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 JoVE General

Bleu d'électrophorèse sur gel de polyacrylamide natif (BN-PAGE) pour l'analyse des complexes multiprotéiques de lysats cellulaires


JoVE 2164 2/24/2011

1Spemann Graduate School of Biology and Medicine (SGBM), University of Freiburg, 2Centre for Biological Signalling Studies (bioss) and Biology III, Faculty of Biology, University of Freiburg, 3Department of Molecular Immunology, Max-Planck-Institute of Immunology and Epigenetics

Dans cette vidéo, nous décrivons la caractérisation de complexes multiprotéiques (PPM) en bleu électrophorèse en gel de polyacrylamide natif (BN-PAGE). Dans une première dimension, dialysées lysats cellulaires sont séparés par BN-PAGE pour identifier les PPM individuelle. Dans une deuxième dimension SDS-PAGE, PPM d'intérêt sont subdivisées afin d'analyser leurs électeurs par immunoblot.

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Stoechiométrie Et Intracellulaire Sort Des Complexes Contenant Du TRIM TCR

Étudier la stoechiométrie et trafic intracellulaire du récepteur antigène des lymphocytes T (TCR) est essentiel dans la compréhension de ses mécanismes d'activation. L'alphabetaTCR comprend l'antigène-liant TCRalphabeta hétérodimère ainsi que le signal transduction sous-unités CD3epsilongamma, CD3epsilondelta et zeta2. Bien que la molécule d'interaction TCR (TRIM) fait également partie de l'alphabetaTCR complexe, il n'a pas été inclus dans la plupart des rapports jusqu'ici.

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