JoVE General
Shabnam Tavassoli, Jesse Tzu-Cheng Chao, Christopher Loewen
Department of Cellular and Physiological Sciences, University of British Columbia - UBC
GFP-fusão proteínas são amplamente utilizados para visualizar organelas por microscopia confocal. No entanto, a triagem para mutações que afetam a morfologia das organelas geralmente requer mutagênese individual e é demorado. Aqui, nós demonstramos um método para incorporar simultaneamente organela-GFP marcadores em quase 5.000 genes não-essenciais no fermento.
JoVE General
Jesse Tzu-Cheng Chao1, Leonard J. Foster2, Christopher J. R. Loewen1
1Department of Cellular and Physiological Sciences, University of British Columbia - UBC, 2Department of Biochemistry and Molecular Biology, University of British Columbia - UBC
Aqui nós descrevemos uma nova técnica proteômica quantitativa para a identificação de complexos de proteína em Saccharomyces cerevisiae. Neste estudo, nós utilizamos o método SILAC juntamente com purificação de afinidade seguido por espectrometria de massa para identificar com alta especificidade dos parceiros de ligação de uma proteína ER, Scs2p.