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PMS2 insuffisantes, ERCC1, Ku86, CCOI des défauts sur le terrain pendant la progression du cancer du colon


JoVE 1931 7/28/2010

1Department of Cell Biology and Anatomy, College of Medicine, University of Arizona, Tucson, 2Southern Arizona Veterans Affairs Health Care System, Tucson, AZ, 3Department of Surgery, College of Medicine, University of Arizona, Tucson, 4Biomedical Diagnostics and Research, Tucson, AZ, 5Department of Medicine, College of Medicine, University of Arizona, Tucson

Expression réduite / absent du PMS2 et / ou ERCC1 dans des cryptes entière est un événement fréquent dans les 10 cm de chaque côté d'adénocarcinomes du côlon, probablement la base d'une anomalie du champ avec la mutabilité élevée et la progression vers le cancer. La carence en Ku86 ou CCOI est beaucoup moins fréquent dans ces anomalies du champ.

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Périls De L'immunohistochimie: Variabilité Coloration Spécificité De Disponibles Dans Le Commerce De La COX-2 Anticorps Sur Les Tissus Du Côlon Humain

Nous avons évalué les tendances coloration immunohistochimique (IHC) de trois disponibles dans le commerce de la COX-2 anticorps dans les tissus humains. L'emplacement de positif tache dans séquentielles série 4-mu sections de formol, des tissus inclus en paraffine différaient considérablement. Les motifs fluorescents variait de cytoplasmique diffuse de la coloration périnucléaire occasionnelle. Ainsi, la variabilité de la coloration marquée des résultats de l'utilisation de différents anticorps, il est donc important de considérer l'anticorps utilisé lorsque l'on compare les rapports de la COX-2 coloration des enquêteurs différents.

Désoxycholate, Un Promoteur De Tumeur Endogène Et Agent Endommageant L'ADN, Module BRCA-1 Expression De L'apoptose-sensibles Cellules épithéliales: Perte De BRCA-1 Expression Dans Les Adénocarcinomes Du Côlon

Désoxycholate, un cadeau des sels biliaires à des niveaux élevés dans la lumière colique des individus sur un régime alimentaire riche en matières grasses, est un promoteur de cancer du côlon. Désoxycholate cause également des dommages d'ADN. BRCA-1 fonctions de réparation de l'ADN et dans l'induction de l'apoptose. Nous montrons que, lorsque les cellules en culture d'origine colique sont exposés au désoxycholate à différentes concentrations, BRCA-1 l'expression est induite à une faible concentration non cytotoxique (10 microM), mais est fortement inhibée à des concentrations plus élevées cytotoxiques (> ou = 100 microM). Indication de la phosphorylation du gène BRCA-1 par le désoxycholate (100 microM) à une dose plus faible a été observée par l'analyse Western blot, tandis que, à une dose plus élevée, le désoxycholate (200 et 300 microM) a causé une perte complète de l'expression du gène BRCA-1. Nous montrons que BRCA-1 est nettement plus faible dans les adénocarcinomes du côlon de cinq patients par rapport aux tissus du côlon associé non-néoplasique chez les mêmes patients, ce qui suggère que la perte du gène BRCA-1 expression contribue au phénotype malin. Dans le tissu du côlon non-néoplasique, BRCA-1 a été localisée dans les cellules nongoblet. Nos résultats impliquent que l'expression réduite du gène BRCA-1 peut être associé à un carcinome du côlon.

L'expression Accrue Et La Sécrétion De L'interleukine-6 ​​chez Les Patients Atteints De L'oesophage De Barrett

L'œsophage de Barrett (BE) est une lésion précancéreuse commune de la partie distale de l'œsophage qui se pose comme une conséquence du reflux duodenogastroesophageal chronique. L'interleukine (IL) -6 est une cytokine pléiotropique qui régule les mécanismes de défense immunitaire et l'hématopoïèse. En outre, l'IL-6 peut également être impliqué dans la transformation maligne et la progression tumorale. IL-6 a été montré pour inhiber l'apoptose. L'objectif principal de cette étude était d'évaluer l'expression de l'IL-6 en BE aux niveaux de protéines et d'ARNm. En outre, nous avons testé si les protéines qui sont associées à l'IL-6 de signalisation, de transduction de signal phosphorylée et activateur de la transcription 3 et deux protéines anti-apoptotiques, Bcl-x (L) et Mcl-1, sont également exprimés dans les mêmes tissus.

Résistance à L'apoptose Dans L'oesophage De Barrett: Essais Biologiques Ex Vivo De Tissus Vivants Stressés

L'œsophage de Barrett (BE) est une lésion précancéreuse de l'oesophage distal dans lequel cellules épithéliales squameuses sont remplacés par métaplasique intestinale semblable à l'épithélium cylindrique qui contient des cellules caliciformes. Les facteurs qui contribuent à la progression de la muqueuse épidermoïde normal d'être, la dysplasie de Barrett et l'adénocarcinome sont pas bien compris au niveau moléculaire. Depuis le reflux des acides biliaires est associée à BE développement, nous pensons que les cellules avec un phénotype résistant apoptose sont sélectionnés après une longue exposition répétée à des impulsions d'acides biliaires. Cela se traduira par la survie des cellules avec lésions de l'ADN non réparés, et une augmentation conséquente de l'instabilité génomique conduisant à la progression du cancer. L'objectif principal de cette étude est de comparer la sensibilité à l'apoptose induite par l'acide biliaire, le désoxycholate (DOC), un inducteur connu de l'apoptose, dans l'épithélium pavimenteux normal de l'œsophage, l'épithélium du côlon normal, et BE.

Unique Modèle De Souris Liées Au Régime Alimentaire De La Colite

Un régime alimentaire riche en matières grasses est un facteur de risque pour le développement de la maladie inflammatoire de l'intestin (MICI) chez les humains. Désoxycholate (DOC) est augmentée dans le contenu du côlon en réponse à un régime alimentaire riche en matières grasses. Ainsi, un niveau élevé de DOC dans la lumière colique peut jouer un rôle dans le cours naturel du développement des MII.

Réduction PMS2 Expression En Non-néoplasique Muqueuse Plane De Patients Atteints De Cancer Du Côlon Est En Corrélation Avec La Compétence Apoptose Réduite

PMS2 protéine est un composant de la réparation des mésappariements d'ADN complexe chargé à la fois pour le post-réplication de correction d'mispairs nucléotidiques d'ADN et pour les premières étapes de l'apoptose. Les mutations germinales dans les gènes de réparation des mésappariements d'ADN donner lieu à un cancer du côlon héréditaire sans polypose, qui représente environ 4% des cancers du côlon. Cependant, peu est connu sur l'expression des protéines de réparation des mésappariements par rapport au cancer du côlon sporadique, qui représente la grande majorité des cancers du côlon. De multiples échantillons ont été prélevés dans la muqueuse non néoplasique plat de résections du côlon chez des patients sans néoplasie colique, un adénome tubulo, ou un adénocarcinome. Expression de PMS2 a été évalué par immunohistochimie semi-quantitative. L'apoptose a été évaluée dans les sections époxy polychrome colorées à l'aide des critères morphologiques. Les échantillons provenant de patients sans néoplasie colique modérée à forte coloration pour PMS2 dans les noyaux cellulaires à la base des cryptes, tandis que les échantillons de 2 des 3-points avec un adénome tubulo, et à partir de 6 des 10 colons avec les adénocarcinomes, a montré réduite PMS2 expression. Les échantillons provenant de patients atteints d'un adénocarcinome qui ont réduit l'expression PMS2 également montré la capacité de réduire l'apoptose dans des échantillons de tissus à proximité, comme en témoigne lorsque ce tissu a été souligné jumelé ex vivo avec de l'acide biliaire. Réduction PMS2 expression dans la muqueuse colique peut être une étape précoce dans la progression vers le cancer du côlon. Cette réduction peut entraîner de réparation des mésappariements diminué, augmenté l'instabilité génétique, et / ou réduction de la capacité apoptotique. Détermination immunohistochimique de l'expression PMS2 réduite, sur des tests supplémentaires, peut se révéler être un biomarqueur prometteur précoce du risque de progression vers la malignité.

L'expression Anormale De Biomarqueurs Dans Ablation Incomplètement Le œsophage De Barrett

Le but de cette étude était d'évaluer l'expression de cancer associés aux risques biomarqueurs dans l'épithélium cylindrique à la jonction pavimento-cylindrique produites par une ablation procédure et proton inhibiteurs de la pompe chez les patients d'oesophage (BE) de manière incomplète roussis Barrett qui étaient nondysplastic avant l'ablation.

Les Acides Biliaires Dans Combinaison à Faible PH Induire Un Stress Oxydant Et Des Dommages Oxydatifs à L'ADN: Pertinence De La Pathogenèse De L'oesophage De Barrett

L'oesophage de Barrett est une affection précancéreuse associée à un risque accru pour le développement de l'adénocarcinome oesophagien (ADCA). Des études antérieures ont indiqué que les dommages oxydatifs contribue au développement de ADCA.

Activation De La Voie Anti-apoptotique Dans Les Cellules Interleukin-6/STAT3 Oesophagiennes Par Les Acides Biliaires Et Un PH Bas: Pertinence De L'oesophage De Barrett

Les facteurs moléculaires qui contribuent au développement de l'oesophage de Barrett (BE) ne sont pas claires. Nos études antérieures ont montré que BE tissus sécrètent de l'interleukine-6 ​​(IL-6) et expriment des protéines associées à l'IL-6 de signalisation, y compris les récepteur IL-6, de transduction de signal activé et les activateurs de la transcription 3 (STAT3), et des protéines anti-apoptotiques Bcl-x (L) et Mcl-1. Ici, nous testons l'hypothèse que les acides biliaires et les acides gastriques, deux composantes de reflux associés à la maladie de reflux, les gastresophageal activer la voie IL-6/STAT3.

Expression De L'acide Biliaire Le Transport Des Protéines Dans L'oesophage De Barrett Et L'adénocarcinome Oesophagien

L'œsophage de Barrett (BE) est une lésion métaplasique caractérisée par le remplacement de l'épithélium pavimenteux normal par un épithélium cylindrique intestinal contenant des cellules caliciformes. Il est spéculé que ce processus est une adaptation pour protéger les cellules à partir de composants de reflux, comme l'acide gastrique et les acides biliaires. Contrairement à l'épithélium pavimenteux normal, les entérocytes de l'iléon distal sont adaptés pour le transport des acides biliaires dans la lumière intestinale. Plusieurs transporteurs d'acides biliaires sont utilisés pour une élimination efficace des acides biliaires, comprenant le apicale dépendant du sodium transporteur des acides biliaires (asbt), l'acide biliaire iléal protéine de liaison (IBABP), et la protéine multirésistante 3 (MRP3). Nous émettons l'hypothèse que l'une des fonctions possibles de nouveaux découlant épithélium métaplasique, dans l'œsophage, est de transporter des acides biliaires. Notre principal objectif était d'évaluer l'expression des transporteurs des acides biliaires dans l'épithélium pavimenteux normal, BE avec différents degrés de dysplasie et adénocarcinome de l'oesophage (EAC).

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