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Articles by Ha T. Tran in JoVE

 JoVE Clinical and Translational Medicine

畸胎瘤代睾丸胶囊


JoVE 3177 11/07/2011

1Department of Chemical Physiology, Scripps Research Institute, 2Department of Chemical Physiology, Scripps Research Institute, 3Department of Reproductive Medicine, University of California

人类多能干细胞(hPSCs)有无数不同的疾病的潜在治疗。这些细胞的效用在于事实,即他们可以分化成人体任何细胞类型。在这里,我们描述畸胎瘤实验,这用于演示的hPSCs pluripotence的。

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胞外环 S 神经肽受体之一的生源与功能的重要性。

神经肽 S (NPS) 是内源性配体的前身孤儿 G 蛋白偶联受体 (气相化学还原)。NPS 受体 (NPSR) 所属的肽 GPCRs 亚科,并在大脑中广泛表示。NPS 促进觉醒和胍诱导后啮齿动物管理中心。以前,我们曾报道人类 NPS 受体 N107I 多态性导致增益--功能的特点是增加在激动剂效力而不改变激动剂结合亲和力。我们通过调查 107 阵地附近的突变的药理和生化后果扩展我们的研究结果。D105 和 N101,作丙氨酸替换和激动剂诱导变化的细胞经分析稳定克隆了。西方的污点与流式监测受体蛋白的表达。D105A 突变产生有大约 200-fold 高 EC(50) 尽管相比表示 NPSR N107 父母受体的细胞株的高架总受体蛋白和表面表达的受体。N101A 造成轻微的突变减少而不会影响蛋白质的能力,以形成功能性受体激动剂效力。稳定 NPSR A101 克隆显示小完全糖化形式的表达式。然而,NPSR A101 受体在细胞表面上表示,功能,暗示这完整的糖基化不必需的受体功能。我们的研究表明与 N 糖基化不是重要的受体生物发生或函数,和这种残留物 D105 可能受体结合的关键。

正常的人类胚胎干细胞系表现出普遍的马赛克非整倍体。

人类胚胎干细胞 (hPSC) 行已被认为是均匀腭裂。在这里我们报告,正常的 hPSC — — 诱导多能干 — — 包括行是腭裂的单元格与所确定的染色体计数显示非无性非整倍体的许多细胞混合在一起、 光谱核型分析技术 (天空) 和荧光原位杂交 (FISH) 相间/非分裂细胞的染色体镶嵌图案。这马赛克非整倍体类似于在发展中国家的大脑和植入前胚胎,这表明它正常的而不是病态,功能的干细胞系的祖细胞中观察到。生成的马赛克非整倍体染色体非均质性对报告功能和表型异质性的 hPSCs 行,以及其疗效和移植后的安全作出贡献。

诱导多能干细胞从高度濒危物种。

对于一些高度濒危物种有太少的交涉能力动物要保持足够的遗传多样性,和非同寻常的措施是必要措施防止灭绝。我们从两个濒危物种报告诱导的多功能干细胞 (魔鬼) 的一代: 灵长类动物、 钻、 Mandrillus leucophaeus、 近乎灭绝的北方白犀牛,Ceratotherium simum 麒麟菜。魔鬼可能最终促进遗传材料被重新列入繁殖种群。

通过基于阵列的 Glycomic 分析确定的人类胚胎干细胞的分离的具体凝集素标志。

质量控制在基础研究、 应用程序基于细胞治疗迫切需要隔离人类胚胎干细胞 (hPSC) 人口快速和可靠的方法。使用凝集素阵列,我们分析了从 26 hPSC 样本中提取的糖蛋白和 22 分化细胞样本,并带有独特的具有约束力的签名的足以从各种各样的非多能干细胞类型区分 hPSCs 确定凝集素一小群。这些特定的生物标志物被共享的所有 12 人类胚胎干细胞和 14 人类诱导的多功能干细胞样本研究,不论出身、 文化条件、 体细胞类型重新编程或使用的编程方法的实验室。我们证明实际应用的特定凝集检测 hPSCs 内一定数量的分化的细胞凝集素介导染色荧光显微镜与流式,然后通过丰富和清除可行 hPSCs 从混合的细胞群体使用凝集素介导的细胞分离。全球基因表达分析表明评选相关差异表达特定的 fucosyltransferases 和 sialyltransferases,这可能就是这些蛋白质糖基化和凝集的差异。两者合计,我们的研究结果显示该蛋白糖基化多能干和非多能干细胞之间有很大不同,和证明凝集素可用于作为生物标志物监测多潜能干细胞群体中和去除的可行 hPSCs 从混合的细胞群体。

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