Translate this page to:
German
In JoVE (1)
Other Publications (1)
Automatic Translation
This translation into German was automatically generated.
English Version | Other Languages
Articles by Matthew L. Fowler in JoVE
JoVE General
Direkter Nachweis der Acetat-bildenden Aktivität des Enzyms Acetat-Kinase
Department of Genetics and Biochemistry, Clemson University
Eine Methode zur Bestimmung von Acetat-Kinase-Aktivität beschrieben. Dieser Assay nutzt eine direkte Reaktion zur Bestimmung der Enzymaktivität und die Kinetik der Acetat-Kinase in die Acetat-bildenden Richtung mit unterschiedlichen Phosphoryl Akzeptoren. Darüber hinaus kann diese Methode für die Untersuchung auf andere Acetyl-Phosphat-oder Acetyl-CoA-Enzyme verwendet genutzt werden.
Other articles by Matthew L. Fowler on PubMed
Die Anti-trypanosomale-Agent-Lonidamine Hemmt Trypanosoma Brucei Hexokinase 1
Glykolyse ist entscheidend für die Parasitäre Protozoen Trypanosoma Brucei. Der erste Schritt in dieser Stoffwechselweg ist durch Hexokinase, ein Enzym vermittelt, das die Gamma-Phosphat von ATP auf eine Hexose überträgt. T. Brucei Genom (TREU927/4 GUTat10.1) kodiert für zwei Hexokinases (TbHK1 und TbHK2), die 98 % identisch auf die Aminosäure-Niveau sind. Unsere bisherigen Bemühungen haben ergeben, dass TbHK2 ein wichtiger Regulator des TbHK1 im prozyklischen Form Parasiten. Hier fanden wir durch RNAi, dass TbHK1 der Blutstrom Form Parasit wesentlich ist. Unterdrückender das Gen für 4 Tage reduziert zellulare Hexokinase ca. 60 % und führt zum Tod des Parasiten. Darüber hinaus haben wir festgestellt, dass das rekombinante Enzym durch Lonidamine gehemmt (IC (50) = 850 MicroM), ein Krebsmedikament, das Ziel der Tumor Hexokinases. Dieser Agent hemmt auch HK-Aktivität von ganzen Parasiten lysate (IC (50) = 965 MicroM). Lonidamine ist giftig für kultivierten Blutstrom Form Parasiten (LD (50) = 50 MicroM) und prozyklische Form Parasiten (LD (50) = 180 MicroM). Interessant ist, schützt eine Überexpression von TbHK1 PF Parasiten von Lonidamine. Diese Studien liefern genetischen Beweis, dass TbHK1 ein gültiges therapeutische Ziel ist gleichzeitig eine mögliche Molekulare Zielgruppen der Anti-trypanosomale-Agent-Lonidamine kennzeichnen.
