Translate this page to:
Japanese
In JoVE (1)
Other Publications (5)
Automatic Translation
This translation into Japanese was automatically generated.
English Version | Other Languages
Articles by Katja Schenke-Layland in JoVE
JoVE Bioengineering
ラマン分光法を用いた細胞と細胞外マトリックスの非接触、ラベルフリーの監視
1Department of Thoracic and Cardiovascular Surgery and Inter-University Centre for Medical Technology Stuttgart-Tübingen (IZST), Eberhard Karls University, Tübingen, 2Department of Cell and Tissue Engineering, Fraunhofer Institute of Interfacial Engineering and Biotechnology (IGB) Stuttgart, Germany, 3Department for Medical Interfacial Engineering (IGVT), University of Stuttgart, Germany, 4Institute of Tissue Engineering and Regenerative Medicine, Julius-Maximillians University, Würzburg, Germany
ラマン分光法は、生きた細胞、組織工学の構造とネイティブの組織の非接触、ラベルフリー解析に適した手法です。ソース固有のスペクトル指紋が生成され、多変量解析を用いて分析することができます。
Other articles by Katja Schenke-Layland on PubMed
コラーゲン IV Trophoectoderm マウス胚性幹細胞分化を誘導します。
発育中の胚の系統の初期の分離細胞の内側へのコミットメントですセルの質量や着床前胚盤胞で trophoectoderm。特定の細胞系譜へのコミットメントを制御外因性信号は不完全に理解される;しかし、細胞外の「ニッチ」と細胞外マトリックス特に、幹細胞の発生運命の決定に重要な役割を果たすに示唆されています。コラーゲン IV (ColIV) は、マウスおよびヒト ES 細胞における中胚葉系統への直接の萌芽期の茎 (ES) 細胞分化に報告されています。ES に及ぼす ColIV 細胞の分化を定義して、結果の異種細胞型を識別するには、マイクロ アレイ解析を実行し、グローバル遺伝子の発現を決定します。我々 は、ColIV の中胚葉性遺伝子の特定に造血、内皮細胞, と平滑筋細胞の表現と、驚いたことに、またパネル trophoectoderm 制限マーカーの誘導を観察しました。絨毛細胞分化はコラーゲンになかったこの効果はコラーゲン IV、特定だった私やラミニン, フィブロネクチン。基本的な繊維芽細胞成長因子 (FGF) での刺激や FGF4 trophoectodermal のセルの数を増加しました。これらの細胞は、クローンの条件下での分離し、正常絨毛細胞誘導体のさまざまな差別化されました。興味深いことに、絨毛の血統に ES 細胞の分化上胚フィーダー層を維持 ES 細胞株でのみ見られたし、尾型ホメオ ボックス タンパク質 2 (Cdx2） だった-依存、Cdx2 の仮定された役割に trophoectoderm のコミットメントと一貫性のあります。我々 のデータは、適切な細胞外刺激を与え、trophoectoderm にマウス胚性幹細胞を区別することをお勧めします。この記事の終わりに潜在的な利益相反の開示が見つかった。
プログラムし直されたマウス線維芽細胞、循環器、造血系統の細胞に分化します。
強制的に式の 4 つの転写因子 Oct4, Sox2, C-myc および Klf4 です多能性状態に応じてマウス線維芽細胞ゲノムを与えるのに十分で誘導多能性幹 （iPS） 細胞を生成します。これらの細胞の分化は萌芽期の茎 (ES) 細胞と同等と考えられますが、厳密決定されていないしています。本研究では、iPS 細胞の容量 Flk1 陽性前駆細胞と心血管系および造血系統の細胞を含む彼ら中胚葉の子孫に区別するために識別するために求めた。IPS 細胞由来キメラマウス由来組織の免疫染色 iPS 細胞が心筋細胞、平滑筋細胞, 内皮細胞および造血細胞を in vivo で貢献できることを示した。マウス ES と iPS 細胞の生体外の微分可能性を比較するには、我々 はどちらかセル タイプごとの胚様体 (EB) 形成誘導や細胞培養コラーゲン type IV (ColIV) マウス ES ダイレクトに報告されていた細胞外マトリックス蛋白質の細胞の中胚葉系統への分化。両方心血管および造血マーカーの発現細胞 iPS 細胞分化誘導 EB 形成と ColIV への暴露。ColIV 分化 iPS 細胞前駆細胞と心血管系および造血の分化の能力に含まれるかどうかを判断するには、Flk1 陽性細胞磁気細胞のソーティングによって分離され、機能的心筋細胞、平滑筋細胞, 内皮細胞および造血細胞への分化誘導される特定の分化の条件にさらされました。我々 のデータはマウス iPS 細胞、ES 細胞のような心血管系および造血系統の細胞に分化することができることを実証したがって再生医療のアプリケーションのソースを貴重なセルを表す場合があります。この記事の終わりに潜在的な利益相反の開示が見つかった。
ヒト胚性幹細胞アセンブリを促進する重要な細胞外マトリックスタンパク質の同定
ヒト胚性幹細胞（hESCの）がしっかりと付着し、未分化細胞を含む大規模なコロニーとして存在しています。単一細胞としてhESCの分解が大幅に接着メカニズムはhESCのコロニーの組み立てやメンテナンスのために重要であることを示唆し、彼らの生存と分化に影響を与えます。これらの研究の目的は、アセンブリとhESCの成長を調節する主要な細胞外マトリックス（ECM）成分を決定することであった。我々の研究は、未分化hESCのはラミニン（ラミニン-511）とナイドジェン-1の特定のサブタイプを発現していることを示しています。 hESCの単細胞懸濁液へのヒトラミニン-511とナイドジェン-1で構成される精製されたタンパク質複合体の添加は、マウス胚線維芽細胞、または外因性の化学物質の不在下でhESCのアセンブリを復元するのに十分である。 hESCの凝集のメカニズムは非常に未分化hESCの膜に発現しalpha6beta1インテグリン受容体の結合を介してであり、集約はalpha6に対する抗体によって阻害され、ほぼ完全にbeta1のサブユニットに対する抗体によってブロックされることがあります。再構築ラミニンナイドジェン複合体のhESCの精製定義された番号の内胚葉、外胚葉、中胚葉誘導体に分化する、とhematoendothelial前駆体を生成する際に非常に効率的である均一な胚様体（EB）を（ "LN-EBS"）の一貫生産を可能にします。これらのデータは、初めてのECMタンパク質ラミニン-511およびhESCのアセンブリ内のナイドジェン-1の重要な役割を明らかにし、xenogenフリー微小でhESCの分化を調査するための新しい実用的なツールを提供しています。
同所性同種肺羊モデルにおける無氷凍結保存した心臓弁同種移植のパフォーマンス。
凍結保存した心臓弁 （同種移植片) 移植は、免疫反応、炎症、後続の構造劣化と高価なインフラストラクチャによって制限されます。以前の研究では従来の冷凍凍結保存 (FC) の細胞外マトリックス (ECM) 構造深刻の変化を伴うですを示した。観測された損害の主な原因として氷結晶の形成が確認されました。本研究の目的はアプリケーション原則凍害保護作用の動物や植物、心臓弁の無氷凍結保存 (IFC) で発生する自然の中で観察だった。バルブは、IFC を使用して、処理および cryoprotectant の定式化 (-124 度 C) のガラス転移温度以上格納されている任意の氷の形成、組織ガラスの割れ、ECM を維持を避けるために摂氏いた。羊の同所性同種肺位置注入後は優れた血行動態に翻訳する重大な ECM-コンポーネント エラスチンやコラーゲンなどを維持しながら IFC の携帯無料行列では、結果を示します。対照的に、FC バルブ in vivo 復元されませんでした ECM 損傷と重要な尖肥厚と間質の T 細胞の炎症反応を示したことを明らかにします。IFC は現在適用されて FC の練習に比較して保存、保管、出荷のためのインフラのニーズも削減。これらの結果は、長期的な機能とコストの削減の約束を含む臨床弁移植の重要な含意があります。
ヒト胚性幹細胞の分化中胚葉へのコミットメントの第一段階のマッピング
中胚葉性組織がどのように形成されるかについての我々の理解は、初期中胚葉のコミットメントの具体的かつ信頼性の高いマーカーの有無によって制限されていました。遺伝子発現プロファイリングによって、細胞表面タンパク質の発現の逆数の変化によって示されるように我々は、ヒト胚性幹細胞（ヒトES細胞）から中胚葉のコミットメントは、上皮から間葉移行（EMT）によって開始されEpCAM/CD326とNCAM/CD56を報告する。分子と機能的なアッセイは、アクチビンA、BMP4、VEGF、およびFGF2の存在下でヒトES細胞から生成された最古のCD326-CD56 +細胞は、多能性中胚葉コミット前駆細胞集団を表すことを明らかにした。 CD326-CD56 +前駆細胞ヒトES細胞の多能性を欠いている一方、造血内皮細胞、間葉系（骨、軟骨、脂肪、線維芽細胞）、平滑筋、および心筋細胞を含むすべての中胚葉系列を生成する能力内で一意です。 CD326-CD56 +細胞は、以前に報告され、より多くの系統制限された中胚葉前駆細胞の前駆体である。これらの知見は、生殖細胞層の仕様が規制されてどのように勉強し、組織工学のための有望な標的を提供するユニークなアプローチを提示します。
