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Articles by Kimberly P. Keil in JoVE
JoVE General
Un débit élevé In situ pour caractériser les modes d'expression d'ARNm dans les fœtus de souris tractus urogénital
Ici, nous décrivons un débit à haute efficacité
Other articles by Kimberly P. Keil on PubMed
Un Atlas Haute Résolution Moléculaire De La Parcelle De Fœtus De Souris Basse Génito-urinaire
Épithélium-stroma interactions dans la partie inférieure du tractus urogénital (LUT) sont partie intégrante du développement des vésicules séminales de la prostate et chez les hommes, le développement du vagin et l'utérus chez les femmes, et le développement urétral chez les deux sexes. Profilage de l'expression génique du stroma et l'épithélium isolé LUT a démêlé les mécanismes de développement LUT, mais ces études sont confondus par la cellule hétérogène et mal défini des sous-populations contenues dans chaque compartiment de tissu. Nous avons utilisé l'hybridation in situ pour synthétiser une haute résolution moléculaire atlas de 17 jours post-coït LUT fœtus de souris. Nous avons identifié les ARNm que les populations cellulaires sélectifs marque de la vésicule séminale, canal éjaculateur, de la prostate, l'urètre et du vagin, de subdiviser ces tissus en 16 stromales et épithéliales 8 sous-compartiments. Ces résultats constituent un outil puissant pour la cartographie des schémas LUT d'expression de gènes et révèlent aussi non caractérisée sous-compartiments qui peuvent jouer un rôle dans le développement mécanistes LUT dont nous avions conscience auparavant.
Atlas De L'expression Génique Wnt Et R-spondine Dans Le Tractus Souris Homme Développement Basse Génito-urinaire
De la prostate développement est influencé par β-caténine, mais il est difficile de savoir quels β-caténine activateurs sont impliqués, où ils sont synthétisés, et si leur abondance de l'ARNm est influencée par les androgènes. Nous avons identifié WNT / β-caténine sensible β-galactosidase dans la partie inférieure du tractus urogénital (LUT) de souris transgéniques journaliste, mais β-galactosidase activité différait entre les quatre souches de souris que nous avons examinés. On utilise l'hybridation in situ à comparer les modèles de Wnts, r-spondines (Rspos, des co-activateurs de β-caténine), β-caténine réagissant à ARNm, et un androgène récepteur réagissant ARNm de type foetal mâle sauvage, femelle foetal, et LUT néonatale masculine. La plupart des ARNm Wnt et RSPO étaient présents dans LUT au cours du développement de la prostate. Profils d'expression sexuellement dimorphes ont été observés pour WNT / β-caténine sensible gènes, et pour Wnt2b, Wnt4, Wnt7a, Wnt9b, Wnt10b, Wnt11, Wnt16, et Rspo3 ARNm. Ces résultats révèlent des différences sexuelles dans la signalisation Wnt / β-caténine dans LUT fœtale, soutenant l'idée que cette voie peut être directement ou indirectement sensibles aux androgènes au cours de la prostate canalaire développement.
