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Articles by Huseyin C. Yalcin in JoVE
JoVE General
アン EX - OVOニワトリ胚培養システム
1Department of Biomedical Engineering, Cornell University, 2Current Address: Mechanical Engineering Department, Dogus University
この記事では、我々は長期的な有効にするシンプルな方法論を提示
Other articles by Huseyin C. Yalcin on PubMed
リビングの比較研究振動光ピンセットを用いたマイクロメカニカル プロパティをセルします。
マイクロメカニックス プロパティの生物の細胞は細胞の機能に重要なです。様々 なアプローチの広範な調査にもかかわらず、被写体の理解は、とらえどころのないまま。培養肺胞上皮細胞は振動の光学ピンセット ベースの cytorheometer のマイクロメカニックス プロパティの比較研究を実施しました。本研究は, これらの細胞の周波数に依存する粘弾性による光トラッピングを測定し、強制振動はサブミクロン内因性細胞内オルガネラ （細胞内のもの） または、1.5microm のシリカ ビーズ トランス膜インテグリン受容体 （細胞） を介して細胞骨格に接続されています。貯蔵弾性率と複素すり弾性率の大きさの両方弱いベキ依存頻度と続きます。これらのデータに匹敵する他の測定手法によって得られたデータです。ベキ依存性イントラと余分な携帯計測からデータの指数は、よく似ています;ただし、2 つの測定からのモジュライの大きさの違いは統計的に有意です。
鳥類心臓発生の二光子顕微鏡誘導フェムト秒レーザーPhotoablation：ローカライズされた心臓の欠陥の非侵襲作成
胎児の心臓の形成は遺伝的および血行動態の刺激の間の複雑なフィードバックによって駆動されます。胚発生時に変更された血行動態の役割を果たす可能性があることを示唆している基礎となる遺伝的変異とローカライズされたmicrotissueの奇形などが、しばしばマニフェスト臨床先天性心疾患（CHD）、、。この関係の調査は、地域をターゲットと心臓の摂動を作成することができます実験的なツールの不足によって損なわれている。ここでは、機械的なシグナリングとCHDの変化との関係を分析する鳥類の心臓発生を調節することができる非侵襲的な光学技術を開発しました。我々は、クッションおよび心室のダイナミクスと暴行ひよこの心の内側にマイクロメートルサイズのボリュームを対象とするフェムト秒パルスレーザーphotoablationを監視するために二光子励起蛍光顕微鏡を使用していました。我々は選択的にハンバーガー·ハミルトン24ニワトリ胚における優れた房室（AV）クッションの小さい（〜100μmの半径）領域をphotoablated。私たちは、混乱が血液および重度の動脈収縮のプーリング静脈をもたらしたAV逆流を引き起こすことが超音波を介して定量した。 48時間postablationで、定量的なX線microcomputed断層イメージングは、発育不全、心室の成長と顕著な左心房拡張を示した。組織学的分析レーザーアブレーション法は、優れたAVクッションにローカライズされた欠陥を生成することが明らかに：クッション組織の小さなquasispherical領域が完全に抹消し、心筋壁に隣接する領域には、以下のセル化であった。クッションと心筋の両方が偽手術対照群より有意に小さかった。我々の結果は、フェムト秒パルスレーザーphotoablationと相まって二光子励起蛍光は、臨床CHDを模倣することがローカライズされたマイクロ欠陥の作成を通して、心臓の形態形成に血行動態のシグナル伝達を研究するための強力なツールと見なされるべきであることを強調。
鳥房室弁の血行動態のパターニング
本研究では、厳密に鳥の胚の房室（AV）運河の進化血行動態環境を定量化するための革新的なアプローチを開発しています。超音波生成された速度プロファイルは、マイクロCT画像にインポートされたハンバーガー·ハミルトン（HH）のステージ17と30の間の解剖学的に正確な心臓のジオメトリを生成します。計算流体力学シミュレーションはして実施し、結果がin vivoでの観測で模倣されるまで繰り返されました。管状の心臓の血流（HH17）は、並列合理化と層流であったが、強い渦がクッションと中隔の壁の拡張との同時開発しました。すべての調査の段階では、最高の壁せん断応力（WSS）は、AV運河弁形成領域にローカライズされています。ピークWSSはHH30でHH17に287.18ダイン/ cm（2）で19.34ダイン/ cm（2）から増加したが、時空WSSはHH30ためのHH17に9.11ダイン/ cm（2）3.62ダイン/ cm（2）となった平均。血行動態の変化は、しばしば先行し、形態学的変化と相関していた。これらの結果は、将来の血行動態の分析と解釈を支援する定量的な基準を確立します。
マイクロCTでのライブ鳥類胚形態形成の定量的な三次元イメージング
多くの臨床的に関連する先天性奇形が遅く胚の段階半ばの間に発生します。この期間は増加した実験的なばらつきを持つ複数の検体の使用を必要と、ライブ胚における定量的に画像に挑戦されています。ここでは、ライブのトリ胚の3次元マイクロCTイメージングのためのX線や血液プールコンピュータ断層撮影（CT）造影剤の毒性と催奇形性のしきい値を確立します。 4日目のニワトリ胚は、欠陥なしで追加の6日間のために開発さVisipaque™（VP）とマイクロ注入した。最大798線量のX線放射は無毒であった。 1060 HUのピーク対平均コントラストが50μmの分解能でイメージングの1時間以内に起こった。 VP-強化されたコントラストは、尿膜における遅延蓄積と過去の24時間を持続した。 VP-注入胚の地域のボリュームは、四酸化オスミウムで灌流固定した胚のものと統計的に同一であった。我々は、さらに30時間かけて尿膜の長手方向の体積の形態を定量化した。これらの結果は、ライブ胚の造影定量的なマイクロCTイメージングの安全性と有効性を示しています。
