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- American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology
- American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology
- Microcirculation (New York, N.Y. : 1994)
- Shock (Augusta, Ga.)
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- American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology
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- Shock (Augusta, Ga.)
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- Cardiovascular Research
- Microcirculation (New York, N.Y. : 1994)
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Articles by Jerome W. Breslin in JoVE
JoVE General
GFP -アクチンを発現するライブ内皮細胞におけるアクチン細胞骨格の研究
Department of Physiology, Louisiana State University Health Sciences Center
GFP -アクチンを発現している生内皮細胞の顕微鏡イメージングは、細胞骨格構造の動的変化の特性評価が可能になります。固定標本を使用する技法とは異なり、この方法は前と同じ細胞内のアクチン細胞骨格の時間的変化の詳細な評価、中、および様々な物理的、薬理学的、または炎症性刺激の後にしています。
JoVE Immunology and Infection
細胞質のCaの測定 2 +絶縁収縮リンパ管における
Department of Physiology, School of Medicine, Louisiana State University Health Sciences Center
我々は、細胞質のCaを評価するアプローチを紹介
Other articles by Jerome W. Breslin on PubMed
P42/44MAPKは、内皮細胞でのベースラインの透過性とCGMPによって誘導される透過性亢進を調節する
経路は高分子に内皮細胞の透過性を調節するシグナル伝達、我々はp42/44MAPKとp38MAPK（MAPKマイトジェン活性化プロテインキナーゼ）という仮説を検証した。通路2から4ヒト臍帯静脈内皮細胞（HUVEC）をフィブロネクチンでコートSnapwell膜上の合流点まで増殖させた。 HUVEC単層全体のフルオレセインのフラックスイソチオシアネート標識デキストラン-70は透過性を決定するために役立った。 1.6×10（-6）〜12.5 + / - - 2.8×10（-6）CM / 1mMの8 - ブロモ-3 '、5'-サイクリックグアノシン一リン酸（8-BR-cGMP）の7.0から増加した透水性の+ /アプリケーションS（P <0.05）。選択p42/44MAPK阻害剤（2.7 AG126、27マイクロモル）を60分間HUVECの前処理は、8-BR-cGMPにより誘導される透過性亢進を阻害した。しかし、p38MAPKの阻害は、（0.6マイクロモルでSB203580）のcGMP誘発性透過性亢進反応に影響を及ぼさなかった。 27マイクロモルで投与AG126は、7.9からベースラインの透過性を減少させた+ / - 0.5×10（-6）〜5.9 + / - 0.5×10（-6）cm / sに（P <0.05）。我々の結果はp42/44MAPKシグナル伝達経路は、ベースラインの透過性およびcGMP誘発性透過性亢進の調節に重要であることを示している。
VEGFは、ERK-1/2と一酸化窒素が関与する別のシグナル伝達経路による血管内皮透過性を向上
我々は、VEGFがERK-1/2 MAPK経路を活性化することによって高分子に内皮透過性亢進を調節するという仮説を検証した。また、PKCと一酸化窒素（NO）は、ERK-1/2経路を介して透過性のVEGF誘導の増加を媒介するかどうかを調べた。ウエスタンブロットは、ERK-1/2のリン酸化を評価したのに対し、ヒト臍帯静脈内皮細胞単層にわたるFITC-デキストラン70フラックスは、透過性の指標として役立った。 VEGF誘発性透過性亢進は、ERK-1/2に対しても、MEKとRaf-1の活動（20マイクロモルPD-98059と5マイクロモルGW-5074）の封鎖監督のアンチセンスDNAオリゴヌクレオチドによって阻害された。これらのブロッキング剤はまた、ERK-1/2のリン酸化を減少させた。 PKC阻害剤bisindolylmaleimide I（10マイクロモル）は、VEGF誘発性ERK-1/2の活性化と透過性亢進の両方をブロックされています。 NO合成酵素（NOS）阻害しないN（G）-ニトロ-L-アルギニンメチルエステル（200マイクロモル）とNOスカベンジャー、2 - フェニル-4 ,4,5,5-tetramethylimidiazolineピペリジン-1 - オキシル-3 - オキサイド（100マイクロモル）は、VEGF誘発性透過性亢進を廃止しますが、ERK-1/2のリン酸化をブロックしていませんでした。これらの観察は、VEGF誘発性透過性亢進は、PKCとNOSの活性化と同様にRaf-1の、MEKおよびERK-1/2を含む示しています。さらに、我々のデータは、ERK-1/2とNOSは、VEGF誘発性透過性亢進の異なるシグナル伝達経路の要素であることを示唆している。
血管内皮増殖因子はin Vivo微小循環での差動信号経路を刺激
血管内皮増殖因子（VEGF）は、軽度の血管拡張および血管透過性の強い増加を誘導する。生体顕微鏡とデジタル集積光強度画像解析を用いて、我々は、ハムスターの頬嚢の微小循環では、動脈と静脈の差動シグナル伝達経路は、血管径と透過性の制御における生体調節機構に表現するという仮説を検証した。実験デザインは、特定のシグナル伝達分子を阻止関与と同時に、動脈直径およびFITC-デキストラン150の微小輸送におけるVEGF誘発性変化を評価する。またはPKC（bisindolylmaleimide付）[LY-294002またはワートマニンと間接的にホスファチジルイノシトール3 - キナーゼを介した] Aktの阻害は、VEGF誘発性透過性亢進を減少させた。 PKCをブロックする効果がなかったのに対し、しかし、ホスファチジルイノシトール3-kinase/Akt阻害は、初期段階、減衰VEGF誘導性血管拡張の後期を強化しました。細胞外シグナル制御キナーゼ（ERK）-1 / 2（PD-98059またはAG-126）の阻害はまた、VEGF誘発性透過性亢進を減少したが、VEGF誘発性血管拡張をブロックしませんでした。内皮一酸化窒素合成酵素の遮断は、（N（ω）-モノメチル-L-アルギニンを含む）透過性と直径の両方で、VEGF誘発性の変化を抑制した。さらに、ヒト臍帯静脈内皮細胞と免疫の研究では、bisindolylmaleimide、PD-98059、血管内皮カドヘリンのL-NMMA減衰VEGF誘発性の再編成を明らかにした。我々のデータは、1）血管内皮一酸化窒素合成酵素は、動脈の直径と血管透過性のVEGF誘導の変更の一般的な収束経路であることを示している、2）PKC及びERK-1/2ハムスターにおけるVEGF誘発性血管拡張の主要な役割を果たしていない頬袋の微小循環、3）酸化Akt、PKC、およびERK-1/2はVEGF刺激微小血管透過性亢進を調節するシグナル伝達カスケードの要素です。我々のデータは、VEGF刺激による微小血管ダイナミクスの規制のステップとして、差動信号のための証拠を提供しています。
好中球刺激内皮透過性亢進におけるRhoAおよびRhoキナーゼの関与
好中球に誘発される微小漏洩は、虚血性および炎症性心疾患の早期イベントです。好中球は血管透過性を増加したことにより、特定のシグナリングパラダイムはまだ確立されていません。我々は低分子量GTPase RhoAおよびその下流のエフェクターRhoキナーゼの仲介は、内皮透過性亢進を好中球刺激かどうかを調べた。我々は、Rho-GTP、プルダウンアッセイとウシ冠細静脈内皮細胞（CVEC）にRhoの活性に及ぼす好中球の影響を評価した。 FITC-アルブミンの透過性はCVEC単分子膜を用いて評価した。 Y-27632およびHA-1077：我々は、2つの構造的に異なる薬理学的阻害剤を用いて好中球への透過性応答にRhoキナーゼの役割をテストされています。さらに、内皮細胞F-アクチンの組織内の好中球刺激の変化を蛍光顕微鏡で調べた。結果は、C5aの活性化好中球はCVECにおけるRhoAの活性化と相まって浸透性の増加を誘発したことを示している。 Y-27632またはHA-1077のいずれかでRhoキナーゼの阻害は弱毒性亢進反応。また、Rhoキナーゼ阻害好中球上清により刺激された透水性の減衰が増加します。さらに、活性化好中球はY-27632またはHA-1077のいずれかの方法で減少したCVECのアクチンストレスファイバーの形成を引き起こした。これらの知見は、RhoAおよびRhoキナーゼは、好中球誘発内皮アクチンの再編成やバリア機能障害の仲介に関与していることを示唆している。
肺微小血管内皮細胞におけるPKC-依存、バーン誘導ヘレンジャンクション再編とバリア機能障害
ラット肺微小血管内皮細胞単層を30分間1：03希釈でやけどを負ったラット（25％合計体表面積）からドナープラズマにさらされた。ギャップ形成変化が接着接合（AJ）タンパク質β-カテニンと血管内皮カドヘリンに見られたとの免疫蛍光分析では、併用を明らかにした。これらのコンポーネントの両方が未処理の細胞の細胞周囲で滑らかで、均一な配置で存在することが示された。しかし、プラズマを燃焼させる露光時に、この均一性が失われ、AJタンパク質は、細胞のエッジで中断し、ジッパーのようなパターンを示した。さらに、これらのタンパク質は、細胞間のギャップ形成領域から欠席した、細胞全体に点状の染色の増加は、彼らがプラズマを燃やすに応答して内在化された示唆している。細胞単層全体の経内皮電気抵抗と、FITC-アルブミンフラックスの両方の測定は、バリアの整合性を評価するために使用されました。我々の研究は急速にプラズマを燃やすへの曝露が減少してコンフルエントな単層を越えて電気抵抗を引き起こしたことを発見し、バリア機能障害に関連付けられている現象を高めるためにアルブミンフラックス。細胞は、PKCが火傷によって誘発される肺血管内皮機能障害のために必要とされることを示唆し、PKC阻害剤bisindolylmaleimideで前処理したときにさらに、プラズマを燃やすために上記のすべての応答が減衰した。
高血糖を変化させるPI3KおよびAktシグナリングと血管内皮細胞増殖機能障害につながる
糖尿病は血管合併症の発症の主要な危険因子である。我々は、高血糖は、ホスファチジルイノシトール3 - キナーゼ（PI3K）およびAktシグナル伝達経路を介して内皮細胞（EC）の増殖および生存率を減少させるという仮説を立てた。我々は培養ヒト臍帯静脈5 ECS（HUVEC）、20、または40 mMのD-グルコース。細胞は5、20で成長し、40 mMのマンニトールは、浸透圧効果の制御を務めていました。我々は最大15日間のECの増殖を測定した。我々は、アネキシンVおよびヨウ化プロピジウム染色およびフローサイトメトリーによるアポトーシスを評価したウェスタンブロット分析により合計とリン酸化PI3KとAktのカルチャ8日目に得られた細胞ライセートを分析し、GSKの融合タンパク質を用いてAktのキナーゼ活性を測定した。 HUVEC増殖は、PI3K-Aktの薬理学的阻害剤（ワートマニンおよびLY294002）の存在下で恒常的に活性なAktの変異体のトランスフェクションの後にテストされています。 5 mMのD-グルコースを含む培地におけるECS（コントロール）は、7〜10日で対数増殖期を示した。マンニトールは、ECの増殖を損なわなかったのに対し、20〜40 mMのD-グルコースが著しく、拡散対コントロール（いずれもP <0.05）に減少した。アポトーシスは、40 mMのD-グルコースに曝露したHUVECで有意に増加した。 40 mMのD-グルコースが有意にチロシンリン酸化PI3K、スレオニン308-リン-AKT、および5mM D-グルコースを制御するための相対的なAkt活性を減少させた。 PI3K-Aktの薬理学的阻害は、EC増殖の用量依存的に減少した。 20〜40 mMのD-グルコースで培養された時に増殖を高めることにより、恒常的活性Aktの変異体で保護されECSとトランスフェクション。我々はD-グルコースは、AktがAktのリン酸化スレオニンを介したシグナル伝達とその高血糖障害PI3K-Aktシグナルが糖尿病でECの増殖機能不全を促進する可能性がある調節することが結論付けている。
好中球刺激血管リークROCK媒介血管内皮テンションの開発への関与
好中球誘発性冠微小血管のバリア機能不全は、心臓病の重要な病態生理学的なイベントです。現在のところ、好中球誘発性血管漏れの正確な細胞および分子メカニズムは明らかではありません。本研究の目的は、Rhoキナーゼ（ROCK）が昇格した内皮細胞の緊張と関連して冠状動脈細静脈の透過性を増加させるという仮説をテストすることだった。我々は孤立したブタ冠状静脈と冠状動脈細静脈内皮細胞（CVEC）単分子膜における（P（a））とアルブミン透過性を評価した。内皮バリア機能もCVEC単層の内皮電気抵抗（TER）を測定することによって評価した。並行して、我々は、コラーゲンゲル上に成長させたCVECsの等尺性張力を測定した。孤立した冠状静脈またはCVEC組織化単分子膜への恒常的活性（CA）-ROCKタンパク質の移動は、P（a）に有意な増加を引き起こし、CVECsでTERの減少となりました。 ROCK阻害剤Y-27632は、ca-ROCKによる変化をブロックされています。 C5aの活性化好中球（10（6）/ ml）を用量依存的にY-27632と構造的に異なるROCK阻害剤、H-1152により抑制されたも大幅に上昇した細静脈P（）、。 CVEC単層では、活性化好中球はY-27632またはH-1152により抑制されたが、どちらも等尺性張力の同時上昇と透過性を増加させた。 CA-ROCKによる治療も大幅にアクチンの重合とThr18/Ser19上でミオシン調節軽鎖リン酸化の上昇と相まって、CVEC単層透過性および等尺性張力を増加させた。データは、好中球活性化の間に、岩が内皮細胞のアクチン - ミオシン媒介張力発生に伴って血管漏出を促進することをお勧めします。
ρとVEGF誘発性血管内皮透過性亢進のROCKシグナリング
血管内皮増殖因子（VEGF）は、さまざまな生理学的および病理学的条件下での微小血管の透過性の調節に重要な役割を果たしています。著者らは、低分子量GTPase Rhoとその下流のエフェクターROCK（Rhoの随伴コイルドコイル含有タンパク質キナーゼ）は、細静脈の透過性のVEGF誘導の増加を仲介するという仮説を検証した。彼らはまた、内皮細胞のバリア機能の調節に関与しているのRho-ROCK経路の2つのよく特徴付けられた目標をミオシン軽鎖（MLC）のリン酸化とアクチンの重合を検討した。
重度の火傷の間に微小血管透過性亢進における長鎖ミオシン軽鎖キナーゼ（MLCK-210）の役割
微小血管の漏れは外傷時に多臓器不全の病態に関与している。これまでの研究では、ミオシン軽鎖（MLC）微小血管透過性亢進の開発におけるリン酸化トリガー内皮収縮の関与を示唆している。ミオシン軽鎖キナーゼ（MLCK）はMLCリン酸化状態の制御に重要な役割を果たしている、したがって、それは、細胞内収縮機構のそのレギュレーションを介してバリア機能を調節すると考えられている。本研究の目的は、さらに最近では血管内皮細胞に発現して主要なアイソフォームとして同定されたMLCKの長いアイソフォーム（MLCK-210）に焦点を当て、やけどのMLC-依存性の障壁損傷内皮メカニズムを明らかにすることである。 MLCK-210ノックアウトマウスモデルは、サード度熱傷が25％、総体表面積をカバーして焼くに供した。腸間膜微小循環を生体顕微鏡を用いて観察し、微小血管の透過性は、フルオレセインイソチオシアネートアルブミンのtransvenularフラックスを測定することにより評価した。別の実験では、in vivoでの腸間膜の透水係数（LP）が変更されたランディス技術を用いて測定した。アルブミンフラックスの2倍に増加し、24時間期間内に高い死亡率と関連していた初期段階でLPの4倍の増加によって示されるように損傷は、深遠な微小血管の漏れが発生しました。野生型対照と比較して、MLCK-210-欠損マウスはアルブミンと流体の微小血管透過性亢進大幅に減衰応答を有意に生存率の改善が表示されます。これらの結果は、バーンイン誘発血管壁の損傷を媒介MLCK-210の役割のための直接的な証拠を提供し、火傷浮腫の治療における潜在的な治療標的としてMLCK-210検証します。
糖尿病とインスリン抵抗性の血管透過性
微小血管のバリア損傷は糖尿病の終わり臓器合併症の開始と進行に関与している。構造の微小血管を検出することができる前に、血漿漏出と体液貯留は、病気の初期段階で糖尿病患者や動物の種々の組織で見られている。臨床的および実験的証拠は、しばしばインスリン欠乏やインスリン抵抗性を伴ってその高血糖は、障害者の自己調節と血管の透過性の増大を引き起こすことを示唆している。複数の分子経路がプロテインキナーゼC活性化の結果、酸化ストレス、カルボニルストレスにつながる先進的糖化、過剰なグルコース代謝を促進増加したポリオールフラックスを含め、変更された流体の恒常性への貢献として同定されている。これらの異常な代謝活動は、シグナル伝達反応と内皮障壁における構造変化の配列を刺激し、最終的に微小漏洩を引き起こす可能性があります炎症性サイトカインや成長因子の生産に関連付けられています。これらの代謝および炎症経路を操作介入は、糖尿病細小血管合併症の進行を遅らせることで効果を実証しているが、その直接効果と微小循環に対する作用のメカニズムは、とらえどころのないままになります。糖尿病誘発内皮バリア機能障害の分子基盤の理解は、この慢性的な衰弱性疾患プロセスを治療する新しい治療標的の開発のためのフレームワークを提供します。
内皮基底膜のバリアを越えて乳癌細胞の移住における内皮由来マトリックスメタロ-2の役割
浸潤癌細胞が転移の過程で細胞外マトリックス、基底膜を分解するマトリックスメタロプロテアーゼ（MMP）を利用する。 MMPファミリーの複数のメンバー間で、ゼラチナーゼMMP-2は、悪性腫瘍の開発·普及に関与している。しかし、細胞のMMP-2のソースと転移の血管外漏出に及ぼす影響は十分に特徴付けされていない。本研究の目的は、仮説を検証することでした微小血管のバリアを越えて乳癌細胞の移住を促進して血管内皮細胞由来のMMP-2をアクティブにします。ゼラチンザイモグラフィーは、からの条件培地中の潜在的な、アクティブなMMP-2産生MDA-MB-231ヒト乳癌細胞、ヒト肺微小血管内皮細胞（HLMVEC）、これら2つのセルの共培養を評価するために使用されていました。転生癌細胞は、siRNAとOA-HYのMMP活性の薬理学的阻害とMMP-2ノックダウン中に測定した。低レベルの生産はMDA-MB-231細胞に見られたのに対し、結果は、HLMVECsで一貫性のあるMMP-2分泌を示した。再構成基底膜上に成長させた内皮単層バリアを介してMDA-MB-231細胞の輪廻著しく減衰HLMVECsにおけるMMP-2発現または活性の阻害。データは、癌細胞の血管外漏出を促進するMMPsの内皮細胞生産のための潜在的な役割を支持する証拠を提供しています。我々は血管内皮を含む悪性腫瘍細胞と腫瘍周囲良性組織間の相互作用が腫瘍の浸潤や転移の調節に重要なメカニズムとして機能することを示唆している。
血管内皮増殖因子-Cは、VEGF受容体-3依存性メカニズムによってリンパポンプを刺激
血管内皮増殖因子（VEGF）-Cはリンパ管新生に重要な役割を果たしているが、VEGF-Cのリンパ管の機能的な応答は特徴付けされていない。我々はVEGF受容体（VEGFR）-3の増加リンパポンプ出力のこと、VEGF-C-誘発活性化仮説を検証した。 ;我々は、基底状態の間に生体顕微鏡を用いてリンパを集めるラット腸間膜のin vivoでのポンプの活動に、1 nMの組換えVEGF-C、選択VEGFR-3アゴニスト、VEGF-システイン（156）のSer変異（1nMのC156S）で治療中の検査または0.1 nMのVEGF-。その特定の応答はまたMAZ-51とVEGFR-3の選択的阻害の間に分析した。収縮頻度、拡張末期径、収縮末期径、ストロークボリュームインデックス、ポンプ流量インデックス、および駆出率を評価した。また、細動脈径とFITC-アルブミンの血管外遊出を評価した。結果は、VEGF-CおよびVEGF-C156Sの両方が大幅に時間依存的に収縮頻度、拡張末期径、ストロークボリュームインデックス、およびポンプのフローインデックスを増加させることを示しています。 VEGF治療の30分後に有意に増加したストローク量によって特徴付け異なる応答を引き起こした。 MAZ-51（5 MUM）トニック収縮を引き起こし、収縮頻度を減少させた。加えて、0.5〜5最大MAZ-51減衰VEGF-CおよびVEGF-C156S誘発性リンパ管ポンプの活性化。 VEGF-VEGF-CおよびVEGF-C156Sが大幅に動脈の直径を変化させなかったのに対し、細動脈の血管拡張を引き起こした。 VEGF-C156Sしなかったのに対し、また、VEGF-A及びVEGF-Cが増加し、微小血管の透過性が発生しました。我々の結果は、VEGF-Cは、VEGFR-3を介してポンピングリンパ管を増加させることを示している。さらに、微小循環動態の変化がリンパポンプ活性のVEGFR-3を介した変更の必要はありません。
VEGFR-3依存性のメカニズムを通して培養リンパ管内皮細胞のVEGF-Cを変化させるバリア機能
リンパ内皮は間隙からリンパ液を分離する重要な半透過性障壁となっている。しかし、リンパ内皮障壁とリンパ節形成のメカニズムの限られた理解は、現在あります。本研究の目的は、障壁の調節にリンパ内皮細胞の潜在的な積極的な役割を調べるために、内皮細胞のアゴニスト、VEGF-AとVEGF-Cはリンパ管内皮のバリア機能を変更できるかどうかをテストすることであった。
ヒスタミン誘発内皮透過性亢進時にVE-カドヘリンとβ-カテニンの結合ダイナミクス
β-カテニンは、細胞骨格にVE-カドヘリン接合複合体をリンクさせることにより、血管内皮細胞 - 細胞接着とバリア機能の調節に重要な役割を果たしている。本研究の目的は、ヒスタミンによる炎症性刺激時の内皮細胞透過性に対するβ-カテニンおよびVE-カドヘリンの相互作用の効果を評価することであった。まず、in vitroでのβ-カテニンの結合にVE-カドヘリンを競争するβ-カテニンとT細胞因子（ICAT）の阻害剤として知られているβ-カテニン結合ポリペプチドの能力を評価した。次に、細胞 - 細胞接着によって制御される血管内皮バリア機能に及ぼす影響を研究するためにヒト臍帯静脈内皮細胞（HUVEC）に組換えFLAG-ICATを過剰発現させた。 β-カテニンの結合は、VE-カドヘリンに経内皮電気抵抗（TER）と同じ条件下で、アルブミンの見掛けの透磁率（P（A））の測定とともに、ヒスタミンによる刺激の前後で定量した。その結果、ICATはβ-カテニンに結合し、競争力の濃度依存的にβ-カテニンにVE-カドヘリン細胞質ドメインの結合を阻害することを示した。不変TERとP（）によって示されるように内皮細胞単層におけるFLAG-ICATの過剰発現は、その基底透磁率特性に影響を与えなかったが、TERのヒスタミン誘発性減少の大きさと持続時間が大幅に増強されました。同様に、ヒスタミンの存在下でP（A）の増加が悪化した。 FLAG-ICATの過剰発現も有意にβ-カテニン関連VE-カドヘリン、次のヒスタミン刺激のレベルを減少させた。一緒に、これらのデータは、ヒスタミンなどの炎症剤は血管内皮透過性が上昇している時のβ-カテニンおよびVE-カドヘリンとの間の結合の一過性で可逆的混乱を引き起こすことを示唆している。
Toll様受容体4は、熱損傷の血管炎症とバリア機能不全に貢献
全身および微小血管の炎症は、感染症、敗血症、および外傷後の多臓器不全の開発に重要な役割を果たしている。 Toll様受容体（TLR）は病原体や滅菌、傷害に関連した炎症反応へのホストの応答を調節する。どちらかの25パーセントの合計体表面積は、全層背に治療を焼くまたは偽火傷を受けたマウス（ - / - ）我々は、TLR-4麻酔野生型またはTLR-4のin vivoで熱傷時の血管機能不全に寄与するかどうかを調べ皮膚。生体顕微鏡を用いて、我々は熱傷からリモート·サイトで内臓の微小循環の代表として腸間膜微小血管の血行動態および白血球動態を評価した。腸間膜静脈全体のフルオレセインイソチオシアネートアルブミンのtransvascularフラックスは、微小血管の透過性の指標として測定した。さらに、培養血管内皮細胞モデルは、TLR-4を介したバリア機能障害に関与する血管内皮固有のメカニズムを評価するために使用されました。 （ - / - ）マウスをこの応答がTLR-4で顕著に減弱したのに対し、結果は、熱傷後の野生型マウスで有意に上昇し血管透過性を示した。また、火傷、野生型マウスの腸間膜静脈の白血球の接着を増加させ、平滑白血球応答がTLR-4マウスで見られた。燃焼プラズマによる内皮細胞単層の治療は、血管内皮細胞 - 細胞接着バリア機能障害の指標と電気細胞 - 基質インピーダンス検出によって測定し経内皮電気抵抗の急激な減少を誘発した。 siRNA処理弱毒この応答でTLR-4の発現を減らすことができます。一緒に、これらのデータは、TLR-4微小漏洩とnonseptic熱傷に関連付けられている炎症性条件の下で白血球の接着に重要な役割を果たしていることを示している。
リンパ管内皮細胞は、せん断応力の変化に応答してバリア機能を適応させ
リンパ管内皮細胞は、正常リンパ節の形成と推進のために必要な重要なバリアを形成する。しかし、ほとんどがリンパ管の中で物理的な力は、内皮バリア機能をどのように影響するかについては知られている。本研究の目的は、層流、リンパ内皮バリア機能をどのように影響するかを特徴付けるためにと内皮細胞のバリア機能を高めるために細胞内のアクチン細胞骨格を活性化することによって流れの変化に対応するかどうかをテストすることでした。
カスケードませんが、eNOSの場所、および微小血管透過性あり
一酸化窒素（NO）カスケードおよび内皮NOシンターゼ（eNOS）は最高の血管平滑筋の内皮細胞媒介性弛緩における役割で知られています。特定の炎症性刺激と強化されたNO放出によるeNOSの活性化にも増加した血管透過性を促進することが示されている。特定の血管拡張剤によるeNOSの活性化は、アセチルコリンと同様に、微小血管の透過性には影響しませんかしかし、それは完全には明らかではありませんが、その増加の透過性を他の炎症性薬剤によるeNOSの活性化、一方、血小板活性化因子と同様に、血管拡張を引き起こすことはありません。このレビューでは、我々は微小血管透過性の上昇にeNOSの役割を示す証拠について説明します。また、eNOSのリン酸化とeNOSと微小血管透過性の調節に関して高架血管透過性などの新興トピックを促進するために、その関数内局在の相対的な重要性を確認します。
急性アルコール中毒に続いて腸間膜リンパ収集ポンプ機能の適応
急性アルコール中毒は、潜在的に粘膜免疫に影響を与え、未知のメカニズムによって腸管リンパの流れを増加させます。我々は腸間膜リンパ管の拡張固有のポンプ機能がアルコール中毒時の腸管リンパの流れを増加に寄与するという仮説を検証した。
ROCK CAMPとは、リンパ内皮細胞障壁の整合性を促進し、ヒスタミン、トロンビン誘発性バリア機能障害を変調
炎症シグナルがリンパ管の透過性を調節することができますが、リンパ内皮バリア機能を調節するメカニズムの現在の理解は限られているという最近の証拠がある。本研究の目的は、微小血管の透過性を増加させる炎症性メディエーターはまた、リンパ内皮細胞単層のバリア機能障害を引き起こすかどうかを調べると、2）リンパ内皮バリア機能における細胞間接合や細胞の収縮に影響を与えるシグナル伝達経路の役割を決定する）を1にした。
ISG15は細胞骨格アーキテクチャを破壊し、ヒト乳癌細胞の運動を促進する
インターフェロン刺激遺伝子15（ISG15）経路は、乳癌の高度上昇であるが、ほとんどはISG15経路は乳房腫瘍形成に寄与する方法については知られています。現在の研究では、遺伝子破壊のアプローチを使用して、我々はISG15とUbcH8（ISG15特異的共役酵素）の両方がF-アクチンのアーキテクチャとZR-75から1乳癌細胞における接着斑の形成を混乱させることを示している。さらに、ISG15とUbcH8は、乳がん細胞の遊走を促進します。また、ISG15は、腫瘍細胞の運動性、浸潤と転移に関与するタンパク質のubiquitin/26Sプロテアソームを介した売上高を抑制することを示している。一緒に、我々の結果はISG15経路の異常活性化は、セル·アーキテクチャを破壊し、細胞運動、浸潤や転移に関与するタンパク質を安定化させることにより、乳癌細胞に運動性の表現型を付与することをお勧めします。細胞構造が保存されており、ISG15経路が恒常的に異なる系統の腫瘍細胞で活性化されるので、乳癌の我々の観察は、他の多くの腫瘍に対して成立していなければならないと仮定するのが妥当です。
