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Articles by Katherine M. Kocan in JoVE
JoVE Immunology and Infection
ダニのRNA干渉
1Department of Veterinary Pathobiology, Center for Veterinary Health Sciences, Oklahoma State University, 2(CSIC-UCLM-JCCM), Instituto de Investigación en Recursos Cinegéticos IREC
食物を与えられていないダニへのdsRNAの注射により、RNA干渉（RNAi）のための方法が記載されている。 RNAiは、遺伝子操作の他のメソッドの使用が制限されているダニの中で最も広く使用されている遺伝子サイレンシング技術です。
Other articles by Katherine M. Kocan on PubMed
ダニ媒介性病原体、アナプラズマまた,、牛やダニの生存のための適応。
ダニ媒介性牛また病原体アナプラズマ, (リケッチア目: Anaplasmataceae) 膜結合型介在物のホスト細胞細胞質内を乗算します。また, ナショナルジオ グラフィックから分離した遺伝子型、抗原組成, 形態およびダニの感染性の異なる発生します。また, 伝搬ティック細胞培養システム ティック病原体相互作用の研究のために良いモデルをことが分かった。また, ウシ赤血球由来上識別 6 主要表面蛋白質 (MSPs) また, ダニのセルから派生に保存されていた。のみ MSP1a、アドヘシン ティック セルのためにバインドされた間 MSP1a と MSP1b （アドヘシン） ウシ赤血球のためだった。MSP1a の縦列繰り返し部分ティック細胞とウシ赤血球の両方に必要かつ十分な接着のために発見されました。また, 菌株のダニの感染性は接着性と繰り返されたペプチッド シーケンスの両方を含むことがわかった、分離株の MSP1a の接着の容量に依存していた。また, と免疫牛牛の赤血球から派生またはティック細胞差動抗体応答 MSP1a と差動式これらの蛋白質の牛やダニの細胞に起因する MSP1b を示した。MSP2 多重遺伝子族の家族から派生した、牛やダニ抗原変異を受けることがわかったし、永続的なまた, 感染症の確立に貢献するかもしれない。MSP1a は分子量タンデムの異なる番号により異なりますので繰り返しの地理的分離株に対する安定した遺伝マーカーとして使用されています。ただし、また, 系統分類学分離北米から MSP1a を使用して、MSP4 MSP4 間と地理的エリア内は多岐 MSP1a 中の良いの生物地理マーカー示した。感染と開発 a. また, 牛と目盛りのセル表示されますが異なると小さなゲノムからエンコードされたいくつかの表面の蛋白質によって媒介されます。
アナプラズマまた, 主要表面蛋白質 1 遺伝子の保全サイクリック伝送タイマー刻みと牛の間中。
ウシ アナプラズマ ジラミ アナプラズマまた, によって引き起こされる世界的な経済の重要性です。いくつかの主要表面蛋白質保存された遺伝子シーケンスとワクチンおよび診断アッセイの候補として検討されています。主要表面蛋白質 1 (MSP1) のポリペプチド MSP1a で構成されていると MSP1b MSP1a から単一コピー遺伝子の msp1 アルファ表現され、MSP1b msp1 ベータの多重遺伝子族のメンバーによって表されます。Msp1 遺伝子が保存されているかどうかを判断するためには、msp1 アルファ、msp1 beta(1)、および msp1 beta(2) 遺伝子特定のプライマー合成し、また, ダニおよび唾液腺カクマダニ属のアベマキの急性および慢性の感染症の中に牛から培養細胞からの msp1 シーケンスを増幅するために使用します。MSP1a、MSP1b(1)、MSP1b(2) の蛋白質シーケンスは、寄生虫のライフ サイクル中に保存されていた。MSP1a のアミノ酸変化は認められなかった。ただし、組換え, また, 脊椎動物のホストおよび/または PCR エラーのサブ集団の選択に起因する可能性が、MSP1b(1) と MSP1b(2) 蛋白質シーケンスで小さな変化が観察されました。いくつかの分離固有のシーケンスも観察されました。MSP1 タンパク質かなりよく保存するが表示されますこの研究では, 得られる情報と潜在的なワクチン候補に基づいてください。
ティック細胞およびウシ赤血球の感染、また細胞内エールリヒア アナプラズマ, の 1 つの遺伝子型と他の遺伝子型による感染を除外します。
アナプラズマまた,、ダニ媒介性リケッチア病原性牛、アメリカ合衆国のいくつかの分野で流行しています。アメリカ合衆国で発生する多くの地理的な菌株また, の順序で異なります主要表面蛋白質の 1 a によって特徴付けられる、分子量異なる数字のタンデムのため 28 または 29 のアミノ酸の繰り返されます。最近の研究 (g. h. パーマー、f. r. Rurangirwa、T. F. マッケルウェイン氏、J. Clin。微生物。39:631-635, 2001年） に A の, 感染牛の群れのフィラリアの領域で複数の msp1alpha の遺伝子型に存在していたが、その 1 つだけの遺伝子個々 のウシあたりが見つかりませんでした示した。感染牛の他の遺伝子型が除外されたことが示唆された.また, 品種の感染赤血球と培養ティック細胞の感染排除の現象を確認するために本研究を行った。また, 2 ティック伝染性分離株は、バージニア州から、オクラホマ州からこれらの研究のために使用されました。2 つの別々 の試験では、1 つだけの遺伝子型を開発した 2 つの分離株感染の平等な用量で接種牛。2 つの分離株の平等な用量を接種した目盛り細胞培養となったバージニアでのみ感染また, の分離。文化、オクラホマの比が異なる接種しバージニア州のまた, 菌株接種より高い比率で分離設立となったし、感染症、他を除外しました。文化 1 菌株の確立された感染症は、その後他のとに感染していたときに、確立された隔離のみが検出されました。我々 感染排除細胞培養での初期感染時に各分離株に異なる蛍光色素標識によって文書化。文化 2 日後、のみ単一の分離はセルあたり蛍光顕微鏡による検出されました。最後に、アナプラズマ ovis 感染後、バージニア州と接種した文化で確立されたまたはオクラホマのまた, を分離すると、また, 感染が除外されました。これらの研究は感染除外のみ 1 つの遺伝子型の設立に伴うまた, ウシ赤血球およびダニの細胞が発生したことを確認感染排除アナプラズマおよびエールリヒアの種のための最初のレポートに表示されます。
アナプラズマまた, 培養マダニ Scapularis 細胞での開発に及ぼすテトラサイクリンの。
アナプラズマまた,、牛におけるダニ媒介性 ehrlichial 病原体の感染は、一部の低用量のテトラサイクリン投与によって制御されています。最近では、細胞培養系 a. また, 胚イクソデススカプラリスから派生した目盛り細胞ラインを使用して開発されました。本研究は、ティック細胞培養の試金で伝達また, テトラサイクリンの影響を判断する設計されました。各種濃度のテトラサイクリン (0, 0.01, 0.10, 1.0, 5, 10, 20 または 100 microg/ml) 単分子膜の細胞でまた, 接種後媒体におけるカルチャ 48 h が追加されました。また, 成長薬での治療し、コントロール文化の感染 7 日後 (PI) で間接 ELISA による、毎日による光と電子顕微鏡 (LM および EM) を評価した後。感染性、文化の派生また, 接種処理と未処理のコントロールの文化の影響を受け牛の決定だった。テトラサイクリン投与 5、10、20、100 microg/ml elisa 法によって定められるようにまた, 成長を有意に阻害の結果。アナプラズマの形態学的劣化 LM と EM、によって決定とを同じ薬剤濃度の治療文化が起きた。また, レプリケーション, 文化で抑制は日に 2-6 PI 20 microg/ml テトラサイクリンと扱われる、見かけの 96 日抗生物質を除去した後でした。感染細胞培養の証明に影響を受けやすい摘脾牛を接種すると感染する 20 microg/ml テトラサイクリンを含む培地で扱われます。本研究のすべてのパラメーター テトラサイクリンまた, 培養ティック細胞を殺したことを示した。アナプラズマ ティック細胞文化薬物アッセイは、したがって、スクリーニング、アナプラズマの制御のための新規抗生物質を評価するのに便利でしょう。
新世界の系統地理学の主要表面蛋白質の系列に基づくアナプラズマまた, 分離されます。
遺伝子および蛋白質シーケンスの主要表面蛋白質 (MSP) 1a とアナプラズマまた, 4 (リケッチア目: Anaplasmataceae) アルゼンチン、ブラジル、メキシコ、アメリカ合衆国から新世界菌株間の系統関係を推論するために使用されました。また, 17 菌株のプラス 2 重要分類群 (A. centrale と A. ovis) 使用された最大節約分析 MSP4 のため 20 菌株 MSP1a の系統解析のために使用された一方。ラテン アメリカ クレードのブートス トラップの強力なサポート msp4 解析を提供、このクレード内はメキシコおよび南アメリカのクレードのサポートが検出されました。また, アメリカ合衆国も南部 (隔離) からフロリダ州、ミシシッピ州、バージニア州からの 2 つのクレードにグループ化されたと西中央 （カリフォルニア州、アイダホ州、イリノイ州、オクラホマ州、テキサス州からの分離株) からの分離の状態します。少しイイズナ解像度これらの高いクレード内で検出されたが、msp4 シーケンスはまた, 菌株の地理学パターンを推定するための良い遺伝マーカーのように見えます。Msp4 によって提供される、イイズナの解像度とは対照的 MSP1a DNA および蛋白質シーケンスされたかなりの変数とイイズナの解像度を提供しなかった。MSP1a シーケンスでほとんどバリエーションが与えられた分離するユニークな登場し、アイダホ州とフロリダ州とアイダホ州とアルゼンチンからの分離株内 msp1alpha での同様の DNA シーケンスの変化が検出されました。これらの研究結果は、その msp4 系統情報提供また, 菌株の進化を示した。対照的に急速に進化している MSP1a シーケンスを登場し、これらのシーケンスは、イイズナ情報を提供するにのみ分離 MSP1a シーケンスが数多く地理的領域から分析するとき。
予防接種牛のアナプラズマまた, ダニの細胞文化とウシ赤血球のチャレンジ-露出が感染しているマダニが続きますから派生。
アナプラズマ、溶血性疾患、ダニ媒介性病原体またアナプラズマ, によって引き起こされる牛 (リケッチア目: Anaplasmataceae) 感染赤血球から収穫される抗原作られて殺されたワクチンを使用して制御されています。我々 は最近の連続的な目盛りのセルラインでまた, 伝播の細胞培養システムを開発しました。本研究では, ダニ細胞文化またはウシ赤血球から収穫されるまた, ワクチン接種牛の応答と比較する牛トライアルを実行しました。すべてを接種し、コントロール牛とまたフィードおよび病原体を転送する, 感染した男性カクマダニ属のアベマキの許可によってチャレンジ公開いた。9 つの 1 歳牛 （1 グループ 3） この研究のため使用されまた細胞培養由来, と, 免疫した赤血球由来また, または受信のアジュバントのみとしてのコントロールを提供します。各ワクチン投与に含まれている約 2 x 10 (10) a. また, と 3 つの予防接種は、1、4、6 週間で投与されました。8 週での牛は、60 + アベマキ男性とまた, 上牛の餌に大人として感染したことによってチャレンジ公開でした。抗体の主要表面蛋白質 (MSP) 1 a、1 b、5、に対する牛 ELISAs によって定められるように最後の予防接種後 2 週間にピークに達した。牛赤血球由来抗原で免疫した優遇認識 MSP1a の細胞由来抗原優遇認識を MSP1b いた IDE8 感染で免疫牛。保護の有効性を評価した、パーセントを使用して感染赤血球 （PPE） は、血球容積 (PCV)、およびピリオド。A. また, 接種牛低い PPE とコントロール動物と比較して臨床アナプラズマを表示しなかったときの高い PCV 値を示した。また、細胞培養由来, アナプラズマは新しい殺されたワクチン開発の抗原として使用するための約束を示しています。
細胞培養系アナプラズマまた, ダニの細胞と相互作用の研究のためのアプリケーション。
ダニ媒介性リケッチアまたアナプラズマ, 培養システムはこの牛の経済的に重要な病原体に関する研究の新しい機会を提供しています。また, 宿主細胞膜結合介在で乗算します。赤血球の感染牛の唯一のサイトのように見えるに対し、また, ダニで複雑な発達のサイクルを経るし、授乳中伝送を介して唾液腺が発生します。我々 は最近、イクソデススカプラリスの胚から派生したセルの行を使用してまた, 培養システム開発。ここではまた, ダニの細胞と相互作用を研究この細胞培養システムの使用を確認します。いくつかのアッセイは、ティック/a. また, 細胞システムを使用して開発されました。接着アッセイはまた, ダニの細胞への付着のために必要なタンパク質の同定は開発されました。また, 感染を抑制することで選択したの主要表面蛋白質に対する抗体の効果はさらにダニの細胞に感染表面タンパク質の役割の確認を許可アッセイでテストされました。また, のためのスクリーニングアッセイ薬物開発され、牛の初期薬剤選択使用なしのメソッドを提供します。文化システムはまた, 感染ダニ唾液および唾液成分の効果を高めるためのテストに使用されました。ティック細胞培養系 a. また, ダニの相互作用を研究するための良いモデルに証明しています。これらの研究から得られる情報は同じティック セルラインで反映されているその他密接に関連するダニ媒介性病原体に適用できます。
アナプラズマまた, Msp1alpha 遺伝子型正の淘汰圧の下で進化が地理菌株のマーカーはありません。
アナプラズマまた, (順序リケッチア目、家族 Anaplasmataceae) 牛のダニ媒介性病原体は、世界の熱帯・亜熱帯地域に固有です。また, ナショナルジオ グラフィックから分離した合衆国で発生して主要表面蛋白質 1a で特定されている (MSP1a) は異なりますシーケンスと分子量タンデム 28-に 29 アミノ酸の異なる数字のために繰り返されます。本研究は、2001 年中に感染した牛からまた, が流行している東の中央オクラホマ州から取得また, 菌株間の遺伝変異を検討を実施しました。MSP1a の遺伝子および蛋白質シーケンスと塩基 msp4 オクラホマと新しい世界の系統関係を分離アルゼンチン、ブラジル、メキシコ、アメリカ合衆国から推論に使用されました。オクラホマから収集された 11 また, 菌株は全て同一 MSP4 シーケンスが異なる MSP1a シーケンスを持っていた。Msp4 シーケンスの 13 の系統分離オクラホマから分離されたラテン アメリカ 7 ・ 12 の米国菌株によって最大節約法 (MP) および最尤 (ML) との比較分析、A. centrale と自尊感情として使用 A. ovis シーケンスのラテン アメリカのクレードの強いブートス トラップ解析サポートを提供します。アメリカ合衆国南部 （フロリダ州、ミシシッピ州とバージニア州） と西中央アメリカ （カリフォルニア州、アイダホ州、イリノイ州、オレゴン州、ミズーリ州とテキサス) からまた, 菌株は、2 つのクレードにもグループ化。両方のクレード広範な牛の動きを示唆オクラホマから分離されたに含まれています。Msp4 配列ブートス トラップ解析サポート オクラホマ州の東の中央、北中央のクレードと両方含まれてクレード菌株を msp4 シーケンス菌株間のコドンおよびアミノ酸の変化のスティルウォーター、オクラホマ解析から異なる系統の提供される証拠を提供するオクラホマから分離された株の ML 解析その msp4 正の淘汰圧の下ではないです。対照的に、オクラホマから 13 菌株と 7 のラテン アメリカの比較と MP と ML の解析による米国から 13 菌株の MSP1a DNA および蛋白質シーケンスの系統地理的クラスタ リングを認めず、この遺伝子は正の淘汰圧の下である証拠を提供しました。その msp1alpha また, のキャラクタリゼーションのためのないマーカー地理菌株、オクラホマの内でまた, 菌株間で観測された遺伝の不均質牛の動きと異なる遺伝子型のメンテナンスによる独立伝送イベントによって説明できることが示唆されたが示唆されました。
北アメリカのバイソンから分離されたまたアナプラズマ, のキャラクタリゼーション
また, アナプラズマ （リケッチア目: Anaplasmataceae)、牛のダニ媒介性病原体は、世界の熱帯・亜熱帯地域に固有。血清テスト アメリカバイソン バイソンバイソンとしてまた, と、感染している、識別したもののまた, 感染を確認し、アメリカ合衆国とカナダの自然感染のバイソンから得られた菌株を特徴付ける本研究が行われました。バイソン菌株の主要表面蛋白質 (MSP1a および MSP4) シーケンスは新世界牛分離株と比較すると特徴づけられました。このまた, バイソンの感染性を示す血液から 1 つ米国バイソン急性アナプラズマを開発し、影響を受け, 摘脾ふくらはぎに接種した牛を分離します。本研究の結果は、バイソンから得られたこれらまた, 菌株は自然感染牛からのものに似て示した。
抗原とアナプラズマまた, 感染牛での制御のための代替。
アナプラズマ、ダニ媒介性牛病、リケッチアまたアナプラズマ, によって、引き起こされる世界の熱帯、亜熱帯地域で流行しています。病気は、乳製品、牛肉産業を世界中にかなりの経済的損失が発生します。16S rRNA、groESL、および表面の蛋白質の解析はリケッチア目順序の最近の再分類の結果があります。属アナプラズマが A のまた, 種の多くは、今また以前エールリヒア bovis、E. プラティスと (これはひと顆粒球エールリヒアを引き起こします) E. phagocytophila グループとしてそれぞれ知られていた A. bovis、A. プラティス、A. phagocytophilum います。ライブと殺されたワクチンは制御アナプラズマのため使用されているし、両方のタイプのワクチンの利点と欠点があります。これらのワクチン臨床アナプラズマ牛を防ぐことで有効にされているが、また, 感染がブロックされていません。したがって、持続感染牛が両方の機械伝達の感染血液の貯留層のダニ感染症として機能します。最後の 10 年間、免疫学、生化学、分子技術の進歩はまた, と生物関連の研究に適用されています。また, 細胞培養システムの最近の開発抗原の潜在的なソース改良が殺され、ライブ ワクチンの開発を提供し、可用性細胞培養由来抗原のワクチンの生産における牛の使用を排除します。また, 抗原レパートリーの増加の知識と、新しいテクノロジとを組み合わせ、A., ウシ細胞と体液性免疫応答の改善された理解は、コントロールのより効果的なワクチンの開発とアナプラズマの防止に貢献する必要があります。
主要表面蛋白質 1 A、またリケッチア アナプラズマ, 宿主細胞への接着に関与の機能ドメインの特性。
属の模式種アナプラズマ, の主要表面蛋白質 (MSP) 1a (リケッチア目: Anaplasmataceae) 接着、感染して、生物の伝送を仲介するだけでなく防御免疫牛における貢献して示されています。蛋白質の残りの部分は菌株保存性が高いですが MSP1a には縦列繰り返しペプチッドのアミノ末端領域の変数数が含まれます。繰り返しの数地理のまた, 菌株によって異なりますが内分離一定であり分離アイデンティティの安定した遺伝マーカーとして使用されています。分離されたタンパク質の最も可変部分はタンデム繰り返しのシーケンスであるため、この地域の蛋白質の宿主細胞への付着、感染症への前提条件に関与する最も可能性です。本研究の目的は組織を特徴付けることでした、関数 MSP1a タンデムの宿主細胞接着におけるまた, の繰り返されます。我々 遺伝子組換え変異タンパク質の使用によって MSP1a の縦列リピート領域必要かつ十分なダニ細胞およびウシ赤血球への MSP1a の接着を仲介することを示した。個々 の繰り返しの優勢なシーケンスを表す合成ペプチド ティックの細胞抽出液 (TCE) の接着の能力は彼らのためにテストされました。20 のアミノ酸として G とペプチドは TCE に接着できませんが D または E の位置 20 酸性アミノ酸を含むペプチド TCE にバインドします。ペプチド中和また, 感染培養ティック細胞のと観察中和が全体 MSP1a 遺伝子組換えタンパク質に対する抗体によって影響を受けるに似ていたが合成に対してウサギの産生する抗体を繰り返します。また, のいくつかの地理的な菌株の縦列繰り返し MSP1a ペプチドの解析は繰り返しペプチドの構造とシーケンス MSP1a の接着特性の影響を受けて msp1alpha 遺伝子型とティック伝染性表現型の分離と推奨との複雑な関係を明らかにしました。これらの研究は、蛋白質の縦列リピート領域 MSP1a の接着能を仲介する実証。
感染症の除外、リケッチア病原体またアナプラズマ, ティック ベクトル カクマダニ属のアベマキの。
アナプラズマまた, アメリカ合衆国のいくつかの分野で流行しているダニ媒介性、リケッチア牛病原体です。最近の研究 (J. デ ラ フエンテ J. C. ガルシア ガルシア、E. F. Blouin、j. t. サリキ、K. M. Kocan Clin。診断。研究室の免疫。9:658-668, 2002年） 細胞培養ティックとウシ赤血球の感染また, の 1 つの遺伝子型と他の遺伝子型による感染を除外することで示した現象呼ばする感染除外として。本研究はまた, 品種のティックのベクトル、カクマダニ属のアベマキの感染排除の現象を確認を実施しました。また, （バージニア分離） の 1 つだけの遺伝子型 PCR によってまずバージニア菌株を感染子牛と第二に、オクラホマ分離株と感染子牛を飼育するダニが検出されました。これらの研究感染排除また, 遺伝子型がまた牛と培養ティック細胞だけでなく自然感染ダニを発生し、1 つだけの遺伝子型 1 チックあたりの設立の結果を示しています。
抗体アナプラズマまた, 主要表面蛋白質 1a と 1b を培養ティック細胞の感染を阻害します。
表面蛋白質 1 （MSP1）、牛病原体またアナプラズマ, の主要な （リケッチア目: Anaplasmataceae） MSP1a と MSP1b の 2 つの蛋白質の複合体です。以前の研究 MSP1a と MSP1b （アドヘシン） はアドヘシン ティック cells をあることが証明 MSP1a のみながらのウシ赤血球のためであることを示した。本研究では, また, 伝搬ティック細胞培養システム培養ティック cells また, 感染をブロックする抗血清の能力をテストするため感染阻害アッセイを開発していました。細胞培養から派生したまた, 細胞膜上に接種前免疫して抗血清をインキュベートしただった。される膜は、収穫の 7 日後と a. また, 文化では抗原検出 ELISA を用いて定量化されました。抗血清の感染阻害試験結果はまた, ウシ赤血球とウサギと組換え MSP1a、MSP1b、複雑な MSP1 を免疫した牛から精製した免疫牛からの持続感染牛から派生しました。また, 持続感染牛からの抗体、また, ウシ赤血球または組換え複雑な MSP1 と免疫牛から免疫牛のティック cells また, 感染性を阻害しなかった。MSP1a と MSP1b を免疫したウサギ抗血清 (個別にまたは組み合わせて) また, ダニ cells のバージニア州とオクラホマ州の分離株の感染 25 70% 削減します。同様に、抗血清組換え MSP1a 26 37 %tick 細胞の抑制 MSP1b 感染と免疫牛から。これらの結果をさらに MSP1 複雑なタンパク質ティック細胞の伝染の役割を確認します。抗血清からによる感染の抑制の欠如自然感染牛または全体の有機体を免疫牛が示すウシの免疫応答はまた, ダニ cells の感染をブロックに向かって向けられていないとダニの病原体の継続的な感染性に貢献するかもしれない。
CDNA 発現ライブラリ予防接種を用いたマダニ Scapularis のインフェ ステーションのコントロールの保護抗原の同定
ティックの蔓延に対する免疫応答を誘発する抗原の同定は、これらの経済的に重要な外部寄生虫に対するワクチンの開発が必要です。保護抗原を特定するためには、scapularis 当初ティック胚から派生したライン (IDE8) セル連続マダニからの Dna の表現ライブラリを構築しました。cDNA クローン マウスされた個々 のプールと免疫し、チャレンジは-I. scapularis 幼虫免疫とコントロール マウスにフィードすることができます公開のスクリーニングのいくつかのラウンドを受けるでした。ダニに対する免疫による低減腹いっぱいをフィードし、幼虫の段階に脱皮する幼虫の能力で決定されました。幼虫のインフェ ステーションへの免疫を誘発するプール内の個々 のクローンされた部分的にシーケンスし、その推定されるタンパク質関数シーケンス データベースとの比較によるに従ってグループ化します。スクリーニングは、I. scapularis インフェ ステーションに対する防御免疫反応を誘起する複数の個別抗原識別。私たちの研究を初めてシーケンス解析を組み合わせた cDNA 発現ライブラリ予防接種 (ELI) ダニに対するワクチンで使用するための候補抗原の同定のための強力かつ効率的なツールであることを示した。
研究とまたアナプラズマ, 感染マダニの効率的伝播。
ダニを頻繁に好まれた供給のサイトのホスト、クラスターし、同じサイトでダニの効率的伝播増加供給成功といくつかの病原体の伝送に示されています。感染症の病原体とダニの主要なルートを介して吸血 parasitemic ホストで授乳中ですが、ウイルスおよびスピロヘータの非全身伝送から発生する共通の給餌サイト未感染のホスト上で感染ダニに感染して示されています。本研究では、2 つの別々 の研究行われていた牛、アナプラズマまた, ダニ媒介性リケッチア病菌を用いたします。また, 非全身から送信できるかどうか我々 はテスト 1 つの研究で未感染カクマダニ属のアベマキ男性に感染ウサギの効率的伝播しながら。ダニの感染は、伝送の影響を受けやすいいる牛をフィードすることによって、DNA プローブと顕微鏡研究唾液腺によって決定しました。男性と女性のダニ parasitemic 牛の効率的伝播買収と男性でまた, の開発を増加させるかどうか 2 番目の研究では、我々 はテスト。伝送の影響を受けやすいいる牛をフィードするダニを許された後また, 感染唾液腺における定量的 PCR によって決定しました。また, 非全身伝送では、ウサギの同じ敷地に供給し、したがって、また, 伝送手段に表示されません感染し、感染していないダニからは発生しなかった。また, 感染症男性のタイマー刻みで女性と効率的伝播しながら増加しなかった。したがって、アダルト カクマダニ属属の効率的伝播また, 伝送のダイナミクスに影響を与えることはありません。
同定と遺伝子組換えワクチン カチカチのインフェ ステーションの保護抗原の解析の進歩します。
ダニ家畜と野生動物の経済的に重要な外部寄生虫相と世界中蚊には人間の病原体のベクトルとして 2 番目であると見なされます。ダニ、殺だに剤の使用に主に基づいているため電流制御法のカチカチのインフェ ステーションの削減効果制限があり、殺だに剤の使用はしばしば選択殺たに剤耐性ダニや環境汚染を含む深刻な欠点が伴っています。改良されたワクチン カチカチのインフェ ステーションの開発費用対効果を提供しています、環境配慮型コントロール メソッド。現在販売牛ダニの制御用市販ワクチンはコンサート統合制御戦略を使用するとフィールド研究における効果的なされています。ただし、新しい抗原ティック ワクチンの有効性を高めるために必要です。保護抗原に対するダニのインフェ ステーションの数に制限を識別し、特徴付けられる持っているが、新しい抗原の発見ティック ワクチンの有効性を改善するため制限のステップままになります。最近の技術は、遺伝子の発見を開発、含む式ライブラリ予防接種と評価する発現配列タグの急速な体系的かつグローバルな抗原スクリーニングのための約束を示す、候補者の選定の総合的なアプローチ ワクチン抗原います。将来ティック ワクチンの設計は病原体の伝送と干渉するだけでなく複数のカチカチ種をターゲットする必要があります。
N ターミナル B 細胞エピトープ マッピング アナプラズマまた, 主要表面蛋白質 1 a のペプチドと組換えと全体の生物の抗原で免疫した牛の体液性免疫応答の特性評価を繰り返した。
属の模式種アナプラズマ, の主要表面蛋白質 (MSP) 1a (リケッチア目: Anaplasmataceae） と一緒に MSP1b MSP1 複合体を形成します。MSP1a 接着, 感染症, また, ダニ伝送に関与するだけでなく防御免疫牛における貢献して示されています。差動抗体応答を MSP1a と MSP1b はまた, ウシ赤血球 (アンチ MSP1a 応答) から派生した免疫牛で観察されたまたは培養ティック細胞 (アンチ MSP1b 応答)。この研究では、我々 はさらに MSP1a 抗体応答いくつかのとり込みによる牛の特徴、含む組換え MSP1a (rMSP1a) タンパク質、赤血球 - または目盛り細胞文化派生また,、または目盛りの組み合わせ細胞培養由来また, と rMSP1a。低抗体レベル C 末端の部分に対して検出されたに対し MSP1a 抗体応答をすべてのこれらのとり込み縦列繰り返しペプチドを含む MSP1a の N 末端領域に対して主に指示されました。リニア B 細胞エピトープの MSP1a スポット合成技術によって準備された蛋白質のシーケンス全体を表す合成ペプチドを用いたマップされています。唯一の 2 つのペプチドの N 末端繰り返し血清免疫牛から認められ。これらのペプチッド シーケンス SSAGGQQQESS、ウシ血清中のプールによって認識されたリニア B 細胞エピトープを含む可能性がある共有。平均差 MSP1a に対する抗体価と MSP1b に対するマイナスの低いパーセントの削減 PCV と相関した.赤血球由来細胞培養由来プラス rMSP1a だけで、rMSP1a と免疫牛における MSP1a への優遇抗体応答が観察され、パーセント削減 PCV これらの牛の他の予防接種のグループに比べて有意に低下しました。これらの結果はまた, とまた, 感染に対する牛の保護における MSP1a の役割に対するウシ抗体応答洞察できます。
アナプラズマまた, Msp1alpha 遺伝子の発現はウシ赤血球とダニの細胞で発生します。
主要表面蛋白質 (MSP) 1a と 1b はまたダニ媒介性病原体アナプラズマ, (リケッチア目: Anaplasmataceae) また, ウシ赤血球と目盛りのセルから派生に保存されます。MSP1a と MSP1b 複雑な MSP1 を形成し、（アドヘシン） 宿主細胞の感染に関与するです。MSP1a と MSP1b の両方のウシ赤血球 （アドヘシン） の間、MSP1a だけは付着性細胞培養とネイティブの目盛りのです。ウシ赤血球や培養ティックのセルから派生したまた殺された, と免疫牛における抗体応答に MSP1a と MSP1b が異なるので、これらの研究が始められました。またダニ細胞文化由来, と免疫牛 MSP1b に対し優先的に抗体に対し赤血球由来また, と, 免疫牛における MSP1a への強い抗体応答が観察されました。この差動抗体応答の分子基盤は、西部のしみ、共焦点顕微鏡、逆転写酵素 （RT） を使用して検討した-PCR。また, これらの細胞による MSP1a の発現はウシやダニの宿主細胞から派生したまた, による MSP1b の発現、タンパク質や RNA レベルで類似していたに対しに異なっていた。MSP1a の低レベル培養ティック細胞で観察されたダニ唾液腺、しかしまた, ウシ赤血球から派生した MSP1a の高発現が発生しました。RT-PCR 法による msp1alpha 遺伝子の発現解析では、差動式 MSP1a の転写レベルで調節されているし、a. また, 宿主細胞のための感染性に影響を与える可能性があることを示唆しています。MSP1a の発現の変化は、病原体の表現型および抗原の変化にまた貢献するかもしれない。
アナプラズマおよびエールリヒアの種の直列な繰り返しを含む外膜タンパク質の接着 （リケッチア目: Anaplasmataceae） ティックのセル。
感染ダニ媒介性リケッチアによる細胞のホスト細胞への付着に病原体を許可する外膜タンパク質によって媒介されるが表示されます。アナプラズマまた,、アナプラズマ、属のタイプ種の主要表面蛋白質 (MSP) 1 a は以前、アドヘシン ティック cells を示しました。また, MSP1a 必要であり、感染ダニの細胞のための十分な接着ドメインを含むタンパク質のアミノ末端領域にあるタンデム 28 または 29 アミノ酸繰り返し変数数を持っています。MSP1a 研究接着タンパク質の同定のための構造と機能の特性を組み合わせることの重要性を実証しました。本研究で含むタンデムリピート他外膜タンパク質の家族 Anaplasmataceae の生物からを選択および彼らティック細胞接着特性を検討しました。接着特性およびタンパク質特性 [ゲノム塩基配列から識別される蛋白質の接着機能の予測を提供するために分析を行いました。選択した蛋白質はまた, MSP1a, A. phagocytophilum 100 と 130 kDa、エールリヒア chaffeensis 120 kDa, E. おおいぬ座 140 kDa および E」（アドヘシン） 培養 IDE8 細胞用としては、テスト、すべてクローンとで表された大腸菌をした体ムチン」、含まれています。勉強の蛋白質のまた, MSP1a と大腸菌体「粘液」（アドヘシン） ティック セルのために見つかりました。すべてこれら組換え外膜タンパク質のグリコ, また, MSP1a と共有 E. 体「粘液」（アドヘシン） であったがタンデムで高 Ser/thr コンテンツを持つ共通の特徴が繰り返されます。報告されている結果ここティック細胞の新しい情報 E. 体「粘液」の役割として、アドヘシン提供し、またアドヘシン分子で糖鎖の役割をお勧め。
アナプラズマ グリコシル化また, 主要表面蛋白質 1 a およびその目盛り細胞への接着における役割。
また, アナプラズマ、ウシ アナプラズマの病原赤血球やダニのセルに乗算ダニ媒介性リケッチア病原菌の牛です。主要表面蛋白質 1 a (MSP1a) と MSP1b のまた病原菌の宿主細胞への接着に関与している,、MSP1 複合体を形成します。両蛋白質の観測の分子量が推測される分子量よりも大きかったので、本研究では我々 MSP1a と MSP1b グリコ、だったこと仮説を検証しました。我々 はさらにティック セルに MSP1a の糖鎖のまた, 付着が役割を果たすことを仮定しました。ネイティブと大腸菌大腸菌由来遺伝子組換え MSP1a と MSP1b タンパク質ガスクロマト グラフによるグリコと中性糖が含まれて示されていた。MSP1a 糖鎖修飾は、繰り返されたペプチッドの主に O リンク Ser/thr N 末端残基に登場。化学 deglycosylation MSP1a が、接着性を大幅に削減するため糖鎖修飾ティック セルにまた, の接着における役割を担うかもしれない。MSP1a ポリペプチド バックボーンだけであったがダニの細胞抽出液に付着性、N 末端の繰り返しで糖鎖結合を強化するために登場し、協調して 1 つの対話可能性があります。 またはより多くの表面分子のホスト細胞。これらの結果は、MSP1a MSP1b グリコおよび MSP1a の糖鎖のティックのセルにまた, の密着性の役割を果たすと示唆ことを示した。
遺伝的多様性と分子系統アナプラズマまた, 菌株ミナスジェ ライス州、ブラジルから。
また, アナプラズマ （リケッチア目: Anaplasmataceae)、牛のダニ媒介性病原体は、世界の熱帯および亜熱帯地域の風土病から分離した a. また, 与えられた地理的な領域で発生することが。また, 菌株の MSP1a と msp4 遺伝子および蛋白質シーケンスを使用して、米国からの系統関係が報告されています。これらの研究は、イイズナ情報 msp4 シーケンスがない MSP1a DNA や蛋白質の配列を提供もその MSP1a シーケンスはまた, 集団間非常に不均一であることを示し。しかし、世界の他の地域からまた, 分離株の遺伝的多様性少し情報を利用できます。本研究はまた, が流行しているブラジル ミナスジェ ライス州で感染した牛から得られたまた, 10 菌株間における遺伝的変異を検討を実施しました。また, アルゼンチン、メキシコからの msp4 配列ブラジルと新しい世界の隣人に参加する解析を分離し、米国はラテン アメリカ クレードのブートス トラップのサポートを提供します。また, 4 ブラジル分離株の MSP1a の繰り返しのシーケンスは、ラテン アメリカおよび米国の分離株のシーケンスに比較しました。MSP1a シーケンス ラテン アメリカ菌株のまた, また, の北アメリカの菌株で以前報告されていない 9 繰り返しフォーム、アルファ ・ ファイいた繰り返した。さらに、繰り返しフォーム タウ、シグマと mu だけブラジルの菌株で存在していた。また, 菌株で観測された遺伝の不均質が流行の地域で優勢な目盛りベクトルの独立が一般的であり、MSP1a また, 菌株のイイズナ キャラクタリゼーションのための有用なマーカーでないことがわかった間イイズナ提供を msp4 でまた, に関する情報、分離前の研究と一致していることを示唆しています。
カスティーリャ ・ ラ ・ マンチャ, スペインの放し飼いイベリアのレッド ディア地域でアナプラズマ感染。
生物アナプラズマ属における脊椎動物と無脊椎動物の両方のホストで乗算 ％30 の細胞内病原体であります。型の種は、アナプラズマ, ウシ アナプラズマを引き起こすと赤血球の脊椎動物のホストに感染して生物のベクトルとしてサーブのタイマー刻みで複雑な発達のサイクルを経る。感染した牛、野生反芻動物ダニはすべてまた, の貯水池として提供できます。本研究では、ハンターが死亡イベリア地域から南西スペインのカスティーリャ ・ ラ ・ マンチャのレッド ディア (Cervus に対して hispanicus) アナプラズマ感染症のためにテストされました。我々 検討鹿の 10 ％ がアナプラズマ用抗体陽性であったことが見つかりました。また, 菌株が続いて得られたこれらの鹿から削除された salivary glands Hyalomma れるのと主要表面蛋白質のシーケンスから (msp) 4 遺伝子だった各ひずみの決定し、系統学的研究のために使用します。H. れるダニ新世界の牛と bison の菌株との比較から msp4 シーケンスの最大節約解析は以前、これらスペイン a. また, 緊張のための推奨の異なる起源を報告しました。本研究の結果は、イベリア レッド ディア アナプラズマと自然感染し、したがって、病原体の野生動物の貯水池として役立つかもしれないことを示した。鹿感染とのタイマー刻みで識別されるまた, 菌株間のリンクが確立されていないが、H. れるとクリイロコイタマダニ ブルサ a. また, この地域の潜在的な生物学的ベクトルとして識別された、また, 鹿と牛の集団間の伝送に影響を与える可能性があります。
同時感染症媒介病原菌の牛の群れスイスで致命的な溶血性貧血に関連付けられています。
ウシ アナプラズマ北ヨーロッパではこれまでのところないが、世界の他の部分の実質的な経済的損失の結果は媒介の病気です。2002 年 8 月が致命的な病気の発生は大きな乳牛 grisons でスイスのカントンで報告されました。動物の病気は、発熱、食欲不振、agalactia、およびうつ病を経験しました。貧血、外部寄生虫の寄生と, 時折, 血色素尿症が認められました。媒介病原体の役割を決定し、病気を特徴付けるためには、血液サンプルはすべて 286 動物から収集された: 牛の 50% で貧血だった。赤い血液細胞を微視的に検討すると, 牛の 47 ％ でアナプラズマ, 封入体が見つかりました。感染症は血清学的および分子法によって確認されました。興味深いことに、我々 はまたアナプラズマ phagocytophilum、大 Babesia とタイレリア属とマイコ プラズマ wenyonii 感染の証拠を見つけた。最後の 2 つの種は、以前スイスで記述されていたないです。貧血は検出, A. phagocytophilum を除いて、感染性病原体の存在と有意に関連していた。著しく、同時感染症媒介感染性病原体最大 5 つの PCR によって試さ病気の動物の 90 ％ が検出されました。我々 は、他のエージェントと西欧病気悪化中そのまた, 溶血性貧血の主要原因だった結論。これは、同時感染症媒介病原体アルペン スイスと関連付けられている最初の重症疾患アウトブレイクだった;それはおそらくの全体の群れをカリングによって短縮されました。北ヨーロッパでは、将来予想されるに同様の病気の発生を持つかどうかは未知数です。
アクチン フィラメントと赤血球の感染中に頻出する小説アナプラズマまた, 肢関連付けられている蛋白質の同定
リケッチア病原体またアナプラズマ, アクチン フィラメント束を細胞内感染中にアセンブルします。アクチン フィラメントの尾を生成する他の細菌性病原体とは異なりまた, 成熟赤血球に感染し、F アクチンの付属肢はいくつかの生物を含む液胞の細胞質表面に組み立てられます。これらの繊維を関連付けられているまた, 分子を識別するには、2 つの相補的なアプローチが使用された: マトリックス支援レーザー脱離イオン化飛行時間質量分析法と、特定の付属物モノクローナル抗体と式のスクリーニングまた, バクテリオファージライブラリで識別されるまた, タンパク質のタンデム質量分析法。アミノ酸およびヌクレオチド シーケンス フルレングス遺伝子また, 聖マリーひずみのゲノムにマップされました。正しい識別はフルレングスの組換えタンパク質の発現とその付属物特異抗体との反応性によって確認されました。興味深いことに、そこは F アクチンの付属肢を組み立てるための多様なまた, 菌株の能力の変化がマークされます。4 系統、フロリダ州、イリノイ州、セント マリーとバージニア系統の比較付属物関連タンパク質のアミノ酸シーケンス id の系統間の 34% の低を持つ遺伝子の実質的なポリモーフィズムを明らかにしました。アクチンの付属肢を組み立てるために能力の損失に関連する特定の多型がないので、しかし、この変化に表現の違い根底ないです。対照的に、アクチン フィラメント束を組み立てる能力付属物関連タンパク質の発現レベルでの劇的なひずみ固有の違いを反映しました。このタンパク質の侵略、レプリケーション、および宿主細胞避難安全のサイクルにどのように影響を理解するホスト病原体の相互作用に新たな洞察を提供する可能性があります。
北アメリカのバイソンから分離されたまたアナプラズマ, のキャラクタリゼーションに関する最近の研究。
また, アナプラズマ （リケッチア目: Anaplasmataceae)、牛のダニ媒介性病原体は、世界の熱帯・亜熱帯地域に固有。また, ナショナルジオ グラフィックから分離した世界は、シーケンスと分子量タンデム 28 29 アミノ酸の異なる番号により異なります主要表面蛋白質 (MSP) 1 a によって識別されている繰り返されます発生します。血清テスト アメリカバイソン バイソンバイソンとしてまた, と、感染している、識別したがバイソン、バイソン菌株を特徴付けると他また, 菌株北米からバイソン分離株の系統関係を比較するまた, 感染を確認するために現在の研究が実施されました。カナダから派生した 9 また, 菌株バイソン保有同一 msp4 シーケンスを 1 つの特徴的なサイレント ヌクレオチドの変化。MSP1a のシーケンスが 1 つカナダと米国バイソン菌株, また, のために決定された、これら菌株直列な繰り返し、4 と 5 はそれぞれに含まれています。1 つ米国バイソンを隔離感染牛の感染性であることが証明し、カクマダニ属のアベマキ ダニによって送信されるテスト。本研究の結果は、バイソンから得られたこれらまた, 菌株に似たもの自然感染牛由来である示した。
カクマダニ属 (生態学) における遺伝的多様性のキャラクタリゼーション (ダニ目: 条件) の体サイズと重量のポリモーフィズムと。
形態および離散の遺伝的差異は地理的に孤立し、局所的、ダニ個体群の間に発見されます。ただしは我々 個体群の同所性のダニの違いを発見しました。注目すべき違いは、体の大きさと重量の単一の場所米国モンタナ州から収集カクマダニ属 (生態学) で発見されました。これらのダニは大きな （B） と小 （S） の個人から成るグループに分かれました。本研究の目的はあった: (a) (b) の体サイズと重量、(c) と生物学的、生理学的、形態学的差異を相互に関連付けられた文字の伝達率を評価する、B と S D の (生態学) 個人と行動特性の遺伝的多様性を特徴付けるします。16S rDNA と ITS2 遺伝子座 B と S のタイマー刻みで広範な遺伝的変異を発見し、B と S の個人間の遺伝的分化を示した。さらにいくつかのサポートを提供するダニの体サイズと重量に関連付けられた文字のメンデル常染色体優性の支配的な伝送のため。本明細書で報告された結果は B ダニおよび S のタイマー刻みの部分的な生殖隔離を提案することがより良い繁殖成功 S ダニよりも. します。
肉用牛の永続アナプラズマまた, 感染症の治療のための 3 つのオキシテトラサイクリン レジームの比較。
ダニ媒介性リケッチアによりは、アナプラズマまた,、引き起こさアナプラズマ牛アメリカ合衆国と世界中の経済的に重要な疾患です。急性の感染から回復する牛低または顕微鏡検出できない A また, rickettsemia が続くのキャリアになります。テトラサイクリン抗生物質は現在米国で急性アナプラズマの治療に使用唯一の薬剤です。薬を具体的に持続感染を除去するためのライセンスは、現在ではありません。この調査はまた, 持続感染した牛からオフに 3 つのオキシテトラサイクリンの治療法の有効性をテストしました。シンメン去勢牛、6-12 ヶ月熟成 x 40 アンガスとまた, 実験感染しました。去勢急性感染からの回復、seroconverted、および DNA の交配によって続いて nested PCR を使用して感染が確認された後は、各動物のキャリア状態別、貧血のホルスタイン子牛に血の sub-inoculation によって確かめた。去勢されたによって体重をブロックし、ランダムに次のように 4 つの試験治療グループに割り当てられている： 処置 A、300 mg/ml 30 mg/kg, 0; 日筋肉内 （イオ ミン） 注射によって投与オキシテトラサイクリン (Tetradure ラ 300 メリアル カナダ株式会社） の溶液B は、同じ 300 mg/ml ソリューションのオキシテトラサイクリン イオ ミン 0 日と 5 日目に再び 30 mg/kg 投与の治療;治療 C、22 mg/kg を静脈内投与の 200 mg/ml 解決のオキシテトラサイクリン （Liquamycin ラ 200、ファイザー社のアニマルヘルス） の （静注）、q の 5 日間の 24 h (エクスポートする前に治療のための現在の国際獣疫事務局 (OIE) の勧告に対応する治療線量)。4 番目のグループ感染対照牛から成っていた。すべて去勢牛はまだ入れ子の PCR と cELISA 治療後 60 日正.感染貧血ホルスタイン子牛に血の subinoculation によって確認されました。治療レジメンがキャリア牛でまた, 感染症をクリアするには失敗したテストが示唆されました。
アナプラズマ Phagocytophilum 菌株の Msp4 遺伝子シーケンス解析。
ひと顆粒球エールリヒアの使役エージェントは最近人間、馬、犬、および反芻動物の病気を引き起こす前述の細菌を統一アナプラズマ phagocytophilum として分類し直されました。遺伝的異質性のこの種のキャラクタリゼーション、アナプラズマまた, 主要表面蛋白質 4 遺伝子 (msp4) ホモログが確認されたが、コーディング領域 PCR 増幅し、50 のサンプルからアメリカ合衆国、ドイツ、ポーランド、ノルウェー、イタリア、スイス、オジロジカ米国から得られる A. phagocytophilum のような生物の 4 サンプルなど、ソースのさまざまなから塩基配列を決定しました。A. phagocytophilum (90 ～ 100 %id ヌクレオチド レベル) と 92 ～ 100% 類似蛋白質レベルでの系統間の変動がシーケンスでまた, より高いだった。Msp4 シーケンスの系統解析イイズナ情報を提供しなかったが、反芻動物から人間、犬、馬から得られた結果から得られる A. phagocytophilum の系統を区別するためでした。最近発見された a. phagocytophilum msp2 遺伝子のシーケンス解析は、これらの結果から確証。ここで報告されている結果は、A. phagocytophilum のような生物オジロジカから密接に A. phagocytophilum に関連しているかもしれないが、彼らはより多様なことができる提案します。A. phagocytophilum 菌株反芻動物から貯水池、病原性は、人間に感染する系統から異なる場合がありますを含むいくつかの共通の特性を共有できることが示唆されました。
遺伝子発現はヒト前細胞アナプラズマ Phagocytophilum と感染に応答してのプロファイリング。
アナプラズマ phagocytophilum （リケッチア目: Anaplasmataceae) ヒト, ウマおよびイヌの顆粒球アナプラズマ症と反芻動物のダニ媒介性発熱を引き起こします。リケッチアは顆粒球と骨髄前駆細胞ウシバエ ・ ヒト前およびティック セルラインで伝達できます。本研究では, マイクロ アレイ 21,329 のひと遺伝子の合成ポリヌクレオチドの hl-60 ヒト前細胞 A. phagocytophilum と感染に応答してに特異的に表現される遺伝子を識別するために使用されました。半定量的逆転写ポリメラーゼの連鎖反応 (RT-PCR) 選択した遺伝子のマイクロ アレイの分析の結果を確認しました。A. phagocytophilum 感染細胞における六つの遺伝子発現亢進大きい 30 倍、中に最も頻繁の downregulated 遺伝子の発現よりも 6 倍変更していないことを発見されました。特異的に規制する発見された遺伝子細胞を感染感染と A. phagocytophilum 宿主細胞での増殖のための最も可能性の高い必要の成長、分化、細胞メカニズム携帯用交通信号し通信と感染に対する防御反応いくつか、それらが不可欠だった。ここに記載された特異的規制遺伝子 A. phagocytophilum 感染 HL ‐ 60 細胞での発現プロファイルのため、グローバルの方法で応答哺乳類セルの既存の情報 A. phagocytophilum の感染を拡大遺伝子に関する新しい情報します。
アナプラズマ 1998 年と 2003年におけるスイスの牛の血清： 新興疾患の証拠はないです。
アナプラズマまた, 感染ヨーロッパでは、地中海と東部の国、オーストリアとスイスで非常に散発的ケースに制限されています。スイス連邦共和国の北の国でその発生の報告はないです。2002 年 8 月アナプラズマ カントン グラウビュンデン, スイス、北アルプスを殺処分にいた、予想外だったし、増加の存在を仮定する理由を与えた以上 300 牛に牛の農場での深刻な発生はまだまた, スイスの有病率を検出されません。ランダムに選択されたウシ血清サンプル 1998 年と 2003年に収集した競合阻害 elisa 法 (cELISA) を使用して仮説をテストするテストされました。当社検証診断の感度と特異性アウトブレイク群れ行われてこのテストの 99.2 と 83.3 ％、それぞれ、おそらく真の特異性を過小評価をもたらした。アナプラズマ cELISA によって決定されるスイスの牛での真の血清は 1998 年にはそれぞれ、カントン グラウビュンデン 2.49% 1.17% スイスの残りの部分との 95% 信頼上限をゼロにする可能性があった。2003 では、これらの見積もりはさらに低いいた。1998 年と 2003年の間明らか消長で有意差はなかった。可能な貯水池の検索では、3 つの chamoises フリー野生反芻、スイス国立公園、グラウビュンデン州からに至るまでの 46 から、cELISA での陽性。この反応はまた, またはクロス反応エージェント アナプラズマ ovis などに従ってです。我々 の結果からアナプラズマにおけるスイス牛の高められた流行の仮説を拒否する必要があることを締結します。
ダニの保護抗原の同定における RNA 干渉スクリーニング。
ダニは、野生の外部寄生虫相と国内の動物と人間はや北アメリカの病原体の最も重要な節足動物ベクトルと見なされます。ダニの蛋白質に対して指示したワクチンの開発は、カチカチのインフェ ステーションの削減とダニ媒介性病原体の透過効果があります。ティック ワクチンの開発の制限のステップは、カチカチの保護抗原の同定されています。ティック ワクチン候補者のプールの急速なスクリーニングを許可しながら、動物実験の削減を目指した逆ワクチン学アプローチは大きくティック ワクチンの開発に向けた進捗を促進します。本明細書でマダニ scapularis Cdna RNA 干渉 （RNAi） を使用して目盛りの保護抗原の同定のためのスクリーニングについて説明します。RNAi スクリーニングの結果類似それら以前式ライブラリの予防接種を使用して得られた RNAi ワクチン抗原検出タイマー刻みと他の nonmodel の生物のためのより迅速かつコスト効果の高いツールとして役立つことができることを実証していた。
BptA（bbe16）は、そのナチュラルダニVectorには、ライム病スピロヘータ、ボレリアburgdorferiはの永続性のために不可欠である
ボレリアburgdorferiは（BB）、ライム病のエージェントは、自然の中でその永続性のための節足動物（マダニティック）と哺乳類（げっ歯類）ホストに依存する人獣共通感染症スピロヘータ細菌である。これら二つの多様なホスト上のBBの寄生依存する責任ボレリアの遺伝子を識別するためのクエストは、遺伝的にBbの強毒株を操作する能力に制限によって妨げられてきた。この制約にもかかわらず、我々はここに不活化とその自然のライフサイクル中に病原性、病因、およびBbの生存におけるその役割を評価するための線状プラスミド-25でエンコードされた遺伝子（bbe16）の遺伝的相補性を報告します。 bbe16はライムライムのマウスモデルにおいてBbの病原性を増強することが判明し、マダニscapularisティックでBbの永続性のために不可欠だった。このように、我々はbbe16のダニ（BPT）Aのボレリアの永続性をコードする遺伝子の名前を変更したプロテアーゼのアクセシビリティの実験は推定リポタンパク質としてBptAはBbの外膜上の表面に露出していることが示唆されていますが、BptAは、その目盛りのベクトル内のBbの永続性を促進することによって分子機構（s）は、まだ解明されていない。 BptAもBptAが広く自然の中で永続性のためにライムライムのスピロヘータによって使用される可能性が示唆され、テストされた全てのBB広義株で（推定されるアミノ酸レベルで> 88％の類似性と> 74％の同一性）高度に保存されたことが示された。 BBの上に絶対的な依存性とその節足動物と哺乳類のホストとの密接な関係を考えると、BptAはBBの全体的な寄生戦略の病原性因子が重要な考慮すべきである。
ティックの蔓延に対する保護 3 つのマダニの Scapularis Cdna のキャラクタリゼーション
カチカチのインフェ ステーションのマウス モデルで表現されたシーケンスされたタグ （EST） の分析および cDNA 発現ライブラリ免疫 (ELI) 影響 I. scapularis cDNA クローンの識別に使用されました。3 つの保護抗原に対する幼虫ダニのインフェ ステーション、4F8、ヌクレオチダーゼ未知関数の 4E6 と 4 8 へ相同をさらに特性評価のために選ばれました。すべての 3 つの抗原すべて I. scapularis 段階で表現し、アダルト チック組織にローカライズします。4 D 8 他の六つのカチカチ種で節約されることが示されました。合成ポリペプチド幼虫と若虫に対する接種試験と大人、これらの抗原の人工摂食実験に基づいて特に 4 8 カチカチのインフェ ステーションの制御のためのワクチンの開発継続の良い候補になるに表示され、タイマー刻みの複数の種を対象とする定式化に役立つことがあります。
血清学的および分子生物学的アナプラズマ種感染農場の動物とシチリア島からダニの。
アナプラズマまた, イタリアで流行して知られていたが、この領域からアナプラズマ属の多様性を持っていないされて特徴します。本研究では、シチリア島で収集されたランダムに選択された農場の動物でアナプラズマ属抗体の有病率 MSP5 cELISA アナプラズマ属とは螢光抗体テスト アナプラズマ phagocytophilum 特定の使用によって決定されました。動物やダニ アナプラズマ属の系統間の遺伝的変異はまた, msp1alpha とアナプラズマ属 msp4 遺伝子を用いた特徴だった。8 種のダニ収集し、PCR によって試さだった。アナプラズマ属菌と A. phagocytophilum のための陽性は、ウシおよびヒツジのサンプルで検出されました。すべてのロバが抗体陽性であった A. phagocytophilum のではなく、アナプラズマ属また, 遺伝子型の 4 つはウシと目盛りのサンプルから msp4 シーケンスによって識別されました。2 つの新しい遺伝子型アナプラズマ ovis の羊で特徴づけられました。A. phagocytophilum MRK 馬のシーケンスに同一であることを証明した 3 つのロバからのシーケンスは、カリフォルニアから分離します。また, 遺伝子型の六つ牛とまた, msp1alpha シーケンスを使用して 1 つの目盛りで見つかりました。すべての遺伝子型 4 つの繰り返しシーケンス 5 リピートしていた 1 つを除いて、MSP1a の N 末端部分があった。イタリア菌株はまた, 以前に報告されていない 3 つの繰り返しシーケンスに含まれています。シチリアでアナプラズマ属の多様性の定義を報告、ここに記載また,、A. ovis A. phagocytophilum シチリアのコントロール戦略の発展に基礎です。
組換えダニ抗原マダニ Scapularis アダルト インフェ ステーションの制御のための予防接種。
マダニ scapularis のインフェ ステーションに対して保護抗原 cDNA 発現ライブラリ予防接種 (ELI) と表現されたシーケンスされたタグ （EST） の分析によって同定されました。3 Cdna 幼虫ダニのインフェ ステーション、4F8、相同性はヌクレオチダーゼと 4 8 と未知関数の 4E6 を有するに対する防護特徴し、免疫研究の組換え蛋白質として得られました。予防接種試験の組換え蛋白質とこれらの抗原に対して I. scapularis 幼虫マウス モデルの効果を示した。ここで、我々 I. scapularis アダルト インフェ ステーション免疫羊の組換え抗原の影響を評価しました。予防接種組換え 4 8、4F8、4E6、すべての 3 つの抗原の組み合わせで大人のダニのインフェ ステーションが 16 ％、20 と 12 58 制御グループと比較が、4 8、4F8 だけは統計的に有意減少。産卵組換えダニ抗原で免疫したすべてのグループで 22 49 ％ 減少した （P < 0.05)。インフェ ステーションと産卵に及ぼすダニを考慮したワクチン製剤の全体的な有効性 33 71 ％ の平均。これらの抗原と特に 4 8、カチカチのインフェ ステーションの制御のためのワクチンの開発継続の良い候補になるに見えます。
アナプラズマ種主要表面蛋白質と含意アナプラズマの血清診断とワクチンの開発のための遺伝的多様性。
アナプラズマ属 (リケッチア目: Anaplasmataceae) 動物と人間の医療の重要性のいくつかの病原体が含まれています。ダニによって感染症, 永続的な感染症の開発と病原体の透過を調節するそれら MSPs 含むアナプラズマ主要表面蛋白質 (MSPs) の多様性の理解は、一部では、キャラクタリゼーションおよび地理的系統の系統解析によって派生します。アナプラズマ属 MSPs の遺伝的多様性に関する情報可能性豚コレラ アッセイおよびアナプラズマの制御のためのワクチン戦略の開発に影響します。
キャピラリー チューブのティック ・病原菌相互作用カクマダニ属のアベマキの勉強のためのシステムを摂食 (ダニ目: 条件) とアナプラズマまた, （リケッチア目: Anaplasmataceae)。
給餌 （CTF） システムは、キャピラリー チューブはカクマダニ属のアベマキ （と言う） と、リケッチア牛また病原体アナプラズマ, タイラーの相互作用を研究するために脚色されました。また, サシバエで始まり、唾液腺からの送信が終了タイマー刻みで複雑な発達サイクルを経る。この CTF システム男性 D. アベマキ a. また, 感染血液が供給されたまたは目盛り細胞培養します。キャピラリー チューブから同じ血を飼育したダニ中腸感染症のみ開発に対し高 rickettsemic 子牛を飼育ダニは PCR による検出中腸と唾液腺感染開発。キャピラリー チューブの予期しない結果は、主要表面蛋白質 la, また, 付着性に対する抗体の中腸の感染症を強化し、またサシバエに感染する細胞培養由来, 原因だった。別の予想外の結果、感染病ダニ キララマダニ （l.） のサシバエのキャピラリー チューブを感染した牛の血を食べて後だった。ダニ感染または感染していない細胞キャピラリー チューブから供給されたときに, また, 腸細胞応答タイマー刻みの SDS ポリアクリルアミドのゲルの電気泳動蛋白質プロファイルから決定される差はなかった。選択したタンパク質バンド、トリプシンの消化力-質量分析法によって識別される蛋白質牛アルブミン、未消化のアルファおよびベータ鎖ヘモグロビン、ヘモグロビン フラグメントなど、牛の起源のほとんど含まれています。また, CTF システムによってダニの感染症感染症と同じで牛を供給することによりでしたが、結果を容易にダニを自然餌で認識されない病原体ベクトルの相互作用の側面を識別するため潜在的な使用このシステムを認めた。
潜在的な脊椎動物の貯水池のホストと無脊椎動物のベクトル アナプラズマまた, A. Phagocytophilum 中央のスペインでの。
生物アナプラズマ属における脊椎動物と無脊椎動物の両方のホストで乗算 ％30 の細胞内病原体であります。種の多く, また, ウシ アナプラズマを原因し、のみカチカチおよび反芻動物に感染します。A. phagocytophilum の人間と動物の顆粒球アナプラズマ症原因し、ダニ、反芻動物、齧歯類、調教、イヌ科、鳥と人間を含む広い宿主範囲、遺伝子組み換え、密接に関連した菌株を表示します。最近の報告はまた, と A. phagocytophilum は地理的領域に共存し、同時感染が、反芻動物およびダニで実証。本研究は, また, と野生 A. phagocytophilum 感染および国内の動物を特徴と、血清学、PCR および 16S のシーケンスによって中央スペインでダニ収集 rRNA 遺伝子型。種は、含まれてヒト、ウシ、犬、げっ歯類、イベリア レッド ディア、ヨーロッパの野生のイノシシ、鳥、およびダニをテストしました。A. phagocytophilum ダニ、鹿、牛や鳥で検出された間種の双翅目アナプラズマまた属, の潜在的な機械的ベクトルとして分析された吸血アブ、ダニ、牛、鹿、検出されました。2 つのアナプラズマの同時感染牛や鹿が見つかりました。これらの結果はまた, A. phagocytophilum 両方の病原体が共存し、共有共通貯水池ホストとベクトルの地域での疫学の複雑さを示しています。野生動物、国内の動物や人間の集団間の増加の接触のひとよぶウシ アナプラズマ発生の危険性と監視と対策の実装の難易度が増加します。
遺伝子特異的に口腔咽頭扁桃と下顎リンパ節結核性の表現し、非結核性のヨーロッパの野生のイノシシが自然にマイコバクテリウムの Bovis 公開されます。
マイコバクテリウムの bovis （結核結核複合） によって引き起こされる、牛結核、牛世界中に影響を与える人畜伝染病疾患です。他の動物種、家畜と野生, 細菌に感染してホストのこの範囲を制御したり、病気を根絶する試みを複雑にします。宿主病原体相互作用と宿主細胞反応 M. に関与するメカニズムの評価の進歩にもかかわらず結核ヒト、ウシ、マウスで複雑な細胞、結核性天然の生検 （組織における発現遺伝子と非被曝者が不十分に特徴づけられています。本研究では、された差動遺伝子発現分析抑制差し引きハイブリダイゼーション口腔咽頭扁桃および下顎リンパ節結核性と非結核性の欧州野生イノシシ フィールド収集のスペインの結核流行地から使用しています。リアルタイム PCR および選択した遺伝子の定量的逆転写 PCR 抑制差し引きハイブリダイゼーション解析の結果を確認します。選択した発現遺伝子の蛋白質発現放射状ゲル内沈降反応や免疫組織化学によって分析されました。差動遺伝子発現は結核性と非結核性グループ間および扁桃とリンパ節間を様々 な。シグナル伝達、免疫反応、炎症、ストレス、アポトーシス/antiapoptosis、細胞構造、接着とトランスポート、タンパク質と DNA の RNA の代謝と酵素プロセスを含む、単一および複数の細胞メカニズムが影響を受けた。これらの結果は扁桃腺および下顎リンパ節自然 M. bovis にさらされるヨーロッパのイノシシの抗酸菌感染による遺伝子発現の変調を実証し、宿主病原体相互作用と防御免疫のメカニズムを定義するための基礎を提供します。
カチカチの保護抗原 4 8 ・ Rs86 式クリイロコイタマダニの RNA 干渉によってサイレンシングの相乗効果。
ティック蛋白質カチカチのインフェ ステーションを減らすワクチンの開発に有用であることが示されています。潜在的な目盛りの保護抗原識別され、一部では、RNA 干渉 （RNAi） の使用によって特徴付けられます。RNAi 遺伝子の機能解析を遺伝子発現ティック生理学上の損失の影響を特徴付けることができます。ここで我々 RNAi クリイロコイタマダニの 2 つの目盛り保護抗原、4 8 ・ Rs86、Bm86、カチカチのインフェ ステーション、摂食と産卵に相同遺伝子の機能を評価するために使用。単独での 4 8 のサイレンシング減少ティック添付ファイル, 生存, 吸血と産卵結果。Rs86 RNAi の影響が少ないと発音されたが、この遺伝子のサイレンシングもティック重量と産卵減少。最も特に、同時 4 8 と RNAi による Rs86 のサイレンシングの目盛りの刻みは、生存、添付ファイル、給餌、体重、産卵深く減少した相乗効果に起因しました。ティック組織の微視的評価ガッツ デュアル注入されたマダニから基底膜に沿って散在して上皮細胞を膨張いたことを明らかにしました。これらの結果から 2 つの目盛り保護遺伝子のサイレンシング式相乗効果を発揮しました。複数のティックの保護抗原の包含は、したがって、目盛りワクチンの効力感を高める可能性があります。
ティック防御抗原、4 8 ティック血摂取と生殖の変調に関与する保存されたタンパク質です。
ティック防御抗原、4 8 エンコード遺伝子 6、属 10 種からクローンされ、塩基およびアミノ酸配列分析を行いました。4 D 8 ヌクレオチドおよび蛋白質シーケンス間これらのカチカチ種との類似性のアイデンティティ/65-98 と 60 98 ％ の間でそれぞれ保存しました。4 8 の機能は 5 つのカチカチ種の RNA 干渉 （RNAi） によって特徴づけられました。ダニは、フィードを許された後、腸、唾液腺および生殖組織の変性が観察されたとマダニの生存、体重および産卵が有意に減少しました。4 D 8 RNAi 影響目すべてのカチカチ種の産卵の 90 ％ 削減をテストします。重要な役割のため 4 D 8 チック中に餌を果たしているし、最終的にティック progeny の削減の結果、産卵提案するジェネリック名"subolesin"（ラテン、suboles: 子孫、子孫） ティック 4 8 蛋白質および subolesin 遺伝子のスバ。
Autocidal コントロールは単一の遺伝子のサイレンシングによる RNA 干渉によってダニの。
ダニ人間と動物の健康世界中に影響を与える、選択薬剤耐性ダニや環境汚染を含む殺アプリケーションによってダニ制御の欠点を回避する新しい制御メソッドが必要です。RNA 干渉を用いた subolesin、単一の遺伝子の発現を黙らせたとダニ繁殖パフォーマンスの低下と生産、成功した交尾と実行可能な子孫の生産を防止しました。滅菌ダニ手法を提案する （ダニの個体群の削減のため subolesin を黙らせたダニのリリースによって土）。Subolesin ダニ種の保全は、SAT 制御医学的にも経済的にも重要な目盛りの多くの種のために有用であると示唆しています。
選択した遺伝子発現亢進非結核性のヨーロッパのイノシシのキャラクタリゼーション マイコバクテリウムの Bovis 感染に対する抵抗性の可能な相関として。
マイコバクテリウムの bovis （結核結核複合） によって引き起こされる牛結核 (bTB) 牛と野生生物世界中に影響を与える人畜伝染病疾患です。これらの動物のホストは、このようにヒトへの暴露、感染のリスクを増加させる感染の貯水池としてを提供できます。本研究では RNA マクロアレイ蛍光交配とリアルタイム RT-PCR を口腔咽頭扁桃と下顎リンパ節 3、7 個々 非結核および結核性自然 M. bovis にそれぞれ公開されるイノシシの特異的発現遺伝子の mRNA のレベル定量化しました。これらの結果からアップレギュレーション (C3) の 2 つの遺伝子の補体成分 3 とメチルマロニル-CoA ムターゼ (MUT) で非結核性イノシシを示した。これら遺伝子のイノシシ bTB に抵抗するに感染、マクロファージ内で永続化する結核菌の能力を制限免疫を変更することにより貢献するかもしれない。C3 MUT 遺伝子したがって、動物のモデル システムにおけるゲノム機能解析を用いた bTB 抵抗のマーカーとして勉強する良い候補になる可能性が高いです。遺伝子発現亢進 bTB に耐性の野生動物の同定防御免疫とマイコ バクテリアの生物への抵抗のメカニズムを理解するために貢献します。
ダニ感染アナプラズマまた, と目盛り防御抗原 Subolesin をターゲットによって A. Phagocytophilum の削減。
Subolesin は最近遺伝子サイレンシングと組換え蛋白質の予防接種によってティックの蔓延に対する保護するために、生存と腸と唾液腺組織の変性削減ティックを起こすと示されました。本研究では、私たちこれらの研究によってテスト subolesin RNAi によるターゲット設定かどうかまたは拡張予防接種 2 つのダニ媒介性病原体に感染する、能力のタイマー刻みをウシ アナプラズマ、アナプラズマ phagocytophilum、アナプラズマ人間 granulocytin の病原を引き起こすまたアナプラズマ, 妨害します。また, 研究カクマダニ属のアベマキ男性 subolesin dsRNA または生理食塩水を注入したし、して rickettsemias、昇順で牛を養うために許された A. phagocytophilum 研究中マウス組換え subolesin タンパク質の免疫と病原体の感染、幼虫イクソデススカプラリス付きが出没します。ダニ感染症は、腸と唾液腺組織の量的なポリメラーゼ連鎖反応によって決定しました。両方の実験的アプローチでダニ感染症は有意に減少しました。コントロールの複数のカチカチ種とダニ媒介性病原体の削減に貢献するかもしれない候補ワクチン抗原をその subolesin が表示されますが示唆されました。
アナプラズマ Ovis 系統オオツノヒツジ モンタナからの遺伝的解析。
野生動物貯水池種とアナプラズマ ovis の遺伝的多様性 (リケッチア目: Anaplasmataceae) 不完全特徴付けされています。モンタナ州 2004 年 12 月から 2005 年 1 月に捕獲ビッグホーン羊 (ヒツジ属カナデンシス） アナプラズマ属菌に対する抗体をテストしました。A. ovis の存在の主要表面蛋白質 msp4 シーケンスのキャラクタリゼーションによって決定されました。アナプラズマ抗体 25/サンプリング 180 で (14%) は、ビッグホーン羊と A. ovis msp4 シーケンス ポリメラーゼの連鎖反応 (PCR) を増幅され、9/23 (39%) が抗体陽性動物のシーケンスが検出されました。すべての動物は関連する病原体、アナプラズマ phagocytophilum、アナプラズマまた, の PCR による陰性であった。オオツノヒツジで識別されるすべての msp4 シーケンスは同一と対応アイダホから既報ヒツジ分離株と同一された単一 A. ovis 遺伝子型にあった。A. ovis この野生の群れのオオツノヒツジでの単一遺伝子型の発見は、米国西部で、世界中の牛の群でまた, 報告された遺伝的多様性とは対照的だった。オオツノヒツジ A. ovis モンタナ州の野生生物貯水池可能性があることが示唆されました。
アナプラズマ プラティス系統犬シチリア島、イタリアからの分子解析
アナプラズマ プラティスの遺伝的多様性 (リケッチア目: Anaplasmataceae) の菌株が現在不完全に定義されています。本研究は、A. patys 系統のパレルモ、シチリア島、イタリア、PCR 16S rDNA の塩基の組み合わせを使用してから犬を特徴付ける、熱ショック オペロン groESL とクエン酸合成酵素 (gltA) 遺伝子に設計されました。
ダニのコントロール: さらに研究の議題の考え。
目盛りの制御は、世紀以上も強烈な関心を刺激している件名です。この記事ピーター Willadsen の最近の記事で提案したダニ制御に対する研究ニーズの解説であり、どちらか悪い表されるまたは省略されたティック制御戦略に注意は後者から呼び出します。特別な考慮は、野生動物寄生病気ベクトル ダニを制御するには、[デバイスのホストをターゲット、フェロモン含浸おとりを誘致すると自然環境とホストは、タイマー刻みを殺してより最新の進歩ワクチン開発する与えられます。
ひとよぶウシ アナプラズマ南ヨーロッパの分子疫学。
アナプラズマ属 (リケッチア目: Anaplasmataceae) 動物と人間の健康に影響があるまた, A. phagocytophilum などいくつかの病原体が含まれています。本研究ではまた, と野生の人間 A. phagocytophilum 感染および国内の動物を特徴と、ダニ血清抗体による南ヨーロッパ （特に南中央スペインおよびシチリア島）、PCR、勉強や主要表面蛋白質 (msp)-1 α と 4 と 16S rDNA の解析をシーケンスします。また, 感染症のこの地域で牛、鹿ダニとアブ、病原体の生物と機械のベクトルとしてそれぞれタイムで維持されていることが示唆されました。A. phagocytophilum の感染症ヒトでも発生する可能性がありますと牛、ロバ、鹿や鳥に維持され、最も可能性が高いといくつかのダニ種としてまだ他野生や家畜の哺乳類のための貯留層ホストとして不明な役割によって伝えられます。牛や鹿の同時感染の存在では、これらの病原体は同じ貯水池ホストで掛けることができるし、ウシ及びひとアナプラズマこの地域での疫学の複雑さを示していますを示唆しています。
アナプラズマ: ワクチン開発のための宿主-ベクター-病原体相互作用に焦点を当ててください。
アナプラズマまた, と A. phagocytophylum それぞれ牛アナプラズマとひと顆粒球アナプラズマ症を引き起こす細胞内のリケッチアにあります。アナプラズマの制御の究極のワクチンは、感染と伝染病原体のダニによって削減 1 つでしょう。アナプラズマの制御のための効果的なワクチンは弱毒系統, 感染した赤血球やダニの細胞由来精製抗原、および組換え病原菌およびマダニ由来のタンパク質などのさまざまなアプローチを使用して試みにもかかわらず利用できません。3 行の機能解析コントロール ティックの蔓延と感染と伝染アナプラズマ属に潜在的なワクチン候補抗原を検出するホスト ティック アナプラズマ相互作用を特徴付ける私たちの研究室で実施した: (1) また, （アドヘシン） 感染症や病原体, A. phagocytophilum と感染に応答して hl-60 ヒト前細胞で特異的発現遺伝子の （2） グローバル発現解析の伝達に関与のキャラクタリゼーション、および (3) の同定と機能解析ティック保護抗原発現ライブラリ予防接種 (ELI) や発現配列タグ （EST） ダニのインフェ ステーションのマウスモデルでの解析およびダニの RNA 干渉によって。これらの実験はまた, MSP1a のキャラクタリゼーション ウシのコントロール候補ワクチン抗原としての使用をサポート、アドヘシン ウシ赤血球とティック セルとして結果しています。A. phagocytophilum に感染したヒトの細胞で特異的に発現する遺伝子のマイクロ アレイの分析は、病原体の感染と増殖に関与する重要な分子識別。カチカチの保護抗原スクリーニング カチカチのインフェ ステーション、脱皮、産卵の低減とタイマー刻みでアナプラズマ感染レベルに影響を与えるワクチン候補の結果。
エンロフロキサシン、imidocarb、および永続アナプラズマまた, 感染牛におけるクリアランスのオキシテトラサイクリンの効果の比較
この研究世界組織が動物の健康のための永続的なアナプラズマまた, 感染牛における除去提案オキシテトラサイクリン レジメン エンロフロキサシンと imidocarb 酸ベクロメタゾン治療と比較してください。療法が競争力のある ELISA およびポリメラーゼの連鎖反応 (PCR) の反応性に及ぼす影響も検討した.12 A. キャリア, 感染子牛は imidocarb (5 mg/kg IM は 2 回、7 日離れて)、またはオキシテトラサイクリン (5 日間の 22 mg/kg IV q24h） どちらかエンロフロキサシン (5 mg/kg IV q24h 5 日間） を受信グループにランダムに割り当てられました。一頭の子牛がオクラホマ分離 imidocarb グループとバージニア分離オキシテトラサイクリン グループ内感染の 1 つに感染血液 subinoculation、次は貧血子牛に感染に失敗しました。両方治療後、44 日間競合 ELISA 陰性になったが、imidocarb 扱わふくらはぎ PCR 陽性残った。テスト済みの治療のどれも確実に永続的なまた, 感染症のすべての牛を排除しました。さらに、PCR の子牛での chemosterilization の成功を決定する信頼性の高い手段でした。
Transovarial は Subolesin DsRNA を十分に備えて女性の注射後 3 ホスト マダニのカチカチ種における Subolesin 遺伝子のサイレンシング。
RNA 干渉 （RNAi） のタイマー刻みで遺伝子機能研究のための最も強力なの実験的ツールとなっています。当初 4 8 と呼ばれる Subolesin としてワクチンを使用するとダニのインフェ ステーションに対して保護されることがわかったし、ヌクレオチドおよび蛋白質レベルでのマダニ類ダニ種の間で高度に保存されることが示されました。RNAi は全身 subolesin のサイレンシング原因し、ティック給餌、複製、および開発の規制でこのタンパク質が関与していることを示した。最近では、これらの結果、1 台のホストに目盛りを十分に備えて女性への dsRNA の注入 transovarial subolesin 式の卵と幼虫のサイレンシングに起因クリイロコイタマダニ (Boophilus) microplus 拡張されました。ここで、transovarial の 3 台のホスト ダニ、キララマダニ、カクマダニ属のアベマキ イクソデススカプラリス RNAi による subolesin のサイレンシングを報告します。これらのカチカチ種における RNAi による subolesin 発現のサイレンシング subolesin 式の卵や幼虫にも影響を受けます。Transovarial RNAi マダニ類共通のメカニズムに表示され、産卵、胚形成、および幼虫の発育に関与するティック遺伝子の急速な特性の簡易法を提供します。
下顎リンパ節および口腔咽頭扁桃の自然感染結核とヨーロッパのイノシシで差動ストレス、炎症反応のプロテオーム、トランスクリプトーム解析
差動ストレス/炎症反応は自然感染結核と mRNA および蛋白質のレベル下顎リンパ節 (MLN) と口腔咽頭扁桃の欧州イノシシ (イノシシ) で特徴づけられました。抑制差し引きハイブリダイゼーションと免疫組織化学結合および/または定量的リアルタイム RT-PCR を識別し、結核 （TB +） は、野生のイノシシで特異的に表現豊かなストレス/炎症性の遺伝子の塩基配列を特徴付けるのために使用されました。遺伝子識別 MLN は、扁桃腺相当する血清アミロイド A, アルギナーゼは、オステオポンチン、リゾチーム、アネキシン I、および熱の衝撃蛋白質それぞれ。TB + と非結核性 （TB-) イノシシ 2 デとアネキシン V、血清アルブミン ストレス/炎症性蛋白質を含む MALDI-TOF さん 5 の蛋白質に MLN と扁桃腺でグローバル タンパク質パターンを比較したし、アポリポタンパク質 A1 下位レベル MLN の TB + イノシシで発見されました。マンガン スーパーオキシドジスムターゼ アップレギュ MLN の TB + イノシシで発見されました。クレアチンキナーゼと MHC クラス II 抗原を含む 5 つの蛋白質が調整 TB + イノシシの扁桃腺で見つかりました。これらの結果は、イノシシで差動ストレス/炎症反応自然 M. bovis と感染し、宿主病原体相互作用の将来の研究や診断とワクチンの開発に便利証明するかもしれないこの種での結核の可能なマーカーを示唆する実証。
遺伝子のカチカチの保護抗原、Bm86、Bm91、subolesin、1 つホスト ティック RNA 干渉による Boophilus Microplus のサイレンシングします。
RNA 干渉 （RNAi 遺伝子機能を評価するために) の使用は、いくつかの 3 台のホストのカチカチ種 RNAi の適応を 1 つホスト マダニがで実証されている、Boophilus microplus 報告されていません。B. microplus の RNAi のアプリケーション 3 つの tick 保護抗原の遺伝子の沈黙の効果を評価： Bm86、Bm91 と subolesin。遺伝子特定二本鎖 (dsRNA) 2 つの目盛り段階に脱皮の未吸血と飽血雌を注入したし、特定の遺伝子のサイレンシング リアルタイム PCR を確認しました。彼らはフィードを許された後遺伝子サイレンシング注入の未吸血雌でが発生しました。飽血雌への dsRNA の注入後ボレリア卵とこれらの卵から孵化した幼虫がこれらの幼虫から開発された大人ないジーンサイレンシング引き起こされます。飽血雌に注入された dsRNA 産卵、その未処理の dsRNA の卵を組み込まれたデモンストレーションの開始から 14 日卵における定量的リアルタイム RT-PCR 法により検出されます。飽血雌 subolesin dsRNA の注入によって生成される卵はその subolesin は萌芽期の開発の役割を担うかもしれないことを示唆、異常であった。卵と幼虫を特定の遺伝子をサイレンシングを取得する飽血雌への dsRNA の注入ティックの胚発生における遺伝子機能研究するために使用できる手法です。
RNA 干渉の研究と Ticks の遺伝子操作。
ダニは、野生の外部寄生虫相と国内の動物と人間です。Tick 関数とティック病原体インターフェイスのより包括的な理解は改良された目盛りの制御方法を策定する必要です。RNA 干渉 （RNAi） 遺伝的操作の他のメソッドの使用が制限されていますダニで最も広く使用される遺伝子サイレンシング手法です。短時間で RNAi が用意されている、それティック遺伝子機能、ティック病原体インターフェイスとスクリーニングのキャラクタリゼーションと目盛りの保護抗原のキャラクタリゼーションを勉強のための貴重なツールを証明しました。このレビューは RNAi ティック研究への応用と目盛りの機能研究のためとティック病原体とダニ ホスト インターフェイスを解明するためにこの手法の可能性と見なします。この実験的アプローチから得られた知識がカチカチのインフェ ステーションを制御するワクチンの開発とダニ媒介性病原体の伝送に貢献することにありそうです。
実験感染牛におけるアナプラズマまた, 感染症の血清診断用競合 ELISA と補体結合試験の比較。
補体結合 (CF) 試験と競合 elisa 法 (cELISA) アナプラズマまた, 実験感染牛での検出感度を比較するには。
市販ワクチンのパフォーマンス制御カチカチのインフェ ステーションの牛のための 10 年レビュー。
ダニ家畜と野生動物の重要な外部寄生虫相とダニのインフェ ステーション経済的に牛の生産を世界中に影響を与えます。牛カチカチのインフェ ステーションの制御の耐ダニや環境汚染の選択をもたらした殺だに剤のアプリケーションで主にされています。ここオーストラリア、キューバ、メキシコ、その他のラテン アメリカ諸国のティック ワクチン アプリケーションからのデータについて説明します。Boophilus microplus Bm86 腸抗原に基づく牛のための商業ティック ワクチンは、コスト効果の高い、環境に優しい殺だに剤の使用に代わる実現可能な目盛りの制御メソッドが必要と証明しました。商業ティック ワクチン カチカチのインフェ ステーションの牛といくつかのダニ媒介性病原体の熱伝導低減だけでなく、家畜生産の増加や殺たに剤使用の強度を減少しました。ティック ワクチンの実用化は難しい以前制約抗原の発見、ワクチン試験牛、及びリストラクチャ リング、会社の経費のおかげされているが過去 10 年間これらのワクチンの成功は牛の目盛りの制御の改善方法として明確に自分の可能性を実証しています。抗原検出のための新しい効果的な分子技術と緊急性を削減または殺だに剤、特に広範な目盛りの抵抗が発生した地域での使用を置換するティック制御手法による将来改良されたワクチンの開発は大幅に強化されます。
Sp110 転写誘導、アナプラズマ Phagocytophilum ヒト前細胞の伝染のために必要な。
ダニ媒介性細胞内病原体、アナプラズマ phagocytophilum （リケッチア目: Anaplasmataceae) 多形核白血球の感染後のひと顆粒球アナプラズマ症を引き起こします。人間の Sp110 遺伝子は核内ホルモン受容体転写コアクチベーターとしてその関数核体 (NB) のコンポーネントのメンバーであるし、人間の病原体に対することメカニズムで重要な役割を果たしています。本研究では、我々 と仮定 Sp110 を関与すると、A. phagocytophilum でヒト前 HL 60 細胞の感染症。
クリイロコイタマダニ寄生の大人の間アクティブな摂食時の Co-housed 犬の動き。
成人男性タイマー刻みは、脱皮を必要とせずできる実験的買収とダニ媒介性病原体の伝送の示されています。この intrastadial の伝送ルートの生態学的関連性を判断するには、積極的に給餌男性クリイロコイタマダニ寄生 move co-housed 出没する犬の間に自然の程度を評価しました。犬 （n = 4) 48 のインフェ ステーションを設立、その後各犬を検討している間の h と現在のタイマー刻みカウントのティック閉じ込めケージで個別に収容されて、1 つの色分けされたダニの寄生が認められました。犬だったし (研究 1) は追加 7 または 5 (研究 2) のための大規模な, グループのペンで co-housed 日。最初の研究では, 性の比率の移行は、主に女性のダニと 2 匹の犬がすべての男性のダニを受信を受信 2 つの犬を奨励するために調整されました。2 番目の研究では, 各犬は自然なインフェ ステーション (4:1 男性女性) で見つかった似てタイマー刻みの比を受け取った。結果は、ダニが出没する、co-housed の犬の間容易に移行されたことを示した。宿泊料金の移民、以前別の犬に移動 1 つの犬に接続されているダニの割合として定義されている 0 から 46 ％ （研究 1 mean=31.1%; 2 研究 9.4 ％） であった。移住率、当初別の犬に移動 1 つの犬をしゅつぼつタイマー刻みの数として定義されている平均 35.2% で 1 と研究 2 は 10.8% (3.6 67.6%) 研究します。大人のダニ犬の間の動きは自然に発生するフォームの摂食、病原体の伝送を許可するための餌の時間を短縮するために示されている戦略が中断を表します。タイマー刻み、容易に 1 つのホストからデタッチし、供給再開する 2 番目のホストに再アタッチ任意病原体の存在のレプリケーションを既に開始されていて、したがってをホストに初めて添付のタイマー刻みで見られる伝送における同様の遅延が発生しません。
ティック細胞アナプラズマまた, 牛菌を感染に応答しての機能ゲノム研究。
タイマー刻みと彼らを送信病原菌の共進化は、彼らの相互の生存を確保しています。これらの研究でアナプラズマまた, 感染に応答して目盛り遺伝子を特徴づける機能ゲノム アプローチを使用しました。特異的規制の遺伝子蛋白質は抑制差し引きハイブリダイゼーションと差動のゲルの電気泳動解析とまた, 感染細胞 IDE8 ティックのによって識別されました。17 これらの遺伝子のうち 9 リアルタイム RT-PCR 法により特異的にダニまたは IDE8 目盛りでまた, 感染に応答して細胞規制が確認されました。RNA 干渉は機能性の研究に使用しました。エンコード推定セレノプロテイン W2a、造血幹細胞/前駆細胞蛋白質のような六つの遺伝子フェリチン、GST、プロテアソーム 26 s サブユニット、subolesin コントロールに IDE8 ティック細胞における a. また, 感染に影響を与えるが見つかりました。推定される GST、唾液セレノプロテイン M、vATPase、ユビキチンをエンコード、4 つの遺伝子の異なるサイトでまた, 感染マダニにおける開発の影響を受けます。これらの研究の分子機構はまた, 発達サイクルどのティック細胞の遺伝子発現を仲介することによって発生することを示したし、カチカチを通して人身売買の結果。
アナプラズマまた, 男性カクマダニ属の生息環境での実験的感染。
ウシ アナプラズマはいくつかの欧州諸国で報告されているが、アナプラズマまた, これらの地域からのカチカチ種のベクトル処理能力が決定されていません。ヨーロッパと米国でまた, のベクトルとしての大きな役割カクマダニ属属の内カクマダニ属の広い分布範囲転換ためのまた, の D. 転換のベクトル コンピテンシーをテストしました。
血清学的および分子生物学的ライオンズ （パンテーラ レオ） イタリア サファリパークからのダニ媒介病原体の。
ライオンズ （パンテーラ レオ） 違法な狩猟、生息地の喪失、感染症によって脅かされて、絶滅危惧種です。ほとんどがライオンズに感染し、人口減少に貢献できるダニ媒介性病原体について知られていません。本研究の目的はリケッチア属、アナプラズマ phagocytophilum とコクシエラによって感染 10 ライオンズからファザーノ サファリパーク イタリアの血清学、ポリメラーゼの連鎖反応、シーケンス解析によって特徴付けることでした。動物, c.burnetii 感染の証拠ダニ媒介性疾患の臨床徴候を示さなかったけれども紅斑熱グループ リケッチア sp. A. phagocytophilum 50 ％、20 ％ と 10 ％、ライオンズのそれぞれ認められた.ライオンズの一つは、すべての 3 つの病原体の陽性。この研究 c.burnetii、リケッチアの sp、A. phagocytophilum のライオンにおける感染症の分子の証拠の最初の報告であり、これらのネコ科が感染してダニ感染細菌のためのホストとしての証拠を提供します。
アナプラズマ Ovis 菌株の Msp4 遺伝子シーケンス解析。
アナプラズマ ovis （リケッチア目: Anaplasmataceae) 羊、山羊、野生反芻動物のダニ媒介性病原体であります。A. ovis 系統の遺伝的多様性は、よくシーケンス情報の欠如により特徴付けられるされてないです。本研究では、我々 ビッグホーン羊 (ヒツジ属カナデンシス） とラバ鹿 (オジロジカで子鹿 hemionus） モンタナから A. ovis と感染症の血清反応とシーケンス msp4 遺伝子の解析により評価。アナプラズマ属する抗体は、37 ％ と 39 ％ のオオツノヒツジ、ミュールジカ、それぞれ分析で検出されました。4 つの新しい msp4 遺伝子型が同定されました。既報アナプラズマ属の他と比較して A. ovis 系統の遺伝的多様性のキャラクタリゼーション シーケンスと共に記載 A. ovismsp4 シーケンスを分析しました。これらの研究結果 A. ovismsp4 遺伝子型地理的な地域の間で、羊、鹿のホスト間で異なる場合がありますが、観測された変化また, と A. phagocytophilum 菌株の間に観測された変化より小さいことを示した。報告されている結果は、ここでさらに A. ovis 感染自然野生反芻動物個体米国西部で発生することとオオツノヒツジ、ミュールジカ A. ovis の野生動物の貯水池として役立つかもしれないことを確認します。
世界株の主要表面蛋白質 1 a を使用してまたアナプラズマ, 分析シーケンスを繰り返します。
また, アナプラズマ病牛アナプラズマ世界中を引き起こすダニ媒介性病原体の牛のです。主要表面蛋白質 (MSPs) 宿主-病原体とダニ病原体の相互作用に関与しているし、また, 系統および系統学的研究の遺伝的解析のためのマーカーとして使用されています。MSP1a 接着しまた, 伝送でダニによってかかわっているし、地理的系統数の変化し、アミノ ターミナル タンデムのシーケンスが繰り返されます。本研究の目的は、北と南アメリカ、ヨーロッパ、アジア、アフリカ、オーストラリアのすべての大陸を含む国から収集したまた, 系統の遺伝的多様性を特徴づけるためだった。本研究では、131 79 MSP1a 繰り返しシーケンスを使用してまた, 系統を特徴とします。これらの結果は、世界中の流行地におけるまた, 系統の遺伝の不均質確証。また, 菌株が提供されたイイズナ情報の地理的起源に従ってクラスター内の MSP1a 繰り返し配列の系統解析を起因しなかった。シーケンスから単一の地理的領域における系統存在していた、MSP1a の 78 パーセントを繰り返します。強い (目または = 80%) のサポートが、イタリア語、スペイン語、中国語、アルゼンチン、南アメリカの系統からのシーケンスを含むクラスターに見つかりました。MSP1a の系統解析はシーケンスの提案されたティック ・病原菌の共進化を繰り返し、また, 菌株世界中のさまざまな地理的な場所から複数の紹介の証拠を提供しました。これらの結果は、遺伝的多様性の理解と a. また, と目盛り病原体の相互作用の進化に貢献します。
概要: タイマー刻みとして人間と動物の病気を引き起こす病原体のベクトル。
ダニ （ダニ目： 条件) さまざまなウイルス、細菌、原生動物や寄生虫を含む脊椎動物の病原体を送信。ダニ媒介性病原体以上 100,000 の場合、世界中の人間の病気の責任と考えられています。ダニ世界中蚊に人間の病気のベクトルとしては 2 番目されると見なされますが、病を引き起こすの最も重要なベクトルは家畜と野生動物の病原体。感染症とダニ、脊椎動物宿主の病原体の開発ティック病原体界面での分子メカニズムによって仲介されます。タイマー刻みと病原体の特徴を含む、これらのメカニズムは共通と種特異的な特性の進化があります。ティック病原体界面の分子評価です急速に進むとダニのインフェ ステーションおよびその関連付けられている病原体の新規制御方式の開発のための新しい道を提供します。
新しい制御戦略のためのカチカチ病原体インターフェイスをターゲットします。
ダニは、野生の外部寄生虫相と家畜および最も特に地球規模の健康病の病原体を送信することによって影響を与える人間です。タイマー刻みと病原菌の感染を促進する病原体の分子相互作用の情報ながら開発と伝送です限られた、ティック病原体インターフェイスの包括的理解がカチカチのインフェ ステーションとダニ媒介性病原体の制御のための新しいと小説対策の開発に向けた基礎的になります。最近では、キーのダニ抗原とティック遺伝子機能のキャラクタリゼーション RNA 干渉 （RNAi） を用いたワクチン研究ティック病原体インターフェイスに影響を与える遺伝子の新しい情報を提供しています。このレビューでは現在の研究とティック ワクチンの展望とティック病原体インターフェイスを対象とダニの遺伝子操作をまとめたものです。これら集団の研究から得られた知識とダニやダニ媒介性病原体をターゲット制御法の定式化のティック ・病原菌相互作用の解明に向けての基盤となります。これらの分子のアプローチの使用は、可能性が特にダニ個体群とダニ媒介の病気を将来削減する対策に貢献します。
アナプラズマ ティック インターフェイスの分子生物学の理解に向けての進歩します。
属にはアナプラズマには内液胞の膜結合排他的ホスト細胞で発見ダニ媒介性病原体の多様なグループが含まれます。反芻動物、A. phagocytophilum マダニ属によるベクターのまた,、A. centrale カクマダニ属とクリイロコイタマダニのダニによってベクター、A. ovis ホスト固有ですが、広い範囲のホストに感染します。タイマー刻み数でアナプラズマ サイクルを餌 tick が調整される発達サイクルを経る。ティック/アナプラズマ界面研究揺籃期にですが、最近の研究はそのアナプラズマ感染の証拠を提供したし、伝送両方ティック セルおよび病原体遺伝子を含む分子メカニズムによって媒介されます。RNA 干渉、ゲノミクス、プロテオミクスなどの分子アプローチの成長しているアレイのアプリケーション急速にカチカチ/病原体インターフェイスの私たちの知識を拡大しています。ワクチン戦略における病原体の開発に必要なキー ティック細胞分子をターゲット ベクトル容量タイマー刻みのため伝送と脊椎動物の感染症削減アナプラズマを損なわれます。総称して、この情報は可能性がティックの蔓延に対する脊椎動物を保護し、病原体の感染を防ぐために設計されたデュアル ターゲット ワクチンの開発に します。
抗菌性タンパク質ディフェンシンの沈黙、varisin で男性カクマダニ属のアベマキ RNA 干渉による減少アナプラズマまた, 感染症の結果します。
ディフェンシンを含む抗菌ペプチド、グラム陰性菌およびグラム陽性細菌に対する保護を提供することが示されているダニの生来の免疫システムのコンポーネントです。主に血液細胞の生産する Varisin、カクマダニ属のアベマキの識別ディフェンシンの 1 つが示されたがトラン スクリプト レベルはまたサシバエと目盛りの他のセルで表現しました。本研究では, グラム陰性牛病原体、アナプラズマまた, ダニの免疫における varisin の役割を検討しました。Varisin 遺伝子の発現は男性ダニいた varisin dsRNA を注入し、フィードし、また, 感染実験感染子牛を取得できる RNA 干渉 （RNAi） によって沈黙だった。血球、腸と唾液腺における varisin の発現をサイレンシング リアルタイム RT-PCR 法によって確認されました。我々 は varisin のサイレンシングはまた, 感染ダニに増加が、その細菌の番号として、また, によって決定される結果を示した予想 msp4 定量的 PCR、varisin 沈黙のタイマー刻みで有意に減少しました。さらに、植民地の RNAi のため使用されるタイマー刻みでまた, 溶出バッファー注入制御のタイマー刻みで見られるから形態学的異常を示した。コロニーの形は不規則ではまた, 中腸細胞の細胞質内に無料のように見えたいくつかのケースだった。いくつかのダニは全身 varisin のサイレンシングに関連されて微生物に感染すると見つけられました。これは、ダニによって減少また, 感染に起因した RNAi の抗菌性タンパク質ディフェンシンのサイレンシングの最初のレポートに表示されます。
Antricola のタイマー刻みの観察: 小さなニンフ上の哺乳類のホストを供給し、マダニ類に似た唾液腺構造。
ダニは、脱皮し、次の食事まで生き残るためと、女性の場合のプレハブハウスに栄養素とエネルギーの源として解析を使用します。ただし、いくつかのカチカチ種の幼虫だけ時にコウモリのフィードを知られている;女性は義務的自家と幼虫段階給紙されないと考えられています。我々 はバットグアノから収集した幼虫 Antricola delacruzi ダニの自然集団での血液の存在を調べた。研究室のホストにフィードバックする能力;唾液腺および腸の微視的構造。DNA 増幅たて収集資料の腸内容の 4 11 の 1 齢幼虫の哺乳動物について肯定的だったが、我々 は後半齢幼虫からホスト吸血 DNA の増幅に成功しました。すべての初期の幼虫の段階 (n = 10) ウサギに供給され、ホストの DNA が検出され、腸内容から塩基配列を決定します。ただし、大型のニンフ (n = 10) 摂食、拒否し、ホスト DNA 残ったこれらのタイマー刻みで検出されません。A. delacruzi のすべての段階の唾液腺がある形態でと同様、マダニ類に agranular I 型唾液腺腺と粒状タイプ II または B 型腺。A. delacruzi のすべての段階はヘマチン顆粒に含まれる基底部分で消化器系の細胞から成る類似の腸構造を持っていた。どちらも再生も分泌細胞の痕跡は腸のセクションで観察されました。
アナプラズマ Phagocytophilum と感染羊における炎症と免疫応答遺伝子の発現。
アナプラズマ phagocytophilum さまざまな宿主動物種に感染して反芻動物とヒト, ウマおよび犬における顆粒球アナプラズマ症疾患のダニ媒介性発熱 (TBF) を引き起こします。TBF 羊にはヨーロッパの一部の地域でより普及しているダニ媒介の病気の一つとなっています。A. phagocytophilum 感染宿主遺伝子発現し免疫応答を修正します。本研究の目的は、実験的および自然 A. phagocytophilum とマイクロ アレイの交配とリアルタイム RT-PCR による感染羊における差動遺伝子発現を特徴づけるためだった。これらの研究結果で羊は炎症と生来の免疫経路の活性化と適応免疫の減損 A. phagocytophilum 感染時に実証。遺伝子とその発現プロファイル羊 A. phagocytophilum 感染に応答してでのキャラクタリゼーション病原菌の感染の分子メカニズムと TBF の病因の理解を進歩します。総称して、これらの結果は A. phagocytophilum 感染する哺乳類を宿主応答の最新情報を展開します。
ダニ Subolesin 遺伝子発現の役割の証拠。
Subolesin イクソデススカプラリス ティック防御抗原として最近発見された、ティック血消化、生殖と発展の役割を持つ、進化的に保存された蛋白質であります。他の生物における subolesin オルソログ発達プロセスの制御に関与している可能性があります。Subolesin ノックダウンでダニや他の生物の深遠な効果のため subolesin 遺伝子発現に役割を果たしているし、それゆえに影響を与える複数の携帯処理仮説を立てた。遺伝子発現における subolesin の役割の証拠を提供しました。
アナプラズマ Phagocytophilum 感染に応答してヒト前細胞における Perilipin の発現は変更脂質代謝の結果します。
％30 の細胞内病原体アナプラズマ phagocytophilum ダニによって送信され、ひと顆粒球アナプラズマ症、反芻動物のダニ媒介性発熱とウマおよびイヌの顆粒球アナプラズマ症を引き起こします。1 つの遺伝子の特異的ヒト前で HL ‐ 60 細胞 A. phagocytophilum と感染に応答して表現として以前の研究では, perilipin (PLIN) 遺伝子が発見されました。PLIN リン脂肪とコレステロールの合成の中心的な役割を果たしている、主要な脂肪細胞脂質液滴関連蛋白質です。ホスト コレステロールや他の脂質は、A. phagocytophilum 感染症とひと細胞での増殖によって必要があります。本研究では, 仮説を立てたその PLIN 人間 HL ‐ 60 細胞の感染で A. phagocytophilum によって関与する可能性があります。この仮説をテストするには、リアルタイム RT-PCR 法, 蛍光抗体法と RNA 干渉の組み合わせ PLIN の発現を研究していました。これらの研究結果は、A. phagocytophilum PLIN mRNA のレベルを増やすことで脂質代謝を調節して HL ‐ 60 細胞の感染を容易に実証。これらの研究結果は A. phagocytophilum 感染症における脂質代謝と HL ‐ 60 細胞における増殖の役割の私達の知識を展開しが A によって phagocytophilum 脂質代謝を調節する機構を提案します。
自然感染結核と差動式イベリア レッド ディア (Cervus に対して Hispanicus) の腸間膜リンパ節の炎症と免疫応答遺伝子の。
ほとんどの情報は野生生物の種の自然の抗酸菌症における遺伝子発現について利用可能な します。イベリア レッド ディアはこうして人間および牛の牛結核 (bTB) のリスクを増加マイコバクテリウムの bovis、スペインの貯水池として使用できます。本明細書で炎症性の発現を特徴と、鹿の腸間膜リンパ節における免疫応答遺伝子はマイクロ アレイの交配を使用して M. bovis と自然感染します。結果は血清蛋白濃度および/またはリアルタイム RT-PCR による定量検証されました。マイクロ アレイの分析された 600 の遺伝子の 17 遺伝子は 1.7 より大きい式のフォールドの変更感染または感染していない鹿 (P0.05) で表示。これらの遺伝子には、タイト結合タンパク質, IL 11 r、bactenecin、CD62L、CD74、学会、IgA と新しい知見を構成し、どの M. によって bovis ホスト炎症性調節機構が新たなメカニズムを提案する IgM 免疫応答含まれて。これらの結果は病因と自然の抗酸菌感染への免疫機構の基本的な理解に貢献し、bTB の制御の重要な含意があるかもしれない。
ティック防御抗原 Subolesin アナプラズマ,-、A. Phagocytophilum 感染宿主細胞での発現。
Subolesin 最近ワクチンと RNA 干渉 （RNAi） 研究のティックの蔓延に対する保護と目盛りを餌再現、および開発と同様、宿主細胞の伝染に影響するアナプラズマまた, A. phagocytophilum によって示した.最近の実験感染ダニと脊椎動物の宿主細胞でこれら 2 つの病原体の遺伝子発現を変更こと証拠を提供しました。そのまた, と宿主細胞の伝染の仮説したがって、A. phagocytophilum subolesin の発現に影響を与えます。Subolesin の mRNA のレベルはリアルタイム ・逆転写酵素 （RT） を決定した-PCR 感染していないと a. また, 感染カクマダニ属のアベマキ根性と唾液腺とティック IDE8 培養細胞と感染して A. の phagocytophilum 感染マダニ scapularis ニンフ、ダニ ISE6 培養細胞およびひと細胞ライン HL 60。また、アナプラズマ属の感染・増殖に及ぼす subolesin RNAi による tick 組織や培養ティックとひと細胞で特徴づけられました。これらの実験は差動式 subolesin a. また, - と A. phagocytophilum 感染細胞での証拠を提示しました。Subolesin 特異的 mRNA のレベルがまた, 感染ダニ唾液腺細胞は腸細胞に応答して増加ティッシュ特定の方法における a. また, 感染ダニに表現されました。RNAi によるノックダウンを Subolesin アナプラズマ感染/乗算感染 subolesin 式を増加細胞のみで、すなわち、また, 感染 D. イロガワリコンニャク唾液腺と IDE8 細胞減少。結果はここでさらにサポート アナプラズマ ホスト相互作用における subolesin の役割を報告し、病原体感染/乗算のタイマー刻みでの制御のためのワクチンの subolesin の推定役割を示唆します。
Subolesin の役割ティック細胞培養における RNA 干渉の使用によって定義します。
ティック ワクチンの開発はインフェ ステーションとダニ媒介の病気ダニの制御のための新しい機会を提供します。最近、ティック保護タンパク質、subolesin、イクソデススカプラリスから派生式ライブラリ予防接種とダニのインフェ ステーションのマウス モデルによるセルラインで確認されました。Subolesin マダニ類ダニ生物で共通していたが、この遺伝子の生物学的機能は不明です。Subolesin 式のタイマー刻みで RNA 干渉 （RNAi 遺伝子の機能に関する情報を提供する) によって沈黙だった、subolesin を深くサイレンシング ティック生存、摂食と生殖影響を受けます。本研究では、我々 RNAi IDE8 ティック セルラインにさらに使用 subolesin 培養ティック細胞の開発の役割を研究します。Subolesin 二本鎖 (ds) RNA と細胞培養し、細胞の成長を監視しました。ティック細胞による dsRNA の定款 Cy3 ラベル dsRNA をモニターしました。72 H 後細胞の形態、細胞数と逆転写 PCR によるジーンサイレンシングの確認のために収穫されました。扱われた細胞における subolesin の発現減少 80 ± 9 %rnai による模擬処理細胞と比較していたが、細胞の成長、72 h 期間にわたって影響を受けることに表示されませんでした。これは、ダニの細胞培養の RNAi の使用の最初の報告です。RNAi はティック遺伝子機能研究のための強力なツールですし、可能性がティック遺伝子細胞の開発と感染症の病原体に果たす役割を理解するために貢献します。
遺伝子発現プロファイルの自然感染結核とヨーロッパのイノシシ。
グローバル遺伝子発現プロファイルは自然感染結核とヨーロッパのイノシシで分析しました。脾臓 RNA 23 M. 17 bovis 感染と感染動物から抽出し、20,400 遺伝子を表す Pigoligoarray を使用して分析.シーケンス (N = 161) は特異的に表現されたアポトーシス細胞の通信と信号伝達、細胞の成長および/またはメンテナンス、骨格組織、器官など識別に影響を与える細胞プロセス、DNA 修復、免疫反応、代謝とエネルギー経路、タンパク質代謝、細胞増殖、遺伝子発現、核酸代謝、生理学的プロセスと輸送の規制の規制の規制の規制。リアルタイム RT-PCR 法によって解析の mRNA のレベルの選択された遺伝子のマイクロ アレイ結果を確証する使用されました。免疫応答遺伝子の中で最も代表の発現シーケンスとさらなる議論のために選ばれました。Β デフェンシン 129, T 細胞表層糖 cd8 陽性および B 細胞受容体関連蛋白質 29 感染した動物の過剰発現されました。免疫応答遺伝子ガレクチン 1, 補体成分 C1qB と I とクラス II 抗原と免疫グロブリン鎖で感染した動物が発見された特定 HLA クラスの表現のレベルを下げます。この研究新しいメカニズムはどの自然感染ヨーロッパの野生のイノシシ応答 M. bovis 感染してどのように病原体感染を確立するために宿主免疫応答を回避によって識別。遺伝子発現の研究では自然貯水池牛結核の機能ゲノム学と野生動物の疾病で支援するワクチン研究のために重要です野生動物感染。
キララマダニによって家庭猫に Cytauxzoon Felis の伝送。
Cytauxzoon felis 飼い猫にキララマダニによって送信されました。感染はニンフとして自然感染 C. felis の生き残った国内の猫を供給買収された A. ヘブレウム大人のかみ傷によって製作されました。発熱、inappetence、うつ病と無気力最初の指摘 11 日 post-infestation (dpi) でした。薄い粘液の膜、脾腫、黄疸、および呼吸困難は病気のコース中にも認められました。それは正常範囲内に戻ったときの体温実験感染 C. felis 猫の 24 dpi まで 16 dpi から subnormal だった。すべての臨床兆候 cytauxzoonsis の猫 subclinically C. felis と感染になったときは 23 の dpi によって解決する始めた。猫のマークは、回生貧血初め 13 dpi によって開発し、回復する前に 20 dpi でどん底に達した。また適度な好中球とリンパ球マークされた増加 18 と 26 の dpi の間を開発しました。ロイコチトゾーン C. felis の脾臓吸引 15 dpi で感染した猫の観察された.C. DNA felis 17 dpi を開始リアルタイム PCR によって増幅され、piroplasms C. felis の最初光顕 18 dpi によって指摘されました。カクマダニ属のアベマキ、イクソデススカプラリス、およびクリイロコイタマダニも同様の方法で同時に調べたが C. felis を送信しませんでした。現在の研究の前に D. アベマキのみ C. felis の感染症を送信する実験的に示されていた。これは、A. ヘブレウムによって送信される C. felis の最初の報告です。C. felis 感染国内猫の 1 つから別の伝送 subclinically C. felis と感染国内の猫は貯水池の素朴な国内の猫の感染可能性があることを示します。
保全と蚊オルソログ Subolesin ティック保護抗原の免疫原性。
人間と動物の健康に影響を及ぼす病原体の節足動物媒介の制御ベクトル媒介疾患の撲滅のために重要です。Subolesin、カチカチの保護抗原のオルソログ ヒトスジシマカの識別し、エピトープ ダニや蚊に保存されていることが見つかりました。ダニや蚊と RNA 干渉 RNA 種有意な遺伝子ノックダウンにつながったし、目盛りの重量および/または生存を減少の 3 つの目盛りで二本。Anopheles atroparvus 給餌、ヤブカ属 caspius とアカイエカ雌イエカ A. ヒトスジシマカ subolesin の高度免疫血清を ± 5 %11 29 ± 6% 生存阻害の効果をもたなかった血清の供給コントロールと比較したときに結果。砂、ハエ、Phlebotomus perniciosus antimosquito subolesin 相同蛋白質阻害抗体メスの生存と幼虫と孵化後 28 ± 22% と 16 +/-3% によって得られるそれぞれコントロールに比べてとき大人の数を供給します。ダニや蚊 subolesin 相同蛋白質ワクチンの接種は同様の方法でマダニ scapularis マダニ寄生および重量大幅に削減。しかし、遺伝子組換え蚊 subolesin オルソログ抗原ワクチンの接種がキララマダニに対して保護していない、クリイロコイタマダニ カチカチのインフェ ステーション。総称して、これらの予備的な結果はワクチンの開発は制御 subolesin オルソログを使用して複数の節足動物のベクトルのために可能性があることの最初の証拠を提供が複数抗原効果的なワクチンを生成するために必要なことを示唆しました。
アナプラズマまた, アルゼンチンでの遺伝的多様性。
アナプラズマまた, によって引き起こされるウシ アナプラズマ畜牛生産、世界的な主要な制約です。また, 主要な表面タンパク質 1 α (msp1alpha) 遺伝子可変直列な繰り返しアミノ末端領域の数が含まれているし、病原体の遺伝的多様性の特性のために使用されています。この研究はまた, 遺伝的多様性に基づく msp1alpha 遺伝子型とその推定の関係 (Boophilus) Rhipicephalus microplus インフェ ステーションをアルゼンチンでの最初の特性を報告します。本明細書でアナプラズマ アウトブレイク R. microplus (9 サンプル) が出没して根絶/無料 （14 サンプル） 地域で全血牛試料を分析しました。シーケンス分析 15 品種の異なる msp1alpha の存在の 31 の異なる繰り返し単位を明らかにしました。6 新しいシーケンスは、この研究で発見され、13/31 （42 ％） 繰り返しアルゼンチン系統にユニークだったを繰り返します。Msp1alpha の解析を繰り返すシーケンス R. microplus インフェ ステーションによると 3 つの繰り返しグループに起因した: (i) (20 リピート) のダニが出没する地域で発見した、(ii) (6 繰り返されます) の空き領域で tick を発見し、（5 リピート）、(iii) ランダムに分散します。また、また, msp1alpha の遺伝的多様性のマダニがはびこってティック無料エリア地域よりも高いだった。これらの結果は, また, msp1alpha の繰り返し単位の目盛りベクトルを飼いならしかもしれない役割ティックを介した伝送世代病原体の遺伝的多様性のための証拠を表す示唆以前の証拠と共に。
ラムズのブルセラ Ovis 感染に対する防御反応の可能な相関のキャラクタリゼーションと B. メリテン シス感染め Rev 1 ワクチン免疫。
メリテン シス感、ライブ弱毒ブルセラ染め Rev 1 ワクチン接種ブルセラ ovis 羊によるヒツジのブルセラ病の制御に使用されます。マイクロ アレイの交配による評価を通して B. ovis 感染に対する保護反応の可能な関連要因と炎症性のリアルタイム RT-PCR を識別するために本研究の目的をされ、免疫応答遺伝子の特異的にラムズに以前表現メリテン シス感 B. 染めと Rev 1 免疫し実験 B. ovis と挑戦します。遺伝子発現プロファイルの前に、と後の挑戦 B. ovis 間保護ラムズと比較した、それらの予防接種が発見後の挑戦に感染します。TLR10、Bak と安西遺伝子ワクチン接種およびプロテクト ラムズでレベルの高い表現されました。これらの遺伝子は B. メリテン シス感染め Rev 1 ワクチン免疫ラムズ B. ovis 感染に対する保護反応の可能な相関を提供しています。
アナプラズマまた, ダニの相互作用に関与する遺伝子のサイレンシング カクマダニ属のアベマキの病原体発達サイクルに影響を与えます。
牛病原体、アナプラズマまた,、腸細胞で始まる発達のサイクル タイマー刻みで受けます。牛への伝送唾液腺から目盛り 2 番目授乳中に発生します。各開発サイトで (網状と密な) また, の 2 つのフォーム parasitophorous 液胞のホスト細胞細胞質内に発生します。しかし、ティック遺伝子の病原体の開発の役割は不明です。カクマダニ属のアベマキ ダニに応答して、また, 感染に特異的に表現される以前の研究で発見した、4 つの遺伝子は RNA 干渉 （RNAi はまた, 発達サイクルにサイレンシングの効果を決定する) によって沈黙しました。推定グルタチオン S トランスフェラーゼ (GST) 唾液セレノプロテイン M (SelM) では H + ライソゾーム空胞プロトン ポンプ (vATPase) と subolesin の輸送をエンコードこれら 4 つの遺伝子。
光と伝送の電子顕微鏡的特性の自然感染綿ラット (シグモドン Hispidus) 新規 Hepatozoon 属。
Hepatozoon の新規種は最近アメリカ犬 hepatozoonosis が流行しているオクラホマの領域から収集された綿ラット (シグモドン hispidus) で報告されました。本研究では、merogony 寄生虫の様々 な段階は光と電子顕微鏡による特徴だった。メロント肝細胞における parasitophorous の液胞内に発生した、mononucleated からであった球状のフォームの大規模な成熟したフォームへの末梢約 50 含まれている空胞メロゾイト配置。メロゾイトの開発特性 apicomplexan 細胞器官の前部と後部の極リングを固め、微小管、rhoptries、micronemes、trilaminar 膜を含むいた。メロントを成熟するにつれ、数多くの曲線メロゾイトから残留体が芽生えた。この形態学的特性はこの小説の Hepatozoon の私達の理解を拡張し、hepatozoa、多数の種に感染 apicomplexan 寄生虫についての情報を追加します。
アナプラズマ Phagocytophilum およびアナプラズマまた, 異なる遺伝子発現培養ティック細胞応答を引き出します。
アナプラズマ属 (リケッチア目: Anaplasmataceae) ％30 ダニ感染細胞生物には、アナプラズマ phagocytophilum にはアナプラズマまた, 脊椎動物やダニの寄生細胞の乗算が含まれます。最近、そのまた, マダニの生存と病原体の感染と増殖に関与しているダニ遺伝子の発現に与える影響を示した。しかし、A. phagocytophilum 感染ダニ細胞における遺伝子発現プロファイルは現在不完全特徴付けられます。本研究の目的ティック遺伝子表現のプロフィールでマダニ scapularis ダニを特徴づけるいたし、培養 ISE6 細胞 A. phagocypthilum と感染に応答して、細胞のマイクロ アレイおよびリアルタイム RT-PCR 解析によって、ティック遺伝子発現応答 A. phagocytophilum - と a. また, 感染マダニを比較します。これらの研究の結果は、A. phagocytophilum によって目盛り遺伝子発現を実証、A. phagocytophilum とまた, 感染細胞の異なる遺伝子発現応答ティックの証拠を提供します。これらアナプラズマ ティックの相互作用の違いティック細胞における病原菌のライフ サイクルでの違いを反映可能性があります。
イイズナ分析協会のダニ媒介性病原体、アナプラズマまた,、MSP1a シーケンス ティック ベクトル性能に影響を与える生態形質を明らかにします。
世界的流行である、ダニ媒介性病原体またアナプラズマ,、アナプラズマ属の模式種です （リケッチア目: Anaplasmataceae)。(Boophilus) Rhipicephalus microplus また, 世界の熱帯・亜熱帯地域での最も重要な目盛りベクトルです。また, 遺伝的多様性の広範な評価にもかかわらず地理的系統の主要表面蛋白質シーケンスを使用するほとんどの生物地理とまた, とアナプラズマの他の種の進化について知られていません。また, ため、MSP1a ベクトル病原体および宿主-病原体の相互作用に関与して正の淘汰圧の下で進化するが示されました。A. MSP1a また, 菌株は分子量のタンデム 23 31 アミノ酸の繰り返し数が可変のためと異なり、安定したマーカーひずみのアイデンティティの証明されています。シーケンス a. また, ダニの共進化の証拠を示している MSP1a の系統学的研究を繰り返しますが、これらの研究イイズナ情報が地球規模で高レベル MSP1a 地理的系統間の遺伝的多様性のため提供していません。
男性アムブリオマ ファリエガツムの Subolesin と Voraxin 遺伝子の RNA 干渉の影響 (ダニ目: 条件) 女性の充血と産卵。
削減やダニ制御の化学農薬の使用を置き換えることが望ましい目標です。最も有望なアプローチは、ダニを守るワクチンを開発することです。抗原のための anti-tick ワクチンの開発に適したがこれらの重要な生理的プロセスでは、不可欠でしょう、特にそれらの直接供給と生殖の関与。本研究では RNA 干渉 （RNAi） 男性のタイマー刻みで subolesin と voraxin のエンコード アムブリオマ ファリエガツム コッホからの遺伝子を調べた。男性 (未吸血または供給) (1) subolesin、(2) voraxin、(3) subolesin プラス voraxin または後彼らが一晩オフ ホストを開催し、その後通常女性 A. ファリエガツムと一緒にウサギをフィードが許可されたの （4） 注入バッファーの dsRNA を注入されました。Subolesin または subolesin と男性のダニとともに供給する女性を注入 + voraxin dsRNA の死亡率の高い率を持っていた、大幅に少ない体重し卵質量の小さい、コントロールよりも生産します。しかし、女性だけで voraxin dsRNA を注入した男性と餌は死亡率, 飽血体重や産卵数に関してコントロールから大幅に異なるでした。しかし、半定量的 RT-PCR 法により評価としては、voraxin からこの研究では, その理由が不明のままが沈黙するでしたはないです。本研究の結果は、その a. ファリエガツム subolesin はさらに候補ティック ワクチン抗原としてのテストの価値があるお勧めします。
オジロジカ (オジロジカで子鹿 Virginianus） の接種アナプラズマ Phagocytophilum の Ap V1 または NY 18 系統とニンフとして鹿から感染感染マダニにおける Ap V1 Scapularis 大人の微視的デモンストレーション。
4 オジロジカ Ap V1 またはアナプラズマ phagocytophilum の NY 18 株を接種しました。ニンフは、習得する許可されていたイクソデススカプラリス接種のシカをフィードし、大人に脱皮します。のみ、Ap V1 感染の鹿は、永続的に感染し、幼虫イクソデススカプラリスに感染することができるだった。Molted アダルト チックは、PCR と顕微鏡による実証 Ap V1 感染を維持しました。我々 は初めて、A. phagocytophilum i. scapularis での形態学的説明を報告します。
ダニ Subolesin は昆虫と脊椎動物の説明 Akirins のオーソログです。
ティック防御抗原、subolesin、複数の携帯電話経路の調節に関わる規制蛋白質であります。Subolesin 無脊椎動物と脊椎動物 akirins、最近名前変更グループのショウジョウバエとマウスにおける転写因子として機能することを提案した蛋白質に相同性と保存が進化です。本研究の目的は、シーケンスと機能的相同性ダニ subolesin と akirins の間の証拠を提供することでした。Subolesin と akirins の進化を示したの系統解析を保存します。Subolesin と akirin2 のノックダウン効果は、アダルト チックとマウスでそれぞれを比較しました。結果は、その目盛り subolesin、昆虫と脊椎動物の akirins のオーソログ実証し、これらの蛋白質シグナル伝達と自然免疫応答遺伝子の NF-カッパ b 依存と自立の発現調節に機能することを示唆します。これらの蛋白質が宿主病原体相互作用で重要な役割があることが示唆されました。
アナプラズマまた, オキシテトラサイクリン、imidocarb、エンロフロキサシンの短期的な赤血球文化にさらされての微細構造と Fluorochromatic の変化。
アナプラズマまた, 軽度から重度の hemoparasitic 病で重大な合併症と死亡牛の世界中の結果が発生します。普遍的に効果的なワクチンがない場合、生物学的封じ込めに抗菌療法を組み合わせるし、バイオ セキュリティ戦略がコントロール アナプラズマに重要です。本明細書に, また, 菌株の短期的な赤血球文化オキシテトラサイクリン、imidocarb、エンロフロキサシンの影響を比較しました。電子顕微鏡写真抗菌誘起リケッチアの形態変化を詳述得点 (0-4) 微細構造の変化に基づいていた。これら hydroethidine （彼は） の臭化エチジウム (EB) への変換を用いたフローサイトメトリー (FACS) によって検出された fluorochromatic の変更に生存率を評価するために生物により比較しました。また, 感染性選択した文化の影響を受けやすい子牛に subinoculation によって確認されました。形態得点カイ二乗テストを使用してと FACS データと比較分散分析により分離、薬物、co-variates、モデルとしての濃度を分析しました。バージニア州とオクラホマ州の菌株のみ 1.0 0.5、5、50、500/ml imidocarb を公開、4.0 0.5、5、50、500/ml エンロフロキサシンにさらされてオクラホマ分離された殺菌抗菌薬曝露後します。リケッチア形態得点 0 いた介在物よりもはるかに多く EB 陽性細胞形態のスコア 4 のと （p = 0.039)。また微細構造の変化と感染性の有意な相関があった (p = 0.0047)。さらに、パーセント EB 陽性細胞の抗菌露出文化は感染の確率の高い予測だった (p 0.0026 =)。これはまた, エンロフロキサシンと imidocarb 曝露後の微細構造の変化を記述する最初の研究です。これらの知見は、FACS と電子顕微鏡観察スクリーン新しい抗菌薬アナプラズマ化学療法で使用するための便利なツールであることを示しています。
ラムズ ブルセラ Ovis とラフの悪性のひずみを実験感染における炎症と免疫応答遺伝子の発現。
感染羊ヒツジ ブルセラ属での結果が緬羊のブルセラ症、病気不妊ラムズで、羊の中絶によって特徴付けられるし、子羊の周産期死亡率の増加します。感染症のコース中にヒツジ免疫反応と宿主細胞の遺伝子発現の両方が変更されます。本研究の目的は、実験 B. ovis とマイクロ アレイの交配とリアルタイム RT-PCR による感染ラムズの差動遺伝子発現の予備評価を行うことでした。600 反芻炎症性、マイクロ アレイの分析した免疫応答遺伝子の 20 と 14 の遺伝子表現フォールドの変更表示目 1.75 P 値と < 15 と 60 日間で 0.05 post-challenge (dpc) に、それぞれ。これらの遺伝子の 16 発現亢進と 4 downregulated 15 dpc で感染したラムズであった。60 Dpc で 11 および 3 遺伝子とダウン-アップレギュ感染ラムズでそれぞれあった。唯一の 4 つの遺伝子、学会、上皮型ナトリウム チャネル、α サブユニット (ENaC アルファ)、インターロイキン 18 結合蛋白質 (IL18BP) とマクロファージ遊走阻止因子 (MIF) で発見された発現亢進 15 と 60 dpc で感染したラムズ。発現遺伝子の解析で感染した動物の炎症と生来の免疫経路の活性化を示した。B. ovis 感染も貪食能に関与する遺伝子の発現と保護の生体防御機構のどちらの B. ovis 感染症の慢性化に貢献するかもしれないのダウンレギュレーションをもたらした。遺伝子発現プロファイル ラムズ重・中度 B. ovis 感染との間に異なっていた。これは大まかな brucellae、特に B. ovis 感染ラムズの差動遺伝子発現の最初の分析です。遺伝子とその発現プロファイル B. ovis 感染さらに応答してのキャラクタリゼーション感染の分子メカニズムとブルセラ病の病態の理解に貢献しています。
アナプラズマ, 自然史
また細胞内病原体アナプラズマ, (リケッチア目: Anaplasmataceae)、1910 年にサー ・ アーノルド タイラーによって記載されている、熱帯、亜熱帯地域で世界的流行しています。感染牛のまた, ウシ アナプラズマ、乳製品、牛肉産業にかなりの経済的損失の結果重度の溶血性疾患に軽度の原因します。また, 牛への伝送には生物学的ダニによって機械的にハエをかむ、により漏れた血液汚染が発生します。両方の男性ダニや牛のホストとまた, 持続感染になるし、感染の貯水池としてサーブします。赤血球感染牛での主要なサイトですが、また, 腸細胞の感染によって始まる複雑な発達サイクル タイマー刻みで受けるし、餌中に唾液腺から影響を受けやすいホストへの伝送が発生します。主要表面蛋白質 (Msp) はまた, 宿主細胞と相互作用の重要な役割を果たす、こうして持続感染の維持に資する抗原性の変化と牛の選択を受ける多重遺伝子族の家族から接着タンパク質および Msp を含みます。多くの地理的系統のまた, 世界的には遺伝子型、抗原組成, 形態およびダニの感染性の異なる識別されています。また, 菌株は独立した伝送イベントや牛とダニで感染/除外の仕組みによって維持があります。また, 遺伝子型の最も可能性の高いいくつかの地域で特定の数の増加は、集中的な牛の動きから結果。しかし、同時実行また, ひずみ感染牛におけるが報告されたこれらの菌株がより遠くに関連しました。また, msp4 と msp1alpha を使用して、選択した地理的分離株の系統学的研究の生物地理と, また, の進化についての情報提供および msp1alpha 遺伝子型正の淘汰圧の下で進化してきた。ライブと殺されたワクチンは制御アナプラズマのため使用されているし、両方のタイプのワクチンの利点と欠点があります。ワクチンは効果的に牛の臨床アナプラズマを防いだがまた, 感染をブロックする失敗しています。ワクチンが必要であることができます臨床病を防止し、同時に、感染牛および感染症の貯水池としてこれらのホストをこのように排除するダニを防ぐ。また, そして生物の関連を研究するゲノミクス、プロテオミクス、免疫学、生化学および分子技術最後の 10 年間の進歩が適用されているし、また, 細胞培養システムの最近の開発は病原体/ティック インターフェイスを研究するため、フォーマットを提供しています。最近の進歩と新しい研究方法論コントロールの新しい戦略の開発とウシ アナプラズマの予防のための追加の機会を提供する必要があります。
機能ゲノム学とティック アナプラズマ相互作用とワクチン開発の進化。
アナプラズマ属 (リケッチア目: Anaplasmataceae) 動物と人間の健康に影響を与えるいくつかのダニ感染病原菌が含まれています。ダニ媒介性病原体はダニのベクトルと脊椎動物のホスト間サイクルし、の相互作用はティック病原体界面での分子のメカニズムによって仲介されます。これらのメカニズムは、ティック ベクトルとその相互の生存を保証する病原体からの形質を伴う特性進化してきました。本明細書で機能ゲノミクスやダニ アナプラズマ インターフェイスとまた, A. phagocytophilum の進化を特徴づけるための遺伝学の研究から得られた情報を確認します。アナプラズマやダニの遺伝子やタンパク質ティック病原体の相互関係が特徴づけられました。これらの研究の共通およびアナプラズマ種特異的な分子メカニズムどの病原体とダニの細胞遺伝子発現を仲介するまたはアナプラズマ発達のサイクルに制限によって発生する実証し、カチカチを通して人身売買の結果。これらの結果は、ティック アナプラズマ相互作用の生物学の私達の理解が進んだ、カチカチのインフェ ステーションの制御とダニ媒介性病原体の伝送のための改良された方法の開発のための新しい道を開いています。
孤独な星の目盛りは、キララマダニのコントロールに対する RNA 干渉による保護抗原の同定
単独星 tick、キララマダニ、人間や動物、米国での新興感染症の病原体をベクトルします。現在、措置は効果的な制御 A. ヘブレウムのインフェ ステーションのためご利用いただけません。ダニの蛋白質に対して指示したワクチンの開発カチカチのインフェ ステーションとダニ媒介性病原体の伝達を減らすことができます。しかし、ティック ワクチン開発における律速段階ティック保護抗原の同定されています。本明細書で RNA 干渉 （RNAi）、A. ヘブレウム cDNA ライブラリ授乳後マダニの生存と重みを減らすカチカチの保護抗原の検出のためのスクリーニングのためのアプリケーションを報告します。推定 threonyl tRNA 合成酵素 (2 C 9) の 60 年代のリボソームタンパク質 L13a （2 10） と L13e エンコーディング、4 つの cDNA クローン (2B7) と間期細胞質病巣タンパク質 45 (2 G 7) は以前に特定したダニ保護蛋白質と一緒に subolesin、牛にワクチン研究のために選ばれました。(E) の全体的な効力は、ワクチン接種牛の目 30 ％ はニンフと大人、ワクチンの効果を検討する際に得られたがのみ 2 10 2 7 と subolesin 両方の目盛りの段階に影響を受けます。アダルト チック コントロールの最高の効力 (E 目 55%) 組換え 2 7 あるいは subolesin 接種牛が得られました。これらの集合の結果では、単独星カチカチのインフェ ステーションの制御のためのワクチン開発の実証。カチカチの保護抗原の同定のための RNAi 使用候補ワクチンの抗原の検出のための迅速かつコスト効果の高いツールであること証明し、このアプローチは、可能性が高い他の獣医および医学の重要性の寄生虫に適用できませんできます。
Subolesin 式のタイマー刻みで病原体感染に応答しては。
ダニ （ダニ目： 条件) 人間と動物の病気を引き起こす病原体世界中のベクトルです。ダニや病原体の相互発展と生存に貢献する分子メカニズムが進化しました。Subolesin はティック防御抗原として発見され、その後構造と関数 akirins に、依存性 NF kB と独立した自然免疫応答遺伝子発現制御、進化的に保存されたグループ昆虫と脊椎動物におけるタンパク質の類似であることが示されました。本研究の目的は、subolesin 式で様々 な病原体に感染していくつかのカチカチ種を調査して病原菌の感染に及ぼす subolesin 遺伝子の打撃を決定するためだった。最初の実験では, subolesin 式実験アナプラズマまた, 牛病原体の感染ダニに特徴づけられました。Subolesin 式 [questing またはアナプラズマ リケッチアとエールリヒア Babesia やタイレリア属菌に感染していることを確認したアダルト チック給餌で特徴づけられました。最後に、RNA 干渉 （RNAi） ダニ感染による subolesin のノックダウン効果 (CF) 毛管給餌によって様々 な病原体にさらさカクマダニ属のアベマキ男性で分析しました。
男性のクリイロコイタマダニ (Boophilus) Microplus アナプラズマまた, 感染への応答での唾液腺における遺伝子発現。
リケッチア ダニ媒介性病原体またアナプラズマ, によって引き起こされる、ウシ アナプラズマ (リケッチア目: Anaplasmataceae)、によって、世界の多くの熱帯・亜熱帯地域におけるクリイロコイタマダニ (Boophilus) microplus ベクターです。また, 感染病原体を牛に伝わるから唾液腺の結果が複雑な発達のサイクル タイマー刻みで受けます。以前の研究我々 はカクマダニ属のアベマキにおける遺伝子発現の変更を報告したし、また, と感染に応答して細胞培養イクソデススカプラリス カチカチ音をたてます。これらの研究では, 特異的また, 感染に応答して R. microplus オスの唾液腺で発現する遺伝子を識別する機能ゲノム アプローチの使用によってこれらの調査結果を拡張しました。さらに、R. microplus 由来細胞ライン、BME26、初めてもまた, 感染に応答して目盛り細胞遺伝子発現を研究に使用されました。
アナプラズマ Phagocytophilum と自然感染羊における A. ヒツジ属感染のキャラクタリゼーションと貧しい人々 の健康状態の群れ。
アナプラズマ種は、ダニによって送信され、人間と動物の病気を引き起こします。これらの病原体では、羊、経済的に重要な国内の動物を世界中に感染します。現在の研究で 200 動物アナプラズマ phagocytophilum とアナプラズマ ovis 感染を特徴づける設計され A. ovis 系統の遺伝的多様性は自然感染ヒツジ flock の貧しい人々 の健康状態から収集します。羊 98% 血清アナプラズマ属の抗体を持っていた。PCR の結果で、A. phagocytophilum と A. ovis 11.5 ％ で DNA の存在、羊の 37 ％ をそれぞれ確認します。同時感染羊の 6.5% に検出された.七一アダルト チック 1 ～ 動物あたり 15 のダニのインフェ ステーションの 45 の羊から収集されました。A. ovis msp4 配列解析はこの病原体の感染したヒツジの 17 の異なるハプロタイプの以前未報告のポリモーフィズムは、実証。A. ovis msp4 ハプロタイプ アナプラズマまた, と A. phagocytophilum 菌株の規模と比較して少ない変数が、遺伝子多型この軌跡は感染したヒツジ flock の貧しい人々 の健康状態から得られた系統で発生すること, が示唆されました。
病原体特異的発現宿主免疫応答遺伝子種アナプラズマと結核菌のキャラクタリゼーション反芻動物感染。
アナプラズマと結核菌種は最も一般的な細菌性病原体欧州 red deer (に対して) 南部のスペインでの間にある、反芻動物における遺伝子発現を変更するのには呼ばれます。この研究では, 我々 マイクロ アレイの交配とリアルタイム RT-PCR 解析におけるアカシカ アナプラズマ ovis と A. ovis/マイコバクテリウムの bovis/マイコバクテリウムここ sub に応答してグローバル遺伝子発現プロファイルを特徴づけるため使用されます。ヨーネ （地図） 感染症, 比較赤鹿 A. ovis、M. bovis と A. ovis/M. bovis/マップ、感染の間の免疫応答遺伝子の発現とウシとアナプラズマまた, 感染牛で red deer で識別される免疫応答遺伝子の発現を特徴付けます。グローバル遺伝子発現 A. ovis - A. ovis/M. bovis/地図に感染した鹿の共通および病原体固有の細胞生物学的プロセスの変更で起因しました。宿主免疫応答遺伝子の発現病原体とホスト固有の署名と多重病原体感染の影響鹿免疫反応を示した。アナプラズマと結核菌属から細胞内細菌感染した反芻動物で同様の遺伝子発現パターンを生成することが示唆されました。ただし、病原体とホスト固有の違いは、反芻動物の病気の診断と治療に貢献できます。
熱ショックと他ストレス応答タンパク質のタイマー刻みで培養ティック細胞アナプラズマ属感染への応答と熱ショックの式。
ダニは、アナプラズマおよび人間および動物の世界に影響を与える他の病原体のベクトルとしてサーブ人間と動物の外部寄生虫です。ダニや彼らが送信病原体彼らの発達と生存を仲介する遺伝的形質の目盛りと病原体を含む分子間相互作用が共同しています。この紙、熱ショック蛋白質 (Hsp) の式および他のストレス応答タンパク質 （SRPs） によって特徴付けられたダニや培養ティック細胞プロテオミクスとトランスクリプトーム解析アナプラズマ属感染と熱ショックに応答しています。これらの研究結果は、ストレス応答のタイマー刻みでアクティブになったし、ティック細胞培養アナプラズマ属菌の感染と熱ショック後実証。ただし、自然のベクトル ・病原菌関係では、Hsp と他 SRPs 強く、ティック ・病原菌の共進化からおそらく起因作動したないです。これらの結果は、また病原体とダニ特異的な差 Hsp と他 SRPs ダニや培養ティック細胞での発現アナプラズマ spp を感染し、アナプラズマ属による感染の目盛り応答を制御する誘導転写機構の存在を示唆を示した。これらの結果は、ダニのストレス応答の複雑さを示す、関数、Hsp と他 SRPs のためアナプラズマ属感染中に示唆されました。
(Boophilus) Rhipicephalus Microplus インフェ ステーションの制御 Subolesin 予防接種やダニ Autocidal コントロールの組み合わせ Subolesin 遺伝子ノックダウンのタイマー刻みで後で牛を飼育しました。
ダニ subolesin 組換え蛋白質を使用してカチカチのインフェ ステーションに対してホストを保護する予防接種試験で示されました。本研究では, subolesin の予防接種とリリース RNA 干渉 （RNAi） による subolesin のノックダウンは (Boophilus) Rhipicephalus microplus の制御に使用することができる後のタイマー刻みの牛のインフェ ステーションをカチカチし、これらのメソッドの組み合わせはいくつかの状況下で牛ダニ制御の有効性を増やすことを示唆を示した。最大の目盛りの制御は、両方のタイマー刻み subolesin ノックダウン後解放し、予防接種は同時に使用されたとき得られました。ただし、結果をモデリング牛寄生マダニの少なくとも 80 ％ subolesin ノックダウン ダニに対応している場合、ワクチンの有効性を増加する可能性が示唆されました。この概念実証試験結果滅菌ダニ手法の有効性を示した (subolesin ノックダウン幼虫の生産を通じていっぱい女性への dsRNA 注入による R. microplus カチカチのインフェ ステーションのコントロールを単独で、または subolesin の予防接種と組み合わせて土)。
ダニとの関連性哺乳類のオリゴ糖ガラクトース-α-1, 3-ガラクトース IgE 抗体の生産をかみます。
2009 年、血清 IgE 抗体はオリゴ糖ガラクトース-α-1, 3-ガラクトース （アルファ-gal) に関連している赤肉を小説の形式の遅延アナフィラキシーを報告しました。これらの患者のほとんど肉以前多くの年を容認していた。いくつかの露出の大人の生活に IgE 抗体の産刺激があったことを意味します。
節足動物の Subolesin/akirin ベクトル インフェ ステーションと病原体の感染制御のための普遍的なワクチンの開発をターゲットに。
疾患による節足動物媒介病原体に人間と動物の健康に大きく影響します。最近の研究は、カチカチの保護抗原ワクチンの開発をデュアル ターゲットの節足動物のインフェ ステーションを制御して病原体のためのベクトル能力を減らすのために使用できること証拠を提供しています。本明細書の見直しとして、媒介種全体の保存性が高い保護の抗原 subolesin/akirin などは節足動物のインフェ ステーションのコントロールと病原体の感染の削減のための普遍的なワクチンの開発に使用のための約束を示します。ただし、さらなる研究はこの目標達成に向けて重要な分野で必要です。
