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Zona Pelúcida Y La Progesterona Inducida Por Ca 2 + De Señalización Y La Reacción Acrosomal En Espermatozoides Humanos

Cómo Atraer Un Espermatozoide

Codificación De La Intensidad De Progesterona Por El Estímulo Intracelular [Ca2 +] ([Ca2 +] I) En Los Espermatozoides Humanos

La progesterona induce una bifásica Ca (2 +) influjo y la consecuente reacción acrosomal en espermatozoides humanos. Hemos utilizado dos procedimientos para variar el estímulo (dosis y desensibilización del receptor antes) para investigar la codificación de la fuerza por estímulo intracelular [Ca (2 +)] ([Ca (2 +)] (i)). Reacción del acrosoma y la amplitud (pero no la cinética) del transitorio [Ca (2 +)] (i) respuesta (medición de la población) mostraron una sensibilidad dosis sigmoidea en el rango de 0,3 nM de 3 MicroM, saturando a aproximadamente 300 nM (ED (50) aproximadamente 30 nM). La amplitud de la respuesta sostenida saturado a 3 microM. Una sola célula de imágenes mostraron que las amplitudes de dos transitorios y sostenida [Ca (2 +)] (i) las respuestas fueron altamente dependiente de la dosis, pero que su frecuencia de aparición y la cinética eran en gran parte independiente de la dosis. Fluorimétricas mediciones confirmaron que la progesterona inducida [Ca (2 +)] (i) ingreso estaba sujeto a la desensibilización, con las aplicaciones de la segunda y subsiguientes de la progesterona 3 microM ser ineficaz. Sin embargo, las adiciones secuenciales de 3 nM, 30 y 3 de progesterona microM generado transitoria [Ca (2 +)] (i) las respuestas a cada concentración, la amplitud y duración de la respuesta a 3 progesterona microM siendo reducido en comparación con las células no pretratadas . Sola celda de imagen reveló que el pretratamiento no tuvo ningún efecto sobre la proporción de células sensibles, pero una sola célula de respuestas, de manera similar a las respuestas de la población, eran más pequeñas y marcadamente reducida en duración, consistente con un efecto de la desensibilización en un componente tardío de la Ca [ (2 +)] (i) transitoria. Se concluye que la fuerza del estímulo progesterona, cuando varió por dosis o por la desensibilización, es codificada por un análogo de [Ca (2 +)] (i) de la señal. Dependencia de la dosis de la reacción de acrosoma tanto, se determina no por el número de células que responden a la progesterona, pero por la variación en la probabilidad de exocitosis en una "constante" población sensible.

Oscilaciones Lentas De Calcio En Espermatozoides Humanos

Hemos utilizado una sola célula de imágenes para investigar la señalización intracelular de Ca2 + en los espermatozoides humanos estimulados con progesterona (3 microM). En aprox. 9% de progesterona células causado la activación de lenta repetitivo [Ca2 +] i (intracelular de Ca2 + concentración) oscilaciones, con un período de 1-4 minutos, que persistió durante la duración de la grabación (20-30 min). El pretratamiento con nifedipino, que bloquea la T y tipo L voltaje que funciona con canales de Ca2 + en las células de espermatogénesis, no modificar las características de las oscilaciones, pero redujo la proporción de células en las que se observaron. La estimulación con Bay K 8644 o FPL64176 inducida [Ca2 +] i oscilaciones en el 5-10% de las células, pero su frecuencia es baja (periodo, 4-5 min). Aplicación de valinomicina (1 microM) para sujetar el potencial de membrana en E (K) (potencial de equilibrio para el potasio) no modificar la actividad en las células oscilante, mostrando que el potencial de la membrana plasmática y la activación de voltaje que funciona con conductancias no están implicados en el mecanismo por el cual espermatozoides [Ca2 +] i oscilaciones que se generan.

Cinética De La Reacción Acrosomal Inducida Por La Progesterona Y Su Relación Con Las Respuestas De Calcio Intracelular En Espermatozoides Humanos Individuales

La progesterona a las 3 microM provoca un aumento bifásico (transitoria y sostenida) de calcio intracelular ([Ca (2 +)] (i)) en el esperma humano, que se cree que es un requisito previo para la progesterona inducida por la reacción del acrosoma (RA). Como se sabe muy poco acerca de cómo AR ocurrencia, la latencia, y la terminación se refieren a las características de la progesterona inducida [Ca (2 +)] (i) de la señal, hemos examinado estos eventos mediante microscopía de fluorescencia de los espermatozoides vida humana individual. La evaluación directa del estado acrosomal después de la filmación de calcio no mostraron diferencias en la cinética o la amplitud de las respuestas anteriores de calcio inducida por la progesterona en las células del acrosoma reaccionado, y el acrosoma intacto-, lo que indica que la amplitud de la [Ca (2 +)] (i) la señal no es el determinante crítico de la AR. La quelación de calcio extracelular para arrestar a AR en distintos momentos después de la estimulación de progesterona reveló que el máximo de AR se produjo inmediatamente después del estímulo de la progesterona, durante la entrada de calcio transitorio inicial en lugar de durante la respuesta de calcio sostenido. Los intentos para seguir la dispersión acrosómica en tiempo real mediante la tinción con el ácido LysoTracker orgánulo sondas DND-99 y dapoxyl (2-aminoetil) sulfonamida (DAES) no fueron concluyentes debido a etiquetado heterogénea de la población celular. Sorprendentemente, el medio de contraste a menudo no se limita a la acrosoma, pero manchada toda la cabeza del espermatozoide, lo que sugiere que sólo una subpoblación de células de esperma humano contiene un acrosoma suficientemente ácida.

Acciones De Esteroides No-genómica En Espermatozoides Humanos. "Persistente El Cosquilleo De Un Ambiente Cargado"

Como espermatozoides atraviesan el tracto femenino de vagina a ovocitos, experimentan un entorno esteroide, que debido a la inactividad transcripcional, sólo pueden responder a través de señalización no genómico. Este ambiente media eventos incluyendo capacitación, cambios en los patrones de motilidad, Quimiotaxis y reacción acrosómica. Conocimiento actual de la identidad potencial de receptores implicados, eventos y vías de señalización de calcio se repasa a la luz de los datos recientes, con un contexto para seguir trabajando en el campo y subrayando la importancia de los esteroides como un estimulante mezclado. Los candidatos del receptor de progesterona son considerados a la luz de los descubrimientos recientes, incluyendo nuevas clases de receptores como un receptor de membrana progesterona componente-1 o -2 complejo con la proteína de unión a serpine-1 mRNA, el mejor candidato hasta ahora para la actividad de la progesterona en espermatozoides humanos. Dado el número de otros candidatos alternativos y la diversidad aparente de las vías de señalización activadas, la presencia de múltiples especies de receptores de la progesterona no debe ser excluida. Dado que la disfunción de la esperma es la causa más común de la definición de la infertilidad, avances en el conocimiento actualmente limitado de estas vías y eventos son cruciales para no sólo crear terapias mejores pero también mejoran diagnóstico racional.

Conteo De Esperma No Suma Más: Tiempo Para Una Nueva Ecuación?

Aunque la disfunción de esperma es la causa más común de infertilidad, contamos con métodos de diagnóstico pobres y sorprendentemente no hay un tratamiento eficaz (con exclusión de las técnicas de reproducción asistida). En esta revisión, desafiamos a la utilidad de un análisis de semen básico y argumentan que un nuevo paradigma se requiere de inmediato. Se discute el uso de la evaluación en el hogar para mejorar potencialmente el diagnóstico del varón y de racionalizar la gestión de la pareja sub-fértil. Además, se exponen los avances recientes en el campo, por ejemplo, en la proteómica, que permitirá el desarrollo de nuevos biomarcadores de la función espermática. Este nuevo conocimiento va a transformar nuestra comprensión del espermatozoide como una máquina y es probable que conduzca a la no-ART tratamientos para hombres con disfunción esperma.

¿Motilidad Espermática: Es Fundamental Para El Progreso La Viscosidad?

El éxito de la fertilización interna es dependiente de migración exitosa de esperma a través del tracto femenino. Oportuna el ovocito en lo que es que una compleja serie tridimensional, altamente invaginated de las superficies húmedas de la oposición es un reto que sólo decenas de esperma nunca tuvo éxito. Esto podría ser en parte debido a las diferencias en escala, con una célula de 50 µm de largo frente a una probable migración de más de 20 cm debido a la compleja arquitectura. Muchos grupos se han centrado en el papel de un efecto quimiotáctico 'huevo atractivo"en la guía de esperma para aumentar el número en el sitio de la fertilización. ¿Qué investigación ha descuidado a considerar es el papel que desempeña la viscosidad de las capas mucosas, que cubra todo el tracto y a través del cual el espermatozoide debe nadar, en selección de esperma y modulación continua de su comportamiento. Esperma entrar a través del cuello uterino durante la fase de la ovulación, para negarles la entrada a través de la acción de la píldora anticonceptiva femenina, les permitan efectos viscosos son fundamentales en el control de la población de espermatozoides migrar a través del aparato. Los efectos fisiológicos de la viscosidad también son cruciales para tener en cuenta al diseñar y extrapolando datos de experimentos in vitro a la situación in vivo.

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