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Articles by José A. Diaz in JoVE
JoVE Clinical and Translational Medicine
Modèle de souris complète stase de la veine cave inférieure thrombose
Conrad Jobst Vascular Research Laboratories, Section of Vascular Surgery, University of Michigan
La souris modèle complet stase de la veine cave inférieure thromboses rendements quantités mesurables de tissu paroi veineuse et thrombose. Il s'est avéré utile pour évaluer les interactions entre la paroi de la veine et le thrombus occlusif et à évaluer la progression de l'aiguë de l'inflammation chronique.
Other articles by José A. Diaz on PubMed
Différenciation Des Vins Mousseux (cava Et Champagne) Selon Leur Teneur En Minéraux
La teneur en métal d'un certain nombre de vins mousseux a été déterminé par spectrométrie atomiques. Al, Ba, Ca, Cu, Fe, K, Mg, Mn, Na, P, Sr et Zn en utilisant plasma à couplage inductif spectrométrie d'émission atomique (ICP-AES); Cd, Ni et Pb par spectrométrie absorption atomique (GFAAS ) et à partir de la génération d'hydrure AAS (HGAAS). Deux types de vins mousseux ont été étudiés avec DO marque: cava et champagne. 18 échantillons de "brut" cava et 17 échantillons de "brut" champagne de marques différentes ont été analysés selon la procédure décrite dans le document. En utilisant les concentrations de métaux comme descripteurs chimiques des deux classes d'échantillons (Cava et Champagne) sont parfaitement discriminatoire, en appliquant des techniques de reconnaissance modèle supervisé d'apprentissage telles que l'analyse discriminante linéaire (LDA) et doux de modélisation indépendante de la classe Analogie (SIMCA). Le nombre de faux positifs et négatifs étaient nuls, ce qui indique une puissance remarquable de l'authentification des descripteurs utilisés.
Les Réponses Antioxydantes Dose-dépendantes Et Des Changements Pathologiques Dans Tenca (Tinca Tinca) Après Une Exposition Orale Aiguë à Microcystis En Conditions De Laboratoire
Les effets de cellules de cyanobactéries contenant microcystines (MC), les toxines de cyanobactéries, sur les biomarqueurs du stress oxydatif du foie et des reins du poisson Tenca (Tinca tinca) ont été étudiés dans des conditions de laboratoire. Par ailleurs, une étude histopathologique des tissus du foie, des reins, du cœur et de l'intestin a été réalisée. Les poissons ont été exposés par voie orale à des cellules de cyanobactéries dosage de 0, 5, 11, 25 et 55 microg MC-LR/fish mélangé à la nourriture. Les résultats ont montré une diminution dose-dépendante de la superoxyde dismutase (SOD), et aussi de la catalase (CAT) dans le foie. Les niveaux de glutathion et l'oxydation des protéines, cependant, n'ont pas été modifiées par l'exposition à la matière de cyanobactéries. L'étude microscopique a révélé des altérations des tissus, même à des doses plus faibles de cellules de cyanobactéries. Oignon comme les hépatocytes dans le foie, glomérulopathie dans le rein, perte de myofibrilles dans le cœur et les entérocytes vacuolisés dans le tractus gastro-intestinal ont été les principaux changements observés. Ces résultats suggèrent que ce poisson d'eau douce peuvent être négativement affectés par la prolifération de cyanobactéries dans leurs habitats naturels.
En Fonction Du Temps Efficacité De La Protection De Trolox (vitamine E Analogique) Contre La Microcystine-toxicité Induite Dans Tilapia (Oreochromis Niloticus)
Microcystines (MC), hépatotoxines de cyanobactéries, induire un stress oxydant et des changements pathologiques dans les poissons qui peuvent être améliorés avec chemoprotectants tels que la vitamine E (vitamine E). Cette étude a porté sur la période de temps après l'exposition MCs dans lequel Trolox, un analogue de la vitamine E, est efficace contre les dommages oxydatifs et histologiques dans les différents organes de tilapia (Oreochromis niloticus). Les poissons étaient nourris Trolox supplément (700 mg / kg d'aliments) pendant 7 jours, ou reçu seulement de la nourriture des poissons commerciaux, et ont ensuite été exposés à une dose orale unique de 120 microg / poissons microcystine-LR, et se sont sacrifiés dans les 24, 48, ou 72 h. Le Trolox efficacité protectrice a été évaluée sur la base de la peroxydation lipidique (LPO), l'oxydation des protéines, enzymatiques et non enzymatiques antioxydants, et une étude morphologique. En ce qui concerne les biomarqueurs du stress oxydatif altérés par MC, le plus élevé des mesures de protection de Trolox a été observé une exposition de 24 h toxine poste, même si elle s'étend également jusqu'à 48 h dans les branchies (superoxyde dismutase (SOD), catalase (CAT)), et le foie, où le glutathion réductase (GR) soutenu pour contrôler les valeurs 48 et 72 h après l'application de toxine. Glutathion-S-transférase (GST) l'activité dans le foie a été amélioré par l'chimioprotecteur après 24 h et 48 h, bien que les valeurs de contrôle n'ont pas été récupérés. Trolox modulation de ces biomarqueurs et sa capacité à éliminer les radicaux libres expliquent la reprise des valeurs LPO dans tous les organes, à 24 h et aussi dans les branchies à 48 h. Histopathologique, l'efficacité Trolox était plus évidente après 72 h.
Effets Du Sélénium Alimentaire Sur Les Changements Stress Oxydatif Et Pathologique Dans Tilapia (Oreochromis Niloticus) Exposée à Une Bloom Microcystine-production D'eau De Cyanobactéries
La présente étude examine le rôle du sélénium (Se) supplémentation (comme le sélénite de sodium) sur le stress oxydatif et des changements histopathologiques induites par les cellules de cyanobactéries contenant microcystines (MC) dans le poisson tilapia (Oreochromis niloticus). Variation de la peroxydation des lipides (LPO) et les niveaux de carbonyle groupes de contenus, le glutathion réduit / glutathion oxydé (GSH / GSSG) ratio, et de la catalase (CAT), la superoxyde dismutase (SOD), la glutathion réductase (GR), la glutathion peroxydase (GPx) et le glutathion S-transférase (GST) les activités dans le foie et les reins du poisson tilapia exposés à une dose orale unique de 120 microg MC-LR/fish et sacrifié en 24 h, ont été étudiés en l'absence et la présence de 1,5, 3,0 et 6,0 microg / Se g alimentation. Les résultats ont montré un rôle protecteur du sélénium en fonction de la dose et le biomarqueur considéré. Ainsi, la plus faible dose Se fait GR foie CAT et SOD rénale convergé à des valeurs basales, alors que la LPO et de la SOD du foie et de la TPS nécessaire la dose plus élevée. GR rein, cependant, n'a pas été protégée à n'importe quelle dose Se. En outre, Se a également montré pour avoir un effet pro-oxydant avec l'augmentation des valeurs LPO reins et du foie et des activités GPx rénaux chez les MC sans poissons. L'étude microscopique a révélé des altérations des tissus induites par les cellules de cyanobactéries dans le tractus foie, les reins, le cœur et gastro-intestinaux qui ont été améliorés par la dose la plus élevée Se dosés. Le niveau de supplémentation en sélénium doit donc être soigneusement choisis pour fournir des effets bénéfiques et d'éviter les conséquences négatives potentielles.
Effets De La Diététique N-acétylcystéine Sur Le Stress Oxydatif Induit En Tilapia (Oreochromis Niloticus) Exposée à Une Bloom Microcystine-production D'eau De Cyanobactéries
Les poissons peuvent être exposés à des cellules de cyanobactéries toxiques dans les eaux naturelles et des exploitations piscicoles et souffrent de dommages oxydatifs. La présente étude examine les effets de la N-acétylcystéine (NAC), un glutathion (GSH) précurseur, sur le stress oxydatif induit par les cellules de cyanobactéries Microcystis contenant microcystines (MC) dans le poisson tilapia (Oreochromis niloticus). Variation de la peroxydation des lipides (LPO), les niveaux de contenu groupe carbonyle, le glutathion réduit le ratio glutathion oxydé (GSH: GSSG), et de la catalase (Enzyme Commission [CE] 1.11.1.6), la superoxyde dismutase (SOD; EC 1.15.1.1), le glutathion réductase (GR; CE 1.8.1.7), la glutathion peroxydase (GPx; CE 1.11.1.9), et de la glutathion S-transférase (CE 2.5.1.18) activités dans le foie et les reins de tilapia exposés à une dose orale unique de 120 microg MC- LR (avec la leucine [L] et de l'arginine [R]) / poisson et tué en 24 h ont été étudiés en l'absence et la présence de 20,0, 44,0, et 96,8 mg CNA / poisson / j. Les résultats ont montré un rôle protecteur de la CNA, en fonction de la dose et le biomarqueur considéré. L'augmentation de la LPO (1,9 et 1,4 fois dans le foie et les reins, respectivement) et la teneur en protéines a diminué et le GSH: GSSG dans le foie induite par MCs ont été récupérés principalement par les faibles doses de NAC employés. Activités des enzymes antioxydantes a augmenté (plage, de 1,4 à 1,7 fois) par MCs ont également été améliorés par le CNA, bien que le plus haut niveau utilisé induit une modification importante de certaines activités enzymatiques, comme la SOD, GPx et GR. Ainsi, la NAC peut être considéré comme un chimioprotecteur utile qui réduit hépatique et rénale stress oxydatif dans la prophylaxie et le traitement des intoxications liées à MC-dans le poisson quand une attention particulière est donnée à sa dose d'application en raison de son propre pro-oxydant activité, comme le montre dans la présente étude à 96,8 mg CNA / poisson / j.
Comparaison De La Toxicité Induite Par La Microcystine-RR Et La Microcystine-YR Dans Différenciés Et Non Différenciés Cellules Caco-2
Les toxines cyanobactériennes, en particulier microcystines (MC), se trouvent dans les eaux l'eutrophisation dans le monde entier. Les intoxications aiguës sur les animaux et les humains ont été rapportés suite à une exposition MC. Environ 80 variantes MCs ont été isolés dans les eaux de surface à travers le monde à ce jour. La toxicité de la plus fréquente congénère MC, MC-LR, est bien connu, mais des études traitant de MC-RR et MC-YR sont moins abondantes. Dans ce présent travail, les effets toxiques de MC-RR et MC-YR à des concentrations de microM 50, 100, 150 et 200 ont été étudiées dans la lignée cellulaire de carcinome du côlon humain Caco-2 à la fois indifférencié et différencié après 24 et 48 h d'exposition . Les paramètres de toxicité ont été évalués le nombre de cellules par la quantification de la teneur en protéines totales des cultures cellulaires; la viabilité des cellules au moyen d'absorption de rouge neutre, et 3 - (4,5-diméthylthiazol-2-yl) -5 - (3-carboxymethoxyphenyl) -2 - (4-sulfophényl)-2H-tétrazolium sel interne (MTS) pour détecter les changements métabolisation mitochondriales. En outre, les altérations morphologiques ont aussi été étudiés. Les résultats ont montré que la teneur en protéines était le paramètre le plus sensible pour le MC-RR avec des réductions de 45% après une exposition de 48 h à 200 microM MC-RR dans des cellules différenciées (CE (50)> 200 microM), tandis que pour le MC-YR est l'inhibition d'absorption de rouge neutre avec des réductions supérieures à 80% à 100 microM dans les cellules indifférenciées après 48 h (CE (50) de 57,3 pM). En outre, l'altération dans les cellules a été démontré dans les études morphologiques, en particulier à des concentrations élevées, subir une réduction générale du nombre de cellules et une dégénérescence hydropique. La sensibilité des cultures à ces toxines a été fortement affectée par le temps d'exposition et dans une moindre mesure par l'état de différenciation, avec MC-YR montrant une toxicité plus élevée que MC-RR.
Le Glutathion Dans Les Lignées Cellulaires De Poisson CBE Et BCF-2: Réponse à La Pro Model-oxydants Tels Que Mesurés Par Trois Différents Colorants Fluorescents
Le glutathion réduit (GSH) protège les cellules contre les blessures par le stress oxydatif et maintient une gamme de fonctions vitales. In vitro des cultures cellulaires ont été utilisés comme modèles expérimentaux pour étudier le rôle de GSH dans la toxicité chimique chez les mammifères, mais cette approche a été rarement utilisé avec des cellules de poissons à ce jour. La présente étude visait à évaluer la sensibilité et la spécificité de trois colorants fluorescents pour mesurer pro-oxydant induits par les changements de contenu GSH dans les lignées cellulaires de poisson: monochlorobimane (mBCl), 5-chloromethylfluorescein diacétate (CMFDA) et 7-amino-4-chloromethylcoumarin ( CMAC-bleu). Deux lignées cellulaires ont été étudiées, la ligne CBE établie à partir d'une tumeur cutanée de la carpe Cyprinus carpio, et BF-2 des cellules établies à partir des ailettes de crapet arlequin Lepomis macrochirus. Les cellules ont été exposées pendant 6 et 24 h à de faibles concentrations cytotoxiques de pro-oxydants, y compris le peroxyde d'hydrogène, le paraquat (PQ), le cuivre et l'inhibiteur de la synthèse du glutathion, la L-buthionine-SR-sulfoximine (BSO). Les résultats indiquent des différences modérées dans la réponse GSH entre EPC et BF-2 des cellules, mais des différences distinctes dans l'ampleur de la réponse GSH pour les quatre pro-oxydants. En outre, le choix de GSH colorant peut gravement affecter les résultats, avec CMFDA paraître moins spécifique pour GSH que mBCl et CMAC-bleu.
La Cytotoxicité De L'acide Carboxylique Fonctionnalisé Nanotubes De Carbone Monoparois Sur La Lignée Cellulaire Intestinale Humaine Caco-2
Les propriétés uniques des nanotubes de carbone (NTC) ont été explorées pour leur utilisation dans les sciences biomédicales et biotechnologiques dans les domaines, mais, leurs possibles effets toxiques sont source de préoccupation. Les sources d'exposition humaine aux nanomatériaux comprennent l'inhalation, ingestion, contact cutané et l'injection. Les effets pulmonaires et dermiques des nanotubes de carbone in vitro ont déjà été étudié avec des résultats contradictoires, mais les données sur les cellules intestinales sont rares. Le but de cette étude était d'évaluer la cytotoxicité des nanotubes de carbone simple paroi fonctionnalisés avec de l'acide carboxylique sur différenciés et non différenciés cellules Caco-2, dérivées d'un adénocarcinome intestinal humain. Biomarqueurs évalués étaient neutres absorption de rouge (NR), la teneur en protéines (PT), un sel de tétrazolium (MTS) métabolisation, la fuite de LDH (LDH) et la viabilité cellulaire par le biais du test exclusion au bleu trypan (Tbet). Par ailleurs, une étude morphologique a été réalisée. Les cellules ont été exposées à des concentrations comprises entre 5 et 1.000 microg / ml NTC et les effets toxiques ont été étudiés après 24h d'exposition. Résultats NR et MTS ont montré une tendance dose-dépendante avec une réponse inhibitrice à partir de 100 microg / ml CNT, avec une augmentation des fuites LDH. Tbet abouti à une réduction de 80% à des concentrations plus élevées, et, enfin, PT a été seulement modifié à des concentrations plus élevées. Dans l'ensemble, les résultats montrent des effets cytotoxiques sur les cellules Caco-2 avec des cultures différenciées montrant une sensibilité plus élevée. Ainsi, une évaluation des dangers des nanotubes de carbone est nécessaire que l'industrie de la nanotechnologie se développe, et les déchets plus nanométriques sont libérés dans l'environnement.
Stress Oxydatif Induit Par La Microcystine-LR Sur PLHC-1 Ligne De Cellules De Poisson
Preuves croissantes suggèrent que le stress oxydatif pourrait jouer un rôle important dans microcystines (MC) non seulement la toxicité chez les mammifères, mais aussi dans les poissons. À cet égard, un grand nombre d'études in vivo ont été réalisées, mais on sait encore peu sur la modification des biomarqueurs du stress oxydatif sur des lignées cellulaires de poisson à ce jour. Dans cette étude, les effets toxiques de MC-LR ont été étudiées dans la lignée cellulaire poissons PLHC-1, dérivé d'un carninoma hépatocellulaire de l'lucida topminnow Poeciliosis, après 48 h d'exposition. La réponse différente de la superoxyde dismutase des enzymes antioxydantes (SOD), catalase (CAT), la glutathion peroxydase (GPx), la glutathion réductase (GR) et de la glutathion-S-transférase (GST), ainsi que la peroxydation des lipides (LPO) en tant que biomarqueur de l'oxygène à médiation toxicité, ont été évaluées dans PLHC-1 des cellules. Les augmentations dans les activités antioxydantes enzymatiques (SOD, GPx, et la TPS) ainsi que dans les valeurs observées en évidence la LPO stress oxydatif induit par MC-LR exposition. En outre, les améliorations de ces enzymes pourrait suggérer une réponse adaptative à lutter contre l'oxydation blesser induite par MC-LR, confirmant que ce mécanisme est impliqué dans les dommages induits par MC sur les cellules de poisson.
Les Réponses Différentielles Stress Oxydatif Pur Microcystine-LR Et La Microcystine-contenant Et Non Contenant Des Cyanobactéries Extraits Bruts Sur Cellules Caco-2
Proliférations de cyanobactéries sont un problème mondial en raison de la production de cyanotoxines comme les microcystines (MC), provoquant une pollution de l'eau et de graves dangers pour la santé publique pour les humains et le bétail. Le stress oxydatif joue un rôle important dans la toxicité MCs. Dans le présent travail les réponses différentielles de stress oxydatif à MC pures, et la microcystine-contenant et non contenant des extraits bruts de cyanobactéries sur l'être humain du côlon carcinome ligne Caco-2 a été étudiée pour la première fois. Après exposition, les cellules ont été collectées et la superoxyde dismutase activités des enzymes antioxydantes (SOD), catalase (CAT), la glutathion peroxydase (GPx), la glutathion réductase (GR) et de la glutathion-S-transférase (GST) ont été mesurés. En outre, la peroxydation lipidique (LPO) à induction, les espèces réactives de l'oxygène (ROS) et le glutathion réduit (GSH) contenu ont également été analysés. Les biomarqueurs du stress oxydatif qui ont connu plus altérations étaient ROS, CAT, SOD et les activités des RG. Le MC contenant de l'extrait de cyanobactéries ont montré les effets toxiques plus élevés, suivis par pur MC-LR. Le non-MC extrait contenant des cyanobactéries ont montré des effets limités, principalement dans l'activité SOD, glutathion contenu et les activités GP et GR seulement à la plus forte concentration utilisée. Ces résultats suggèrent que MC-LR est le responsable de la réponse au stress oxydatif observées dans les cellules Caco-2, mais d'autres composés contenus dans les extraits de cyanobactéries peuvent contribuer à des effets toxiques.
Microcystine-LR Induit Des Effets Toxiques Dans Différenciés Et Non Différenciés Cellules Caco-2
Microcystines (MC) sont des toxines de la structure heptapeptidic produites par les cyanobactéries toxiques dans les eaux eutrophes de surface. MCs sont connus pour être hépatotoxiques chez l'homme, mais ils sont également capables d'induire des altérations gastro-intestinaux, des réactions allergiques, des irritations, et ressemblant à la pneumonie symptômes. L'impact de la MC-LR, l'une des toxines les plus courantes de cyanobactéries, a été étudiée sur la lignée cellulaire Caco-2, un modèle couramment utilisé entérocytaire, établie à partir d'un carcinome du côlon humain. Cellules Caco-2 ont été différenciées afin de comparer l'effet de MC-LR dans des cellules différenciées et non différenciées. Ils ont été ensemencées dans une plaque de microtitration de 96 puits et traitée avec MC-LR étalon pure (98% de pureté). Les effets de différentes concentrations de cyanotoxines ce (50, 100, 150, et 200 microM) ont été étudiés à 24 h et 48 h de l'exposition par l'observation morphologique et des modifications biochimiques (teneur totale en protéines, l'absorption neutre rouge, et métabolisation MTS). Différenciés cellules Caco-2 ont été légèrement plus sensible que les cellules indifférenciées. En outre, les effets toxiques induits par MC étaient plus élevés à 48 h par rapport à celles observées à 24 h. Le paramètre le plus sensible pour la lignée cellulaire était la réduction de la teneur totale en protéines. Les modifications morphologiques induites par MC-LR étaient la réduction du nombre de cellules et une dégénérescence hydropique, ces modifications étant plus évidente 48 h après l'exposition au MC-LR.
Dans L'évaluation in Vitro De Cytotoxicité Et Génotoxicité D'un Alliage De Titane Commercial Pour L'implantologie Dentaire
Le titane et ses alliages ont de nombreuses applications en dentisterie, utilisés dans l'orthodontie, endodontie, prothèse et en implantologie. Mais l'utilisation dans le domaine biomédical dépend de sa biocompatibilité, comme la directive 93/42/CEE du Conseil du 14 Juin 1993 relative aux dispositifs médicaux a établi. Le but de cette étude était d'étudier la cytotoxicité et la génotoxicité d'une activité commerciale de titane / aluminium / vanadium (Ti-6Al-4V) développé par un jet de sable innovante processus avec l'oxyde d'aluminium, et l'acide nitrique de passivation. Cette procédure créé un matériau avec une rugosité de surface moyenne de 1,73 ± 0.16μm avec des applications dans des implants dentaires. Organisation internationale de normalisation (ISO) 7405:2008 et procédures ont été 10993-5:2009 utilisé pour effectuer les tests de cytotoxicité, et des essais bactériens et des cellules de mutation pour évaluer la génotoxicité. Les résultats montrent que cet alliage de titane (Ti-6Al-4V) n'était ni cytotoxique ni génotoxique dans aucun des tests effectués. Il peut être conclu que cette nouvelle Ti-6Al-4V matériel avec les caractéristiques de rugosité spécifiées montre une bonne biocompatibilité et peut être considéré comme de choix dans l'implantologie dentaire.
Effets Sous-chroniques De Cellules De Cyanobactéries Sur La Transcription Des Gènes Des Enzymes Antioxydantes Chez Le Tilapia (Oreochromis Niloticus)
La fréquence croissante des efflorescences de cyanobactéries toxiques dans les plans d'eau eutrophes est aujourd'hui une préoccupation mondiale en raison de leur capacité à produire des toxines comme les microcystines (MC). Ces toxines de cyanobactéries ont été montré pour affecter les organismes aquatiques comme les poissons, ce qui entraîne un stress oxydatif. Parmi les enzymes antioxydantes, la glutathion peroxydase (GPx) et soluble glutathion-S-transférase (sGST) jouent un rôle important dans la détoxication des MCs. Dans le présent travail le tilapia (Oreochromis niloticus) ont été exposés par voie orale à des cellules de cyanobactéries contenant MCs et non-contenant MCs pendant 21 jours. L'activité et l'expression des ARNm par rapport par PCR en temps réel de ces deux enzymes et l'abondance protéine GST par Western blot ont été évalués dans le foie et les reins. Aussi l'induction de la peroxydation lipidique (LPO) a été dosée. MC contenant des cellules de cyanobactéries a induit une augmentation des produits LPO dans les deux organes, et des MC contenant et MCs non contenant des cellules de cyanobactéries modifié l'activité, l'expression des gènes et de l'abondance des protéines des enzymes, ce qui indique l'importance de la GPx et sGST dans la détoxication MCs. En outre, le foie, le principal organe impliqué dans la biodégradation et la biotransformation, a connu une réponse adaptative à l'agression toxique. Ces résultats montrent pour la première fois que l'exposition subchronique à des cellules de cyanobactéries entraîne des changements au niveau des enzymes antioxydantes et de détoxification et que la GPx et l'expression des gènes TPS sont de bons marqueurs de ces altérations dans le tilapia.
La Toxicité Et L'implication Glutathion Dans Les Effets Observés Par L'exposition De La Lignée Cellulaire De Foie De Poisson PLHC-1 à Pure Cylindrospermopsine
Cylindrospermopsine (CYN), un des cyanotoxines produites par les cyanobactéries plusieurs espèces d'eau douce, a été signalé à provoquer des intoxications humaines et animales. CYN est un puissant inhibiteur de la protéine et la synthèse du glutathion. Afin d'étudier ces effets, les différents modèles in vitro ont été utilisés, qui sont représentatifs des organes ciblés par la toxine. Cependant, les études concernant la toxicité pour les espèces de poissons CYN, à la fois in vivo et in vitro, sont encore très rares. À notre connaissance, c'est le premier travail portant sur les effets de la CYN dans une lignée cellulaire de poisson. Dans le présent travail, nous avons essayé de tester l'hypothèse que CYN pourrait être hépatotoxique à pêcher endommagent les cellules et le stress oxydatif, ce qui peut conduire à la pathogénicité. Pour faire face à cette fin, PLCH-1 des cellules, des dérivés du foie de poisson, ont été exposés à des concentrations qui variaient de 0,3 à 40 pg / ml au cours CYN 24 et 48 h pour l'étude de cytotoxicité, et 2, 4 et 8 pg / mL pour CYN les tests de stress oxydatif. Les critères d'évaluation cytotoxicité basale étudiés étaient la teneur en protéines, l'absorption neutre rouge et le sel de tétrazolium, MTS, la réduction. Les biomarqueurs utilisés pour l'étude du stress oxydatif étaient des espèces réactives de l'oxygène (ROS) de contenu, une teneur réduite en glutathion synthétase et de l'activité γ-glutamyl. Les critères d'évaluation de cytotoxicité ont révélé une diminution de la viabilité cellulaire dans un temps et dépendante de la concentration façon. En outre, les cellules ont été exposées à quand pur CYN, soit une augmentation de la teneur en ROS a été observée, étant plus marquée à des concentrations plus élevées utilisées. Enfin, le présent travail montre des altérations de la teneur en GSH et de synthèse en raison de CYN. En outre, une relation entre les effets cytotoxiques et la production de ROS a été mis en évidence. Les résultats obtenus confirment l'altération des cellules de foie de poisson, ce qui devrait être considérés comme pertinents à ce qu'il peut arriver dans des scénarios réels, car les poissons sont souvent en contact avec cette cyanotoxines.
Influence De La Fonctionnalisation Acide Carboxylique Sur Les Effets Cytotoxiques Induites Par Nanotubes De Carbone Monoparois Sur Cellules Endothéliales Humaines (HUVEC)
Une grande variété de nanomatériaux ont été développés dans les dernières années, étant nanotubes de carbone (NTC) ceux qui ont attiré plus d'attention, en raison de ses propriétés uniques qui les rendent aptes à de nombreuses applications. Par conséquent, il est prévu que des tonnes de nanotubes de carbone sera produit dans le monde chaque année, étant son exposition sur le plan toxicologique. Les nanomatériaux, une fois dans le corps, peut déplacer des sites de recapture de la circulation sanguine ou le système lymphatique, résultant de la distribution dans tout le corps. Ainsi, l'endothélium vasculaire peut être en contact avec eux et peuvent souffrir de leurs effets toxiques. À cet égard, l'objectif de ce travail était d'étudier la cytotoxicité de nanotubes de carbone à paroi simple (SWCNT) sur les cellules endothéliales humaines évaluant l'influence de la fonctionnalisation de l'acide carboxylique et également le temps d'exposition (24 et 48 h). Biomarqueurs évalués étaient neutres absorption de rouge, la teneur en protéines, une métabolisation sel de tétrazolium et la viabilité cellulaire par le biais du test exclusion au bleu Trypan. Les cellules ont été exposées à des concentrations comprises entre 0 et 800 pg / mL pour SWCNTs 24 et 48 h. Les résultats ont montré que les deux SWCNTs et acide carboxylique fonctionnalisés nanotubes de carbone à paroi simple (COOH-SWCNTs) induisent des effets toxiques dans les cellules HUVEC à une concentration et temps-dépendante façon. En outre, les résultats de fonctionnalisation carboxyliques d'acide dans une toxicité plus élevée par rapport aux SWCNTs.
Effets Aigus De La Pure Cylindrospermopsine Sur L'activité Et De Transcription Des Enzymes Antioxydantes Dans Le Tilapia (Oreochromis Niloticus) Exposés Par Gavage
La toxine de cyanobactéries cylindrospermopsine (CYN) est un contaminant largement distribué des systèmes d'eau douce avec pour conséquence le risque pour l'homme et la faune, en particulier les poissons. Toutefois, les données de toxicité sur les poissons CYN sont encore rares. Il est connu que CYN inhibe la synthèse du glutathion, ce qui pourrait contribuer à des dommages oxydatifs. Dans le présent travail le tilapia (Oreochromis niloticus) ont été exposés par gavage à 200 et 400 pg / kg de poids corporel de la pure CYN et sacrifiés après 24 h. L'activité et l'expression des ARNm par rapport par PCR en temps réel d'antioxydant glutathion peroxydase enzymes (GPx) et solubles dans la glutathion-S-transférase (sGST) et l'abondance des protéines sGST par analyse Western blot ont été évalués dans le foie et les reins. Aussi l'induction de la peroxydation lipidique (LPO) a été dosée. Les résultats montrent une augmentation des produits LPO dans les deux organes. En outre, le CYN modifié l'activité, l'expression des gènes et de l'abondance des protéines des enzymes, ce qui indique l'importance de la GPx et sGST dans la pathogénicité CYN. C'est la première fois que CYN est rapporté à affecter ces enzymes dans le poisson et ils ont montré à être des biomarqueurs sensibles de la toxicité CYN.
Les Réponses Du Stress Oxydatif Dans Le Tilapia (Oreochromis Niloticus) Exposés à Une Dose Unique De Cylindrospermopsine Pure Dans Des Conditions De Laboratoire: Influence De La Voie D'exposition Et De L'heure Du Sacrifice
Cylindrospermopsine (CYN) est une toxine produite par diverses espèces de cyanobactéries qui sont de plus en plus présentes dans les systèmes d'eau douce. Bien que CYN peut avoir des effets toxiques chez les humains, les animaux domestiques et sauvages, il a fait l'objet d'une enquête très peu (en particulier dans les poissons). Il a été rapporté d'appauvrissement de la teneur en glutathion cellulaire, mais le rôle du stress oxydatif dans la pathogénicité de CYN de poisson est inconnu. Pour cette raison, le poisson tilapia ont été exposés à 200 mg / kg CYN pur à travers deux voies d'exposition différente-gavage et une injection intrapéritonéale et sacrifiés après 24 h et 5 jours. Les résultats ont montré une augmentation de l'activité de la NADPH oxydase (un biomarqueur de l'oxygène espèces réactives de formation), la peroxydation lipidique (LPO) et l'oxydation des protéines; aucun changement dans l'oxydation de l'ADN et une réduction des niveaux de glutathion (GSH) et γ-glutamyl synthétase (GCS l'activité), l'enzyme limitante dans la synthèse du glutathion. Le temps du sacrifice avait une plus grande influence sur les résultats que la voie d'exposition, car après 5 jours quelques-uns des biomarqueurs dosés avaient récupéré leurs pré-intoxication niveaux, ce qui n'était pas le cas après 24 h.
En Fonction Du Temps Des Changements Histopathologiques Induites Dans Tilapia (Oreochromis Niloticus) Après Une Exposition Aiguë à Cylindrospermopsine Pure Par Voie Orale Et Par Voie Intrapéritonéale
Bien que poissons et les organismes aquatiques peut être en contact avec le cyanotoxines (CYN) cylindrospermopsine, les études toxicologiques sont pratiquement inexistants. CYN a une toxicité tardive et progressive aiguë chez les rongeurs, mais aucune donnée n'a été signalé chez les poissons. Dans ce travail, le tilapia (Oreochromis niloticus) ont été exposés pour la première fois à une dose aiguë de CYN (200 ug / kg de poisson) par voie intrapéritonéale (ip) d'injection, et les effets ont été comparés avec la voie orale (gavage). Dans les deux cas, les poissons ont été sacrifiés après 24 h ou 5 jours de l'administration de toxine. CYN induit des dommages multiorganic, étant le foie et les reins des principales cibles de la toxicité. Les résultats histologiques ont été plus prononcés après administration ip (dans le foie, les reins, le cœur, les branchies), à l'exception de l'appareil gastro-intestinal. Le temps du sacrifice influencé le degré des lésions histologiques dans tous les organes étudiés, et a été plus sévère après 5 jours en comparaison à 24 h. En outre, le CYN induit une augmentation du diamètre moyen nucléaire des hépatocytes dans le foie, et une diminution des sections proximale et distale de tubes contournés dans le rein. Les variations de ces paramètres étaient également plus sévère par voie ip, et avec le moment du sacrifice, en soutenant les résultats histopathologiques obtenus dans ces organes. Ainsi, les deux paramètres pourrait être utile pour quantifier l'étendue des dégâts dans les poissons après exposition CYN.
Biochimiques Et Pathologiques Des Effets Toxiques Induits Par L'cyanotoxines Cylindrospermopsine Sur La Lignée Cellulaire Humaine Caco-2
Cylindrospermopsine (CYN), un des cyanotoxines produites par les cyanobactéries d'eau douce de plusieurs, provoque des intoxications humaines et de la mortalité des animaux. La présente étude se concentre sur les effets cytotoxiques de CYN sur cellules Caco-2, à 24 h et 48 h. Les critères d'évaluation cytotoxicité basale étudiés étaient teneur totale en protéines (TP), neutre absorption de rouge (NR) et la réduction du sel de tétrazolium (MTS). L'effet de concentrations non cytotoxiques de CYN sur la génération de intracellulaires espèces réactives de l'oxygène (ROS), γ-glutamyl synthétase (GCS) et l'activité du glutathion (GSH) contenu a également été étudiée et les altérations morphologiques dans les cellules Caco-2 à la suite de l'exposition CYN ont été enregistrées. Le paramètre le plus sensible - la réduction de MTS - a montré que la viabilité de cellules Caco-2 après une exposition à la plus haute concentration testée (40 mg / ml CYN) a été réduite d'environ 90%. Intracellulaire augmentée production de radicaux libres uniquement lorsqu'il est exposé à une concentration de 1,25 mg / mL CYN, tandis que le contenu du GSH et de l'activité GCS augmenté lorsqu'il est exposé à 2,5 ug / ml CYN. Les principaux enseignements fournis par la présente étude sont les modifications ultrastructurales, qui révèlent une dégénérescence lipidique, des dommages mitochondriaux et la ségrégation nucléolaire avec noyaux altérés. Par conséquent, il a été démontré que CYN peut induire des effets toxiques dans les cellules Caco-2 d'une manière dépendante de la concentration du temps. En outre, contrairement aux altérations cytotoxiques et biochimiques, qui étaient seulement évidente à des concentrations plus élevées, des dommages au niveau morphologique ultrastructurale était perceptible même à la plus faible concentration utilisée.
L'exposition Aiguë à Pure Résultats Cylindrospermopsine Du Stress Oxydatif Et Altérations Pathologiques Dans Tilapia (Oreochromis Niloticus)
Cylindrospermopsine (CYN) est de plus en plus reconnu comme une menace potentielle pour la sécurité de l'eau potable, en raison de son ubiquité. Cette cyanotoxines a été trouvé pour causer des effets toxiques chez les mammifères, et bien que le poisson pourrait être en contact avec cette toxine, les études de toxicité aiguë pour les poissons sont inexistants. C'est la première étude montrant que des doses uniques de CYN pur standard (200 ou 400 mg de poisson CYN / kg de poids corporel) par voie orale (gavage) de générer des effets histopathologiques dans les poissons (tilapia-Oreochromis niloticus) exposés à la toxine dans des conditions de laboratoire. Parmi les changements morphologiques, désorganisé l'architecture du parenchyme du foie, dilatés espace de Bowman dans le rein, fibrolyse dans le cœur, l'entérite nécrotique dans les intestins, et des hémorragies dans les branchies, ont été observés. En outre, certains biomarqueurs du stress oxydatif dans le foie et les reins des tilapias ont été modifiées. Ainsi, l'exposition CYN induit une augmentation des produits d'oxydation des protéines dans les deux organes, l'activité de la NADPH oxydase a été augmenté de façon significative avec le rein est l'organe le plus touché, et une diminution du contenu de GSH ont également été détectés dans les deux organes, à la dose la plus élevée testée. © 2012 Wiley Periodicals, Inc Environnement Toxicol, 2012.
