Translate this page to:
Italian
In JoVE (1)
Other Publications (11)
- Molecular Endocrinology (Baltimore, Md.)
- Journal of Personality and Social Psychology
- Psychological Bulletin
- Clinical Cancer Research : an Official Journal of the American Association for Cancer Research
- Steroids
- Molecular Endocrinology (Baltimore, Md.)
- Personality & Social Psychology Bulletin
- Steroids
- The Journal of Biological Chemistry
- Archives of General Psychiatry
- Hepatology (Baltimore, Md.)
Automatic Translation
This translation into Italian was automatically generated.
English Version | Other Languages
Articles by Jeffrey Quinn in JoVE
JoVE General
Isolamento di cromatina Purificazione RNA (disturbo)
CHIRP è una tecnica innovativa e rapida mappa genomica siti di legame di RNA non codificanti lunghi (lncRNAs). Il metodo sfrutta la specificità di oligonucleotidi anti-senso di affiancamento per consentire l'enumerazione di lncRNA-bound siti genomici.
Other articles by Jeffrey Quinn on PubMed
Azione Di Estrogeni Attraverso I Recettori Accoppiati a Proteine G, GPR30: Stimolazione Della Adenilato Ciclasi E Attenuazione Accampamento-mediata Dell'asse Segnalazione Epidermal Growth Factor Receptor-MAPK
Estrogeno innesca rapida ancora transitoria attivazione delle MAPKs, chinasi segnale-regolata extracellulare (Erk) -1 ed Erk-2. Abbiamo segnalato che questa azione di estrogeni richiede i recettori accoppiati a proteine G, GPR30 e si verifica tramite transattivazione dipendente dalla proteina Gbetagamma-subunità del recettore attraverso il rilascio di pro-eparan-bound EGF epidermal growth factor (EGF) dalla superficie della cellula. Qui indaghiamo il meccanismo da cui Erk-1-2 attività viene ripristinato rapidamente ai livelli basali dopo stimolazione di estrogeni. Prova è condizione che attenuazione di Erk-1-2 attività di estrogeni si verifica tramite stimolazione GPR30-dipendente della adenil ciclasi e cAMP-dipendente di segnalazione che si traduce nell'inattivazione di Raf-1. Mostriamo che 17beta-E2 reprime EGF-indotta di attivazione del percorso Raf-Erk in cellule di carcinoma mammario umano che esprimono GPR30, comprese le cellule MCF-7 e SKBR3 che esprimono entrambi o nessuno, ER, rispettivamente. Cellule MDA-MB-231, che esprimono ERbeta, ma non ERalpha e bassi livelli di proteina GPR30, sono in grado di stimolare la adenilato ciclasi o promuovere blocco estrogeno-mediata di EGF-indotta di attivazione di Erk-1-2. Pretrattamento di MDA-MB-231 celle con tossina del colera, che ADP-ribosylates e attiva proteine di subunità Galphas, risultati in recettori accoppiati a proteine G (GPCR)-attività di indipendente adenil ciclasi e la soppressione di EGF-indotta Erk-1-2 attività. Transfezione di GPR30 nelle cellule MDA-MB-231 ripristina la capacità di stimolare adenil ciclasi e attenuare EGF-indotta da attivazione di Erk-1-2 di estrogeni. Inoltre, GPR30-dipendente, accampamento-mediata attenuazione dell'EGF-indotta Erk-1-2 attività venne raggiunto dagli antagonisti ER come il tamoxifene o ICI 182, 780; ma non di 17alfa-E2 o progesterone. Così, i nostri dati delineano un nuovo meccanismo, che richiedono GPR30 ed estrogeni, che agisce per regolare Erk-1-2 attività tramite un segnale inibitorio mediato da cAMP. Accoppiato con i nostri risultati precedenti, questi dati attuali implicano che gli estrogeni saldi Erk-1-2 attività attraverso un singolo GPCR tramite due distinti G proteina-dipendente segnalazione vie che sono opposti effetti sulla via del recettore-MAPK EGF.
Le Abitudini Nella Vita Quotidiana: Pensiero, Emozioni E Azione
Per illustrare i diversi pensieri e le emozioni coinvolte nel guidare il comportamento abituale e nonhabitual, 2 Diario studi sono stati condotti nei quali i partecipanti forniti rapporti oraria delle loro esperienze in corso. Quando i partecipanti sono stati impegnati nel comportamento abituale, definita come un comportamento che era stato eseguito quasi quotidianamente in contesti stabili, erano propensi a pensare a problemi non correlati al loro comportamento, presumibilmente perché non hanno consapevolmente guidare le loro azioni. Quando impegnati in comportamento nonhabitual, o azioni eseguite meno spesso o in spostamento contesti, pensieri dei partecipanti tendevano a corrispondono al loro comportamento, suggerendo che il pensiero era necessaria per guidare l'azione. Inoltre, i benefici di autoregolamentazione delle abitudini erano apparenti nei sentimenti minore dello stress associato abituale di comportamento nonhabitual.
Avvertiti E Avvisato Mezzo Salvato? Due Ricerche Sintesi Di Forewarnings Di Influenza Appelli
Due sintesi di ricerca valutano gli effetti sull'atteggiamento di preavviso di ricorso un'influenza. In generale, avvisi apparvero a minacciare gli atteggiamenti delle persone o la loro delicata e impatto avviso dipendeva da quale aspetto di sé è stato minacciato. Quando l'argomento dell'appello era che coinvolge e riguarda i risultati immediati o quando il ricorso è stato effettivamente consegnato, destinatari sembravano concentrarsi sulla potenziale minaccia ai loro atteggiamenti, e hanno risposto in difesa di cognitivamente rafforzando le proprie vedute e resistendo al ricorso. Tuttavia, generati avvisi degli appelli su meno argomenti che coinvolgono accordo prima che il ricorso è stato consegnato, presumibilmente perché questi avvertimenti allertato persone per la minaccia di immagine di sé di essere ingenuo e preventivo accordo ridotto questa minaccia.
Distribuzione Di GPR30, Un Sette Che Attraversa Membrana Recettore Estrogeno, Nel Cancro Al Seno Primario E La Sua Associazione Con Fattori Determinanti Clinicopathologic Di Progressione Del Tumore
Il recettore transmembrana sette, GPR30, è legata all'associazione di estrogeni e rilascio di fattore di crescita epidermico eparan-bound. Qui, il significato di GPR30 nel cancro al seno umano è stato valutato confrontando la sua relazione con espressione del recettore ormone steroideo e variabili di progressione del tumore.
Associazione Di Membrana Estrogeno Recettore, GPR30, Con Metastasi Del Tumore Al Seno E Transattivazione Del Recettore Del Fattore Di Crescita Epidermico
Famiglia epidermal growth factor receptor (EGFR) chinasi tirosina del recettore funziona come un conduttore di segnalazione comune per i recettori di membrana che la mancanza di attività enzimatica intrinseca, come G-protein coupled receptors and integrine. GPR30, un orfano membro della superfamiglia dei recettori transmembrana sette (7TMR) è stato collegato a specifici estrogeni vincolante, rapida estrogeno-mediata attivazione dell'adenilato ciclasi e il rilascio di membrana-legato proHB-EGF. Più recentemente, GPR30 espressione nell'adenocarcinoma mammario primario è stato associato con patologici parametri comunemente utilizzati per valutare la progressione del cancro al seno, compreso lo sviluppo di metastasi extramammary. Questo meccanismo appena apprezzato della Croce comunicazione tra estrogeni ed EGF è coerenza con l'osservazione che 7TMR-mediated transactivation dell'EGFR è un paradigma di segnalazione ricorrente e può spiegare dati previo segnalazione EGF-like effetti degli estrogeni. I dettagli molecolari circostanti GPR30 mediata dal rilascio di proHB-EGF, il coinvolgimento dell'integrina beta1 come un intermediario segnalazione in azione EGFR estrogeno-dipendenti e le possibili implicazioni di questi dati per la progressione del cancro al seno sono discussi nel presente documento.
Coordinare I Recettori Accoppiati a Proteine G, GPR30 Regolamento Di Fibronectina Estrogeno-mediata Matrix Assembly E Transactivation Di Epidermal Growth Factor Receptor
Estrogeno promuove cambiamenti nell'architettura del citoscheletro non facilmente attribuita all'azione biologica dei recettori degli estrogeni, ERalpha ed ERbeta. Il Gs accoppiati a proteine transmembrana recettore, GPR30, è legato alla Associazione estrogeno specifico e rapido rilascio estrogeno-mediata del fattore di crescita epidermico eparina-bound. Utilizzando marker rescue e interferendo strategie mutante dominante, mostriamo che gli estrogeni azione via GPR30 promuove assemblaggio matrice fibronectina (FN) di cellule di cancro al seno umano. Stimolazione con 17beta-estradiolo o l'antagonista di ER, ICI 182, 780, risultati nel reclutamento di FN-occupato integrina alpha5beta1 conformeri fibrillar aderenze e la sintesi di fibrille di FN. In concomitanza con questa risposta cellulare, GPR30 promuove la formazione di Src-dipendente, Shc-integrina alpha5beta1 complessi. Funzione di blocco anticorpi diretti contro l'integrina alpha5beta1 o solubile Arg-Gly-Asp peptide frammenti derivati da FN specificamente inibiscono transattivazione del recettore mediata GPR30 di fattore di crescita epidermico. Estrogeno-mediata FN matrix assembly e transactivation di epidermal growth factor receptor allo stesso modo sono stati perturbati in cellule GE11 di integrina beta1-carenti, considerando che la reintroduzione di integrina beta1 in cellule GE11 restaurato queste risposte. Mutante Shc (317Y/F) bloccato FN GPR30-indotta matrix assembly e fosforilazione di tyrosyl di erbB1. È interessante notare che, rispetto al ricombinante selvaggio-tipo Shc, 317Y/F Shc era più facilmente mantenute nel GPR30-indotta dell'integrina alpha5beta1 complessi, ancora questa mutante non ha impedito endogeno Shc-integrina alpha5beta1 formazione complessa. I nostri risultati suggeriscono che GPR30 coordinate estrogeno-mediata FN matrix assembly e fattore di crescita rilascio in cellule tumorali umane del seno tramite un meccanismo di segnalazione Shc-dipendente che attiva dell'integrina alpha5beta1.
Non è Possibile Controllare Voi Stessi? Monitorare Quelle Cattive Abitudini
Quali strategie possono utilizzare persone per controllare le abitudini indesiderate? Lavoro passato si è concentrato sul controllo di altri tipi di impulsi automatici, soprattutto tentazioni. La natura dell'abitudine cuing chiamate per determinate strategie di autocontrollo. Perché la traccia di memoria lenta al cambiamento delle abitudini non è suscettibile di modifica o reinterpretazione, successo abitudine controllo comporta inibendo la risposta indesiderata quando attivata in memoria. Nel supporto, due episodio-campionamento diario studi hanno dimostrato che cattive abitudini, a differenza delle risposte alle tentazioni, sono state controllate più efficacemente attraverso l'uso spontaneo di sorveglianza vigile (pensando Don ' "t do it," guardando attentamente per slipups). Nessun altra strategia era utile nel controllare le abitudini forte, nonostante quello stimolo controllo era efficacia a inibire risposte alle tentazioni. Un successivo esperimento ha mostrato che vigile sorveglianza aids abitudine controllo, non modificando la forza della traccia di memoria abitudine ma dall'intensificazione dei processi di controllo inibitorio, cognitivo. Vengono discusse le implicazioni di queste scoperte per gli interventi di modifica di comportamento.
Trasporto Retrogrado Del Recettore Dell'estrogeno Del Transmembrane, G-proteina-accoppiato-recettore-30 (GPR30/GPER) Dalla Membrana Del Plasma Verso Il Nucleo
G-protein-coupled receptor 30 (GPR30/GPER) appartiene alla Superfamiglia delle sette recettore transmembrana (7TMR), la classe più comune del recettore superficiale con circa 800 membri conosciuti. GPER promuove l'associazione di estrogeni e di segnalazione rapida tramite enzimi associati a membrana con conseguente aumento di cAMP e rilascio di eparan associato epidermal growth factor (EGF-proHB) da cellule di cancro al seno. Tuttavia, GPER è prevalentemente localizzata intracellularly in cellule cancro al seno con minori quantità di recettori sulla superficie cellulare, un'osservazione che ha provocato qualche polemica per quanto riguarda il suo ruolo potenziale come un estrogeno recettore di membrana del plasma. Utilizzando l'approccio ampiamente impiegato di tracking 7TMRs ricombinanti di superficie di cellule vive di etichettatura, abbiamo cominciato a caratterizzare e confrontare il destino endocitico di GPER per altri 7TMRs Analogamente etichettati. Su espressione ectopica in cellule HEK-293 Rene embrionale umano, GPER funzionale viene generato come queste cellule acquisiscono la capacità di stimolare il campo e attivare l'AMP ciclico reattiva proteina in risposta alla stimolazione di estradiolo-17 beta. GPER è rilevabile sulla superficie della cellula di analisi immunofluorescenza con anticorpi specifici HA, anche se la maggior parte del recettore si trova intracellularly. Come β1AR (recettore adrenergico beta 1) e CXCR4 (C-X-C chemokine receptor 4), GPER esce dalla membrana plasmatica tramite pozzi rivestite da Clatrina ed entra presto endosomes. È interessante notare, GPER ha una destinazione che è rara tra i 7TMRs, come si accumula in un vano perinucleare. Come molti 7TMRs (circa un terzo), GPER traffico dalla membrana del plasma è costitutiva (si verifica in assenza di agonista). Tuttavia, la rotta del traffico intracellulare è altamente insolito, come 7TMRs tipicamente riciclare alla membrana del plasma (ad esempio β1AR) o sono degradati nei lisosomi (per esempio CXCR4). L'accumulo di GPER nello spazio perinucleare e suo possibile significato per attenuanti azione estrogeno attraverso questo appena riconosciuto estrogeno recettore di membrana è discusso qui.
Giù-modulazione Del Recettore Estrogeno G-proteina-accoppiato, GPER, Dalla Superficie Della Cellula Avviene Attraverso Un Percorso Trans-Golgi-proteasoma
GPER è un g-coupled receptor 7-transmembrana che è stato collegato all'estrogeno specifica vincolanti e segnalazione di attività che si sono manifestate dagli enzimi di membrana plasmatica associati. Tuttavia, in molti tipi di cellule, GPER è prevalentemente localizzata al reticolo endoplasmatico (ER), e solo una minor quantità di recettore è rilevabile alla superficie delle cellule, un'osservazione che ha causato la polemica per quanto riguarda il suo ruolo come un estrogeno recettore di membrana del plasma. Qui, ci mostra che GPER costitutivamente gemme intracellularly in See-1++ endosomes da pozzi rivestite da Clatrina. NonVisual arrestins-2 /-3 non co-localize con GPER ed espressione dei mutanti di dominante negativo arrestin-2 manca clatrina - o β-adaptin siti di interazione non riesce a bloccare GPER interiorizzazione suggerendo che arrestins non sono coinvolti nell'endocitosi GPER. Come β1AR, che ricicla alla membrana del plasma, GPER co-traffics con Transferrina +, Rab11 + riciclaggio endosomes. Tuttavia, endocytosed GPER non riciclare alla superficie delle cellule, ma invece restituisce alla rete trans-Golgi (TGN) e non rientrare l'ER. GPER è ubiquitarie alla superficie delle cellule, esibisce una breve emivita (t½); < 1 h) ed è protetto dal degrado dall'inibitore del proteasoma, MG132. Interruzione del TGN da GBF1 A induce l'accumulo di endocytosed GPER in Rab11 + perinucleare endosomes e previene la degradazione GPER. I nostri risultati forniscono una spiegazione del perché GPER non viene prontamente rilevato sulla superficie delle cellule di alcuni tipi di cellule e suggeriscono ulteriori che TGN serve come punto di arresto per la degradazione di endocytosed GPER.
Sintomi Di Stress Post-traumatico E Acuto in Un Potenziale Gene X Studio Ambiente Di Un Campus Universitario Riprese
Il trasportatore della serotonina (SLC6A4) è stato associato con diverse sindromi legate allo stress, tra cui traumatico da stress (PTSD). La capacità di rilevare significative associazioni dipende in gran parte misure affidabili di trauma preesistente.
Epatociti Laser Catturato Visualizza Associazione BCHE Perdita E Fibrosi Di Progressione Nell'epatite C Infettata Di Tossicodipendenti
Infezione da epatite cronica C virus (HCV) è complicata dalla fibrosi epatica. Ipotizzando che fibrogenic primi segnali possono avere origine nelle cellule suscettibili all'infezione da HCV, espressione genica degli epatociti è stata analizzata da persone con HCV cronica a diversi stadi di fibrosi epatica. Quattro soggetti infettati da HCV con fibrosi epatica precirrotiche (Ishak fibrosi 3-5) sono stati abbinati per età, razza e genere a cinque soggetti infettati da HCV con nessuna evidenza di fibrosi (Ishak fibrosi 0). Epatociti da ciascun soggetto sono stati isolati da biopsie epatiche utilizzando microdissection del laser. Transcriptome analisi è stata eseguita su RNA degli epatociti utilizzando matrici di ibridazione. Abbiamo trovato che epatociti in fibrosi precirrotiche erano esauriti per geni coinvolti nella piccola molecola e metabolismo del farmaco, soprattutto butirrilcolinesterasi (BCHE), un gene coinvolto nel metabolismo delle droghe d'abuso. Espressione differenziale di BCHE è stato convalidato nei tessuti stessi e trasversalmente in una coorte espanso di 143 individui infettati da HCV. In uno studio longitudinale, attività BCHE siero erano già diminuito a Studio inception in 19 progressori fibrosi rispetto ai 20 fibrosi non-progressori (p < 0,05). Non-progressori anche avevano ridotto l'attività BCHE nel tempo rispetto ai valori iniziali, ma questi si è evoluta una mediana (range) 8,6 anni (7,8-11.4) dopo il inception(p<0.05) periodo di studio. Portale tratti laser catturati furono arricchiti per immunitario relativi geni rispetto agli epatociti ma precirrotiche fegati hanno perso questo arricchimento. Conclusione: Nel complesso, abbiamo trovato che HCV cronica è associata con degli epatociti BCHE perdita anni prima funzione sintetica epatica è alterata. Questi risultati indicano che BCHE può essere coinvolto nella patogenesi della fibrosi HCV-correlate tra i tossicodipendenti di iniezione. (HEPATOLOGY 2012.).
