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Articles by Giselle C. Meléndez in JoVE
JoVE Immunology and Infection
機能心臓の免疫細胞の単離
Department of Cell Biology and Anatomy, University of South Carolina- School of Medicine
心臓から機能的な免疫細胞を単離するためのこの方法では、これらの細胞の反応性の低下、その結果、不要な免疫細胞の活性化を引き起こすコラゲナーゼ消化、の従来の方法に代わる方法が用意されています。分離の手法は、酵素消化に関連する問題を回避することによって機能的な心臓の免疫細胞が得られます。
Other articles by Giselle C. Meléndez on PubMed
In Situ 内皮形成可能性ナノコンポジット Biofunctionalised 生体材料を用いた小口径のバイパス術。
内皮機能障害や心血管移植と関連付けられた内皮の欠如は、移植の失敗は血栓症にリンクされ、関連の合併症の主要な原因です。この研究は、(1) biofunctionalise ナノコンポジット材料の生体、かご型変更ポリカーボネート尿素ウレタン (ポス PCU)、ベースの小口径人工血管と (2) 末梢血液から抽出した単球を含む EPC と内皮形成を誘導する目的としました。(ナノコンポジット ポリマーの Biofunctionalisation 1): 細胞外マトリックス成分、フィブロネクチン、機能的なドメインです、生理活性の RGD ペプチドだった合成 fmoc 保護化学を用いたします。ラウリン酸の疎水性「テール」は生体材料の RGD 方位を最適化するために添付されました。ペプチッド POSS-PCU にリンクされているクロスだった。RGD の存在ナノコンポジットに水接触角の測定値とテストされ、ペプチド RAD (2) 前駆細胞でのテストを行った特異性があったし、アダルト健常人の末梢血液から抽出された多孔質 biofunctionalised ナノコンポジット ポリマー静的条件下で培養しました。細胞は、し、72 h 以下細胞導入後拍動流の非静的条件導入されたグラフト接続されている回路にも導入されました。細胞増殖の程度アラマー ブルー アッセイでテストされました。血管内皮 SEM と内皮細胞マーカー CD34、CD31、eNOS の免疫染色によって確認されました。水の接触角の測定は、その biofunctionalisation ナノコンポジット ポリマーの親水性増加していた示されます。アラマー ブルー biofunctionalised ナノコンポジット上のセルの存在感をより示されて、この細胞生存率の相対的な増加は RAD ペプチドの確認として RGD に固有だった。SEM 内皮細胞の形態のための証拠を提供、この免疫染色で血管内皮細胞のマーカーで確認されました。Biofunctionalised ナノコンポジット ポリマー小径バイパス移植片末梢血液から抽出された細胞から比較的急速な内皮形成の可能性を示した。
エンコードとデコードのバースト NMDA によって層の基底樹状突起 5 錐体ニューロンをスパイクします。
バーストの発生と検出の基礎となるニューロンの専門分野が部分的にしか理解されてが活動電位のバーストは、脳の中の重要な情報-軸受信号です。新皮質錐体細胞の樹状、カルシウム スパイク生成、バーストに貢献する知られている、基底樹状メカニズムの対等な理解が欠けています。ここで基底樹状突起における NMDA スパイク検出と世代のバーストの後シナプス機構を通じて仲介を示します。高周波数入力基底樹状突起に著しく低周波活性化または単一入力に比べて NMDA スパイク開始を促進しました。電圧による従来時間加算エフェクトとは異なりただし、NMDA スパイク円滑化以前のアクティベーションから NMDA 受容体にバインドされて主に残留グルタミン酸依存。入力のバーストによってトリガーされると、我々 は NMDA は生体内のような刺激条件の下でトリガー出力バースト ターンで確実に突出することを発見しました。独自の年会プロパティを通じて、NMDA スパイクしたがって皮質ネットワークを介してバーストの伝播を促進するために最適です。
オメガ 3 脂肪酸 DHA、神経細胞死に関連して変更された亜鉛の輸送が減少します。
ドコサヘキサエン酸 （DHA） は、神経細胞の細胞膜の主要の多価不飽和脂肪酸です。DHA 削減の ZnT3 式および亜鉛の吸収によって神経細胞死の減少を誘導することを仮定します。M17 細胞 DHA 欠乏媒体への露出は、DHA を十分に備えて細胞における神経細胞死を促進する DHA の欠乏の悪影響を確認レベルに比べてアクティブ カスパーゼ 3 のレベルを増加しました。DHA 扱わ M17 細胞における亜鉛摂取 65 ％ 未満だったし、ZnT3 mRNA および蛋白質レベル DHA 枯渇細胞と比較して減少しました。DHA の神経保護機能ターンでアポトーシスを阻害する、セルラー亜鉛含量の減少を通じて発揮されることを提案します。
亜鉛と DHA ヒストン H3 と H4 ひと神経細胞での発現に及ぼす影響に反対するがあります。
Zn と DHA 推定される神経保護効果を持って、これら 2 つの必須栄養素が生化学的対話を知られています。ひと神経細胞ライン M17 応答で Zn とこの相互作用の分子基盤を説明するだろう DHA に特異的に表現される新規タンパク質の候補を特定することを目指した。二次元ゲル電気泳動および MS でのプレゼンスが栽培されていたひとの Ml7 神経細胞の蛋白質の lysates と Zn と DHA の不在の主要タンパク質発現変化を識別に適用されました。プロテオームの調査結果は、さらに Western blot およびリアルタイム PCR 解析を用いて検討しました。重要な差動式があった、4 つの蛋白スポットが同定され、続いてマトリックス支援レーザー脱離イオン化 MS 解析によるゲルのトリプシンの消化力の選択。結果として生じるペプチドの質量指紋各スポットは演繹されることのそれぞれの id を許可しました。2 つの人間のヒストン変異 H3 と H4 を同定しました。H3 と H4 は DHA (Zn 効果) の不在で Zn によって downregulated と DHA (DHA 効果) Zn （生理的条件） の存在下で発現が誘導され.これらプロテオームの調査結果は、さらに Western blot とそれぞれ H3 と H4 特異的モノクローナル抗体をオリゴヌクレオチドのプライマーを用いたリアルタイム PCR 分析によってサポートされていました。我々 は食餌療法の Zn と DHA ヒストンによって仲介される遺伝子発現上のグローバルな影響を引き起こすことを提案する.このような新規の情報を可能な手がかりによる Zn と将来の治療、予防、アルツハイマー病などの神経変性疾患の管理に寄与する DHA の分子基盤を提供します。
Cytodex 1 Microcarriers 2 リットル攪拌槽バイオリアクターで栽培 Vero 細胞によるニューカッスル病ウイルスの生産。
本研究の目的は、細胞培養バイオリアクターでライブ弱毒ワクチンの準備のためによるニューカッスル病ウイルス (NDV) F 株の弱毒ひずみの生産のためのモデルを準備することです。本研究では, まず我々 Vero 細胞文化のいくつかのメディアの成長を検討しました。セルの最大数 Vero 細胞でダルベッコ変更イーグル培地 (10(6) 細胞 x 1.93 された DMEM) 培養によって得られただった/ml. 第二に、Vero 細胞 2 リッター攪拌槽バイオリアクターでいくつかの商業 microcarriers を使用して栽培しました。我々 最大セル濃度約 7.95 10 (5) セル/ml x Cytodex 1 を使用する場合を達成しました。後で田口 L4 メソッドを使用して開発設計に基づく撹拌槽型バイオリアクターにおけるニューカッスル病ウイルスを生産しました。結果は、感染症 (MOI) の高い多様性と細胞乳酸菌のサイズより高いウイルス力価が得られることが明らかに。最後に、ウイルスのサンプル高速遠心分離 3 をベースを使用して精製した （※ *)(3-1) 小数階乗デザイン。統計解析は、最大ウイルス価ウイルス サンプル濃度 58.45 ％ (v/v)、13729 rpm の遠心分離速度および遠心分離の時間 4 時間で実現できることを示した。結論としては、高収率ウイルス価の細胞培養バイオリアクターと分離の最適化による高速遠心分離によって達成できます。
チタンと炭素複合ナノファイバーのプラズマ プロセスによって作製しました。
炭素ナノファイバーの金属または金属炭化物ナノ粒子の混入はそのプロパティを変更してアプリケーションの分野を拡大します。この作業の目的は組織的金属炭化-炭素複合ナノファイバー ナノパターンの深い反応性イオン エッチングによる結合レーザー干渉露光により作製したシリコン基板を準備する新しい非触媒で簡単な方法を報告するためです。チタン カーバイド炭素複合ナノファイバー基板に平行のシリコン線の上に物理的蒸着法を組み合わせたハイブリッド プラズマ プロセスによる栽培し、プラズマ強化化学気相蒸着。電子顕微鏡観察, x 線光電子分光, ラマン分光法と透過電子顕微鏡をスキャン準備ナノファイバーの分析を行いました。我々 は、形状, 微細組織と化学組成として成長したナノファイバーのプラズマ条件を変更することでチューニングできることを示しています。
Microcarriers の異なるタイプを使用してインスリンを生産ブリンいかた Pra-bd11 文化を比較します。
この研究は成長プロファイル、成長カイネティクスと最適化された媒体における microcarriers (MCs) の種類に育った BRIN いかた pra-bd11 細胞のインスリン分泌の応答性を調べるために実施されました。比較は、変性ポリスチレン (Hillex(®) II) で作られたと架橋ポリスチレン プラスチック プラス (PP) Solohill エンジニア リングから。インスリンの生産セルの行は、T-フラスコ MCs に基づいて文化間コントロールとして攪拌槽バイオリアクター 1 L 作業量で実装されました 25 cm(2) で培養した.文化の種類ごと生菌数のグルコース, 乳酸、グルタミン酸とインスリン濃度測定と比較し、あった。実行可能なセルの最大数をそれぞれ 1.47 × 10 (5) セル/mL PP マイクロ （PPMCs） 文化、1.35 × 10 (5) セル/mL Hillex(®) II （HIIMCs） 文化、0.95 × 10 (5) セル/mL の T フラスコ培養で得た。最高のインスリン濃度は HIIMCs 文化 (2.01 mg/L) に比べて PPMCs 文化 (5.31 mg/L) と T フラスコ培養 (1.99 mg/L) で生産されています。したがって PPMCs だった可能性が好ましいとブリンいかた pra-bd11 細胞培養 Hillex(®) II MCs と比較して使用する全体的な観察を示唆しました。
ハイリスク、節陰性乳癌に対するアジュバント ドセタキセル。
ドセタキセル、ドキソルビシン、シクロホスファミド （TAC） のレジメンは、女性のリンパ節転移陽性乳がんのアジュバント療法として使用する場合、フルオロウラシル、ドキソルビシン、シクロホスファミド （FAC を） の処方に優れています。タキサン系薬剤ノード負の病気の治療の値が決定されていません。
ペグ化リポソーム封入ドキソルビシン シクロホスファミド ＋ トラスツズマブの HER2 陽性転移性乳癌患者と組み合わせて: 心臓の有効性と安全性リンパ/2004年-05 研究から。
ドキソルビシン シクロホスファミド ＋ トラスツズマブ併用療法に対するリポソーム化ドキソルビシン (PLD) を代入するのかどうかを決めるためには、ひと上皮増殖因子受容体 2 （HER2) 転移性乳がん (MBC) 過剰ファーストライン療法として組み合わせ第 ⅱ 相試験を実施しました。
In Vivo 実験モデル組織工学小-直径の血管バイパス術。
ポリエステル (ダクロン） または eptfe を実行など不十分な細径血管バイパスとして移植 (SDBGs) 従来人工血管使用。長期開存を維持することができます SDBGs、それらは、体の成長と潜在的進化する可能性は非常に望ましい血管手術で、こうして研究血管組織工学 （TEBVs） に関心のあります。TEBV は、架橋され、平滑筋細胞 (SMCs) 契約コラーゲン マトリックス上に内皮細胞を播くことによって開発されました。ポリエステル グラフトとして足場を務めた。In vivo での内皮形成と TEBVs の長期開存評価する回復学 （12 TEBVs と 7 つのコントロール） が実施されました。血行動態観測パラ吻合 turbulences と吻合部高剪断応力を示した。回復の研究は、コンフルエント内皮形成、血栓フリー表面および特許の TEBVs すべてのケースで実証。接ぎ木定款及び血管新生足場のハイブリッドとコントロールの両方の移植でが発生しました。しかし、肥厚した新生内膜形成 TEBV 移植では、最も可能性の高いポリエステル足場の剛性によって引き起こされたが発生しました。TEBVs とコントロールの両方で認められる重要な perigraft の炎症性変化 1、4、および 8 週で移植。結論としては、TEBVs、赤外線-腎-大動脈グラフト ブタ モデルとして十分な性能を示した。TEBV は有望なモデルとして提供していますの臨床設定の潜在的ひと幹細胞と自然の血管を機械的に準拠していますより多くの生体適合性、生分解性足場 TEBV の開発が容易になります。
一酸化窒素はマウス肝虚血/再灌流障害モデルにおける前処理リモート虚血性の保護効果の本質的なメディエーターです。
(一酸化窒素) 肝臓から IR (虚血/再灌流） 傷害を保護するかもしれない。(リモート虚血プレコンディショニング) RIPC はまた肝臓の IR 傷害を保護する;ただし、RIPC の分子 mediator(s) は現在知られています。No 後肢 RIPC 誘起肝 IR の障害保護の役割を評価するためにした.マウスを次のグループに割り当てられた: 偽のグループ;RIPC グループ (4 × 4 min IR 後肢の 6 サイクル);IR グループ [40 分肺葉 (70%) の肝虚血・再灌流 2 h];RIPC + IR グループ （IR グループ手順を RIPC);C 化された CD/CU [2-(4-carboxyphenyl)-4,4,5,5-tetramethylimidazoline-1-oxyl-3-oxide カリウム塩] + RIPC + IR グループ [C 化された CD/CU （直接ないスカベン ジャー) 投与、RIPC + IR グループ手順が続くだった]。肝 MBF (微小循環血流) 実験をとおしてを測定しました。NOx (亜硝酸および硝酸イオン) のレベルを循環、プラズマ肝トランスアミナーゼ、肝の病理組織学的および TEM （透過型電子顕微鏡） の検討を実験の終わりに行った。NOx 濃度は有意に高値 (P < 0.05) RIPC と RIPC + IR グループで。肝臓と比較して IR だけで、RIPC + IR 保持肝 MBF 肝灌 (P < 0.05)。対照的に、C-化された CD/CU + RIPC + IR 減少 RIPC + IR と比較して MBF (P < 0.05)。RIPC + IR 削減プラズマ トランスアミナーゼ (P < 0.05), と IR を単独で比較した傷害の病理組織学的および超微細構造の機能。肝 IR 傷害を減らす RIPC + IR の保護効果は先行詞の C 化された CD/CU を受信グループで廃止された （C-化された CD/CU + RIPC + IR)。結論として、いいえは保護の不可欠なメディエーター後肢 RIPC 肝 IR 傷害に対するによって与えられます。この保護メカニズムは、正弦波の構造の保全および肝微小循環血流の維持を含みます。
かご型ナノ材料の心血管系アプリケーション: 将来の地平を垣間見る。
ナノテクノロジーの革命的な進歩優れた特性をもつ新規材料バイオ医療応用のため提案します。バイオメディカル応用のための最も有望なナノマテリアルのかご型 (ポス)、シリコンと酸素原子の内側の無機フレームワークと有機グループの外側シェルから成る、驚くべき nanocage です。このナノ粒子の一意のプロパティは、機械的・化学・物理的特性の改善を含む大幅に強化されたプロパティを持つナノ構造を有する共重合体の広い範囲の開発につながっています。ナノ材料 POSS は高い生体適合性であるので、生物医学アプリケーション POSS ナノ構造の激しく検討されています。ナノ材料 POSS のアプリケーションの最も有望な分野の 1 つは心血管系インプラントの開発です。生体適合性ポリマーのポスのとり込み改善血液適合性、抗血栓、強化された機械的および表面プロパティ、石灰化抵抗および削減炎症反応心血管移植材の選択の材料のこれらの材料を作ると高度なナノコンポジット材料で起因しました。これらの汎用性の高い POSS 誘導体心血管のインプラントの分野に新しい地平を開いています。現在、POSS ポリマー心臓弁プロテーゼを含む新世代の心血管系インプラントの開発を含むアプリケーションをバイパス移植片、および冠動脈ステントは集中的な調査の下で成果を奨励します。
乳癌の術前治療としてドセタキセルの投与量密度の高いスケジュール続いてドキソルビシンおよびシクロフォスファミドによる: 第 II 相からの結果します。
目的は局所進行乳癌患者の術前治療としてドキソルビシンおよびシクロフォスファミドによる (AC) によって続いてドセタキセルの線量密なスケジュールを評価するためにあった。
階層的炭素ナノ構造の設計: 超カーボンナノファイバー装飾カーボンナノ チューブを。
プラズマ プロセスを用いたカーボンナノ チューブ (CNT) を飾られた超カーボンナノファイバー (CNF) に基づく階層的炭素ナノ構造を作製しました。CNT の成長のためのサポートとしての使用、ニッケル/炭素複合ナノファイバー ナノパターン シリコン基板上マグネトロンスパッタ法とプラズマ強化化学気相成長 （PECVD） を組み合わせたハイブリッド プラズマ プロセスによって、堆積しました。透過型電子顕微鏡ではランダム内カーボンナノファイバーを分散球状ナノ粒子の存在を明らかにしました。ニッケル微粒子を触媒として CNT の成長を開始するのには、pecvd 法により 600 ℃ で使用されています。超長い CNF に CNT の成長後、SEM イメージング シース CNF Cnt で構成される階層型炭素ナノ構造の形成を明らかにしました。さらに、CNT の成長温度 500 ℃ 未満に減らすカーボンナノウォールの形成に CNT 代わり CNF につながることを示します。この簡易作製法階層炭素ナノ構造の簡単な準備大きい表面エリアだけでなく、そのような材料の単純な操作ナノデバイスに統合するためにできます。
患者の不安の高レベルに関連するパーソナリティ特性とアトピー性皮膚炎協会セロトニントランスポーター遺伝子の多型
コンテキスト: アトピー性皮膚炎 (AD) の症状は、しばしば不安によって悪化してセロトニントランスポーター （5-HTT） は、このコンテキストで重要なことに示されています。この遺伝子の転写に影響を及ぼす 3 つの多型が知られている： のプロモーター領域 (5HTTLPR)、STin2 として呼ばれる、変数番号直列な繰り返し (VNTR) イントロン 2 内 5 HTTLPR 内にある （A/G） 単一ヌクレオチド多型 (SNP) の反復的な要素。目的: 多型による AD の悪化との関係を調べることが可能にストレスします。材料と方法: 33 の年齢と gendermatched 健康な対照被験者と一緒にこのような悪化の歴史を持つ 30 3 患者を実施しました。カロリンスカ スケール パーソナリティ診断の不安に関連するパーソナリティ特性を評価するために採用された、ゲノム DNA は血液サンプルから抽出されたおよびポリメラーゼの連鎖反応を使用して分析します。結果: 患者と健常者の間 5 HTTLPR の短期および長期の対立遺伝子の有病率の差はなかったが、STin2 の短い （10-コピー） バリアントは患者の有病率が高い傾向だった。研究人口はさらに細分化サブグループにによって分析されたときすべての AD 患者高不安特性と STin2 の短いバリアントを行った。対応する健全なコントロール グループで、10 の消長- と 12-コピーの亜種があった 62 ％ と 38 ％、それぞれ (P 0.01 <)。結論： これらの調査結果は不安によって STin2 の 10 コピー バリアントと AD の悪化との関係を示しています。
CA1 放射状斜め樹状突起における非線形統合対線形識別： それは時間です。
複数の興奮性入力 CA1 錐体細胞の樹状突起をほぼ同時にローカルの樹状突起スパイクおよび直線応答、相馬で生成するでアクティブ必要がありますが最近示された;ローカル スパイク開始 (ガスパリーニとマギー, 2006; もわずかな入力同期外れを防ぐLosonczy とマギー、2006年）。これをアクティブな探査とレム睡眠 (シータ) 中に、不十分な同期励起の本質的に線形のデバイスとして機能する ca1 野錐体細胞につながる一方 CA1 錐体細胞だけ非線形統合能力高い同期鋭い波と徐波睡眠と休息/consummatory の動作中に発生するさざ波の中に述べることが推測につながった。詳細な単一ニューロン モデルを使用して、シナプスのシングル リリース イベントを模倣簡単入力用 b-20-5 実観測同期の効果を複製しました。シナプスは、代わりにダブル パルスによって駆動されたときに、生体内で発生するバースト入力の代表的我々 入力同期外れの許容以上の大きさの順で増加していること発見します。効果ペアパルス ファシリテーションの NMDA 受容体を介した応答シャファー担保シナプスで主に依存していた。Ca1 野錐体細胞のすべての主要な海馬州非線形統合ユニットとして機能する可能性が示唆されました。
大腸菌における遺伝子組換えブロメライン生産: 応答曲面法による振盪フラスコ培養におけるプロセスの最適化。
要約： ブロメライン、システインプロテアーゼの様々 な治療および産業アプリケーションと大腸菌の BL21 AI クローン (post-induction 温度, l-アラビノース添加濃度と post-induction の期間) の異なる栽培条件下で発現していた.顔を用いた応答曲面法による最適条件の中心中央複合設計された 0.2% (w/v) l-アラビノース, 8 hr と 25 oc。分散分析は、R2 の大きい方の値を結合した (0.989) 予測に使用される二次モデルが有意に高いことを示した (p < 0.05)。最適化された条件下では、ブロメライン活動 9.6+/-0.02 U/mg 0.15 ％ (w/v) l-アラビノース, 8 hr と 27 の検証実験を与えた一方、モデル生産ブロメライン活動 9.2 U/mg の oc。本研究は、革新的な栽培条件振盪フラスコ培養における組換えブロメラインの良い生産を開発していた。
