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Articles by Kristen Werner in JoVE
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ショウジョウバエ幼虫NMJ免疫組織化学
このプロトコルは、解剖さショウジョウバエの幼虫の免疫組織化学を実行する方法を示しています。
Other articles by Kristen Werner on PubMed
タバコの煙は、後期橋と正常細胞のゲノムの不均衡を誘導します。
タバコの煙への暴露は長く発癌にリンクされていますが、煙の発がん性によって引き起こされる DNA シーケンスにおける変異の変化を重視しました。ここでは、タバコの煙曝露細胞における染色体異常に貢献することの追加の役割は、報告します。タバコの煙凝縮 (CSC) 後期橋は短時間でゲノムの不均衡に導くひと培養細胞の誘導を発見しました。誘導ブリッジ全体の人口内の周波数が減少する時間をこの減少は p53 を介したアポトーシス経路に依存しません。また、培養細胞および精製された DNA に CSC DNA 二重鎖切断 （Dsb） を誘導することを示します。活性酸素種 (ROS) スカベン ジャー、2' デオキシグアノシン 5'-モノリン酸 (dGMP) を防ぎます CSC 誘起の偏向、後期ブリッジ形成とゲノムの不均衡。したがって、CSC が橋と発がん経由のゲノムの不均衡を誘導することを提案する.さらに、カルチャに追加 CSC の量は、単一のたばこから抽出よりはるかに小さいだったので、我々 の結果培養細胞の染色体の憲法で不可逆的な変化原因できますタバコの煙のも低レベルを表示します。
骨髄系樹状細胞に応答して UV 不活化ウイルス産生するインターフェロン初期アルファ/ベータでは、ウイルス エントリとインターフェロン制御因子 3 がない MyD88 が必要です。
アルファ/ベータ インターフェロン （IFN-α/β) は、キーのメディエーターの自然免疫と適応免疫の重要変調器です。どちらの IFN-α/β によってメカニズムに起因しているますますよく理解になっています。最近の研究は、Toll 様受容体 7 と形質細胞様樹状細胞 (Pdc) を示した 8 エンドソーム認識骨髄分化因子 88 (MyD88) を必要とするプロセスの受信のウイルス RNA ゲノムを仲介することを示した。ここでウイルス誘発骨髄由来のマウス骨髄性 Dc (Mdc) の IFN-α/β 生産文化のための要件を調査します。組換えセムリキ森林ウイルス ウイルスのライフ サイクルで複数のステップにはブロックを使用して、融合不良ウイルス IFN-α/β 誘導されなかった一方そのレプリケーション欠陥ウイルス IFN-α/β Mdc で誘導される. します。レプリケーション欠陥のあるウイルスへの応答は、MyD88/mDC の文化で大部分はそのままだったが厳しく mDC の文化では IFN 規制要因 3 に欠けているマウスから減少しました。我々 の観察は Mdc の Pdc の IFN-α/β の誘導について説明した融合に依存しない、MyD88 を介したエンドソーム経路と異なる経路を介した着信ウイルスに応答することをお勧めします。イベント中または下流のウイルス融合ですがレプリケーションの前 IFN-α/β Mdc でアクティブにできることを提案します。したがって、Mdc は感染後早い時点での免疫システムによってアクティブに抗ウイルス応答に貢献するかもしれない。
ショウジョウバエのシナプス形成の変異体のゲノムワイドなP-エレメントの画面
シナプス形成の分子的理解は、脳は、開発と経験の間に、 "自分自身を結びつける"とし、 "ReWireを"どのように理解することの目標に向かって重要なステップです。最近のゲノムと分子の進歩は、ゲノム規模でのシナプス形成を研究することが可能になりました。ここでは、グルタミン酸作動性ショウジョウバエの神経筋接合部（NMJ）の形成と発展に関与する遺伝子の画面の結果を説明します。我々は、全体のショウジョウバエのゲノムの約16％で、挿入を表す2185年のP要素のトランスポゾン変異株をスクリーニングした。まず、シナプス形成に深刻な混乱を引き起こす変異は致死である可能性が高いという仮説に基づいて、劣性致死変異を同定した。すべての挿入の二百20（10％）がホモ接合体致死であった。少なくとも後期胚発生、形成された神経筋肉組織を通じて開発これらの致死的な変異体の二百五（93％）。我々は、免疫細胞化学と共焦点顕微鏡を使用して、これらのホモ接合変異体202内に胚/幼虫NMJsを検討した。我々は、変化したNMJの形態で88の変異体を同定し、分類した。これらの変異体の挿入遺伝子は、ATPとGTPアーゼ、細胞骨格調節因子、細胞接着分子、キナーゼ、ホスファターゼ、RNAレギュレータ、タンパク質形成の調節因子、転写因子、およびトランスポーターを含むタンパク質のいくつかの異なるタイプをエンコードします。挿入の13％は、新規または未知の関数のタンパク質をコードする遺伝子である。相補性試験およびRT-PCRアッセイは、挿入行の約51％は、バックグラウンドの変異を運ぶことをお勧めします。ゲノム全体のおそらく同じくらいの44％ - - とトランスポゾンmutagenesesは、解釈の結果はこの方法を使用して生成したときに尊重されなければならない重要な注意事項を運ぶことが我々の結果はそのシナプス形成は、タンパク質の多くの異なる種類の協調行動を必要と明らかにした。
