais aussi un penchant pour l'hétérogénéité phénotypique et l'instabilité et, par conséquent, augmentation du risque de tumorigénèse après la prise de greffe. Pour le HNS dérivé in vitro afin d'être utilisé en toute sécurité dans des paradigmes thérapeutiques, il nécessite une conversion de cellules pluripotentes humaines uniformément pour les cellules qui sont limitées à la lignée neuronale ayant besoin de réparation. Élaborer des stratégies d'induction directe des cellules pluripotentes humaines exclusivement dans les descendances de neural-commis à un large éventail de stades de développement permettra une grande quantité de HNS thérapeutique optimale sur mesure pour un traitement sûr et efficace de certaines maladies neurologiques et de blessures chez les patients.

Le Réseau Transcriptionnel Mesenchymal Transformation Des Tumeurs Cérébrales

Nature. Jan, 2010  |  Pubmed ID: 20032975

L'inférence de réseaux transcriptionnels qui régulent les transitions vers les États physiologiques ou pathologiques cellulaires reste un défi central en biologie des systèmes. Un phénotype mésenchymateux est la marque distinctive de l'agressivité de la tumeur dans les gliomes malins humaine, mais les programmes de réglementation responsables de la mise en œuvre de la signature moléculaire associée sont largement méconnus. Ici, nous montrons que l'ingénierie à rebours et un interrogatoire impartial d'un réseau de réglementation axée sur les gliomes révèlent le module de transcription qui active l'expression des gènes mésenchymateuses dans les gliomes malins. Deux facteurs de transcription (C/EBPbeta et STAT3) émergent comme initiateurs synergiques et maîtres régulateurs de transformation mésenchymateuse. Ectopique co-expression de C/EBPbeta et STAT3 reprogramme des cellules souches neurales le long de la lignée mésenchymateuse aberrante, alors que l'élimination des deux facteurs dans les cellules de gliome conduit à l'effondrement de la signature mésenchymateuse et réduit l'agressivité de la tumeur. Gliome humain, expression de C/EBPbeta et STAT3 est corrélée avec la différenciation mésenchymateuse et prédit l'issue clinique pauvre. Ces résultats montrent que l'activation d'un petit module réglementaire est nécessaire et suffisante pour initier et maintenir un État phénotypique aberrant dans les cellules cancéreuses.

Le Mammifères Proteome Extracellulaire De Régulateurs De La Pluripotence Des Cellules Souches Humaines Embryonnaires De Dépistage

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Feb, 2010  |  Pubmed ID: 20133595

Environ 3 500 gènes mammifères sont prévus pour être sécrétées ou passage unique de protéines transmembranaires. La fonction de la majorité de ces gènes est encore inconnue, et un certain nombre de protéines codées peut-être trouver utilisation comme de nouveaux agents thérapeutiques eux-mêmes ou comme cibles pour le développement de médicaments petit molécule ou anticorps. Pour analyser les activités physiologiques du protéome extracellulaire, nous avons développé une expression de la protéine à grande échelle et à haut débit, purification et plateforme de criblage. Pour cette étude, protéome humain extracellulaire complète a été analysé et priorisé basé sur des études d'association pangénomique maladie pour sélectionner 529 gènes cibles initiales. Ces gènes ont été clonés dans des vecteurs d'expression trois séquences natives et de N-terminal et C-terminal Fc fusions pour créer une première collection de 806 purifié des protéines sécrétées. Pour déterminer son utilité, cette bibliothèque a été projetée dans un essai cellulaire OCT4 pour identifier les responsables de la réglementation de l'autorenouvellement des cellules-souches embryonnaires humaines. Nous avons constaté que le facteur dérivé de l'épithélium pigmentaire peut favoriser la croissance pluripotentes à long terme des cellules souches embryonnaires sans bFGF ou supplémentation ligand TGF/Activin/Nodal. De plus, nos résultats indiquent que l'activation de la voie de signalisation du récepteur-Erk1/2 de facteur dérivé de l'épithélium pigmentaire par le facteur dérivé de l'épithélium pigmentaire est suffisante pour maintenir l'auto-renouvellement des cellules souches embryonnaires pluripotentes. Ces expériences illustrent le potentiel pour la découvertes des fonctions biologiques nouveaux en sélectionnant directement la diversité de la protéine à base de cellules phénotypique ou essais de journaliste.

Communication Par L'intermédiaire De Jonctions Lacunaires Sous-tend Des Interactions Précoces Fonctionnelles Et Bénéfiques Entre Greffé Des Cellules Souches Neurales Et L'hôte

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Mar, 2010  |  Pubmed ID: 20147621

Comment greffés des cellules souches neurales (CNS) et leur progéniture intégrer dans les tissus cérébraux de destinataire et fonctionnellement interagissent avec les cellules hôtes est encore sans réponse. Nous rapportons que dans organotypique tranche cultures analysée par ratiométrique calcium time-lapse imaging, courant-clamp enregistrements et méthodes de couplage colorant, façon précoce et essentielle dans lequel greffée murin ou homme CNS intègrent fonctionnellement hôte neurales circuits et l'affect cellules-hôtes est par couplage lacunaire, même avant la différenciation neuronale rhinophore mature. Les jonctions lacunaires, qui sont mis en place rapidement, permettent de CNS exogènes d'influencer directement l'activité réseau hôte, y compris transitoires de calcium synchronisé avec les cellules de l'hôte dans les réseaux fluctuantes. Les CNS exogènes aussi protègent les neurones de l'hôte de la mort et réduisent de tels signes de lésion secondaire comme réactifs astrogliosis. Pour déterminer si les jonctions entre les CNS et les cellules de l'hôte peuvent également négocier neuroprotection in vivo, nous avons examiné la transplantation NSC dans deux murin modèles caractérisent par la dégénérescence du même type cellulaire (neurones de Purkinje) de différentes étiologies, à savoir, le système nerveux et SCA1 mutants. Dans les deux, jonctions lacunaires (contenant la connexine 43) forment entre les CNS et les cellules de l'hôte en péril et étaient associées de sauvetage des neurones et de comportement (lorsque l'implantation a été réalisée avant la perte de neurones manifestes). In vitro et in vivo des effets bénéfiques NSC ont été abrogées lorsque la formation de jonctions lacunaires ou fonction fut supprimée par pharmacologiques et/ou stratégies RNA-inhibition, soutenir la médiation pivotale par couplage lacunaire de certaines actions modulatrices homéostatiques et protecteurs sur les systèmes hôtes ainsi que d'établir un modèle pour le développement ultérieur de la communication intercellulaire synaptique électrochimique.

Dérivation Du Système Vasculaire De Cellules Souches Embryonnaires

Current Protocols in Stem Cell Biology. Mar, 2010  |  Pubmed ID: 20200855

La formation du système vasculaire multicellulaire est essentielle à la croissance, le développement et la viabilité de l'organisme, et de nombreux embryonnaires de souris létale prises sont dues à des défauts vasculaires. Malheureusement, la nature complexe et nombreux types cellulaires impliqués dans la vasculogénèse et angiogenèse a entravé les modèles in vitro de formation vasculaire. Cette unité décrit un système qui permet à des cellules souches embryonnaires humaines à différencier et spontanément forment des réseaux vasculaires via vasculogénèse et l'angiogenèse dans le contexte des trois couches germinales.

Transcription Et épigénétiques Profilage Basé Sur Microréseau De Métalloprotéinases Matricielles, Collagènes Et Des Gènes Liés Au Cancer

The Journal of Biological Chemistry. Jun, 2010  |  Pubmed ID: 20404328

Paramètres épigénétiques (méthylation de l'ADN, modifications d'histone et miARN) jouent un rôle important dans le cancer. Pour identifier les signatures communes épigénétiques de l'individuel métalloprotéinases (MMP) et les gènes supplémentaires, dont la fonction est également liée à la protéolyse, migration et tumorigenèse, nous avons effectué profilage épigénétiques de 486 certains gènes indépendant non migrateur carcinome mammaire de MCF-7 et des cellules de gliome U251 migrateurs. Genome-wide profilage transcriptionnel, reverse transcription-PCR quantitative et des analyses micro-ARN ont été utilisés pour soutenir les résultats de nos études épigénétiques. Transcriptionnelle dans les cellules de carcinome gliome et la poitrine principalement impliqué la répression histone H3 Lys-27 triméthylation (H3K27me3) marque. À son tour, stimulation épigénétique a été principalement réalisée grâce à un gain de l'histone H3 Lys-4 MBD (H3K4me2) et H3 hyperacétylation et par une réduction globale de H3K27me3. Les gènes pro-invasives inactifs dans les cellules MCF-7, mais pas dans les cellules U251 souvent exposée une marque bivalente de cellules souches ressemblant (enrichissement en H3K27me3 et H3K4me2), une caractéristique des gènes du développement. Contrairement aux autres MMP, MMP-8 a été épigénétiquement réduit au silence dans les deux types de cellules, fournissant ainsi des éléments de preuve pour le strict contrôle épigénétique de cette protéinase anti-tumorigenic dans le cancer. Stimulation épigénétique de multiples gènes de collagène, observée dans les cellules de gliome cultivées a été confirmée puis directement à l'aide de xénogreffes orthotopiques et échantillons de tumeur. Nous suggérons que les mécanismes épigénétiques permettent des gliomes à déposer une matrice de collagène enrichi favorisant l'invasion puis à utiliser cette matrice pour accomplir leur migration rapide à travers le tissu de cerveau.

La Culture Et La Manipulation Des Cellules Souches Neurales

Advances in Experimental Medicine and Biology. 2010  |  Pubmed ID: 20455492

Malgré les progrès dans le traitement du cancer, le pronostic des patients atteints de métastases cancer au cerveau reste pauvre. Le rôle des cellules souches neurales constitue un moyen efficace dans le traitement du cancer métastatique au cerveau seul ou en conjonction avec des modalités thérapeutiques actuelles est prometteur. Murins et humains cellules souches neurales (CNS) a été démontrés à migrer à travers le système nerveux central (CNS) et de s'infiltrer dans les tumeurs et autres états pathologiques de la maladie du cerveau. La modification génétique des CNS de produits cytotoxiques ou à proximité d'une lésion tumorale et/ou satellite primaire des agents immunomodulateurs ou a joué à la réduction de la masse tumorale dans des modèles murins. Bien que l'utilisation de cellules souches se révèle pour être un sujet social volatil, les scientifiques ont découvert que les CNS sont présents dans le cerveau adulte et continuent à propager et à faire la différence. Ces cellules peuvent être isolées et cultivées pour produire des lignées clonales de NSC capables d'auto-renouvellement et différenciation lorsque introduit dans le système nerveux central. Dans ce chapitre, nous décrivons les protocoles actuellement utilisés dans les ourlab pour l'entretien efficace des CNS in vitro, le rôle des cellules souches neurales dans le traitement des tumeurs cérébrales.

Nna1 Intervient Dans Les Cellules De Purkinje Développement Dendritique Via Lysyl Oxydase Propeptide Et Signalisation NF-κB

Neuron. Oct, 2010  |  Pubmed ID: 20920790

On connaît mal les mécanismes moléculaires contrôlant la maturation et la formation des cellules de Purkinje cérébelleuses dendrite. La souris mutante (pcd) de la dégénérescence de cellules de Purkinje est caractérisée par des mutations dans Nna1, un gène découvert dans un contexte de régénération axonal, mais dont la fonction réelle dans le développement et la maladie est inconnue. Nous avons trouvé des développement anormal des dendrites des cellules de Purkinje chez la souris pcd(Sid) postnatal et relié ce déficit à une mutation de suppression dans l'exon 7 de Nna1. Avec une seule cellule gene profiling et transfert de gènes à base de virus, nous avons analysé une voie moléculaire en aval de Nna1 sous-jacente anormale des cellules de Purkinje dendritogenesis chez la souris pcd(Sid). Nous avons découvert ce mutant que nna1 augmente de façon spectaculaire la localisation intranucléaire de lysyl oxydase propeptide, qui interfère avec la signalisation NF-κB RelA et règlement de protéines associées aux microtubules de la stabilité des microtubules, conduisant à l'atrophie des dendrites des cellules de Purkinje. Ces résultats donnent un aperçu du rôle de Nna1 dans le développement neuronal et pourquoi son absence rend les cellules de Purkinje plus vulnérables.

Acquisition Précoce De La Compétence De La Crête Neurale Durant Neuralization CSEh

PloS One. 2010  |  Pubmed ID: 21085480

Les cellules souches neurales de crête (SNCLC) sont une population des cellules embryonnaires multipotentes transitoire qui représente une caractéristique déterminante des vertébrés. La crête neurale (NC) donne lieu à nombreux dérivés, y compris les neurones et cellules gliales des ganglions sensitive et autonomique de système nerveux périphérique, neurones entériques et glia, mélanocytes et le tissu cartilagineux, osseux et conjonctif du squelette craniofacial organes neuroendocrines céphaliques et certains vaisseaux du cœur.

Neurotransplantation De Cellules Souches Génétiquement Modifiées Pour Exprimer Le Transporteur De La Dopamine Humaine Réduit La Consommation D'alcool

Stem Cell Research & Therapy. 2010  |  Pubmed ID: 21122109

Actions de neurotransmetteur réglementé dans le système nerveux central des mammifères déterminer le fonctionnement du cerveau et contrôlent le comportement et les organes périphériques. Bien que les comportements de recherche de drogue, y compris la consommation d'alcool, dépendent de la neurotransmission centrale, modification des actions de neurotransmetteur dans les noyaux spécifiques du cerveau reste difficile. Ici, nous rapportons une nouvelle approche pour la modification de la neurotransmission in vivo par la transplantation de cellules souches machinés pour relever de la dopamine (DA) de neurotransmetteur efficacement grâce à l'action du transporteur de la dopamine humaine (hDAT). Un test fonctionnel chez les souris, nous avons utilisé la consommation d'alcool volontaire, qui est connue pour libérer DA dans le noyau accumbens (NAC), un événement pour aider à maintenir des comportements de recherche de drogue. Nous avons pensé que réduire les niveaux de DA extracellulaires, de faire une exception sur les cellules souches du CNA DA séquestrant exprimant hDAT, modifierait la consommation d'alcool.

Autorenouvellement Induit Efficacement, En Toute Sécurité Et Efficace Thérapeutiquement Avec Un Gène Réglementable Dans Une Cellules Somatiques Humaines

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Mar, 2011  |  Pubmed ID: 21378266

Dans le domaine de la puissance induite et la reprogrammation de sort, on ignore ce que pourrait être la cellule de départ et dans quelle mesure une cellule doivent être transportée vers un état plus primitif à des fins translationnelles. Reprogrammation d'une cellule engagée vers la pluripotence pour lui demander ensuite vers un type particulier de cellules spécialisées est exigeant et peut augmenter le risque de néoplasie et types de cellules indésirables. Précurseur/progéniteurs de l'organe d'intérêt thérapeutique généralement ne pas qu'un seul attribut indispensable--la capacité d'autorenouvellement soutenue. Nous avons supposé que cela peut être induite de manière réglementable, telles que les cellules prolifèrent uniquement in vitro et différencient in vivo sans la nécessité de promouvoir la pluripotence ou précisant l'identité de la lignée. Comme preuve de concept, nous avons généré et testé l'efficacité, sécurité, engraftability et utilité thérapeutique des « induit des cellules progénitrices (ICSP) autorenouvellement conditionnelle », dérivé du système nerveux central humain (CNS) ; Nous avons induit conditionnellement autorenouvellement efficacement au sein de cellules souches neurales uniquement en introduisant des v-myc étroitement contrôlée par une tétracycline (Tet)-sur le système d'expression de gène. TET dans le milieu de culture activé transcription myc et traduction, permettant une expansion efficace de homogènes, clonales, caryotype normales humains précurseurs de CNS ex vivo ; in vivo, où Tet était absent, myc ne s'est pas exprimé et auto-renouvellement était entièrement inactivé (comme ce fut le potentiel tumorigène). Cessé de prolifération cellulaire et différenciation en neurones rhinophore actifs et autres types de cellules de CNS in vivo s'est ensuivi sur la greffe sur des rats, aussi bien au cours du développement et après une lésion adulte--avec l'amélioration fonctionnelle et sans néoplasie prolifération, déformation, apparition de types de cellules non neuronales, instabilité phénotypique ou génomique, ou besoin d'immunosuppression. Cette stratégie d'induction d'autorenouvellement peut-être s'appliquer à progéniteurs des autres organes et peut s'avérer être une méthode efficace, sûre, efficace et pratique pour optimiser les enseignements tirés de la capacité de reprogrammer des cellules.

Dorsomorphin Favorise L'autorenouvellement Des Cellules Souches Embryonnaires Humaines

Angewandte Chemie (International Ed. in English). Apr, 2011  |  Pubmed ID: 21384475

À Long Terme Magnetic Resonance Imaging of Stem Cells in Neonatal Lésion Ischémique

Annals of Neurology. Feb, 2011  |  Pubmed ID: 21387373

Quantitative d'imagerie par résonance magnétique (IRM) peut en série et non invasive évaluer le degré de dommage dans les modèles de rats nouveau-nés des lésions ischémiques hypoxiques (HII). Il peut surveiller également de façon non invasive de migration de cellules souches suite prelabeling d'oxyde de fer. Rapports ont montré que des cellules souches neurales (CNS) peuvent aider à concilier neuroprotection ou de susciter des réponses neuroreparative dans des modèles adultes et néonatals d'une lésion ischémique. Nous avons étudié la capacité de l'IRM haut champ pour surveiller et non-invasive de quantifier la migration, la prolifération et l'emplacement des CNS marquée d'oxyde de fer sur de très longues périodes (58 semaines) en temps réel tout en simultanément correspondance entre cette activité et en constante évolution gravité et l'étendue des dommages neuronaux.

Le Risque De Mettre Quelque Chose Dont Il N'appartient-elle Pas : Produire Des Cellules Souches Mésenchymateuses Masses Dans Le Cerveau

Experimental Neurology. Jul, 2011  |  Pubmed ID: 21420402

La Surexpression Des Facteurs De Transcription D'hélice-boucle-hélice Base Améliore La Différenciation Neuronale De Cellules Foetales Progénitrices Neurales Humaines De Diverses Manières

Stem Cells and Development. Jul, 2011  |  Pubmed ID: 21561385

Dans une perspective de la médecine régénérative, cellules multipotentes progénitrices neurales humaines (hNPCs) offrent un avantage thérapeutique sur les cellules souches pluripotentes puisqu'ils sont déjà invariant « neurale commis » et manquent de tumorigénicité. Cependant, certaines de leurs propriétés intrinsèques, tels que la différenciation lente et multipotentialité incontrôlée, demeurent parmi les obstacles à leur utilisation courante pour la transplantation. Bien que le rongeur PNJ ont été modifiées génétiquement in vitro afin de surmonter certaines de ces limitations, la traduction de cette stratégie aux cellules humaines reste à ses débuts. Dans la présente étude, nous comparons les actions de 4 facteurs de base hélice-boucle-hélice transcription sur la prolifération, spécification et différenciation terminale des hNPCs isolé à partir du télencéphale dorsale foetale. Conformément à leur activité de Control, Ngn1, Ngn2, Ngn3 et Mash1 a incité un engagement rapid des cellules. Les RGN induit une diminution de la prolifération, alors que Mash1 maintenue progéniteurs commises dans un État prolifératif. Par opposition à Ngn1 et Ngn3, qui a eu aucun effet sur une différenciation gliale, Ngn2 induit une augmentation dans les astrocytes en plus des neurones, tandis que Mash1 a conduit à la spécification neuronale et d'oligodendrocyte. GABAergique, cholinergique et différenciation des motoneurones ont augmenté considérablement par la surexpression de Ngn2 et, dans une moindre mesure, de Ngn3 et Mash1. Ainsi, nous démontrons que hNPCs peut être efficacement, rapidement, et élargi en toute sécurité in vitro mais aussi rapidement différenciées vers des lignées (typiquement neuronales) neurales matures par la surexpression des gènes sélectionnez Control.

La Danse Complexe Entre La Réparation Et L'inflammation : Introduction Au Numéro Spécial

Experimental Neurology. Jul, 2011  |  Pubmed ID: 21596040

Exempt De DMSO Programmé La Cryoconservation Des Cellules Totalement Dissociées Et Adhérentes Souches Pluripotentes Induites Humaine

Stem Cells International. 2011  |  Pubmed ID: 21716669

TROIS MODES pour la cryoconservation (CP) des humains IPSC cellules ont été comparés: STD: CP standard de petites touffes avec 10 % de la CPA dans cryovials, ACC : dissociation des cellules avec Accutase et le gel en cryovials et PLT : programmé la congélation des cellules adhérentes dans des plats en plastique multipuits dans un congélateur programmable à l'aide de mono - et multistep protocoles de refroidissement. Quatre CPAs ont été tesetd : le diméthylsulfoxyde (DMSO), l'éthylène glycol (EG), propylène glycol (PG) et le glycérol (GLY). Les cellules du CAC et du PLT ont été gelés et récupérés après décongélation en présence d'un inhibiteur ROCK Y-27632 (RI). Par exemple, était moins toxique w/o de cryoconservation de CP que le DMSO et a permis de beaucoup mieux entretenir de pluripotence après CP que PG ou GLY. Les cellules ont été cryoconservés très efficacement comme cultures adhérentes (+ RI) en plaques (5 à 6 fois plus élevé que STD) à l'aide de EG et un protocole de congélation de 6 étapes. Récupération dans ces conditions est comparable ou même supérieur à ACC + RI. Conclusions. Maintien de l'adhérence cellule-substrat est un environnement favorable qui atténue le gel et le dégel des tensions (concept de ComfortFreeze(®) développé par CELLTRONIX). CP des cellules directement dans des plats en prêt-à-go après décongélation format pour dépistage HT/HC peut être bénéfique dans de nombreuses applications liées à SC scientifiques et commerciales telles que des tests de toxicité et de la découverte de drogue.

Modélisation Des Troubles Neuropsychiatriques Complexes Avec Des Cellules Souches Humaines Pluripotentes Induites

Current Opinion in Pharmacology. Oct, 2011  |  Pubmed ID: 21723195

Identifier la base cellulaire et moléculaire des maladies neuropsychiatriques complexes (cNPDs) a été limitée par l'inaccessibilité des neurones centraux, la variabilité au sein des grandes classifications diagnostiques et l'interaction de facteurs génétiques et environnementaux. De récents travaux utilisant voie différencie des cellules souches humaines pluripotentes induites (hiPSCs) mendélienne et polygénique cNPDs commence à illuminer séniles, synaptique ou corps cellulaire des variations accompagnent par gène spécifique ou protéine altérations d'expression largement imitant pathologie connue. Dans certains cas, les phénotypes sont apparus seulement après application du stress cellulaire ou de longue durée de différenciation. Les fonctionnalités des expressions pathologiques et cellulaires sont entièrement ou partiellement répondent bien au traitement pharmacologique, en soulignant l'utilité potentielle des hiPSCs différenciées pour la découverte de traitements personnalisés et pour identifier des cibles pathogenetically pertinentes dans les sous-groupes de patients au sein d'une large classification syndromique. En raison de la variabilité inhérente à l'élaboration et de différencier les lignes de hiPSC et de comparaisons multiples implicites dans les technologies « omiques », algorithmes rigoureuses pour garantir une signification statistique et une confirmation indépendante des résultats, sera nécessaire pour la modélisation robuste de cNPDs.

Phosphoproteomic Analyse : Un Rôle En Déchiffrant Cellular Signaling in Embryonnaires Humaines, Cellules Souches Et Leurs Dérivés Différenciés

Stem Cell Reviews. Oct, 2011  |  Pubmed ID: 22009073

Signalisation cellulaire est largement contrôlée par la phosphorylation des protéines. Cette modification post-traductionnelle (PTM) a été longuement analysée lors de l'examen d'un ou plusieurs événements de phosphorylation de la protéine qui influent sur la signalisation cellulaire. Cependant, protéine kinase axée sur la signalisation réseaux, comprenant au total (phospho) proteomes, contrôlent en grande partie sort de la cellule. Une analyse à grande échelle de la phosphorylation des protéines différentiellement réglementé est donc centrale pour élucider les événements cellulaires complexes, y compris le maintien de pluripotence et différenciation des cellules souches embryonnaires (CSE). La technologie de choix pour phosphoproteome total et protéome total combiné plus total phosphoproteome (appelé le protéome (phospho)) [1] analyses est multidimensionnel chromatographie en phase liquide-(MDLC) spectrométrie de masse (MS/MS). Avancées dans l'utilisation de MDLC pour la séparation des peptides comprenant au total (phospho) proteomes, enrichissement de phosphopeptide, séparation des fractions enrichies et identification quantitative de peptide par SM/SM ont été rapide ces dernières années, comme ont des améliorations dans la sensibilité, la vitesse et la précision des spectromètres de masse. Couverture de plus en plus profonde des protéomes (phospho) permet une meilleure compréhension des changements dans les réseaux de la phosphorylation de protéines comme les cellules réagissent aux stimuli et progrès d'un indifférenciées ou distinguent d'État à l'autre. Bien que les études MDLC-MS/MS sont puissants, proteome analyses comprendre l'interprétation des données est importante, et ciblée recherche expérimentale de prédictions biologiques fournie par total (phospho) est nécessaire. Analyses protéomiques (Phospho) des cellules souches pluripotentes sont à leurs premiers balbutiements en ce moment. Toutefois, ces études ont déjà commencé à contribuer à une compréhension améliorée et accélérée de base pluripotent stem cell signalisation et sort contrôle, surtout au niveau de la biologie des systèmes.