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Articles by Maya Sieber-Blum in JoVE
JoVE General
Ratón epidérmico de la cresta neural de células madre (EPI-NCSC) Culturas
1Institute of Human Genetics and Northeast England Stem Cell Institute, Newcastle University, 2Department of Cell Biology, Neurobiology and Anatomy, Medical College of Wisconsin
Aquí mostramos nuestro método para aislar la epidermis del ratón las células nerviosas troncales de la cresta (EPI-NCSC). Técnica consiste en micro-disección de folículos bigotes, aislar el bulto y placeing que en el cultivo de tejidos. EPI-NCSC comienzan a emigrar a partir de explantes bulto en el sustrato dentro de 3 a 4 días.
Other articles by Maya Sieber-Blum on PubMed
Origen De La Cresta Neural De Células De Merkel De Mamíferos
Aquí, nos proporcionan la evidencia para el origen de la cresta neural de células de Merkel de mamíferos. Junto con los terminales nerviosos, Merkel células mecanorreceptores cutáneos lentamente adaptándose de forma que transducen la sangría constante en piel peluda y glabra. Hemos determinado el origen ontogenético de células de Merkel en ratones transgénicos compuestos de Wnt1-cre/R26R, en el que las células de la cresta neural están marcadas indeleblemente. Células de Merkel en bigotes y ubicaciones interfolicular expresan el transgén, beta-galactosidasa, identificándolos como descendientes de la cresta neural. Por lo tanto Concluimos que murino células de Merkel se originan de la cresta neural.
Violeta Cristal Combinado Con Merocyanine 540 Para El Ex Vivo Purga De Injertos De Células Madre Hematopoyéticas
El propósito de este estudio fue determinar en un modelo preclínico de purga, cómo es eficaz terapia fotodinámica mediada por violeta cristal (CV-PDT) contra tumores sólidos y células tumorales mutante resistente a los medicamentos, y si ciertas limitaciones de CV-PDT pueden superarse mediante el uso de cristal violeta (CV) en combinación con la membrana activa fotosensibilizador, 540 Merocyanine (MC540). Cuando se utiliza bajo condiciones que conservan una fracción adecuada de progenitores de granulocitos/macrófago humano normal (CFU-GM), CV-PDT han podido lograr reducciones significativas de DU145 próstata, cáncer de pulmón de células pequeñas H69 y las células de cáncer de pecho MDA-MB-435S. Melfalán-resistente L1210/L-PAM1, adriamycin-resistentes P388/ADR y resistente a la adriamicina HL-60/ADR leucemia células eran notablemente menos sensibles al CV-PDT que sus contrapartes de tipo salvaje, mientras que las células H69/CDDP cisplatina-resistentes eran más sensibles que las células wild-type H69. Exposición secuencial a MC540 - y CV-PDT bajo condiciones que conserva una fracción adecuada (73% y 29%, respectivamente) de células hematopoyéticas normales de CD34 positivas y granulocito/macrófagos progenitores era altamente eficaz contra H69 (99.997% reducción) y H69/CDDP (reducción de 99.999%) las células, pero ineficaces contra las células HL-60/ADR, MDA-MB-435S y DU145. CV así demuestra solamente limitada promesa como agente único-modalidad purga. Sin embargo, en ciertas situaciones, agotamientos de células de tumor clínicamente significativas pueden obtenerse mediante el uso de CV en combinación con un segundo fotosensibilizador como MC540.
Ontogenia Y Plasticidad De Las Células Madre Neuronales Hipocampales Adultas
Hemos investigado el origen ontogenético y el grado de plasticidad de las células madre neuronales hipocampales adultas. Wnt1-expresando las células se encuentran en el aspecto dorsal del tubo neural embrionario y algunos de ellos son predestinados para dar lugar a células de la cresta neural. Considerando que la mayoría de las células madre neuronales hipocampales adultas no originan de las células que expresan Wnt1, un subconjunto express Wnt1 transitorio durante la embriogénesis, según lo determinado en el ratón transgénico doble, Wnt1-cre/R26R. Hippocampal células madre de adultos ROSA 26 ratones se diferencian en condrocitos, melanocitos (células pigmentarias) y las células musculares lisas cuando cocultured con cresta neural células de embriones de codorniz. Estímulos generados por células de cresta neural tienen un corto alcance de acción y se reconocen a todas las especies. Estas observaciones proporcionan la evidencia de la heterogeneidad en la piscina de células neuronales hipocampales en cuanto a expresión de Wnt1. Además, presentan plasticidad y una notable variedad de opciones de desarrollo de las células madre hippocampal.
Neurotrofina-3 Señalización En Desarrollo Mamífero De La Célula De Merkel
Células de Merkel son las células sensoriales del origen de la cresta neural. Porque se sabe poco sobre los mecanismos que dirigen su diferenciación, hemos investigado el papel potencial de un factor regulador del candidato, neurotrofina 3 (NT-3). En el día embrionario 16.5 (E 16,5), ni NT-3 ni su receptores primarios, TrkC y p75NTR expresados por las células de Merkel en la barba murino. En el momento del nacimiento, sin embargo, las células de Merkel son immunoreactive para NT-3 y TrkC p75NTR. En TrkC null y NT-3 ratones nulos, células de Merkel distinguen inicialmente, pero sufren apoptosis durante el período perinatal. Estos resultados demuestran que no es necesaria para la diferenciación de células de Merkel señalización de NT-3, pero que es esencial para su supervivencia postnatal.
Células De La Cresta Neural Cardiaca
Mientras que el corazón en sí mismo es de origen mesodérmico, componentes del tracto de salida cardiaca se forman por la cresta neural, un derivado ectodérmico que da origen al sistema nervioso periférico, las células endocrinas, melanocitos de la piel y órganos internos y tejido conectivo, hueso y cartílago de la cara y el cuello ventral, entre otros tejidos. Células de la cresta neural cardiaca participan en la tabicación del tracto de salida cardiaca en la aorta y la arteria pulmonar. La cresta migratoria de neural cardiaca consiste en células madre, restricción de destino de las células y las células que están comprometidas con el linaje de células de músculo liso. Durante su migración dentro de los arcos branchial posteriores, las potencialidades del desarrollo de células de la cresta neural pluripotentes ser restringidas. Por el contrario, las células madre de cresta neural persisten en muchos lugares, incluyendo el tracto de salida cardiaca. Muchos aspectos de la diferenciación de células de cresta neural son conducidos por la acción del factor de crecimiento. Neurotrofina 3 (NT-3) y su receptor preferido, TrkC, juegan papeles importantes no sólo en el desarrollo del sistema nervioso y la función, sino también en el desarrollo cardíaco como la eliminación de estos genes causa malformaciones de tracto de salida. Análisis clonal in vitro ha mostrado un compromiso prematuro de células madre de la cresta neural cardiaca en ratones nulos TrkC y una morfología perturbada del tubo endotelial. Función de norepinefrina transportador (NET) promueve la diferenciación de células de la cresta neural en las neuronas noradrenérgicas. Sorprendentemente, muchos tejidos embrionarios nonneuronal diversos, en particular en el sistema cardiovascular, expresan NET también. Será de interés para determinar si el transporte de noradrenalina desempeña un papel también en desarrollo cardiovascular.
El Papel De La Señalización De NT-3 En El Desarrollo De La Célula De Merkel
Las células de Merkel se originan de la cresta neural. Están situadas en la piel peluda y glabra y presentan características neuroendocrinas. Junto con un beta aferentes, células de Merkel forman un Mecanorreceptor adaptando poco a poco, el Merkel conclusión de nervio, que transmite la sangría constante de la piel. Neurotphin-3 (NT-3) juega un papel importante en el desarrollo de las células de la cresta neural. Por lo tanto intentamos determinar si neurotrofina señalización es esencial para el desarrollo de la célula de Merkel en la almohadilla de la barba del ratón. Nuestros datos indican que en el día embrionario 16.5 (E 16.5), NT-3 y sus receptores, del receptor p75 neurotrofina (p75NTR) y receptor de la tirosina cinasa, TrkC no se expresan en niveles detectables en las células de Merkel. Después de un interruptor perinatal, sin embargo, las células de Merkel en bigotes de ratones recién nacidos son immunoreactive para p75NTR, TrkC y NT-3. Inmunoreactividad de los tres marcadores persiste en la edad adulta. Por el contrario, las fibras innervating son intensamente p75NTR-immunoreactive en E16.5 bigotes, pero no inmunoreactividad TrkC es detectado. Al nacer y en 6 semanas de edad, fibras aferentes son intensamente immunoreactive para p75NTR y TrkC. En TrkC nulos bigotes, numerosas células de Merkel están presentes en E16.5, y ellos están inervados. Sacamos tres conclusiones principales de estas observaciones: (i) NT-3 señalización a través de p75NTR o TrkC es no necesario para el desarrollo y la supervivencia prenatal de un subconjunto cualquiera de los dos principal o de todas las células de Merkel, (ii) la supervivencia postnatal de células de Merkel es apoyada por autocrina o paracrina NT-3, en lugar de derivados de neuron NT-3, y (iii) NT-3 derivados de células de Merkel es no quimioatractiva para inervan las fibras de una beta, pero es probable que participan en el mantenimiento de la inervación de la célula de Merkel postnatal.
El Folículo De Pelo Adulto: Cuna De Células Pluripotentes De La Cresta Neural
Esta revisión se centra en la identificación reciente de dos nuevas células derivados de la cresta neural en mamífero folículo adultos, células madre pluripotentes y células de Merkel. Los ratones transgénicos compuestos Wnt1-cre/R26R, que en la periferia expresan beta-galactosidasa de manera específica de la cresta neural, fueron utilizados para rastrear las células de la cresta neural. Las células de la cresta neural invaden la epidermis facial tan pronto como el día embrionario 9.5. Derivados de la cresta neural células están presentes a lo largo de la extensión entera del folículo barba. Esto incluye el área de bombeo, un nicho epidérmico para células madre de queratinocitos, así como la matriz en la base del folículo piloso. Hemos determinado por análisis clonal in vitro que el área de abultamiento del folículo barba adulto contiene células pluripotentes de la cresta neural. En la cultura, las células beta-galactosidasa-positive emigran de explantes de bombeo, identificándolos como derivados de la cresta neural células. Cuando estas células se resuspendió y crecidas en cultivo clonal, dan lugar a colonias que contienen varios tipos de células diferenciadas, como neuronas, Schwann las células, las células musculares lisas, las células del pigmento, condrocitos y posiblemente otros tipos de células. Este resultado proporciona la evidencia para la pluripotencialidad de la célula formadora clon. Clonación serial demostró que las células de la cresta neural derivados de bombeo someterse a renovación, que se identifica como las células madre. Pluripotentes células de cresta neural también se localizan en el pelo de la parte posterior de la piel de ratones adultos. El área de abultamiento del folículo barba está rodeado por numerosas células de Merkel, que junto con inervan terminaciones nerviosas forman lentamente adaptación mecanorreceptores que transducen la sangría constante de la piel. Células de Merkel expresan beta-galactosidasa en ratones transgénicos dobles, que confirma su origen de la cresta neural. Tomados en conjunto, nuestros datos indican que la epidermis del folículo piloso adulto contiene células de madre pluripotentes cresta neural, denominadas células epidérmicas cresta neural (eNCSCs), y uno recién identificado derivado de la cresta neural, la célula de Merkel. El intrínseco alto grado de plasticidad del eNCSCs y el hecho de que sean fácilmente accesibles en la piel hacen candidatos atractivos para estrategias de terapia de diversas células autólogas.
Caracterización De Células Epidérmicas Cresta Neural (EPI-NCSC) Injertos En El Lesionado Medular
Hemos caracterizado en la contusión-lesionados medulares murino el comportamiento de las células madre de agudo implantado epidérmico nervios de la cresta (EPI-NCSC, anteriormente eNCSC). EPI-NCSC, un tipo nuevo de pluripotentes células madre adultas, son vestigios de la cresta neural embrionaria. Residen en el bombeo de los folículos pilosos y tienen la capacidad de diferenciarse en todos los derivados principales cresta neural (Sieber-Blum, M., Grim, M., Hu, Dufr, Szeder, V., 2004. Células madre de la cresta neural pluripotentes en el folículo piloso para adultos. Dev Dyn. 231, 258-269). EPI-NCSC injertado sobrevivió, integrado y se entremezclan con neuritas de anfitrión en el lesionado medular. EPI-NCSC fueron no migratorias. Ellos no proliferar y no formaron tumores. Subconjuntos significativos expresan tubulina enolase beta-III, el GABAérgico marcador Glutamato Descarboxilasa 67 (GAD67), el Oligodendrocito marcador, RIP o mielina proteína básica (MBP). Se observó la estrecha asociación física de EPI-NCSC no neuronal con neuritas de anfitrión. No se detectó la inmunofluorescencia de la proteína ácida fibrilar glial (GFAP). En conjunto, nuestros datos indican que intraspinal EPI-NCSC demuestran varias características deseables que pueden incluir reemplazo de nervios local y re-mielinización.
Una Firma Molecular De La Célula De Vástago (EPI-NCSC) Epidérmico De La Cresta Neural
Aquí, divulgamos la primera transcriptoma células madre epidérmicas cresta neural de ratón (EPI-NCSC, anteriormente eNCSCs). Además, nuestro estudio resuelve opiniones encontradas en la literatura que muestra que los EPI-NCSC son diferentes de otros tipos de células de piel-residente/progenitores. Finalmente, con los perfiles de tres genes, hemos establecido una Fundación y proporcionar un recurso valioso para ratón futuro investigación NCSC. EPI-NCSC representan un nuevo tipo de células madre adultas multipotentes que origina de la cresta neural embrionaria y reside en el bombeo de los folículos pilosos. Realizamos gene perfilado por LongSAGE (larga serie análisis de expresión génica) con el mRNA de EPI-NCSC, NCSC embrionario, y distinguido in vitro progenie de la cresta neural embrionaria. Hemos identificado los genes expresados diferencialmente importantes, incluyendo nuevos genes y genes de la enfermedad. Además, utilizando criterios estrictos, hemos definido una firma molecular del NCSC que consiste en un panel de 19 genes y es representante de EPI-NCSC tanto NCSC. EPI-NCSC tienen características que combinan las ventajas de las células madre embrionarias y adultas. Similar a las células madre embrionarias, EPI-NCSC tienen un alto grado de plasticidad innata, pueden ser aislados en altos niveles de pureza, y pueden ampliarse in vitro. Similar a otros tipos de células madre adultas, EPI-NCSC son fácilmente accesibles por mínima invasiva. Las células madre pluripotentes de mamíferos adultos son de gran interés debido a su valor potencial en el futuro reemplazo terapia celular por el trasplante autólogo, que evita el rechazo de injerto.
Epidérmicas De La Cresta Neural Células Madre (EPI-NCSC) Y Pluripotencia
Este artículo tiene tres propósitos. Nos resumir el conocimiento actual sobre el origen y las características de EPI-NCSC, revisar su aplicación en un modelo murino de lesión de la médula espinal, y se presentan nuevos datos que destacan aspectos de la pluripotencia de EPI-NCSC. PAI-NCSC son células madre pluripotentes, que se derivan de la cresta neural embrionario y se encuentran en la protuberancia de los folículos pilosos. EPI-NCSC pueden someterse a la auto-renovación y son capaces de generar todos los derivados más importantes de la cresta neural, como neuronas, células nerviosas de apoyo, células musculares lisas, células de hueso / cartílago y los melanocitos. A pesar de su origen ectodérmico, las células de la cresta neural también puede generar tipos de células que normalmente se derivan del mesodermo. Estábamos interesados en explorar tanto los aspectos de la EPI-NCSC pluripotencia. Estamos aquí, muestran que el PAI-NCSC puede fusionarse con adultos fibras del músculo esquelético y que los núcleos incorporados EPI-NCSC son funcionales. Además, nos muestran que el músculo esquelético adulto representa un entorno favorable a largo plazo la supervivencia de la neurogénica EPI-NCSC. Los genes se utilizan para crear madre pluripotentes inducidas (iPS), las células están presentes en nuestro PAI-NCSC biblioteca de expresión de genes LongSAGE. Aquí hemos corroborado esta idea por PCR en tiempo real. Nuestros resultados muestran similitudes en la expresión de Myc, Klf4, Sox2 y Lin28 genes entre EPI-NCSC y las células madre embrionarias (ESC). En cambio hubo diferencias importantes en Nanog Pou5f1 (octubre-4) entre los niveles de expresión del PAI-NCSC y ESC, que posiblemente expliquen por qué EPI-NCSC no son tumorigénico. En general, como restos de embriones en un lugar para adultos EPI-NCSC muestran varias características atractivas para el tratamiento futuro de la sustitución de células y / o ingeniería biomédica: Debido a su capacidad de migrar, el EPI-NCSC se puede aislar como una población de alta pureza de las células madre multipotentes por procedimientos mínimamente invasivos. Las células se pueden expandir in vitro en millones de células madre / progenitoras, y que comparten algunas características con las células madre pluripotentes, sin ser carcinogénico. Puesto que las del propio paciente PAI-NCSC podrían ser utilizados para el trasplante autólogo, esto evitar el rechazo del injerto.
Papel Esencial Del Factor De Células Madre En El Desarrollo De Neurona Sensorial Primaria
A continuación os mostramos ese factor de célula de vástago (SCF) de señalización a través de su receptor, c-kit, es esencial para el desarrollo de neuronas sensoriales primarias de c-kit-expresión - y medio diámetro. Utilizamos el ratón W, que es el c-kit deficientes y tiene un fenotipo letal perinatal debido a una mutación de punto que ocurre naturalmente en el gene del c-kit. En ratones recién nacidos del c-kit-null, el 52,5% de sustancia P immunoreactive y 31.4% de neuronas sensoriales de la calcitonina Péptido relacionado con el gen (CGRP) immunoreactive de pequeño y mediano diámetro estuvieron ausentes, mientras que las neuronas sensoriales de gran diámetro no fueron afectadas. Déficit equivalentes ocurrieron durante la embriogénesis. Hubo un retraso en el desarrollo ni la degeneración de las neuronas diferenciadas. Por lo tanto Concluimos que, en ausencia de señalización de la SCF, derivados de la cresta neural progenitores no diferenciarse en neuronas aferentes viscerales y somáticas c-kit-expresión.
Expresión Del Gen Mediada Por Transporte De Norepinefrina En Neurogénesis Noradrenérgica
Hemos identificado un perfil de expresión génica diferencial en células de la cresta neural que es debido a la canceladura del gene del transportador (NET) de norepinefrina. NET es el destino de sustancias sicotrópicas, como los antidepresivos tricíclicos y la droga de abuso, cocaína. NETAS mutaciones han sido implicadas en la depresión, la ansiedad, la intolerancia ortostática y trastorno por déficit de atención con hiperactividad (TDAH). Función neta en las neuronas noradrenérgicas adultos del sistema nervioso central y periférico es interiorizar la norepinefrina de la hendidura sináptica. Por el contrario, durante la norepinefrina embriogénesis transporte (NE) promueve la diferenciación de células de la cresta neural y locus ceruleus progenitores en las neuronas noradrenérgicas, mientras que red inhibidores bloquean noradrenérgica diferenciación. Aunque la estructura de la red y la regulación de la función de red están bien descritas, poco se conoce acerca de los genes diana de transporte de la norepinefrina (NE).
Tensor De La Heterogeneidad De Difusión MRI (?-Dti): Matemáticas Y Aplicaciones Iniciales En Espinal Cable De Regeneración Después De Trauma - Biomed 2009
Imágenes por resonancia magnética ponderada de difusión (DWI) es una poderosa herramienta para la evaluación de anomalías microestructurales en numerosas patologías del sistema nervioso central. Tensor de difusión (DTI) permite la magnitud y dirección de agua auto difusión a estimarse muestreando el coeficiente de difusión aparente (ADC) en varias direcciones. Clínica DWI y DTI realizada en un solo nivel de difusión ponderación, sin embargo, no permiten múltiples compartimentos de difusión para ser sacados. Además, supuestos sobre el número exacto de compartimientos de difusión intrínsecos al tejido de interés han resultado en una falta de consenso entre las investigaciones. Para superar estos retos, se aplicó un modelo exponencial se extendía de difusión para examinar el coeficiente de difusión y "Índice de heterogeneidad" en altamente compartimentados tumores cerebrales. El propósito del estudio actual es ampliar el modelo exponencial se extendía de difusión para incluir la direccionalidad de la heterogeneidad de la difusión tanto del coeficiente de difusión aparente. Este estudio desarrolla las matemáticas de esta nueva técnica junto con una aplicación inicial en la cuantificación de la regeneración de la médula espinal después de la inyección aguda de injertos de células madre (EPI-NCSC) epidérmico de la cresta neural.
Epidérmico Cresta Neural Mediada Por La Célula De Vástago (EPI-NCSC)--la Recuperación De La Función Sensorial En Un Modelo Murino De Lesión De La Médula Espinal
Aquí mostramos que epidérmico cresta neural trasplantes de células madre (EPI-NCSC) en la médula espinal contusionado causaron una mejora de 24% en conectividad sensorial y una recuperación sustancial de la percepción táctil. Además presentamos un método novedoso para el ex vivo expansión de EPI-NCSC en millones de células madre que aprovecha la capacidad migratoria de las células de la cresta neural y se basa en un nuevo medio de cultivo y el uso de microcarriers. Mejoría funcional fue demostrado por dos métodos independientes, potenciales evocados somatosensoriales espinales (SpSEP) y la prueba de toque de Semmes-Weinstein. Subconjuntos de células trasplantadas diferenciado en myelinating oligodendrocitos. Inyecciones unilaterales de EPI-NCSC en la lesión de la episiotomía contused ratón médulas espinales sacados bilateral mejoras. EPI-NCSC intraspinal no migrar lateralmente en la médula espinal o invadir las raíces espinales y ganglios de la raíz dorsal, implicando así factores difusibles. EPI-NCSC expresó factores neurotróficos, factores angiogénicos y metaloproteasas. La fuerza de EPI-NCSC así es que puede ejercer una combinación de funciones pertinentes en la médula espinal contusionada, incluyendo reemplazo celular, neuroprotección, angiogénesis y modulación de la formación de la cicatriz. EPI-NCSC están excepcionalmente calificados para la terapia celular en lesiones de la médula espinal, como las células de la cresta neural y tubo neural células comparten una célula de vástago de orden superior y así están ontológicamente estrechamente.
Células Epidérmicas De La Cresta Neural Y Su Uso En Modelos De Ratón De Lesión De La Médula Espinal
Injertos de células madre (EPI-NCSC) epidérmico cresta neural causan una mejoría significativa en la conectividad sensorial y toquen la percepción en la médula espinal de ratón contusionado. EPI-NCSC se derivan de la cresta neural embrionaria pero reside en una ubicación postnatal, el bombeo de los folículos pilosos. Tanto el ratón y el EPI-NCSC humana son células adultas multipotentes capaces de generar todos derivados de la cresta de los nervios principales. EPI-NCSC de ratón y de origen humano expresan la firma molecular de la célula de vástago de cresta neural, genes que inicialmente se utilizaron para crear (iPS) células pluripotentes inducidas y otros de la cresta neural y genes de la célula de vástago global. Debido a su origen en los pliegues neurales y porque comparten un mayor células de orden, las células de la cresta neural y así EPI-NCSC, están estrechamente relacionadas con las células de vástago del tubo neural. Esta estrecha relación ontológica con la médula espinal hace candidatos atractivos EPI-NCSC para la terapia celular en lesiones de la médula espinal. En dos modelos diferentes de la contusión de lesión de la médula espinal, hemos demostrado que EPI-NCSC integra el tejido medular murino y que subconjuntos diferencian en neuronas GABAérgicas y myelinating oligodendrocitos. EPI-NCSC intraspinal no forman tumores. En presencia de injertos de EPI-NCSC, pero no en los animales de control, hay una mejora de 24% de la conectividad sensorial y una mejora sustancial en la percepción táctil. Trasplantes unilaterales conduce a mejoras funcionales bilaterales sugieren que los mecanismos subyacentes incluyen moléculas difusibles. EPI-NCSC hecho expresar genes que codifican neurotrofinas, factores tróficos, factores angiogénicos y metaloproteasas. EPI-NCSC intraspinal así tienen múltiples efectos en la médula espinal contusionada, la suma de la que puede explicar las mejoras funcionales observadas.
Epidérmico Humano De La Cresta Neural Células Madre (hEPI-NCSC)--caracterización Y Diferenciación Dirigida a Osteocitos Y Melanocitos
Aquí describimos la expansión aislamiento, caracterización y ex vivo de células epidérmico humano de la cresta neural (hEPI-NCSC) y ofrecemos protocolos para su diferenciación dirigida en osteocitos y melanocitos. hEPI-NCSC son derivados de la cresta neural stem células pluripotentes que persisten en la edad adulta en el bombeo de los folículos pilosos. Multipotencia y auto renovación se determinaron mediante análisis clonales in vitro. hEPI-NCSC generar todos los derivados de la cresta de los nervios principales, incluyendo células de cartílago del hueso, neuronas, células de Schwann, miofibroblastos y melanocitos. Además, hEPI-NCSC expresan marcadores de células adicionales de la cresta neural y genes de la célula de vástago global. Grados variables y en una forma dependiente de donantes, hEPI-NCSC expresar los genes esenciales de la pluripotencia seis C-MYC, SOX2, KLF4, LIN28, OCT-4/POU5F1 y NANOG. hEPI-NCSC puede ampliarse ex vivo en millones de células que permanecen mulitpotent y continuar expresar genes de células madre. La novedad de hEPI-NCSC radica en la combinación de sus características altamente deseables. hEPI-NCSC son remanente embrionarios en una ubicación postnatal, el bombeo de los folículos pilosos. Por lo tanto son fácilmente accesibles en la piel peluda por mínima invasiva. hEPI-NCSC son pluripotentes células somáticas que pueden ser aisladas, reproducible y con alto rendimiento. Aprovechando su capacidad migratoria, hEPI-NCSC puede aislarse como una población altamente pura de células madre. hEPI-NCSC puede sufrir robusto ex vivo expansión y dirigido la diferenciación. Como células madre somáticas, hEPI-NCSC son propicias para el trasplante autólogo, que evita el rechazo de injerto. En conjunto, estas características hacen hEPI-NCSC novedosos y atractivos candidatos para futuras terapias celulares y medicina regenerativa.
Transición De Cilindroma a Espiradenoma En Tumores CYLD Defectuoso Se Asocia a La Expresión Reducida De DKK2
Pacientes portadores heterocigoto del germline truncar las mutaciones en el gen CYLD desarrollan múltiples tumores primarios relacionados con el folículo piloso. Un tumor altamente modelado, denominado Cilindroma y un tumor muy desorganizado, denominó Espiradenoma, ambos pueden desarrollar en el mismo paciente. Además, se han descrito las características histológicas de ambos tipos de tumores dentro de la misma muestra de tumor. Solíamos que la reconstrucción tridimensional automatizado de estos tumores muestran crecimiento contiguo del cylindromas en los spiradenomas, sugiriendo así una transición entre los tipos de dos tumor. Para explorar los factores que influyen en los patrones de tumor cutáneo, se realizó análisis transcriptómico de genoma de 32 tumores CYLD defectuoso. La sobreexpresión de la Wnt/β-catenina vía de señalización se observó en relación con el tejido normal perilesional. Análisis morfométrico fue utilizado para investigar la relación entre la expresión de genes relacionados con la vía de Wnt y organización del tumor. Esto reveló una asociación entre la expresión reducida de Dickkopf 2 (DKK2, un regulador negativo de la vía de señalización Wnt/β-catenina) y pérdida de patrones de tumor. Reducido DKK2 expresión se asoció con la metilación del promotor del gen DKK2 en la mayoría de las muestras tumorales ensayadas. RNA interferencia mediada por silenciamiento de la expresión DKK2 en cultivos de células de primaria de Cilindroma causó un aumento en la formación de la Colonia, viabilidad celular y el crecimiento de anclaje independiente. Con estos datos, se propone un modelo donde la programación Epigenética puede influir en patrones de tumor en pacientes con mutaciones de CYLD.
Dinámica De Células Epidérmicas
Wong y Reiter han explorado la posibilidad de que células del folículo puede dar lugar a carcinoma de células basales (BCC). Expresaron en ratones un inducible humano derivado del BCC oncogénico alelo de alisado, SmoM2, bajo el control de cualquiera de los dos la citoqueratina 14 (K14) o cytokeratin 15 (K15) promotor. Alisado codifica una proteína de receptor g-proteína-juntado en el camino de erizo, el misregulation de los cuales está implicado en la BCC y otros tipos de cáncer humanos. Lesión crónica se cree que un factor que contribuye. Los autores utilizaron K14 como marcador de células en la capa basal de la epidermis y K15 como marcador para las células madre epidérmicas en el bombeo de los folículos pilosos. Al activarse, K14 construcción-cojinete ratones fácilmente forman BCC-como tumores, mientras que esto no era el caso en K15:SmoM2-llevar ratones. Hiriendo a la epidermis, sin embargo, había formación generalizada BCC-como tumor en la piel de ratones K15:SmoM2. Los autores concluyen herir la contratación de bombeo las células madre epidérmicas a la superficie, permitiendo que las células para escapar de la quietud en el nicho de células madre y llegar en un ambiente donde se activa la vía de erizo y por lo tanto se produce la tumorigénesis. Si bien se trata de un resultado provocadora y conclusión de los autores puede ser correcta, hay explicaciones alternativas.
