Translate this page to:
German
In JoVE (1)
Other Publications (1)
Automatic Translation
This translation into German was automatically generated.
English Version | Other Languages
Articles by Leah Fohl Villegas in JoVE
JoVE Immunology and Infection
Eine Änderung, die EPA-Methode 1623 Tangential Flow Hohlfaser-Ultrafiltration und Wärme Dissoziationsstufen nutzt, um auf Wasserbasis Detect
1National Exposure Research Laboratory, Office of Research and Development, US Environmental Protection Agency, 2Shaw Environmental & Infrastructure, 3Office of Ground Water and Drinking Water, US Environmental Protection Agency
Dieses Protokoll beschreibt die Verwendung einer Tangentialströmungs-Hohlfaser-Ultrafiltration Probenkonzentration und eine Wärme Dissoziation als alternative Schritte zum Nachweis von wässrigen
Other articles by Leah Fohl Villegas on PubMed
Mit Quantitative Reverse-Transkriptase-PCR Und Zelle-Kultur-Plaque-Proben Widerstand Von Toxoplasma Gondii Oozysten Zu Chemischen Sanitizers Zu Bestimmen
Toxoplasma Gondii Oozysten sind sehr widerstandsfähig gegen viele chemische Sanitizers. Methoden zur Bestimmung der Oozyste Infektiosität haben in erster Linie auf Maus, Huhn und katzenartige Bioassays verlassen. Obwohl Gold Standards, bieten sie nur eine qualitative Bewertung der Oozyste Lebensfähigkeit. In dieser Studie wurden zwei alternative Ansätze entwickelt, um tragfähige T. Gondii Oozysten nach Behandlung mit mehreren gemeinsamen Sanitizers Quantifizierung. Die erste ist eine quantitative Reverse Transkriptase Echtzeit-PCR (RT-qPCR) Assay gezielt die Gene ACT1 und SporoSAG um tragfähige T. Gondii Oozysten aufzulisten. RT-qPCR C(T) Werte zwischen Wescodyne(R), gesäuerte Ethanol oder wärmebehandelt Oozysten waren nicht signifikant im Vergleich zu unbehandelten Kontrollen. Behandlung mit Formalin oder Clorox(R) führte hingegen eine Verringerung 2-log(10) C(T) Werte. Ein in-vitro-T. Gondii Oozyste Plakette Assay (TOP-Assay) wurde auch entwickelt, um Oozyste Lebensfähigkeit zu messen. Diese Probe verwendet eine Kombination aus Perlen-Fräsen und Galle Verdauung, gefolgt von der Kultivierung der Excysted Sporozoites in einem konfluierende Fibroblast Zellen Monolage. Ergebnisse zeigten, dass keine signifikante Verringerung der Sporozoite Lebensfähigkeit in angesäuertem Äthanol festgestellt oder Wescodyne(R) behandelt Oozysten während mindestens einem 2-log(10) Rückgang der Plaketten gebildet mit Clorox(R) beobachtet wurde behandelt Oozysten. Darüber hinaus führte Formalin oder Wärmebehandlung von Oozysten in mindestens einem 5-log(10) Rückgang der Plaketten gebildet. Diese Studie zeigt, dass eine mRNA basierende PCR Entwicklungsfähigkeit-Probe ACT1 oder SporoSAG Gene targeting eine relativ rasche Technik im Vergleich zur in-vitro- und in-vivo-Tests. Darüber hinaus erwies sich der TOP-Assay, sehr effektiv und sensibler auf die Quantifizierung der Oozyste Rentabilität im Vergleich zu tierischen Bioassays.
