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Articles by Mayumi Kubota in JoVE
JoVE Neuroscience
Mouse in Utero elettroporazione: controllato Transefection Gene spazio-temporale
Lab for Molecular Mechanisms of Thalamus Development, RIKEN Brain Science Institute
Un metodo di trasferimento genico nel cervello del mouse di sviluppo è descritta utilizzando un metodo unico chirurgico e la forma speciale di elettrodi. Questa tecnica unica consente la trasfezione di DNA plasmidico temporalmente e spazialmente, che aiuterà molti neuroscienziati a studiare lo sviluppo del cervello.
Other articles by Mayumi Kubota on PubMed
Co-occorrenza Di Morfologie Arum Parigi-tipo Di Miccorrize Mycorrhizae in Pomodoro E Cetriolo
Colonizzazione di funghi miccorrize micorrizici (AM) è stato studiato nel cetriolo (Cucumis sativus), pomodoro (Lycopersicon esculentum) e Clethra barbinervis (Ericales) coltivate in terreno raccolti in campo noto da studi precedenti per generare mycorrhizae miccorrize Parigi-tipo di c. barbinervis. Spore di Paraglomus, Acaulospora, Glomus e Gigaspora sono state trovate nel terreno. Formazione di ifali bobine e bobine arbusculate di mycorrhizae Paris-tipo e arbuscoli delle micorrize Arum-tipo nelle radici sollevate in questo terreno nella camera di crescita sono stati confrontati con la rilevazione di DNA di funghi AM dagli stessi sistemi di root utilizzando primer specifici Glomales. Solo micorrize di Parigi-tipo con ampio arbusculate bobine sviluppato in c. barbinervis, ma il cetriolo e pomodoro sviluppato entrambi Parigi-Arum-tipi e nei sistemi della radice stessi. Glomaceae e Archaeosporaceae o Paraglomaceae sono state individuate fortemente il DNA dalle radici sia cetriolo e pomodoro, in quale tipo di Arum mycorrhizae sono stati osservati. Al contrario, DNA di Glomaceae è stato rilevato più con parsimonia in c. barbinervis, in cui dominavano mycorrhizae Paris-tipo. Acaulosporaceae e Gigasporaceae erano fortemente rilevato nel DNA da c. barbinervis e il pomodoro, considerando che essi erano più debolmente rilevata nel cetriolo. Questi risultati indicano che la morfologia della colonizzazione è fortemente influenzata dalla selezione di funghi a colonizzare la pianta ospite tra quelle nell'ambiente suolo.
Nuovi Gruppi Di Anastomosi, AG-T E AG-U, Di Binucleate Rhizoctonia Spp. Causando Radice E Stelo Rot Del Fiore Reciso E Rose Miniatura
ASTRATTO putrefazione di radice e stelo di fiori recisi Rose (Rosa spp.) è stata osservata nel commerciale rose coltivate in serra in 10 prefetture del Giappone dal 1998 al 2001. Binucleate-come Rhizoctonia spp sono stati isolati principalmente dalle piante di malattia. In tutto, 670 isolati sono stati divisi in due tipi basati sull'aspetto cultura; 168 isolati di tipo marrone a marrone chiaro e 502 isolati di tipo biancastro. Una reazione di anastomosi ifali mediante rappresentante isolati da ogni tipo ha rivelato che il tipo di marrone a marrone chiaro apparteneva al gruppo anastomosi G (AG-G), mentre il tipo biancastro (AG-CUT) non è riuscito a anastomotizzare con ceppi tester di Rhizoctonia binucleate AG-A attraverso AG-S. Né gli isolati di AG-G né AG-CUT anastomosed con ceppi tester di un AG sconosciuto precedentemente riportato (AG-MIN) di binucleate Rhizoctonia spp, raccolti da Rose in miniatura. Nei test di patogenicità, selezionati in modo casuale gli isolati dei tre gruppi causati radice e stelo rot su Rose fiore reciso e in miniatura. Per differenziare AG-CUT e AG-MIN da AGs noto binucleate Rhizoctonia spp., sono state condotte restriction fragment length polymorphism (RFLP) e analisi di sequenza di una regione interna trascritto distanziale (ITS) di DNA ribosomiale (r). Tra le otto enzimi di restrizione usati, HaeIII prodotto DNA banding modelli per AG-CUT che differivano da quelli dei ceppi tester e AG-min. Inoltre, profili di restrizione di AG-MIN differivano da quelli di tutti i ceppi di tester. AG-G isolati da fiore reciso Rose avevano lo stesso modello RFLP i ceppi tester di AG-G. Basato su risultati di anastomosi ifale e analisi RFLP e sequenza di una regione, la sua rDNA, proponiamo che AG-taglio essere designata AG-T e AG-MIN designato AG-U, due nuovi AGs binucleate Rhizoctonia spp. L'albero filogenetico sulla base dei dati di sequenza di rDNA, la sua regione ha mostrato che gli isolati di AG-MIN erano in un clade distinto da altri AGs, mentre isolati di AG-taglio erano in stesso clade come quelli di AG-A. Più dettagliata analisi filogenetica oltre rDNA, la sua regione potrebbero essere necessaria per la classificazione di AG binucleate Rhizoctonia spp.
Le Caratteristiche Cliniche E Gestione Chirurgica Per Cisti Juxtafacet Della Colonna Lombare
Analisi retrospettiva di 10 casi di resezione della cisti sintomatiche juxtafacet lombare in nove pazienti (età media anni 65,4) indagato il rapporto tra metodo chirurgico e la progressione della ricorrenza spondilolistesi o cisti spinale. Paziente caratteristiche, metodi chirurgici e decorso sono stati riesaminati. Il sintomo più comune preoperatoria, radicolopatia dolorosa, si è verificato in tutti i casi, seguiti da debolezza motoria in quattro, cinque, perdita sensoriale e claudicatio intermittens in quattro. Tutti i pazienti sono stati sottoposti bilaterale totale (n = 6) o parziale laminectomia (n = 4), con minima (n = 3) o no (n = 7) faccettectomia. Le cisti sono stati lorde totalmente asportato in otto casi e parzialmente asportato in due. Fissazione concomitante non è stata eseguita. Radicolopatia dolorosa, deficit motorio e sensoriale disturbo tutto risoluto, con conseguente risultato buono o eccellente in tutti i pazienti. Spondilolistesi sintomatiche postoperatorio ha avuto non stato notato a dire 52,1 mesi postoperatorio. Tuttavia, nuove cisti juxtafacet più successivamente sono state rilevate sul lato controlaterale alla lesione iniziale in due pazienti. La rimozione chirurgica della cisti juxtafacet è consigliata per un immediato sollievo sintomatico. Concomitante fissazione spinale per prevenire la progressione della ricorrenza spondilolistesi o cisti spinale dipende dalla dimensione della cisti, coinvolgimento delle strutture circostanti, grado di spondilolistesi preoperatoria e distruzione articolare sfaccettature.
La Fase Di Feedback Del Tipo Ad Induzione Di Interferone in Cellule Dendritiche Richiede Fattore Regolatore Interferone 8
Producono le cellule dendritiche (DCs) di tipo interferoni (IFN) in quantità maggiore rispetto a altre cellule, ma i meccanismi di rimangano inafferrabili. Qui abbiamo studiato il ruolo di un fattore di trascrizione, IRF8, induzione DC di tipo I IFN. All'infezione da virus (NDV) delle malattia di newcastle, plasmacytoid derivate da midollo osseo e DCs convenzionale indotta trascrizioni IFN, esibendo cinetica a due fasi. Il secondo, amplificando la fase rappresentava una risposta di feedback IFN che hanno rappresentato per gran parte della produzione di proteine IFN. Induzione della trascrizione di seconda fase necessaria IRF8. Citomegalovirus mouse (MCMV) e Toll-like receptor mediated IFN induzione in DCs anche necessaria IRF8. Analisi di immunoprecipitazione della cromatina ha mostrato che IRF7, IRF8 e RNA polimerasi II sono stati reclutati per i promotori IFN dopo stimolazione. Inoltre, sostenuta reclutamento dei II RNA polimerasi i promotori dipendeva dalla critica IRF8. Insieme, questi dati indicano che IRF8 ingrandisce la seconda fase della trascrizione di IFN in DCs prolungando associazione di macchine base trascrizione per i promotori IFN, quindi giocare un ruolo nell'immunità innata.
Il Plant Growth-promoting Fungo Penicillium Simplicissimum GP17-2 Induce Resistenza in Arabidopsis Thaliana Mediante L'attivazione Di Diversi Segnali Di Difesa
Arabidopsis thaliana coltivata in terreno modificato con inoculi grano orzo del Penicillium simplicissimum GP17-2 o ricevono un trattamento della radice con il filtrato di cultura (CF) esposto chiaramente resistenza a Pseudomonas syringae pv. Tomato DC3000 (Pst). Per valutare il contributo di percorsi diversi difesa, Arabidopsis genotipi implicati in acido salicilico (SA) segnalazione esprimendo il transgene NahG o di una perturbazione in NPR1 (npr1), sono stati testati jasmonico acido (JA) segnalazione (jar1) e etilene (ET) segnalazione (ein2). Tutti i genotipi proiettati erano protette da GP17-2 o suoi cfr. Tuttavia, il livello di protezione è stato significativamente più basso in NahG e npr1 piante di quanto fosse trattati allo stesso modo selvaggio-tipo piante, indicando che la SA signaling pathway offre un contributo minore alla resistenza GP17-2-mediata ed è insufficiente per una risposta completa. Esame dell'espressione del gene locale e sistemica ha rivelato che il suo CF e GP17-2 modulano l'espressione dei geni coinvolti nella SA e JA/ET vie di segnalazione. Sfida successiva delle piante GP17-2-colonizzato con Pst è stato accompagnato da attivazione diretta del SA-inducible PR-2 e PR-5 geni così come espressione potenziato del Vsp JA-inducible gene. Al contrario, CF-trattati piante infettate con Pst esposta elevata espressione della maggior parte dei geni correlati a difesa (PR-1, 2 PR, PR-5, PDF1.2 e Hel) studiato. Inoltre, un'altezza iniziale di risposte SA è stata seguita da tardo induzione delle risposte JA durante l'infezione Pst di resistenza sistemica indotta (ISR)-esprimendo piante. In conclusione, si ipotizza il coinvolgimento di molteplici meccanismi di difesa che porta a un PVR di Arabidopsis da GP17-2.
Siringomielia Causato Dai Resti Intratecale Di Mezzo Di Contrasto a Base Di Olio
Mezzo di contrasto oleoso era stato in uso fin dal XIX secolo come un agente radiografico per la rilevazione di lesioni spinali e tumori del midollo spinale fino al tardo XX secolo. A quel punto computato tomografia a scansione e risonanza magnetica, o altro mezzo di contrasto idrofilo sostituito per esso. Gli effetti negativi del colorante a base di olio, acuta e cronica, erano stati segnalati fin dalla metà del XX secolo. In questo libro gli autori riportano il caso di siringomielia che sembrava essere causato principalmente da mezzo di contrasto oleoso rimanente per 44 anni. Siringomielia secondaria ad Aracnoidite adesiva causati da mezzo di contrasto oleoso, dopo un lungo periodo di tempo è ben noto. Nel caso di specie, tuttavia, chirurgia ha rivelato solo lieve aracnoidite a livello di siringomielia come pure residui solidi e liquidi di mezzo di contrasto. In genere, ostruzione del liquido cerebrospinale (CSF) a causa di un'adesione aracnoidea è considerato causa siringomielia seguito Aracnoidite adesiva. Gli autori hanno ipotizzato che nella fattispecie siringomielia è stata indotta da un meccanismo diverso da quello nei casi precedentemente segnalati; il mezzo di contrasto oleoso stessa sembra avere indotto il blocco funzionale di CSF e alterato il sistema tampone della pressione intratecale. No rapporti su toracica Aracnoidite adesiva e siringomielia causata dalla tintura a base di olio di cui a questo meccanismo di revisione della letteratura.
Formazione Heterokaryon in Thanatephorus Cucumeris (Rhizoctonia Solani) IC AG-1
Circa 50 single-basidiospore isolati (SBIs) ottenuti da ognuna delle 16 isolati del campo di Thanatephorus cucumeris AG-1 IC sono stati esaminati per la formazione di heterokaryon. SBIs tutti ottenuti da ciascun isolato del campo sono stati divisi in due gruppi di accoppiamento (SBIs-M1 e M2 SBIs) e ciuffi di micelio si formarono nella zona di Contatta tra colonie di SBIs-M1 accoppiati e - M2 basato su 0,5% carbone agar nutritivo. Ciuffi sono state prodotte da tutte le possibili abbinamento tra SBIs da campo non parentale isolati. Anastomosi ifali reazioni non indicato nessuna morte cellulare e morte cellulare casuale presso il Contatta delle cellule e non era imparentato con ciuffo di formazione. Fenotipi AFLP di SBIs da ogni isolato del campo non erano identici a vicenda ed erano differenti dai loro genitori campo isolato. Fenotipi AFLP degli isolati ciuffo formati da SBIs-M1 e M2 SBIs da ogni isolato del campo erano heterokaryotic. Inoltre, diversi SBIs formata anche ciuffi con loro isolati campo parentale e non parentale. Fenotipi AFLP di questi ciuffo isolati ha suggerito che essi erano tutti heterokaryotic. Risultati di questi esperimenti suggeriscono che T. cucumeris AG-1 IC è heterothallic e bipolare, e quello scambio genetico può verificarsi tra homokaryotic e heterokaryotic isolati (fenomeno di Buller).
Alto Livello Espressione Di Un Gene Di Resistenza Di Virus, RCY1, Conferisce Estrema Resistenza Al Virus Del Mosaico Del Cetriolo in Arabidopsis Thaliana
Bobina arrotolata-nucleotide binding sito-leucina rich repeat-tipo resistenza gene, RCY1, conferisce resistenza ad un ceppo del virus del mosaico del cetriolo, CMV(Y), in Arabidopsis thaliana ecotipo C24 giallo. Resistenza al CMV(Y) in C24 è accompagnata da una risposta ipersensibile (HR) che è caratterizzata dallo sviluppo di lesioni necrotiche locali presso i siti di infezione primaria. Per ulteriore studio HR e resistenza alla CMV(Y) in ecotipo Col-0, che è suscettibile di CMV(Y), Col-0 sono stati trasformati con RCY1. Diffusione sistemica di CMV(Y) era completamente soppressa in trasformate RCY1 Col-0 (Col::pRCY1 linee 2-6), considerando che il ceppo virulento CMV(B2) diffuso e moltiplicata per via sistemica in queste linee transgeniche simile a quello del selvaggio-tipo Col-0. Curiosamente, il fenotipo resistente di Col::pRCY1 variava tra le linee. Nelle linee 3 e 6, quali livelli di trascrizione RCY1 erano simili a che nel wild-type C24, la HR e resistenza a CMV(Y) è stata indotta. Linea 4, che esprime livelli moderatamente elevati di trascrizione RCY1, esposto moderatamente maggiore resistenza rispetto a quella in C24 o linea 3. Al contrario, linee 2 e 5, che iperesprimono altamente il gene RCY1, non hanno esibito o lesioni visibili o un micro-HR sulle foglie inoculate. Inoltre, proteina del cappotto virus non è stata rilevata nelle foglie superiori o inoculati o noninoculated di queste due linee, suggerendo che estrema resistenza (ER) a CMV(Y) è stata indotta da alti livelli di espressione di RCY1. Inoltre, nelle linee transgeniche che esprimono emoagglutinina (HA) RCY1 epitopo-etichettato (Col::pRCY1-HA), alti livelli di accumulo di proteine RCY1-HA anche erano correlati con il fenotipo di ER. Analisi di espressione genica globale in linea 2, che altamente overexpresses RCY1, ha indicato che, espressione di diversi geni correlati a difesa erano costitutivamente elevato rispetto al wild-type Col-0. Nonostante questo, la linea 2 non hanno una maggiore resistenza ad altri agenti patogeni virulenti e avirulente. Prendere insieme, accumulo costitutiva di alti livelli di proteina RCY1 sembra regolare la forza di resistenza RCY1 conferito in modo gene-per-gene e implica che ER e resistenza HR-associated differiscono solo nella forza di resistenza.
Risposte Di Difesa Avanzata in Arabidopsis Indotta Da Frazioni Proteiche Parete Cellulare Da Pythium Oligandrum Richiedono SGT1, RAR1, NPR1 E JAR1
La frazione di proteine della parete cellulare (CWP) viene purificata dal biocontrollo non patogeno agente Pythium oligandrum ed è composta da due glicoproteine (1 POD e POD-2), che sono strutturalmente simili alla classe III elicitins. In piante di pomodoro trattate con CWP, Acido jasmonico (JA) - e (ET) etilene - dipendente di segnalazione percorsi sono attivati, e resistenza di Ralstonia solanaceraum è migliorato. Per sezionare CWP indotta da meccanismi di difesa, abbiamo studiato espressione genica di difesa e resistenza agli agenti patogeni batterici in Arabidopsis thaliana ecotipo che col-0 trattati con CWP. Quando le foglie di Col-0 erano infiltrate con CWP, necrosi visibile né acido salicilico (SA)-espressione di gene reattivo (PR-1 e PR-5) è stata indotta. Al contrario, JA-sensibile espressione genica (PDF1.2 e JR2) era up-regolato e la resistenza a r. solanaceraum e Pseudomonas syringae pv. Tomato DC3000 è stato migliorato in risposta a CWP. Tali risposte di difesa CWP-indotta sono state completamente compromessa in CWP-trattati coi1-1 e jar1-1 mutanti con una via di segnalazione JA compromessa. L'induzione dell'espressione genica correlati a difesa dopo trattamento CWP è stato parzialmente compromessa in mutanti insensibili ET di ein2-1, ma non nella segnalazione mutanti SA o nahG piante transgeniche. Analisi di espressione genica globale mediante cDNA array anche suggerito che diversi altri geni JA - ed ET-sensibile, ma non SA rispondere geni, sono up-regolate in risposta a CWP. Un'ulteriore analisi delle risposte di difesa CWP-indotta utilizzando un altro otto mutanti con difesa compromessa signaling pathways indicato che, è interessante notare che, l'induzione dell'espressione genica JA-reattiva e una maggiore resistenza alle due agenti patogeni batterici in risposta a CWP completamente sono stati compromessi in rar1-1, rar1-21, sgt1a-1, sgt1b (edm1) e mutanti npr1-1. Così, il sistema di difesa CWP-indotta sembra essere regolata da JA-mediata e SGT1-, RAR1 - e NPR1-dipendente vie di segnalazione.
