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In JoVE (2)
- Mikroinjektion von Medaka Embryonen für die Verwendung als Modell Genetic Organism
- Dechorionation von Medaka Embryonen und Zell-Transplantation für die Erzeugung von Chimären
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Articles by Huijia Wang in JoVE
JoVE General
Mikroinjektion von Medaka Embryonen für die Verwendung als Modell Genetic Organism
Centre for Regenerative Medicine, Department of Biology and Biochemistry, University of Bath
Medaka und Zebrafisch sind für die genetische Dissektion Vertebratengenom Funktionen ergänzen. Dieses Protokoll werden die wichtigsten Punkte für eine erfolgreiche Mikroinjektion in medaka Embryonen eine wichtige Technik für embryologische und genetische Analyse mit medaka und Zebrafisch in einem Labor.
JoVE General
Dechorionation von Medaka Embryonen und Zell-Transplantation für die Erzeugung von Chimären
Centre for Regenerative Medicine, Department of Biology and Biochemistry, University of Bath
Aufgrund der harten und weichen Chorion Embryonen, die Manipulation von Embryonen medaka ist mehr als in Zebrafisch beteiligt. Dieses Video zeigt Schritt-für-Schritt-Anleitungen, wie Sie medaka Embryonen zu manipulieren, einschließlich dechorionation, Montage in Agarose für die Bildgebung und-Transplantation für die Herstellung von Chimären. Diese Verfahren sind unerlässlich, um medaka und Zebrafisch in einem Labor zu verwenden, um vollen Nutzen aus ihren komplementären Funktionen für die genetische Dissektion Vertebratengenom Funktionen übernehmen.
Other articles by Huijia Wang on PubMed
Insuffizienz Der BUBR1, Aufsichtsbehörde Prüfpunkt Mitotische Spindel Bewirkt, Dass Beeinträchtigte Ciliogenesis Bei Wirbeltieren
Angehenden Tabulos von Benzimidazol-bezogene 1 ist (BUBR1) ein zentrales Molekül Spindel Baugruppe Checkpoint. Keimbahn-Mutationen in der angehenden Tabulos Benzimidazole 1 Homolog Beta Gen Kodierung BUBR1 verursachen vorzeitige Chromatid Trennung (Mosaik panaschierten Aneuploidie) [PCS (MVA)]-Syndrom, die durch konstitutionelle Aneuploidie und ein hohes Risiko für Krebs im Kindesalter gekennzeichnet ist. Patienten mit dem Syndrom entwickeln oft Dandy-Walker-komplexe und polyzystische Nieren; Was bedeutet eine entscheidende Rolle des BUBR1 bei Morphogenese. Jedoch ist wenig bekannt über die Funktion von BUBR1 als mitotische Kontrolle. Hier berichten wir, dass BUBR1 für die primäre Zilie Bildung wichtig und das PCS (MVA)-Syndrom ist somit eine neuartige Ziliopathie,. Morpholino Knockdown von bubr1 in Reiskärpfling Fisch verursacht auch Ziliendysfunktion charakterisiert durch Mängel zerebelläre Entwicklung und gestört links-rechts-Asymmetrie des Embryos. Biochemische Analysen gezeigt, dass BUBR1 erforderlich für Ubiquitin-vermittelte Proteasomal Verschlechterung der Zellteilung Zyklus Protein 20 in der G0-Phase ist und Anaphase-promoting unterhält Komplex/Cyclosome-CDC20 Homolog 1-Aktivität, die das optimale Niveau der zerzausten für Ciliogenesis regelt.
Grundlegenden Techniken Für Die Einführung Von Reiskärpfling Auf Einem Zebrafisch-Labor--der Kombinierte Einsatz Von Reiskärpfling Und Zebrafisch Für Weitere Die Genetik Der Funktion Des Vertebrate Genom
Der Medaka Oryzias Latipes, ein kleines eierlegenden Süßwasserfisch, ist eine der drei vertebrate Modellorganismen in der genomweiten Phänotyp-gesteuerte mutant Bildschirme durchgeführt wurden. Trotz einer Reihe von großen Bildschirmen im Zebrafisch wurden eine beträchtliche Anzahl von Mutanten mit neuen unterschiedliche Phänotypen in ähnlich großen Bildschirmen in der Reiskärpfling identifiziert. Dies beobachtet, Unterschied im Phänotyp durch die beiden Arten haben eine einzigartige Kombination von genetischen, biologischen und Erziehungspsychologie Eigenschaften ist. Die zwei genetische Modelle teilen ein ganzes Genom Vervielfältigung-Ereignis der Tetrapoden; jedoch hat jeder unabhängig spezialisiert oder die Funktion eines der beiden Paralogues verloren. Die beiden Fischarten ergänzen einander als genetische Systeme wie der direkte Vergleich der Phänotypen, einfache Side-by-Side-Analyse mit den gleichen Techniken und einfache und kostengünstige Tierhaltung Mutanten machen diese kleinen Teleosts in Kombination sehr mächtig. Darüber hinaus haben beide Entwurf Genomsequenzen und Bioinformatic Hilfsmittel zur Verfügung, die die Genetik einschließlich des gesamten Genoms Ansätze weiter zu erleichtern. Zusammen mit dem Gen Ansatz Gen Knockout-Mutanten der Fisch Modelle generieren ergänzen die beiden Fische-Modelle die Maus in genetisch sezieren vertebrate Genom-Funktionen. Die externe Embryogenese und transparente Embryonen der Fische erlauben systematische Isolierung des embryonalen letale Mutationen, die schwierigsten Ziele in Säugetieren mutant Bildschirme. In diesem Kapitel wird beschrieben, wie arbeiten mit Reiskärpfling und Zebrafisch fast als eine Art in einem Labor, Schwerpunkt Reiskärpfling und Hervorhebung der Unterschiede zwischen den Systemen Reiskärpfling und Zebrafisch.
