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Articles by Mary Jean See in JoVE
JoVE Immunology and Infection
取得高纯度弓形虫卵囊
1Dynamac, Inc., 2Department of Biological Sciences, University of Cincinnati, McMicken College of Arts and Science, 3Animal Parasitic Disease Laboratory, Agricultural Research Service, U.S. Department of Agriculture, 4National Exposure Research Laboratory, US Environmental Protection Agency
这项研究描述了修改后的铯的方法，可以轻松地净化适用于分子生物学和组织培养操作感染的猫粪的弓形虫卵囊的发展
Other articles by Mary Jean See on PubMed
使用定量逆转录聚合酶链反应和细胞培养菌斑检测以确定对化学杀菌剂厕弓形虫虫卵的抗性。
弓形虫虫卵有高度抗药性很多化学杀菌剂厕。用于确定卵囊感染力的方法主要依赖于鼠标、 鸡和猫的生物鉴定。虽然认为黄金标准，但它们只提供卵囊活力的定性的评估。在这项研究，制定了两种备选方法，量化后治疗几种常见的杀菌剂厕的可行 T.虫虫卵。首先是针对 ACT1 和 SporoSAG 基因来枚举可行 T.虫虫卵定量逆转录酶实时聚合酶链反应 (RT-qPCR) 检测。RT qPCR C(T) 值 Wescodyne(R)、 酸化的乙醇或热处理虫卵囊之间差别不大而未经处理的控件。相比之下，用福尔马林或 Clorox(R) 治疗导致的 C(T) 值 2-log(10) 减少。此外制定了体外的 T.虫囊空斑试验 （顶部测定)，以衡量卵囊活力。这种测定方法使用珠铣削和胆汁消化，其次是 excysted 虫子在合流的成纤维细胞单层培养的组合。结果显示酸化乙醇中，检测到的子孢子活力没有显著减少或 Wescodyne(R) 治疗虫卵虽然至少 2-log(10) 减少斑块形成中的有人指出与 Clorox(R) 治疗虫卵。此外，福尔马林或热处理的虫卵囊导致至少 5-log(10) 减少斑块形成。这项研究表明基于 mRNA 的可行性 pcr 针对 ACT1 或 SporoSAG 基因是相对快速的技术相比，在体外和体内检测。此外，顶部测定证明非常有效和敏感量化卵囊活力与动物生物鉴定相比。
确定使用的细胞培养和小鼠生物测定紫外线灭活的弓形虫虫卵。
弓形虫虫卵对紫外线照射的影响尚未完全定义用于水消毒。这项研究的三种检测方法评价紫外线照射虫卵： SCID 小鼠生物测定、 体外 T.虫囊斑 （顶部） 检测和定量逆转录聚合酶链反应 (RT-qPCR） 实时检测。从动物的生物测定结果显示该 1 和 3-log(10) 的灭活分别取得 4 mJ/cm(2) UV、 10 mJ/cm(2) 低压 UV、。顶部测定的结果，但不是 RT qPCR 的结果，也与生物测定结果关联。最后，T.虫虫卵 3-log(10) 灭活通过 10-mJ/cm(2) 低压紫外线和体外顶部测定是有希望的替代鼠标生物测定。
中空纤维超滤主浓度的病原体和病毒从水中等浓度的评价。
切向流中空纤维超滤 （HFUF） 是病毒和隐孢子虫孢子浓度从水评估。病毒在低滤过率恢复被发现是明显要比在较高的滤过率，回收率的噬菌体 MS2 在高、 低过滤率所示分别为 64.7%和 98.7%。脊髓灰质炎病毒恢复从自来水过滤的率高和低，分别是类似于 MS2，与恢复的 62.9%和 104.5%。C.孢子，只有在高滤水率测试了平均恢复为 105.1%。除了主浓度技术的优化，这项研究还比较中等浓度的几个步骤。牛肉提取物硅藻土方法都使用了和这种病毒从磷酸盐缓冲盐水，ph 值 9.0 硅藻土洗脱时，将获得从自来水精矿最高回收 (89.5%) 脊髓灰质炎病毒的传播。HFUF 主要集中和优化中等浓度方法结合使用时，平均恢复 97.0 ± 35.6%或 89.3 ± 19.3%，根据穗级别，实现脊髓灰质炎病毒的传播。这项研究表明 HFUF 主要集中方法是有效的 MS2、 脊髓灰质炎病毒和 C.孢子回收大量水牛肉提取物硅藻土方法是有效的中等浓度脊髓灰质炎病毒测试方法 》。
