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Articles by Mayumi Kubota in JoVE
JoVE Neuroscience
Souris dans Utero électroporation: contrôlé Transefection Gene spatio-temporelle
Lab for Molecular Mechanisms of Thalamus Development, RIKEN Brain Science Institute
Une méthode de transfert de gènes dans le cerveau de souris en développement est décrit en utilisant une méthode unique de chirurgie et la forme particulière des électrodes. Cette technique unique permet la transfection d'ADN plasmidique temporellement et spatialement, ce qui aidera de nombreux neuroscientifiques à étudier le développement du cerveau.
Other articles by Mayumi Kubota on PubMed
Cooccurrence Des Morphologies De Type Arum Et Paris De Mycorhizes Arbusculaires Dans Les Concombres Et De Tomates
La colonisation par les champignons mycorhiziens arbusculaires (AM) a été étudiée dans le concombre (Cucumis sativus), la tomate (Lycopersicon esculentum) et Clethra barbinervis (Ericales) cultivé dans des sols récoltés sur le terrain connu d'études antérieures pour générer des mycorhizes arbusculaires type Paris dans c. barbinervis. Les spores de Paraglomus, Acaulospora, Glomus et Gigaspora trouvées dans le sol. Formation des pelotons d'hyphes et bobines d'arbusculé des mycorhizes de type Paris et des arbuscules des mycorhizes de type Arum dans les racines soulevées dans ce sol dans la chambre de croissance ont été comparées avec la détection de l'ADN des champignons AM depuis les mêmes systèmes de racine à l'aide d'amorces spécifiques aux Glomales. Seulement type Paris mycorhizes avec bobines de vastes arbusculé développé dans c. barbinervis, mais concombre et tomate, mis au point deux types de Paris et d'Arum dans le même système racinaire. Glomaceae et Archaeosporaceae ou Paraglomaceae ont été détecté fortement dans l'ADN de racines de concombres et de tomates, dans quel type Arum mycorhizes ont été observées. En revanche, l'ADN de Glomaceae a été détectée avec plus de parcimonie dans c. barbinervis, où dominent des mycorhizes de type Paris. Acaulosporaceae et Gigasporaceae étaient fortement présents dans l'ADN du c. barbinervis et tomate, alors qu'elles étaient plus faiblement détectée chez le concombre. Ces résultats indiquent que la morphologie de la colonisation est fortement influencée par la sélection de champignons à coloniser la plante-hôte parmi ceux dans l'environnement édaphique.
Nouveaux Groupes De L'anastomose, T-AG Et AG-U, Binucléées Rhizoctonia Spp. Causant Racine Et De La Pourriture De La Tige De La Fleur Coupée Et Roses Miniatures
ABSTRAITE putréfaction de racine et la tige de roses fleurs coupées (Rosa spp.) a été observée chez commerciales roses cultivés en serre dans 10 préfectures du Japon entre 1998 et 2001. Comme binucleate Rhizoctonia spp. ont été isolées principalement les plantes de la maladie. Au total, 670 isolats ont été divisés en deux types basés sur l'aspect culturel ; 168 isolats de lumière de type brun à brun et 502 isolats de type blanchâtre. Une réaction d'anastomose des hyphes en utilisant des isolats représentatifs de chaque type ont révélé que le type de brun à brun clair appartenait au groupe d'anastomose G (AG-G), alors que le type blanchâtre (AG-CUT) n'a pas pu s'anastomosent avec des souches de Rhizoctonia binucléé AG-A travers AG-S. Aucun des isolats de AG-G ni AG-CUT anastomoser avec des souches d'essai une AG rapportées antérieurement inconnue (AG-MIN) binucléées Rhizoctonia spp., recueillies de roses miniatures. Dans les tests de pathogénicité, choisis au hasard des isolats des trois groupes causés la pourriture des racines et la tige sur roses fleurs coupées et miniatures. Pour différencier les coupe-AG et AG-MIN d'AGs connus de binucléées Rhizoctonia spp., polymorphisme de longueur de fragment de restriction (RFLP) et analyse de la séquence d'une région d'espaceur interne transcrit (ITS) de l'ADN ribosomique (r) ont été menées. Parmi les huit enzymes de restriction utilisées, HaeIII produit ADN profils de bandes pour AG-CUT qui différaient de ceux des souches et AG-MIN. en outre, les profils de restriction de AG-MIN diffèrent de celles de toutes les souches. AG-G isolats de roses fleurs coupées avaient le même modèle RFLP que les souches de AG-G. Selon les résultats de l'anastomose des hyphes et l'analyse RFLP et séquence d'une région, son ADNr, nous proposons que AG-CUT désigné T-AG et AG-MIN être désignée AG-U, deux AGs nouveau binucléées Rhizoctonia spp. L'arbre phylogénétique basée sur les données de séquence de la région ADNr-ITS a montré que les isolats AG-min sont dans un clade distinct des autres AGs, alors que les isolats de AG-coupe dans le clade de même que celles du AG-A. L'analyse phylogénétique plus détaillée en dehors de la région, son ADNr pourrait être nécessaire pour classification AG binucléées Rhizoctonia spp.
Les Caractéristiques Cliniques Et Prise En Charge Chirurgicale Des Kystes De Juxtafacet De La Colonne Lombaire
Analyse rétrospective des 10 cas de résection des kystes juxtafacet lombaire symptomatique chez neuf patients (âge moyen 65,4 ans) ont étudié la relation entre la méthode chirurgicale et la progression de la colonne vertébrale récurrence spondylolisthésis ou kyste. Caractéristiques des patients, des méthodes chirurgicales et cours postopératoires ont été examinées. Le symptôme le plus fréquent préopératoire, radiculopathie douloureuse, s'est produite dans tous les cas, suivis de faiblesse moteur à cinq, une perte sensorielle en quatre et la claudication intermittente dans quatre. Tous les patients ont subi au total bilatéral (n = 6) ou laminectomie partielle (n = 4), avec un minimum (n = 3) ou non (n = 7) facettectomie. Les kystes étaient bruts totalement réséquée dans huit cas et partiellement réséquée en deux. Fixation concomitante n'a pas été effectuée. Radiculopathie douloureuse, faiblesse moteur et perturbation sensorielle tous résolus, ayant pour résultat bon ou excellent résultat chez tous les patients. Spondylolisthésis symptomatique postopératoire n'a pas constaté à moyenne 52,1 mois après l'opération. Cependant, nouveaux kystes de juxtafacet ont été plus tard détectées sur le côté controlatéral à la lésion initiale chez deux patients. Ablation de kystes juxtafacet est recommandée pour le soulagement symptomatique immédiat. Concomitante fixation vertébrale afin d'empêcher la progression de la colonne vertébrale récurrence spondylolisthésis ou kyste dépend de la taille du kyste, implication des structures avoisinantes, degré de spondylolisthésis préopératoire et la destruction des articulations facette.
La Phase De Retour De Type I Induction De L'interféron Chez Les Cellules Dendritiques Nécessite Le Facteur 8 De Normalisation De L'interféron
Les cellules dendritiques (CD) des produits de type I interférons en plus grande quantité que les autres cellules, mais les mécanismes demeurent insaisissables. Ici, nous avons étudié le rôle d'un facteur de transcription, IRF8, dans l'induction de type DC j'ai interférons. Après infection par le virus (NDV) maladie newcastle, moelle osseuse plasmacytoides et DCs classiques induisent transcrits de l'IFN, présentant une cinétique biphasique. Le second, amplifiant la phase a représenté une réponse de rétroaction IFN qui représente une grande partie de la production de protéines IFN. Induction de deuxième phase transcription requis IRF8. Cytomégalovirus (MCMV) de la souris et l'induction de IFN médiée par les récepteurs Toll-like dans DCs IRF8 requis. Analyse d'immunoprécipitation de la chromatine a montré que l'ARN polymérase II, IRF8 et IRF7 ont été recrutés pour les promoteurs de l'IFN lors de la stimulation. En outre, soutenu RNA polymérase II recrutement les promoteurs dépendait critique IRF8. Ensemble, ces résultats indiquent que les IRF8 magnifie la deuxième phase de transcription de l'IFN dans DCs en prolongeant la liaison de la machinerie de transcription de base pour les promoteurs de l'IFN, jouant ainsi un rôle dans l'immunité innée.
La Plante Favorise La Croissance Champignon Penicillium Simplicissimum GP17-2 Induit La Résistance Chez Arabidopsis Thaliana Par L'activation De Multiples Signaux De Défense
Arabidopsis thaliana cultivée dans un sol amendé avec des inoculums de grain orge de Penicillium simplicissimum GP17-2 ou recevant un traitement de racine par son filtrat de culture (CF) exposé claire résistance à Pseudomonas syringae pv. Tomato DC3000 (Pst). Pour évaluer la contribution des voies différentes de la défense, Arabidopsis génotypes impliqués dans l'acide salicylique (SA) signalisation exprimant le transgène NahG ou perturbation dans NPR1 (npr1), jasmonique acide (JA) (jar1) de la signalisation et l'éthylène (HE) de signalisation (ein2) ont été testés. Tous les génotypes examinés étaient protégés par GP17-2 ou son CF. Cependant, le niveau de protection a été significativement plus faible chez NahG et npr1 qu'en même traitement plantes plantes sauvage, indiquant que la SA voie de signalisation apporte une contribution mineure à la résistance induite par le GP17-2 et qu'il ne suffit pas pour une réponse complète. Examen de l'expression génique locales et systémiques ont révélé que le GP17-2 et sa FC modulent l'expression des gènes impliqués dans les SA et JA/ET voies de signalisation. Défi subséquente des plantes GP17-2-colonisé avec Pst s'est accompagnée d'une activation directe de SA-inducible PR-2 et PR-5 gènes ainsi que l'expression du gène inductible par JA Vsp potentialisée. En revanche, les plants traités CF infectés par le Pst exposé expression élevée de la plupart des gènes reliés à la défense (PR-1, PR-2 PR-5, PDF1.2 et Hel) étudié. En outre, une élévation initiale des réponses SA a été suivie par induction tardive des réponses JA pendant l'infection de Pst de résistance systémique induite (ISR)-exprimant des plantes. En conclusion, nous posons l'implication de multiples mécanismes de défense, conduisant à un rapport de recherche internationale d'Arabidopsis par GP17-2.
Syringomyélie Causé Par Les Débris Intrathécale De Produit De Contraste à Base D'huile
Opacifiant grasse avait été en usage depuis le début du XIXe siècle comme un agent radiographique pour détecter les lésions de la colonne vertébrale et les tumeurs de la moelle épinière jusqu'à la fin du XXe siècle. À ce moment-là de tomodensitométrie scanner et imagerie par résonance magnétique ou un autre support hydrophile de contraste substitués. Les effets indésirables de la teinture à base d'huile, aiguë et chronique, avaient été signalés depuis le milieu du XXe siècle. Dans cet article, les auteurs rapportent le cas de Syringomyélie qui semblait être causée principalement par restant opacifiant huileux pendant 44 ans. Syringomyélie secondaire à une arachnoïdite adhésive causée par contraste grasse après une longue période de temps est bien connu. En l'espèce, cependant, la chirurgie a révélé seulement doux arachnoïdite au niveau de la syringomyélie ainsi que des restes solides et liquides de produit de contraste. Généralement, blocage de liquide céphalo-rachidien (LCR) pour une adhérence arachnoïde est considéré comme cause de Syringomyélie suite arachnoïdite adhésive. Les auteurs ont émis l'hypothèse que, en l'espèce, Syringomyélie a été induite par un mécanisme différent de celui dans les cas précédemment signalés ; du milieu de contraste huileux lui-même semble avoir induit le bloc fonctionnel du LCR et réduite du système tampon de pression par voie intrathécale. Aucun rapport sur thoracique arachnoïdite adhésive et Syringomyélie causée par le colorant à base d'huile ne visée à ce mécanisme à l'examen de la littérature.
La Formation De Hétérocaryons Chez Thanatephorus Cucumeris (Rhizoctonia Solani) IC AG-1
Environ 50 single-basidiospore isolats (IES) provenant de chacune des 16 isolats de champs de Thanatephorus cucumeris IC AG-1 ont été examinés pour la formation d'hétérocaryons. Tous Ies provenant de chaque isolat de champ ont été divisés en deux groupes accouplements (M1-ITT et SBIs-M2) et touffes de mycélium ont été formés dans la zone de contact entre les colonies de paires ITTS-M1 et - M2 basée sur un milieu gélosé de 0,5 % de charbon de bois. Touffes ont été produites à partir de tous les appariements entre IES d'isolats de champs non parentale. Réactions des hyphes anastomose n'indiqué aucune mort cellulaire et l'apoptose aléatoire à la cellule de contact et n'était pas liée à la touffe de formation. Phénotypes AFLP d'ITT de chaque isolat de champ n'étaient pas identiques les uns aux autres et étaient différentes de leur souche parentale champ. AFLP phénotypes des touffe isolats issus d'ITTS-M1 et M2-IES de chaque isolat de champ étaient hétérocaryotiques. En outre, plusieurs SBIs forment aussi des touffes avec leurs isolats de champ parental et non parentale. Touffe de phénotypes AFLP de ces isolats a suggéré qu'ils étaient tous hétérocaryotes. Les résultats de ces expériences suggèrent que T. cucumeris AG-1 IC est hétérothallique et bipolaire, et que l'échange génétique peut se produire entre homocaryotes et hétérocaryotes isolats (phénomène de Buller).
Haut Niveau D'expression D'un Gène De Résistance Aux Virus, RCY1, Confère Une Résistance Extrême Au Virus De La Mosaïque Du Concombre Chez Arabidopsis Thaliana
Un gène de résistance de répétition de type riche site-leucine d'un liaison bobine d'enroulement-nucléotides, RCY1, confère une résistance à une souche du virus de la mosaïque du concombre, CMV(Y), chez Arabidopsis thaliana écotype C24 de jaune. Résistance à la CMV(Y) en C24 est accompagnée d'une réaction d'hypersensibilité (HR) qui se caractérise par le développement de lésions locales nécrotiques sur les sites d'infection primaire. Pour approfondir l'étude du HR et résistance à le CMV(Y) dans l'écotype Col-0, qui est sensible à la CMV(Y), Col-0 ont été transformées avec RCY1. Dissémination systémique de CMV(Y) a été supprimée complètement transformées par RCY1 Col-0 (Col::pRCY1 lignes 2 à 6), alors que la souche virulente CMV(B2) répandre et multiplié de façon systémique dans ces lignées transgéniques similaires à celle de type sauvage Col-0. Fait intéressant, le phénotype résistant de Col::pRCY1 varie entre les lignes. Aux lignes 3 et 6, à quels niveaux de transcription de RCY1 étaient semblables à que dans le sauvage-type C24, les RH et la résistance aux CMV(Y) a été induite. Ligne 4, qui exprime les niveaux modérément élevés de transcription RCY1, exposées modérément plus forte résistance comparée à C24 ou ligne 3. En revanche, les lignes 2 et 5, qui a fortement surexpriment le gène RCY1, ne montrent pas de lésion visible ou un micro-HR sur les feuilles inoculées. En outre, protéine de capside des virus n'a pas été détecté dans inoculés ou non inoculés des feuilles supérieures de ces deux lignes, ce qui suggère que résistance extrême (ER) à CMV(Y) a été induite par de hauts niveaux d'expression de RCY1. En outre, dans les lignées transgéniques exprimant l'hémagglutinine (HA) RCY1 épitope-tag (Col::pRCY1-HA), des niveaux élevés d'accumulation de la protéine RCY1-HA étaient également en corrélation avec le phénotype ER. Analyse d'expression génique global en ligne 2, qui a fortement risque RCY1, a indiqué que l'expression de plusieurs gènes de défense étaient constitutivement élevées comparativement à sauvage Col-0. Malgré cela, ligne 2 n'ont pas une résistance améliorée aux autres pathogènes avirulentes et virulentes. Prendre ensemble, accumulation constitutive des niveaux élevés de protéine de RCY1 semble régler la force de résistance conféré par RCY1 d'une manière pour les gènes et implique que les ER et résistance associés à HR ne diffèrent que par la force de résistance.
Réponses De Défense Renforcée Chez Arabidopsis Induite Par Les Fractions De Protéines De La Paroi Cellulaire De Pythium Oligandrum Demandent SGT1, RAR1, NPR1 Et JAR1
La fraction protéique de la paroi cellulaire (CWP) est purifiée à partir de la non pathogènes biocontrol agent Pythium oligandrum et se compose de deux glycoprotéines (POD-1 et 2-POD), qui sont structurellement semblables à la classe III elicitins. Dans les plants de tomates traités par CWP, l'acide jasmonique (JA) - et l'éthylène (HE) - dépendante de signalisation des voies sont activés, et résistance à Ralstonia solanaceraum est améliorée. Pour disséquer les mécanismes de défense induite par le CWP, nous avons étudié l'expression de gènes de défense et de la résistance aux pathogènes bactériens dans Arabidopsis thaliana écotype que col-0 traités par CWP. Lorsque les feuilles du Col-0 ont été infiltrés avec CWP, nécrose visible ni l'acide salicylique (SA)-responsive gene (PR-1 et PR-5) l'expression a été induite. En revanche, JA favorisant l'expression des gènes (PDF1.2 et JR2) était régulée et la résistance aux solanaceraum r. et Pseudomonas syringae pv. Tomato DC3000 a été amélioré en réponse à CWP. De telles réactions de défense induite par le CWP étaient complètement compromises chez les mutants coi1-1 et jar1-1 CWP traités avec une voie de signalisation de JA avec facultés affaiblies. L'induction de l'expression des gènes reliés à la défense après que traitement de CWP était partiellement compromise chez les mutants d'ein2-1 ET insensible, mais pas dans SA signalisation mutants ou de la nahG des plantes transgéniques. Analyse l'expression génique global à l'aide de cDNA tableau aussi suggéré que plusieurs autres gènes réagissant-JA et ET, mais pas des gènes sensibles aux SA, furent régulée en réponse à CWP. Une analyse plus poussée des réactions de défense induite par le CWP en utilisant un autre huit mutants avec défense altérée de signalisation des voies a indiqué que, de façon intéressante, l'induction de l'expression des gènes sensibles aux JA et une résistance améliorée aux deux pathogènes bactériens en réponse à CWP étaient complètement compromise dans sgt1b rar1-1, rar1-21, sgt1a-1, (edm1) et mutants npr1-1. Ainsi, le système de défense induite par le CWP semble être régulés par JA médiation et SGT1-, RAR1 - et NPR1-dependent signaling pathways.
