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Articles by Felix Moltzahn in JoVE

 JoVE Bioengineering

ハイスループットマイクロRNAプロファイリング:最適化されたマルチプレックスフリューダイナミックArrayTMのIFCSでナノリッタースケールでの定量RT - PCR


JoVE 2552 8/03/2011

1The Eli and Edythe Broad Center of Regeneration Medicine and Stem Cell Research, University of California San Francisco, 2Center for Reproductive Sciences, University of California San Francisco, 3Department of Urology, University of California San Francisco, 4Department of Cell and Tissue Biology, University of California San Francisco, 5Fluidigm Corporation, Fluidigm Corporation, 6Department of Obstetrics and Gynecology, Hadassah-Hebrew University Medical Center, 7UCSF - Helen Diller Family Comprehensive Cancer Center, University of California San Francisco

ここでは、サンプルの限られた量を扱う場合は特に、マイクロRNA(miRNA)の発現レベルのコストと時間効果のハイスループットスクリーニングのツールと​​してのマイクロ流体プラットフォームとの組み合わせで最適化された多重逆転写定量PCR(定量RT - PCR)プロトコルについて説明します。

Other articles by Felix Moltzahn on PubMed

188Re ラベル付けされる自己展開型のニチノール ステント羊モデル内新生内膜増殖の阻害です。

自己展開レニウム 188 を評価するには、(188Re) は radiochemically 放射性ステント羊のラベル。

「がん幹細胞」-、ヒドラと戦うヘラクレスからの教訓。

造血幹細胞の最初の識別後、このような細胞もいくつかの固体腫瘍の種類で発見されました。泌尿器のがん幹細胞のみ前立腺の腫瘍でこれまでのところ発見されています。概念と検出腫瘍幹細胞の幹細胞の研究から派生した所見依存します。したがって、特定し、泌尿器腫瘍幹細胞を特徴づけるに加えて、泌尿器腫瘍における研究も泌尿器科器官の幹細胞生物学について理解を深める目指すべき。類似点と相違はこれらの研究から収集の洞察は生理の幹細胞を温存しながらターゲットの破壊腫瘍幹細胞のための戦略が開発される可能性があります。未来の根治療法泌尿器腫瘍でのメイン ターゲットは中央、不滅の頭のヒドラ、腫瘍幹細胞したがってする必要があります。

MicroRNAの機能は、グローバルマウスの卵母細胞および初期胚に抑制され

マイクロRNA(miRNA)と低分子干渉RNA(siRNA)の両方の処理に必要とされるダイサーは、卵成熟[1]、[2]のために不可欠です。卵母細胞は、miRNAと内在性siRNA(エンド-siRNA)を[3]、[4]の両方を表現しています。減数分裂成熟時のダイサーノックアウト卵母細胞の異常がエンド-siRNAおよび/またはmiRNAのロスに二次的であるかどうかを判断するために、我々は具体的にmiRNAの処理に必要なRNA結合タンパク質をコードする、Dgcr8を削除しました。ダイサーと対照的に、Dgcr8欠損卵子は、miRNAのレベルがダイサー欠損卵母細胞と同様のレベルにまで減少したにもかかわらず、健康に見える子孫を生産し、野生型精子と受精した場合、正常に成熟します。さらに、両方の母体と接合体Dgcr8対立遺伝子の欠失は、内部細胞塊と栄養外胚葉の決定を含め、着床前の発達を阻害しませんでした。ダイサーヌル卵はmisregulated転写産物の数百を示したのに対し、最も驚くべきことに、野生型およびDgcr8ヌル卵母細胞のmRNAのプロファイルは、本質的に同一であった。これらの知見は、miRNAの機能がグローバルに卵成熟および着床前の開発中とエンド-siRNAのではなく、miRNAはなく、卵母細胞におけるDicerのノックアウトの表現の根底にその抑制されていることを示している。

マイクロ流体ベースの多重QRT-PCRは、前立腺癌患者血清中の診断および予後microRNAのシグニチャを識別します

最近の前立腺特異抗原ベースのスクリーニング試験では、前立腺癌の挙動の予測を改善するための新規かつ非侵襲的バイオマーカーの同定戦略のための緊急の必要性を示しています。血清および血漿中の非コードのマイクロRNA(miRNAは)生理学的および病理学的条件のために非侵襲的マーカーとしての可能性を有することが示されている。診断と前立腺癌の予後と相関する血清miRNAを同定するために、我々は384のヒトmiRNAを評価するためのマイクロ流体チップ上のuniplex分析に続いてマルチプレックスPCR産物の精製を含むマルチプレックス定量的逆転写PCR法を開発した。ベンチマークとしてDgcr8とダイサーノックアウト(small RNAの欠損)マウスES細胞を使用して、我々の手法の有効性を確認し、以前に発行された方法の精度はかなりの不足を発見した。健康な男性と異なるキャプラスコアの治療前立腺癌患者からの48血清プロファイリング、私たちは私たちは、がん患者の診断と予後と相関することができますmiRNAの署名を同定した。これらの血清署名は、前立腺癌の進行における機能的役割を示唆して、発癌と腫瘍抑制miRNAを含む。

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