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Articles by Felix Ellett in JoVE
JoVE Immunology and Infection
斑马鱼的胚胎细胞内细菌病原体感染
1Department of Molecular Cell Biology, Institute of Biology, Leiden University, 2Department of Medical Microbiology and Infection Control, VU University Medical Center, 3Australian Regenerative Medicine Institute, Monash University
透明斑马鱼的胚胎已经证明有用的模型可视化和主机之间的先天免疫细胞和细胞内细菌病原体的功能，如研究的相互作用，
Other articles by Felix Ellett on PubMed
电子投标系统因子 Erg 斑马鱼血管发生中的作用。
Erg，转录因子的 ETS 家族的成员有牵连过去的研究中内皮细胞和造血发展。放松管制的人类 ERG 轨迹是与急性骨髓性白血病、 前列腺癌和尤文氏肉瘤相关联。更好地了解 Erg 的作用，在早期的开发过程中，我们利用斑马鱼作为一种模式适合于体内的描述性和功能研究。斑马鱼有单个 erg 基因表示在 angioblast 迁移、 血管发生和早期血管生成过程中胚层和其血管的衍生品。突变体和 morphant 表达分析放 erg 在下游的 cloche、 tal1/scl 和 etsrp 的遗传的途径中早期 angioblast 迁移过程。此外，增益的函数和功能损失的研究组合建议 erg angioblast 规格/扩散和早期血管生成，冗余又具体的作用，关键电子投标系统的协同互动因素 etsrp。
斑马鱼作为一种模式为脊椎动物造血功能。
斑马鱼 (表达序列标签斑马鱼） 是生物研究的许多领域作出有益贡献的模式生物。斑马鱼已证明特别适合于研究早期发展。斑马鱼胚胎的透明度和前体内发展意味着可以轻松地可视化，早期的胚胎学，尤其用表示荧光标记感兴趣的组织的转基因品系。高繁殖力和耐受性致密诱变已转发遗传筛选和创造可以从中恢复稳定突变体等位基因的 mutagenized 图书馆的实用模型。瞬态遗传操纵显微注射法 mRNA (表达) 或反义 morpholino 寡核苷酸 (组合式) 提供功能评估遗传调控无需扩展的育种策略的便捷方法。此模型的实用程序一个脱颖而出的例子一直是造血功能的最早阶段建模中的应用。斑马鱼发育造血功能显示的哺乳动物的造血系统发展密切的对应关系，并受保守分子途径。这次审查突出了关键最近的研究，已用此模型来提供深入了解脊椎动物造血细胞发育和先天免疫。
Mpeg1 启动子的转基因斑马鱼直接巨噬细胞沿袭表达。
巨噬细胞和嗜中性粒细胞在非特异性免疫反应、 phagocytosing 入侵微生物和交付抗菌化合物对损伤部位发挥重要的作用。斑马鱼感染/炎症模型中细胞的非特异性免疫反应的功能分析已被资助的转基因株与荧光标记中性粒细胞。然而，没有可能直接研究巨噬细胞行为和体内的中性粒细胞/巨噬细胞相互作用，因为一直没有只巨噬细胞的记者一行。若要删除此设置路障，巨噬细胞特定标记是确定 (mpeg1) 和用于驱动 mpeg1 转基因及其启动子。mpeg1 驱动转基因细胞巨噬细胞沿袭不表示中性粒细胞标记转基因表示。使用这些线路，中性粒细胞和巨噬细胞后伤人被不同的动态行为相比在复合转基因并排。实时随时观察到巨噬细胞/中性粒细胞相互作用，如衰老的嗜中性白细胞的吞噬功能。这些斑马鱼转基因提供新的资源，将有助于炎症、 感染、 和白细胞生物学领域。
体内可视化和氧化的脂质积累高胆固醇血症的斑马鱼的衰减。
低密度脂蛋白的氧化修饰是动脉粥样硬化的发展的早期病理事件。如丙二醛 (MDA) 形成氧化事件可能会产生特定的免疫原性的抗原表位。事实上，MDA 派生的抗原抗体广泛应用于动脉粥样硬化研究，并已证明，使心血管成像。在这项研究，我们制造出转基因斑马鱼与温度诱导表达绿色荧光蛋白标记单链人单克隆抗体，IK17，其中将绑定到 MDA 低密度脂蛋白，并用于成像研究光学透明斑马鱼幼虫。饲喂高胆固醇饮食 (HCD)，辅以红色的荧光脂质标记的转基因斑马鱼导致血管脂质积累，量化中使用共聚焦显微镜的活生动物。后热休克诱导 IK17 与绿色荧光蛋白的表达，我们测量了血管积累的 IK17 特定 MDA 抗原表位的时间进程。一种抗氧化剂或回归饮食治疗导致减少 IK17 绑定到血管病变。有趣的是，IK17 绿色荧光蛋白表达的幼虫匀绑定到 MDA 低密度脂蛋白和抑制巨噬细胞 MDA 低密度脂蛋白结合。此外，持续的 IK17 与绿色荧光蛋白的表达有效地阻止 HCD 诱导的脂质堆积在血管壁，表明抗体本身可能有疗效。因此，我们得出结论 HCD 馈斑马鱼幼虫与条件表达式的绿色荧光蛋白标记氧化特异性抗体起测试最终可能应用于人类的饮食和/或其他治疗抗氧化剂战略的一种有效方法。
中脑后脑边界阵列和形态发生受各种粒状头样 2 依赖通路。
位于中脑后脑边界 (MHB) 的峡部主办机构是负责阵列中脑神经和 metencephalic 地区的脊椎动物大脑关键发展信号中心。层次式程序发起的成纤维细胞生长因子 8 （Fgf8），加上细胞形态发生，最终形成的顶盖峡小脑的结构基因表达的特点是形成和维持的 MHB。在这里，我们显示斑马鱼一个 orthologue 的转录因子有纹路头样 2 (Grhl2)、 斑马鱼 grhl2b MHB 维修和折叠通过调节两个不同的、 非线形通路的中央作用。损失的 grhl2b 表达诱导神经细胞凋亡和灭绝的 MHB 标记，这由酪氨酸锯齿 2a 救出 (eng2a)，Grhl 家族进化保持的目标。Grhl2b 和 eng2a morpholinos sub-phenotypic 剂量充填转载了细胞凋亡和 MHB 标记丢失，但没有大大破坏形成的峡部缩窄。相比之下，小说直接 grhl2b 目标，spec1，确定的系统发育分析和确认的芯片，功能上 grhl2b 诱使 MHB 形态与合作，但是没有作用凋亡或 MHB 标记的维修。集体，这些数据表明 MHB 维修和形态发生游离事件受 grhl2b 通过多样的转录目标。
斑马鱼胚胎中的荧光白细胞数的计算量化。
与白细胞限制表达荧光转基因已基本使用斑马鱼模型的炎症和非特异性免疫反应的最新研究表明。很多使用这些模型进行的实验涉及定量荧光白细胞数的变化。在这里，我们描述工具用于派生一个定量变量从单平面荧光数字图像的整个活胚胎荧光白细胞数目成正比。参数，被称为"白细胞单位，"提供了可靠值线性比例范围 50-400 白细胞或胚胎，在实际白细胞数目和其在更高的白细胞密度的性能仍然是线性。在后面的特点的白细胞规范通路摄动的白细胞数字评分变化，足以证明其有用性。
