Différents Effets De La Privation De Glucose Sur L'expression Et La Stabilité Des Isoformes De L'ARNm Du VEGF Dans Les Cellules Ovariennes Cancéreuses Murines

Biochemical and Biophysical Research Communications. Apr, 2002  |  Pubmed ID: 11944893

Facteur de croissance vasculaire endothéliale (VEGF) a été impliqué comme un puissant régulateur de l'angiogenèse dans les tumeurs, et de sa protéine existe sous la forme d'au moins cinq isoformes ayant des activités biologiques distinctes et la signification clinique. Les tumeurs dans des conditions de stress métabolique augmenter considérablement l'expression de VEGF en raison à la fois une transcription accrue et la dégradation des ARNm diminué. Cependant, on ne sait pas comment les conditions de stress réguler l'expression de chaque isoforme VEGF. Nous rapportons ici un roman Taqman en temps réel RT-PCR stratégie pour la quantification de toutes les isoformes du VEGF murin et de trouver ce que (1) la privation de glucose de façon spectaculaire jusqu'à régule le niveau d'ARNm de toutes les isoformes du VEGF, avec les trois isoformes abondantes, VEGF120 et VEGF164 , et VEGF188, augmentant à un rythme similaire, tandis que le VEGF144 rares isoforme est plus marquée jusqu'à réglementé; (2) la privation de glucose induit une augmentation significative de l'abondance relative des ARNm VEGF144, mais pas les isoformes les plus répandues, les VEGF120 VEGF164, et VEGF188, par rapport au VEGF totale, et (3) la stabilité de chaque ARNm isoforme diffère dans les conditions de contrôle ainsi que la privation de glucose. Celui-ci se stabilise sensiblement ARNm de toutes les isoformes VEGF à une vitesse différente, avec la plus VEGF144 sensiblement stabilisé. Nos résultats indiquent que dans des conditions de stress métabolique VEGF144 est la plus spectaculaire jusqu'à réglementé VEGF isoforme, probablement par un mécanisme (s) différente de celle des trois isoformes du VEGF abondantes.

Effet De La Sous-alimentation Sur L'herpès Simplex Virus Type 1 Infection Oculaire Chez Le Rat Wistar

International Journal of Experimental Pathology. Apr, 2002  |  Pubmed ID: 12084042

Nous avons étudié la susceptibilité à virus Herpes simplex type 1 (HSV-1) chez des rats souffrant de malnutrition. Groupes de 10 rats étaient sous-alimentées pendant l'allaitement par la duplication progéniture. Les animaux ont été mis sur l'alimentation commerciale et à 1, 2, 3, 5 et 8 semaines après le sevrage, infectés à l'œil par la scarification par le HSV-1, souche différences F. significative de la morbidité et la mortalité ont été observées entre les groupes sous-alimentés et le contrôle infectés trois semaines après le sevrage. Les titres viraux étaient plus élevés dans lavages oculaires et le cerveau obtenues à partir du groupe de sous-alimentés. Ce groupe a montré une diminution de la prolifération des lymphocytes antigène dépendante par rapport à contrôler, et significativement plus faible réaction d'hypersensibilité retardée de type contre le virus inactivé (malnutrition = 0,16 + / - 0,02 mm, de contrôle = 0,26 + / - 0,03 mm, p <0,05). Les anticorps neutralisants dans le sérum ont été plus faibles dans le groupe souffrant de malnutrition et des niveaux inférieurs de l'interféron ont été obtenus dans le groupe souffrant de malnutrition 24 h post-infection. Nous concluons que la malnutrition pendant la tétée induit un retard dans la capacité à surmonter l'infection au VHS.

Génération D'un Modèle De Souris Syngénique Pour étudier Les Effets Du Facteur De Croissance Endothélial Vasculaire Dans Le Carcinome Ovarien

The American Journal of Pathology. Dec, 2002  |  Pubmed ID: 12466143

Facteur de croissance vasculaire endothéliale (VEGF) exerce des fonctions multiples dans le microenvironnement de la tumeur favoriser l'angiogénèse, la suppression de réponse anti-tumorale immunitaire, et peut-être exercer des fonctions autocrines sur les cellules tumorales. Cependant, les modèles animaux appropriés syngéniques pour des études in vivo sont insuffisants. Utilisation de transfection rétrovirale et le tri de cellules activées par fluorescence, nous avons généré une lignée murine de cellules C57BL6 carcinome ovarien qui surexprime de manière stable la murin VEGF164 isoforme et la protéine fluorescente verte. VEGF164 surexpression de façon spectaculaire accélération de la croissance tumorale et la formation d'ascite, l'angiogenèse tumorale considérablement améliorée, et sensiblement favorisé la survie des cellules tumorales in vivo. In vitro, VEGF164 la survie des cellules surexpression considérablement améliorée après le retrait de facteur de croissance et a conféré une résistance à l'apoptose induite par le cis-platine par un mécanisme autocrine. VEGF / protéine fluorescente verte exprimant tumeurs n'ont pas été reconnus par le système immunitaire adaptatif. Après la vaccination, un anti-tumorale des cellules T de réponse a été détecté, mais la croissance tumorale n'a pas été inhibée. Ce modèle murin d'ingénierie cancer devrait se révéler utile à l'enquête sur le rôle du VEGF dans la modulation du microenvironnement de la tumeur et affectant les interactions complexes entre les mécanismes de l'angiogénèse, anti-tumoraux des mécanismes immunitaires, et le comportement des cellules tumorales à l'état naturel ou au cours du traitement dans le cancer de l'ovaire .

Intrapéritonéale De La Vaccination Thérapeutique Oncolytiques Et De La Tumeur Avec La Réplication-virus Recombinant Compétente: Le Paradigme Herpès

Current Gene Therapy. Apr, 2003  |  Pubmed ID: 12653405

La thérapie biologique des tumeurs en utilisant des virus vivants a d'abord été proposé il ya un siècle mais a été abandonnée en raison de la virulence potentielle de souches de type sauvage. Merci aux progrès de la technologie de recombinaison, la réplication restreints souches ont été génétiquement modifiées, qui reproduisent sélectivement dans les cellules tumorales. Les exemples incluent compétents pour la réplication des mutants de l'herpès simplex virus (HSV), adénovirus, virus de la stomatite vésiculeuse, le réovirus et le virus de la rougeole. Réplication restreints virus oncolytiques sont capables de se propager de manière sélective dans les nodules tumoraux solides exerçant une activité antitumorale directe en tuant les cellules infectées de tumeurs à l'achèvement d'un cycle réplicatif. Dans le processus, ils génèrent une réponse inflammatoire intratumorale, ce qui dans les circonstances appropriées, peut déclencher l'activation d'une réponse anti-tumorale immunitaire adaptative, un processus qui a été nommé dans la vaccination tumorale in situ. Recombinant HSV peut offrir des avantages distincts dans la thérapie des tumeurs épithéliales oncolytique. HSV est très contagieux pour les tumeurs d'origine épithéliale, ce qui entraîne une grande efficacité, il ya une redondance considérable dans HSV récepteurs, ce qui rend la perte de récepteurs HSV par des tumeurs dues à des mutations et sont moins susceptibles de puissants anti-herpétiques médicaments sont disponibles dans le commerce, qui peut être utilisée en clinique pour contrôler les effets secondaires indésirables. Ci-joint, nous décrivons l'utilisation de la thérapie virale oncolytique contre des tumeurs malignes par voie intrapéritonéale avec un accent particulier sur le virus de l'herpès simplex oncolytique. Nous passons en revue les éléments de preuve préclinique sur l'efficacité et la sécurité des applications intra-péritonéales de HSV et discuter de la justification de son utilisation pour la thérapie oncolytique et vaccination tumorale in situ de tumeurs intrapéritonéales.

L'oxyde Nitrique Et Le HSV Infection Vaginale à Souris BALB / C

Virology. Apr, 2003  |  Pubmed ID: 12726728

Ici, nous étudions le rôle de l'oxyde nitrique dans l'infection vaginale de souris Balb / c avec virus Herpes simplex type 2. Synthase inductible de l'oxyde nitrique (iNOS) ARNm a été détecté par RT-PCR dans les tissus du vagin et des ganglions lymphatiques inguinaux après l'infection précoce. iNOS a également été trouvé pour être activé dans les cellules récupérées à partir de lavages vaginaux d'animaux infectés. Les animaux traités avec de l'aminoguanidine (AG), un inhibiteur de iNOS, a montré une augmentation dose-dépendante de la pathologie vaginale après une infection virale par rapport aux témoins. Les titres viraux dans lavages vaginaux et des vagins étaient plus élevés dans la résolution AG-souris traitées. Les animaux traités a présenté les chiffres plus élevés dans PMN lavage vaginal par rapport aux témoins. Des études histopathologiques ont révélé une profonde exsudat inflammatoire dans le tissu vaginal des animaux traités. Enfin, la RT-PCR analyse a montré une expression accrue des chimiokines MIP-2 et RANTES dans les tissus du vagin et des ganglions lymphatiques inguinaux de ces animaux.

Letal, Un Ligand Associé à Une Tumeur Immunorécepteur NKG2D, Induit L'activation Et L'expansion De Cellules Immunitaires Effectrices

Cancer Biology & Therapy. Jul-Aug, 2003  |  Pubmed ID: 14508119

NKG2D sert comme l'un des récepteurs d'activation les plus puissants pour les lymphocytes effecteurs. dans les tissus périphériques. Ici, nous rapportons la caractérisation des Letal, le premier humain trans-membranaire ligand NKG2D manque une immunoglobuline de type alpha-3 ectodomaine. Letal est exprimé de façon constitutive par une variété de tissus normaux, et est régulée positivement dans les cellules tumorales de différentes origines. Contrairement à d'autres ligands NKG2D, expression de l'ARNm Letal progressivement diminué après le traitement des cellules tumorales avec de l'acide rétinoïque. Simultanée activation du récepteur des cellules T et l'engagement de la prolifération stimulée Letal de CD8 (+) des cellules et augmenté de façon spectaculaire l'IL-2 et la sécrétion IFNgamma. En outre, Letal induit la mort des cellules cancéreuses en CD8 (+) et les cellules NK. Ces résultats suggèrent que Letal délivre des signaux d'activation des cellules NK et favorise la tumeur la surveillance immunitaire en induisant l'expansion de l'anti-tumorales des lymphocytes cytotoxiques.

Cancer De L'ovaire Exprime L'Letal Ligand NKG2D Et Favorise La Survie Et L'expansion Des Cellules T CD28-antitumoraux

Cancer Research. Mar, 2004  |  Pubmed ID: 15026360

Le rôle de l'immunorécepteur NKG2D et ses ligands dans la réponse immunitaire anti-tumorale est encore mal compris. Ici, nous déclarons que les cellules immunitaires effectrices infiltrant cancer de l'ovaire sont pour la plupart lymphocytes CD8 + CD28 manque, mais exprimant le récepteur NKG2D costimulation. Carcinome ovarien humain exprime le roman ligand NKG2D lymphocytes effecteurs cellule toxicité d'activation ligand (Letal). Letal a été trouvé être un pronostiqueur indépendante amélioration de la survie dans le cancer avancé de l'ovaire. Des niveaux plus élevés de la tumeur dérivée Letal ont été associées à une infiltration lymphocytaire plus forte. Letal eu des effets marqués et co-stimulatrices induite de type 1 de polarisation dans CD8 + CD28-infiltrant les tumeurs ex vivo les lymphocytes. L'engagement Letal augmenté l'expression du transporteur de glucose Glut-1, le glucose améliorée pouvant prendre-, et protégés des lymphocytes CD8 + à partir induite par le cisplatine meurtre. Letal également régulée à la baisse l'expression de Fas dans les cellules CD8 + et les rendait résistants à Fas ligand apoptose induite. Nos résultats indiquent que la promotion de la tumeur Letal la surveillance immunitaire en favorisant la survie et l'expansion des lymphocytes anti-tumoraux intratumorale cytotoxiques. Nous proposons que Letal pourrait être utilisé pour l'expansion ex vivo de l'apoptose-résistant tumeur réactives lymphocytes cytotoxiques pour le transfert adoptif.

Modulation D'oxyde Nitrique De La Réponse Immunitaire Contre La Toxine Cholérique Adjuvé Ovalbumine Administrée Par Voie Intranasale

Immunology Letters. Apr, 2004  |  Pubmed ID: 15081619

Ici, nous avons étudié l'effet de l'aminoguanidine (AG) de traitement, un oxyde nitrique synthase (NOS) -2 inhibiteur, au cours de la réponse immunitaire contre l'administration intranasale d'ovalbumine (OVA) mélangé avec de la toxine cholérique (CT) en souris BALB / c. NOS-2 ARNm a été détecté par RT-PCR (RT-PCR) dans des échantillons de poumons et de cornets début de l'après-inoculation de l'antigène. Animaux intranasale traités avec AG, ont montré une augmentation des niveaux de taux sérique IgG et IgM spécifiques. Un ratio plus élevé IgG1/IgG2a contre OVA a également été observée dans le sérum des animaux mêmes. En outre, des niveaux élevés de IgA spécifiques ont été détectés dans des échantillons de lavages pulmonar provenant d'animaux traités. Au contraire, les animaux traités ont montré une faible réponse DTH tout splénocytes obtenus à partir des mêmes animaux ont montré une capacité réduite de prolifération contre OVA par rapport aux témoins. Enfin, la RT-PCR analyse a montré une expression accrue de TGF-beta dans les cornets, les poumons et les cellules de lavages pulmonar obtenus à partir de souris traitées AG. Pris ensemble, ces données suggèrent un rôle de l'oxyde nitrique (NO) dans la modulation de la réponse immunitaire primaire contre les antigènes par voie intranasale.

L'inhibition Précoce De La Production D'oxyde Nitrique Augmente HSV-1 Infection Intranasale

Journal of Medical Virology. Jun, 2004  |  Pubmed ID: 15122810

Ici, nous avons étudié le rôle de l'oxyde nitrique (NO) au cours des premières étapes de l'infection respiratoire de la souris BALB / c avec virus Herpes simplex type 1 (HSV-1), la souche F. oxyde nitrique synthase II (NOS-II) ARNm et des protéines ont été détectées par transcription inverse (RT)-PCR et dot blot, respectivement dans les échantillons de poumons et de cornets début de l'après-infection (pi). L'analyse immunohistochimique a révélé les macrophages et les PMN pulmonar exprimer NOS-II dans les poumons des animaux infectés. Animaux intranasale traités avec aminoguanidine (AG), un inhibiteur de la NOS, pendant les premières étapes de l'infection, a montré une augmentation dose-dépendante de la pneumonie par rapport aux témoins. Les titres viraux dans les cornets, les poumons et le cerveau étaient plus élevés chez les souris traitées AG. Enfin, les études histopathologiques ont révélé une forte inflammation dans les yeux et les poumons de ces animaux. Pris ensemble, ces résultats suggèrent un rôle du NO dans le contrôle de primaire HSV intranasale infection.

Infiltrant Les Tumeurs Précurseurs De Cellules Dendritiques Recrutées Par Un Bêta-défensines Contribuer à Vasculogenèse Sous L'influence De VEGF-A

Nature Medicine. Sep, 2004  |  Pubmed ID: 15334073

L'implication des mécanismes immunitaires dans l'angiogenèse tumorale n'est pas claire. Nous décrivons ici un nouveau mécanisme de la vasculogenèse tumorale médiée par des cellules dendritiques (DC) précurseurs grâce à la coopération de la bêta-défensines et de croissance endothélial vasculaire facteur-A (VEGF-A). Expression de la souris beta-défensines-29 recrutés précurseurs DC à des tumeurs et le renforcement de la vascularisation tumorale et la croissance en présence d'une augmentation d'expression du VEGF-A. Une population de leucocytes exprimant nouvelle DC et des marqueurs endothéliaux a été découvert chez la souris et les carcinomes ovariens humains coexprimant VEGF-A et de bêta-défensines. Infiltrant les tumeurs les PED ont migré vers les vaisseaux tumoraux et néovascularisation assemblées indépendamment in vivo. Os dérivées de la moelle PED ont subi l'endothélium, comme la différenciation ex vivo, ont migré vers les vaisseaux sanguins et favorisé la croissance des tumeurs exprimant des niveaux élevés de VEGF-A. Nous montrons que le bêta-défensines et le VEGF-A coopérer pour promouvoir la vasculogenèse tumorale en effectuant des tâches distinctes: le bêta-défensines chemoattract précurseurs DC à travers CCR6, alors que le VEGF-A induit principalement par leur endothélium, comme la spécialisation et la migration vers les navires, qui est médiée par Récepteur-2 VEGF.

Leucocytes Vasculaires Contribuer à La Vascularisation Tumorale

Blood. Jan, 2005  |  Pubmed ID: 15358628

Il n'existe aucune preuve que les cellules hématopoïétiques de contribuer de manière significative à la vasculogenèse dans la vie postnatale. Ici, nous rapportons une nouvelle sous-population de leucocytes dans les cancers de l'ovaire qui co-exprime les marqueurs des cellules endothéliales et les cellules dendritiques. Fluorescence-activated cell sorter (FACS) a identifié une fréquence élevée de la VE-cadhérine + de leucocytes CD45 + (39% des cellules hôtes) dans 10 des 10 tumeurs solides évalué. Cette population représente moins de 1% des cellules non tumorales dans l'ascite et du sang périphérique. Au niveau protéique, plus de 86% de ces cellules expriment les marqueurs endothéliaux P1H12, CD34, CD31 et des marqueurs et des leucocytes CD11c et complexe majeur d'histocompatibilité (CMH) de classe II. Au niveau de l'ARNm, nous avons détecté TEM1, TEM7, et Thy-1, des marqueurs spécifiques de l'endothélium angiogénique. Enfin, cette population a la capacité de générer des vaisseaux sanguins fonctionnels in vivo. En raison de son phénotype mixte, nous avons nommé cette population leucocytes vasculaires (CLV). Nos données fournissent un lien important entre hématopoïétiques précurseurs endothéliaux et le développement vasculaire dans la vie postnatale et une nouvelle cible thérapeutique possible.

L'expression De L'IL-15, IL-18 Et NOS-II Dans Les Yeux Controlatéraux De Souris BALB / C Pendant Le Développement De La HSV-induite Kératite

Immunology Letters. Jan, 2005  |  Pubmed ID: 15585336

HSV Oncolytique Thérapie Régule à La Hausse L'interféron-inductibles Chimiokines Et De Recrues Des Cellules Immunitaires Effectrices En Cancer Des Ovaires

Molecular Therapy : the Journal of the American Society of Gene Therapy. Nov, 2005  |  Pubmed ID: 15925544

Coopération entre le virus simplex oncolytique l'herpès (HSV) et effecteurs de l'hôte mécanismes immunitaires a été décrit précédemment. Dans la présente étude, nous avons étudié le mécanisme sous-jacent de cette coopération dans un modèle murin syngénique de cancer de l'ovaire. L'administration thérapeutique de HSV-1716, un mutant de réplication restreinte, a entraîné une réduction significative de la croissance tumorale et un avantage significatif en survie. Injection intratumorale de HSV-1716 expression induite d'IFN-gamma, MIG, et IP-10 dans la tumeur. Ceci a été accompagné par une augmentation significative du nombre de tumeurs associées à des cellules NK et T CD8 + de exprimant CXCR3 et CD25. L'ascite de HSV-1716-chez les animaux traités efficacement induite in vitro la migration des cellules NK et les lymphocytes T CD8 +, qui était dépendante de la présence de MIG et IP-10. Monocytes murins et des cellules dendritiques (CD) étaient responsables de la production de MIG et IP-10 sur HSV-1716 l'infection. Dans les monocytes, cela a été partiellement abrogée par des anticorps neutralisants contre IFN-alpha et bêta, indiquant ainsi un rôle de type-1 IFN dans l'effet rapporté. Carcinomes ovariens de l'homme ont montré un nombre élevé de monocytes et les PED. Sur HSV-1716 l'infection, l'homme dérivées de monocytes PED produit de grandes quantités d'IFN-gamma et MIG régulés à la hausse et IP-10 expression. Ces résultats indiquent que le HSV-1716 induit une réponse inflammatoire qui peut faciliter la réponse immunitaire antitumorale sur la thérapie oncolytique.

Oncolytic HSV Exerce Direct Activité Anti-angiogénique Dans Les Cancers De L'ovaire

Human Gene Therapy. Jun, 2005  |  Pubmed ID: 15960607

Dans la présente étude, nous avons étudié la capacité de réplication du virus-restreint de l'herpès simplex (HSV) 1716 manque ICP34.5 pour infecter l'endothélium et de perturber la vascularisation des tumeurs. HSV-1716 efficace infecté et tué la souris des cellules endothéliales et les lignes H5V MS1 cellules, ainsi que les cellules humaines endothéliales de veine ombilicale in vitro. La formation de tubes capillaires par les cellules endothéliales est inhibée par le HSV-1716 in vitro et in vivo. Après l'administration intratumorale de oncolytique HSV-1716, le HSV-glycoprotéines pu être détecté dans CD31-positives endothélium vasculaire tumoral par immunomarquage. L'ADN viral a été récupéré à partir hautement purifiée microdisséquées endothélium vasculaire tumoral. Par ailleurs, l'endothélium des tumeurs traitées par le HSV-1716 expose l'expression du facteur tissulaire, un marqueur de lésion de l'endothélium. Il est important, antigène HSV et l'ADN ont également été détectés dans l'endothélium éloigné de foyers d'infection tumeur active. Après inoculation intravasculaire du virus HSV-1716, glycoprotéines virales ont été détectées en association à l'endothélium tumoral, mais pas l'endothélium vasculaire des différents organes. Purifiés cellules tumorales endothéliales ont montré une grande capacité de prolifération et étaient sensibles à l'infection au VHS-1716 et de tuer tout l'endothélium ex vivo à partir d'organes normales n'était pas. Nous concluons que oncolytiques HSV-1716 exerce des effets directs anti-angiogéniques, qui peuvent contribuer à l'efficacité thérapeutique global du virus.

L'utilisation De L'immuno-LCM Pour Identifier Le Profil D'expression Dans Le in Situ Des Constituants Cellulaires Du Microenvironnement Tumoral

Cancer Biology & Therapy. Jun, 2006  |  Pubmed ID: 16627987

Profilage de l'expression en utilisant des puces est devenu un outil essentiel pour interroger la biologie des tumeurs. Toutefois, le profilage de l'ARN tumorales entières reflète à la fois la tumeur et les cellules hôtes, ce qui rend difficile de disséquer les mécanismes moléculaires à l'intérieur des compartiments cellulaires spécifiques dans le microenvironnement de la tumeur. Nous avons développé et optimisé une technique simple, rapide associant immunohistochimie et laser capture microdissection (immuno-LCM) pour purifier des populations cellulaires spécifiques du microenvironnement de la tumeur suivie par l'isolement de l'ARN et d'amplification pour l'analyse des microréseaux. En utilisant cette méthodologie, nous avons pu élucider le profil d'expression dans des cellules tumorales in situ purs et les cellules endothéliales tumorales de tumeurs de l'ovaire avec des infiltrats vifs immunitaires. Cette technique non seulement augmenté la spécificité de profilage des populations de cellules isolées, ce qui élimine les gènes exprimés par les cellules environnantes, mais aussi augmenté la sensibilité de l'analyse, permettant la détection de gènes d'expression faibles qui n'ont pas été détectés dans des tableaux tumorales entières. L'analyse des voies de cellules tumorales in situ identifié activation des voies de signalisation distinctes qui convergent sur NF-kB, par rapport aux voies identifiées dans des cultures de lignées cellulaires tumorales, qui étaient principalement métabolique. Profilage des tumeurs des cellules vasculaires a révélé les plus connus panendothelial et la tumeur endothéliale des marqueurs spécifiques, et a dévoilé des gènes spécifiques à la lignée myéloïde-monocytaire. Nous proposons que l'immuno-LCM couplé avec le profilage transcriptionnel est un outil pratique pour disséquer les événements moléculaires et cellulaires dans les systèmes biologiques complexes tels que le microenvironnement de la tumeur.

La Vaccination Directe Avec Des Cellules Tumorales Tuées Avec ICP4-déficient HSVd120 Déclenche Une Immunité Anti-tumorale Efficace

Cancer Biology & Therapy. Jul, 2006  |  Pubmed ID: 16861891

Nous avons vérifié si les cellules tumorales ont été tués par la réplication incompétent virus herpes simplex recombinant (HSV) d120 manque immédiate ICP4 gène précoce et si HSVd120 tués par les cellules tumorales pourrait être utilisé directement pour la vaccination tumorale. L'efficacité du vaccin a été testé dans TC-1, un adénocarcinome murin transformé avec HPV16 E6 et E7, et ID8-VEGF, un modèle murin épithéliale cancer de l'ovaire. HSVd120 tué les cellules tumorales par apoptose. Les cellules tumorales infectées par HSVd120 ont été engloutis plus avidement par les CD immatures et induite par DC maturation plus efficace que les cellules tumorales tuées par les rayons ultraviolets B (UVB). HSVd120 infection induite plus forte régulation positive de la GRP94 que les UVB dans les cellules en apoptose. L'immunisation des souris avec des cellules HSVd120-tués suscité plus forte réponse anti-tumorale des cellules T, y compris la tumeur réactive sécrétant l'interféron-gamma et des cellules T cytotoxiques, et a entraîné un retard sensiblement plus forte dans la croissance tumorale que la vaccination avec UVB cellules tumorales tuées. Ainsi, l'utilisation de souches HSV-réplication incompétents qui n'ont pas ICP4 offre des avantages possibles de la préparation de l'antigène tumoral de cellules entières pour la vaccination tumorale directe.

Leucocytes Vasculaires: Une Population Avec Des Propriétés Angiogéniques Et Immunossuppressive Fortement Représentés Dans Le Cancer De L'ovaire

Advances in Experimental Medicine and Biology. 2007  |  Pubmed ID: 17191386

Récepteur Endothéline B Médiatise La Barrière Endothéliale à La Cellule T Homing à Des Tumeurs Et De Thérapie Immunitaire Désactive

Nature Medicine. Jan, 2008  |  Pubmed ID: 18157142

En dépit de leur immunogénicité suffisante eu, vaccins antitumoraux restent en grande partie inefficaces. Les mécanismes sous-jacents à ce manque d'efficacité sont encore mal connues. Nous rapportons ici un mécanisme précédemment non décrite par lequel l'endothélium tumoral des lymphocytes T empêche de ralliement et entrave immunothérapie antitumorale. Profilage transcriptionnel de la microdissection des cellules endothéliales tumorales de cancer de l'ovaire de l'homme ont révélé des gènes associés à l'absence ou la présence de lymphocytes infiltrant les tumeurs (TIL). La surexpression du récepteur B endothéline (ET (B) R) a été associée à l'absence de TIL et à court temps de survie du patient. La HE (B) R inhibiteur de BQ-788 a augmenté l'adhérence des cellules T à l'endothélium humain in vitro, un effet contré par la molécule-1 d'adhésion intercellulaire (ICAM-1) le blocage ou le traitement par les donneurs de NO. Chez la souris, ET (B) la neutralisation R par BQ-788 a augmenté de cellules T homing à des tumeurs, ce qui requis homing ICAM-1 et a permis à la réponse tumorale à l'immunothérapie par ailleurs inefficace in vivo, sans changements dans la réponse anti-tumorale immunitaire systémique. Ces résultats mettent en évidence un mécanisme moléculaire avec le potentiel d'être manipulé pharmacologiquement pour améliorer l'efficacité de l'immunothérapie des tumeurs chez les humains.

Whole Vaccination Antigène Tumoral Utilisant Les Cellules Dendritiques: Comparaison De L'électroporation De L'ARN Et Par Impulsions Avec Des Cellules Tumorales Irradiées Aux UV

Journal of Translational Medicine. 2008  |  Pubmed ID: 18445282

En raison de l'absence de caractérisation complète des antigènes associés aux tumeurs pour les tumeurs solides, l'utilisation antigène entier est une approche pratique de la vaccination tumorale. ARN tumorales et les cellules tumorales apoptotiques ont été utilisés comme une source d'antigène tumoral ensemble pour préparer des cellules dendritiques (DC) sur la base vaccins antitumoraux, mais leur efficacité n'a pas été directement comparés. Ici, nous comparons directement l'ARN électroporation et pulsant des PED avec l'ensemble des cellules tumorales tuées par les rayons ultraviolets (UV) B en utilisant un modèle de tumeur exprimant pratique virus du papillome humain (VPH) oncogènes E6 et E7. Bien que les deux approches a conduit à les PED présentant l'antigène tumoral, l'électroporation avec une tumeur total de la cellule d'ARN induit une fréquence significativement plus élevée de tumeurs réactives de l'IFN-gamma des cellules T sécrétant, et E7-spécifiques lymphocytes CD8 + par rapport à impulsions avec des cellules tumorales irradiées aux UV. PED électroporation avec des cellules tumorales induite ARN une infiltration plus la tumeur par les lymphocytes T et a produit un retard sensiblement plus forte dans la croissance tumorale par rapport aux PED pulsées avec des cellules tumorales irradiées aux UV. Nous concluons que l'électroporation avec entiers ARN cellulaires tumorales et palpitant avec des cellules tumorales irradiées aux UV sont à la fois efficace pour susciter la réponse immunitaire antitumorale, mais les résultats d'électroporation d'ARN de la vaccination contre la tumeur plus puissante dans les conditions expérimentales étudiées.

Wnt5a Est Exprimée En Murines Et Humaines Lésions Athéroscléreuses

American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology. Jun, 2008  |  Pubmed ID: 18456733

L'athérosclérose est une maladie inflammatoire impliquant l'accumulation de macrophages dans l'intima. Wnt5a est un membre non canonique de la famille Wnt de glycoprotéines sécrétées. Récemment, les macrophages humains ont été montré pour exprimer Wnt5a lors de la stimulation par des agents pathogènes bactériens in vitro et dans les lésions granulomateuses dans le poumon de Mycobacterium tuberculosis chez les patients infectés. Expression Wnt5a a également été aimé Toll-like receptor-4 (TLR-4), un récepteur impliqué immunitaire inné dans l'athérosclérose. Ces observations, ainsi que le fait que Wnt5a est impliqué dans la migration cellulaire et la prolifération, nous a conduit à postuler que Wnt5a joue un rôle dans l'athérosclérose. Pour vérifier cette hypothèse, nous avons caractérisé l'expression Wnt5a dans murines et humaines des lésions athérosclérotiques. Les coupes de tissus dérivés du sinus aortique à la crosse aortique de l'apolipoprotéine E-souris déficientes et des sections issues des artères carotides de patients subissant une endartériectomie ont été soumis à une analyse immunohistochimique. Tous les échantillons se sont révélés positifs pour Wnt5a avec une coloration prédominante dans les domaines de l'accumulation de macrophages dans l'intima. En parallèle, nous avons sondé la présence de TLR-4 et a trouvé coïncide TLR-4 et d'expression Wnt5a. Pour la coloration à la fois le Wnt5a et TLR-4, des coupes de tissus consécutifs traités avec un isotype et de l'espèce correspond Ig a servi de témoin négatif et montré peu, le cas échéant, la réactivité. RT-PCR quantitative a révélé que l'expression d'ARNm Wnt5a dans RAW264.7 macrophages murins peut être induite par la stimulation avec le LPS, un ligand connu pour TLR-4. Ensemble, ces résultats démontrent pour la première fois l'expression Wnt5a dans les lésions athéroscléreuses humaines et murines et suggèrent que la diaphonie entre les TLR-4 et Wnt5a est opérationnel dans l'athérosclérose.

Herpes Virus Oncolytiques Thérapie Inverse Tumeur Dysfonction Immunitaire Et Facilite La Présentation Antigène Tumoral

Cancer Biology & Therapy. Aug, 2008  |  Pubmed ID: 18458533

Nous avons précédemment montré que l'administration intratumorale de HSV-1716 (un mutant nul ICP34.5) a entraîné une réduction significative de la croissance tumorale et un avantage significatif en survie dans un modèle murin de cancer de l'ovaire. Ci-joint nous déclarons que oncolytique HSV-1716 génère des effets de vaccination dans le même modèle. Sur HSV-1716 l'infection, les cellules de souris tumeur ovarienne ont montré des niveaux élevés d'expression de glycoprotéines virales B et D et ont été très phagocytés par les cellules dendritiques (CD). Il est intéressant, a augmenté la phagocytose de la tumeur des cellules infectées par les CD a été altérée par l'héparine, et anti-HSV glycoprotéines B et D, ce qui indique que l'infection virale augmente les interactions adhésives entre les PED et les tumeurs des corps apoptotiques. En outre, le HSV-1716 cellules infectées ont exprimé des niveaux élevés de protéines de choc thermique 70 et GRP94, des molécules qui ont été signalés pour induire la maturation des CD, d'accroître la présentation croisée d'antigènes et de promouvoir la réponse immunitaire antitumorale. Après la phagocytose de la tumeur des cellules infectées, les PED ont acquis un statut matures in vitro et in vivo, régulée à la hausse l'expression de la molécule co-stimulatrice et l'augmentation des migrations vers MIP-3beta. En outre, le HSV-1716 le traitement oncolytique nettement réduite facteur de croissance endothélial vasculaire (VEGF) dans les niveaux animaux porteurs de tumeurs abrogeant ainsi la tumeur milieu immunosuppresseur. Ces mécanismes peuvent expliquer les très améliorées des réponses immunitaires anti-tumorales observées dans le HSV-1716 animaux traités. Le traitement oncolytique induit une fréquence significativement plus élevé de cellules de tumeur IFNgamma réactifs producteurs, et induit une infiltration tumorale par les lymphocytes T robuste. Ces résultats indiquent que la thérapie par le HSV oncolytique-1716 facilite les réponses immunitaires anti-tumorales.

Thérapie Biologique Par L'herpèsvirus Oncolytique

Advances in Experimental Medicine and Biology. 2008  |  Pubmed ID: 18546631

L'épuisement Des Retards Cellules Ovariennes Progression Du Cancer Dendritiques Par Stimuler L'immunité Antitumorale

Cancer Research. Sep, 2008  |  Pubmed ID: 18768667

Les cellules dendritiques (DC) et des cytokines qui élargissent progéniteurs myéloïdes sont largement utilisés pour traiter le cancer. Ici, nous montrons que CD11c (+) DEC205 (+) PED coexprimant actine musculaire lisse alpha-et VE-cadhérine à domicile dans les zones périvasculaires dans le microenvironnement cancer de l'ovaire et sont nécessaires pour le maintien de la vascularisation tumorale. Par conséquent, l'épuisement des contrôleurs de domaine dans des souris porteuses de cancer de l'ovaire établie en ciblant différents marqueurs spécifiques retarde significativement la croissance tumorale et améliore l'effet des chimiothérapies standard. Restriction de la croissance tumorale a été associée à l'apoptose vasculaire après l'ablation DC suivie de nécrose, ce qui a déclenché un coup de pouce antitumorale immunogène. Nos résultats fournissent une justification mécaniste éliminer sélectivement associés à la tumeur leucocytes à promouvoir l'immunité antitumorale tout en empêchant la vascularisation tumorale et à développer des vaccins plus efficaces en fonction DC sur une meilleure compréhension du microenvironnement tumoral.

La Modulation De La Réponse Immunitaire Antitumorale Par Complément

Nature Immunology. Nov, 2008  |  Pubmed ID: 18820683

L'implication du complément d'activation des produits dans la promotion de la croissance tumorale n'a pas encore été reconnu. Ici, nous montrons que la génération de C5a du complément dans une croissance de la tumeur microenvironnement de la tumeur renforcée par la suppression de la réponse antitumorale CD8 (+) T à médiation cellulaire. Cette suppression a été associée avec le recrutement de myéloïde des cellules dérivées de suppresseurs de tumeurs dans et augmentation de leur cellules T dirigées capacités suppressives. L'amplification de la capacité suppressive des myéloïde des cellules dérivées de suppresseurs de C5a a eu lieu grâce à la réglementation de la production d'oxygène réactif et les composés azotés. Le blocage pharmacologique du récepteur C5a considérablement freiné la croissance des tumeurs à un degré similaire à l'effet produit par le paclitaxel médicament anticancéreux. Ainsi, notre étude démontre une fonction thérapeutique pour l'inhibition du complément dans le traitement du cancer.

En Suivi De Cellules Dendritiques in Vivo Utilisant L'imagerie De Vie De Fluorescence Et Le Proche Infrarouge-émissives Polymersomes

Molecular Imaging and Biology : MIB : the Official Publication of the Academy of Molecular Imaging. May-Jun, 2009  |  Pubmed ID: 19194761

Non invasive in vivo des cellules de suivi techniques sont nécessaires pour faire avancer le domaine de la cellulaire thérapeutiques à base ainsi que pour élucider les mécanismes qui régissent la biologie des cellules in vivo. La fluorescence est couramment utilisé pour études in vitro et post-mortem, mais biomédicales a été limitée par autofluorescence à tout le niveau et l'animal.

Amplifier L'immunogénicité Des Cellules Tumorales Survivre Permet La Coopération Entre La Doxorubicine Liposomale Et De L'IL-18

Journal of Translational Medicine. 2009  |  Pubmed ID: 20003308

Doxorubicine liposomale (Doxil) est un médicament de chimiothérapie cytotoxique avec un profil de toxicité hématologique favorable. Son médicament actif, la doxorubicine, a des propriétés immunomodulatrices intéressantes. Ici, les effets de Doxil sur la survie immunophénotype des cellules tumorales ont été étudiés.

Vaccins Entiers Antigènes Tumoraux

Seminars in Immunology. Jun, 2010  |  Pubmed ID: 20356763

Bien vaccins contre le cancer avec des antigènes définis sont couramment utilisés, l'utilisation de préparations de cellules tumorales entières dans l'immunothérapie des tumeurs est une approche très prometteuse et peut éviter certaines limitations importantes dans le développement de vaccins. Cellules tumorales entières sont une bonne source de TAA et peut induire des CTL simultanées et CD4 (+) d'activation des lymphocytes T auxiliaires. Nous passons en revue les approches actuelles pour préparer ensemble les vaccins de cellules tumorales, y compris les méthodes traditionnelles de gel-dégel lysats, des cellules tumorales traitées avec une irradiation aux ultraviolets et l'électroporation ARN, ainsi que des méthodes plus récentes visant à accroître l'immunogénicité des cellules tumorales avec une oxydation HOCl ou d'une infection avec la réplication incompétent virus herpès simplex.

Aminoguanidine Administrés Au Cours De L'induction De La Tolérance Orale Modifie La Réponse Systémique Des Rats Tolerised

Cellular Immunology. 2010  |  Pubmed ID: 19931043

Ci-joint, nous avons étudié le rôle de l'oxyde nitrique synthase (NOS)-II dans l'établissement de la tolérance orale induite par dose d'antigène faible. Pour ce faire, nous avons utilisé un modèle de rat de la tolérance orale induite par l'administration intragastrique de faibles doses de l'ovalbumine (OVA). NOS-II a été inhibée in vivo au cours de la survenue de la tolérance par voie intrapéritonéale (ip) de traitement avec de l'aminoguanidine (AMG), une approche sélective NOS-II inhibiteur. Quatre groupes expérimentaux ont été générés: (TOL), les rats tolerised, recevoir OVA, mais pas AMG; (TAG), les rats tolerised avec OVA et recevoir simultanément ip AMG; (ACG), les contrôles traités avec AMG, mais aucun antigène par voie orale, et (CONT) , contrôle ne recevant ni ovules ni le traitement AMG. L'état de la tolérance orale a été évaluée dans tous les groupes en analysant plusieurs paramètres immunitaires lors de l'administration sous-cutanée d'OVA dans un adjuvant complet de Freund. Tout d'abord, nous étions en mesure de déterminer que la NOS-II inhibition modifié l'équilibre TH1/TH2 chez les rats tolerised, la conduite de la TH2 anti-OVA réponse chez le rat TOL vers TH1 chez les animaux TAG, qui a montré amélioré réponses d'hypersensibilité retardée. Deuxièmement, les cultures de splénocytes de rats a montré TAG des niveaux inférieurs de la production d'IL-10 par rapport à des échantillons TOL tel que déterminé par analyse ELISA. Dernière, nous avons détecté la présence d'un Tr1 fonctionnelle réglementaire distincte population de cellules T dans les échantillons de rate provenant d'animaux récupérés TAG. Contrairement à ce qui s'est passé avec des cellules Tr1 TOL, les niveaux de cellules Tr1 dans les échantillons de TAG ont été modifiés par stimulation in vitro avec de l'OVA. Tous ensemble, ces données indiquent un rôle prépondérant pour NOS-II dans le processus de la tolérance orale induite par dose d'antigène faible.

En Fonction Du Temps Médicaments Cytotoxiques Sélective Coopérer Avec L'IL-18 Pour Le Cancer Chimio-immunothérapie

Journal of Translational Medicine. 2011  |  Pubmed ID: 21609494

En fonction du temps des agents chimiothérapeutiques peuvent cibler sélectivement les cellules tumorales dans les phases sensibles du cycle cellulaire mais une fraction de cellules tumorales dans les pays non-vulnérables phases du cycle cellulaire restent résistantes aux médicaments. L'immunothérapie représente une approche prometteuse pour surmonter la limitation de la phase des médicaments spécifiques et d'améliorer leur efficacité clinique. Ici, nous avons étudié la possibilité d'utiliser des médicaments chimiothérapeutiques anticancéreux en combinaison avec l'IL-18, une cytokine avec des propriétés immunostimulantes fortes.

L'interaction Entre Les Surfaces Et Les Facteurs Solubles Définir Le Immunologique Et Des Propriétés Angiogéniques Des Cellules Dendritiques Myéloïdes

BMC Immunology. 2011  |  Pubmed ID: 21645356

Cellules dendritiques (CD) sont des cellules présentatrices d'antigènes capables d'induire des réponses immunitaires spécifiques contre les infections microbiennes, des antigènes de transplantation, ou des tumeurs. Fait intéressant, les conditions de microenvironnement tels que ceux présents dans les milieux tumorales pourrait induire un phénotype DC qui est peu immunogène, et avec la capacité de favoriser l'angiogénèse. Nous émettons l'hypothèse que cette plasticité peut être causée non seulement par l'action de cytokines spécifiques ou des facteurs de croissance, mais aussi par les propriétés des surfaces avec lesquelles ils interagissent, tels que la matrice extracellulaire (ECM) des composants.