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- Microinyección de embriones de medaka para su uso como un organismo modelo genético
- Dechorionation de embriones de medaka y trasplante de células para la generación de quimeras
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Articles by Huijia Wang in JoVE
JoVE General
Microinyección de embriones de medaka para su uso como un organismo modelo genético
Centre for Regenerative Medicine, Department of Biology and Biochemistry, University of Bath
Medaka y pez cebra son complementarios para la disección genética de las funciones de genoma de los vertebrados. Este protocolo pone de relieve los puntos clave para el éxito de microinyección en embriones medaka, una técnica importante para el análisis embriológicos y genéticos con medaka y pez cebra en un laboratorio.
JoVE General
Dechorionation de embriones de medaka y trasplante de células para la generación de quimeras
Centre for Regenerative Medicine, Department of Biology and Biochemistry, University of Bath
Debido a que el corion duro y blando de embriones, la manipulación de embriones medaka es más complicado que en el pez cebra. Este video muestra paso a paso los procedimientos para la forma de manipular embriones medaka, incluyendo dechorionation, montaje de agarosa para la imagen y el trasplante de células para la producción de quimeras. Estos procedimientos son esenciales para el uso medaka y pez cebra en un laboratorio para sacar el máximo provecho de sus características complementarias para la disección genética de las funciones de genoma de los vertebrados.
Other articles by Huijia Wang on PubMed
La Insuficiencia De BubR1, Un Huso Mitótico Regulador De Checkpoint, Causas Ciliogenesis Impedimentos De Los Vertebrados
Ciernes desinhibida por benzimidazol relacionada con 1 (BubR1) es una molécula central del puesto de control conjunto del eje. Mutaciones germinales en el incipiente desinhibida de bencimidazoles una codificación homólogo gen de la beta BubR1 causar la separación prematura de cromátidas (aneuploidía mosaico abigarrado) [PCS (MVA)] síndrome de Down, que se caracteriza por la aneuploidía constitucional y un alto riesgo de cáncer en la infancia. Los pacientes con el síndrome a menudo se desarrollan de Dandy-Walker riñones poliquísticos y complejas, lo que implica un papel fundamental en la morfogénesis de la BubR1. Sin embargo, poco se sabe acerca de la función de que no sea de control mitótico BubR1. En este caso, nos informan de que BubR1 es esencial para la formación de cilio primario, y que los PCS (MVA) síndrome de Down es, pues, un ciliopathy novela. Morpholino caída de BubR1 en el pescado medaka también causó disfunción ciliar se caracteriza por defectos en el desarrollo del cerebelo y perturbado asimetría izquierda-derecha del embrión. Los análisis bioquímicos demostraron que BubR1 se requiere para la degradación mediada por ubiquitina-proteasoma de proteínas ciclo de división celular 20 en la fase G0 y mantiene la anafase de la promoción complex/cyclosome-CDC20 homólogo una actividad que regula el nivel óptimo de revuelto de ciliogenesis.
Técnicas Esenciales Para La Introducción De Medaka a Un Laboratorio De Pez Cebra: Hacia La Utilización Combinada De Medaka Y Pez Cebra Para La Disección Genética De La Función Del Genoma De Los Vertebrados
El medaka, Oryzias latipes, una pequeña puesta de huevos de peces de agua dulce, es uno de los tres organismos modelo de vertebrados en la que todo el genoma impulsadas por el fenotipo mutante pantallas han llevado a cabo. A pesar de una serie de grandes pantallas en el pez cebra, un número sustancial de nuevos mutantes con fenotipos distintos fueron identificados en similares a gran escala las pantallas en el medaka. Esta diferencia observada en el fenotipo es debido a las dos especies que tienen una combinación única de propiedades genéticas, biológicas y evolutivo. Los dos modelos genéticos compartir un evento de todo el genoma duplicación sobre la de los tetrápodos, sin embargo, cada uno ha independiente especializada o perdido la función de uno de los dos paralogues. Las dos especies de peces se complementan entre sí como los sistemas genéticos como la comparación directa de los fenotipos, la facilidad de análisis de lado a lado, utilizando las mismas técnicas y cría simple y barato de los mutantes que estos pequeños peces teleósteos muy potente en combinación. Además, ambos tienen proyectos de secuencias del genoma y las herramientas bioinformáticas disponibles que facilitan aún más la disección genética incluidos los enfoques de todo el genoma. Junto con el enfoque de genes impulsada por la generación de mutantes del gen de octavos de final de los modelos de peces, los dos modelos de pescado se complementan con el ratón en la disección genética del genoma de vertebrados funciones. La embriogénesis externa y los embriones de los peces transparentes permiten el aislamiento sistemático de mutaciones letales embrionarias, los objetivos más difíciles en los mamíferos pantallas de mutantes. Este capítulo describe cómo trabajar con tanto medaka y pez cebra casi como una especie en un laboratorio, centrándose en la medaka y poner de relieve las diferencias entre el medaka y los sistemas de pez cebra.
