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In JoVE (2)
- Microiniezione di embrioni Medaka per essere utilizzato come organismo modello genetico
- Dechorionation di embrioni Medaka e trapianto di cellule per la generazione di chimere
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Articles by Huijia Wang in JoVE
JoVE General
Microiniezione di embrioni Medaka per essere utilizzato come organismo modello genetico
Centre for Regenerative Medicine, Department of Biology and Biochemistry, University of Bath
Medaka e zebrafish sono complementari per la dissezione genetica delle funzioni del genoma dei vertebrati. Questo protocollo mette in evidenza i punti chiave per il successo microiniezione in embrioni Medaka, una tecnica importante per l'analisi embriologiche e genetiche utilizzando Medaka zebrafish e in un laboratorio.
JoVE General
Dechorionation di embrioni Medaka e trapianto di cellule per la generazione di chimere
Centre for Regenerative Medicine, Department of Biology and Biochemistry, University of Bath
A causa del corion duro e morbido embrioni, la manipolazione degli embrioni Medaka è più coinvolto che in zebrafish. Questo video mostra passo per passo le procedure di come manipolare gli embrioni Medaka, tra cui dechorionation, montaggio in agarosio per l'imaging e il trapianto di cellule per la produzione di chimere. Queste procedure sono essenziali per l'uso Medaka zebrafish e in un laboratorio per sfruttare al massimo delle loro caratteristiche complementari per la dissezione genetica delle funzioni del genoma dei vertebrati.
Other articles by Huijia Wang on PubMed
Insufficienza Di BUBR1, Un Regolatore Del Checkpoint Mitotico, Provoca Disturbi Ciliogenesis Nei Vertebrati
Germoglia disinibito da 1 benzimidazolo-correlati (BUBR1) è una molecola centrale del checkpoint mandrino assieme. Mutazioni germinali in erba disinibito da benzimidazoles 1 omologo beta gene codifica BUBR1 causano separazione prematura Cromatidio (aneuploidia variegata a mosaico) sindrome [pz (MVA)], che è caratterizzata da aneuploidia costituzionale e un elevato rischio di cancro infantile. I pazienti con la sindrome sviluppano spesso i reni policistici e complessi di Dandy-Walker; implicando un ruolo critico di BUBR1 nella morfogenesi. Tuttavia, poco è noto circa la funzione di BUBR1 diverso dal controllo mitotic. Qui, segnaliamo che BUBR1 è essenziale per la formazione del cilio primario, e che la sindrome di pz (MVA) è quindi un romanzo Ciliopatia. Oligonucleotides atterramento di bubr1 nei pesci medaka causato anche disfunzione ciliare caratterizzata da difetti di sviluppo cerebellare e perturbato asimmetria sinistra-destra dell'embrione. Analisi biochimiche ha dimostrato che BUBR1 è necessaria per proteosomale di ubiquitin-mediato degradazione della proteina ciclo di divisione cellulare 20 nella fase G0 e mantiene anafase-promozione attività omologo complesso/cyclosome-CDC20 1 che regola il livello ottimale di scomposto per ciliogenesis.
Tecniche Essenziali Per Introdurre Un Laboratorio Zebrafish - Verso L'uso Combinato Di Medaka E Zebrafish Per Ulteriore Dissezione Genetica Della Funzione Del Genoma Vertebrato Medaka
Medaka, Oryzias latipes, un piccolo uova pesce d'acqua dolce, è uno dei tre organismi modello vertebrati in cui genome-wide basata sul fenotipo mutanti schermi sono stati effettuati. Nonostante un certo numero di grandi schermi in zebrafish, un notevole numero di mutanti con nuovi fenotipi distinti sono stato identificato nelle schermate simili su larga scala in the medaka. Questo osservato differenza nel fenotipo è dovuto le due specie avendo una combinazione unica di proprietà genetiche, biologiche ed evolutiva. I due modelli genetici condividono un evento di duplicazione del genoma intero oltre che dei tetrapodi; Tuttavia, ognuno indipendentemente ha specializzato o perso la funzione di uno dei due paralogues. Le specie di due pesci complementano a vicenda come sistemi genetici come semplice confronto dei fenotipi, facilità di side-by-side analisi utilizzando le stesse tecniche e allevamento semplice e poco costoso di mutanti rendono questi teleostei piccoli abbastanza potente in combinazione. Inoltre, entrambi hanno sequenze di genoma di progetto e strumenti di bioinformatic disponibili che facilitano ulteriormente la dissezione genetica tra cui approcci intero genoma. Insieme con l'approccio orientato al gene per generare mutanti knockout gene dei modelli di pesci, i modelli di due pesci completano il mouse nella dissezione geneticamente le funzioni del genoma vertebrati. L'embriogenesi esterno e trasparenti embrioni dei pesci permettono isolamento sistematico di mutazioni letali embrionali, gli obiettivi più difficili in mammiferi schermi mutanti. In questo capitolo viene descritto come lavorare con medaka e zebrafish quasi come una specie in un laboratorio, concentrandosi su medaka ed evidenziando le differenze tra i sistemi medaka e zebrafish.
