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 JoVE Neuroscience

Culturas organotípicos rebanada de mesencéfalo ventral embrionario: Un sistema para estudiar el desarrollo neuronal dopaminérgica In vitro


JoVE 3350 1/31/2012

Institute of Reconstructive Neurobiology, University of Bonn

Un método para generar cortes organotípicos del cerebro medio E12.5 embrionarias murinas se describe. Las culturas rebanada organotípicos se puede utilizar para observar el comportamiento de las neuronas dopaminérgicas o neuronas del cerebro medio ventral.

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Respuesta Adaptada Del Sistema De Defensa Antioxidante Al Estrés Oxidativo Inducido Por Deoxinivalenol En Células Hek-293

La micotoxinas deoxinivalenol (DON), un contaminante de ciertos alimentos y piensos, es citotóxico y genotóxico en células de mamíferos. Exposición de las células de riñón embrionario humano (Hek-293) a DON condujo a una disminución de dependientes de la dosis y tiempo en la viabilidad celular, con una IC(50) sobre 7.6 μM. Se estudiaron los efectos de DON Hek-293 morfología, especies reactivas de oxígeno, peroxidación de lípidos y antioxidante expresión sistema y caspasa 3 y bcl-2. Las células se convirtió en redondas y en algunos son pérdida progresiva del accesorio celular apareció. Estos parámetros bioquímicos fueron evaluados después de 6, 12 y 24 h de tratamiento con 2.5 y 5 μM DON. Se observó un aumento en la actividad de superóxido dismutasa dentro del intervalo de 6-12 h y recuperación casi completa al final del experimento para ambas concentraciones, mientras que el perfil de actividad de la catalasa era lo mismo con la superóxido dismutasa uno de 2,5 μM y disminuyó de manera dependiente del tiempo para 5 μM. Una activación temporal de la glutatión peroxidasa y glutatión reductasa se registró en postexposición de 12 h, mientras que la actividad de la glutatión-S-transferasa era igual para ambas concentraciones. El NADP (+)-actividad de la deshidrogenasa dependiente de isocitrato demostró un aumento transitorio en la postexposición de 12 h. La expresión de caspasa 3 se mantuvo sin cambios y el bcl-2 uno disminuido después de 24 h de exposición para las dos concentraciones. Nuestros resultados mostraron los cambios específicos de dosis y tiempo en el sistema de antioxidantes de las células Hek-293, que no pudo contrarrestar eficazmente los efectos DON exposición. Los diferentes tipos de muerte celular que podría activarse por este DON cambios inducidos se mencionan.

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